定性檢驗項目的質(zhì)量控制

定性檢驗項目的質(zhì)量控制

臨床檢驗質(zhì)量控制中心二級醫(yī)院質(zhì)控要求【C】建立和實施與檢測項目相適應的室內(nèi)質(zhì)量控制流程，應包括：（1）質(zhì)控品的技術規(guī)則定義。（2）質(zhì)控品常規(guī)使用前的確認。（3）實施質(zhì)控的頻次。（4）質(zhì)控品檢測數(shù)據(jù)的適當分析方法。（5）質(zhì)控規(guī)則的選定。（6）試驗有效性判斷的標準。（7）失控的判定標準、調(diào)查分析、處理和記錄。2023/11/26三級醫(yī)院質(zhì)控要求【Ｃ】1．建立和實施與檢測項目相適應的室內(nèi)質(zhì)量控制流程，應包括：（1）質(zhì)控品的技術規(guī)則定義。（2）質(zhì)控品常規(guī)使用前的確認。（3）實施質(zhì)控的頻次。（4）質(zhì)控品檢測數(shù)據(jù)的適當分析方法。（5）質(zhì)控規(guī)則的選定。（6）試驗有效性判斷的標準。（7）失控的判定標準、調(diào)查分析、處理和記錄。2023/11/26臨床定性檢驗的報告方式有反應、無反應陽性、陰性檢出、未檢出是、不是有、沒有定性試驗完全定性實驗：只有兩種檢測結果（例如：陽性/陰性、存在/不存在、有反應的/無反應的）的方法免疫定性試驗：例如：尿液HCG、感染標志物、大便隱血（免疫法），梅毒凝膠顆粒凝集試驗（TPPA）。其他定性試驗：例如：大便隱血（化學法）、革蘭氏染色質(zhì)量控制（金黃色葡萄球菌、大腸埃希氏菌）、微生物凝固酶和過氧化氫酶，陰道分泌物過氧化氫、白細胞酯酶、唾液酸酶等。定性試驗半定量定性試驗：結果報告為陰性、+1、+2、+3、+4或滴度（1:8、1:16等）的方法半定量免疫試驗：例如抗核抗體（ANA）滴度報告、血型抗血清、微生物診斷性抗血清、梅毒快速血漿反應素環(huán)狀卡片試驗（RPR）檢測等。其他半定量試驗：如尿液干化學試驗弱陽性標本陰性標本重點在于弱陽性檢測能力確保陰性檢為陰性常見的定性實驗：ELISA實驗包被Ab層析作用質(zhì)控線必須穩(wěn)定顯色包被Au-Ag樣本Ab包被AgAu-Ag-Ab-AgGTCAu-Ag-AbAu-Ag-Ab游離Au-Ag游離Au-Ag常見的定性實驗：金免疫層析試驗

（goldimmunochromatographicassay,GICA)操作控制：早孕膠體金法檢測步驟１:從包裝鋁箔袋中取出試紙條步驟２:將試紙條按箭頭方向插入尿液標本中步驟３:至少5秒后取出放于干凈平臺上或放在尿杯中讀結果。測試結果應在3分鐘讀取.用前拆封，必要時平衡溫度保持規(guī)定的深度、角度、姿態(tài)保持規(guī)定的放置方向、姿態(tài)、時間FDA等批準家庭使用的技術，只要求檢測裝置有內(nèi)對照，檢測結果滿足說明書規(guī)定即可。對于需要經(jīng)驗來判定結果的技術仍需在實驗室進行，均有質(zhì)控的要求，但國際上無具體操作的規(guī)定和資料。

美國CDC“HIV抗體快速檢測質(zhì)量保證指南”<2007年版>中要求：除檢測裝置的內(nèi)對照外，每檢測日或分析批，應使用弱陽性和陰性外對照作為質(zhì)控。

無判定標準，一般理解為陰、陽性質(zhì)控的檢測結果分別為陰性和陽性即表明在控，相反則為失控。電子質(zhì)量控制電子QC是指在儀器上用電子檢查代替液體控制品檢測，由傳感器發(fā)出的信號被一種電學信號取代；那些具備電極傳感器的儀器，其來自電池（或其他穩(wěn)定的電源）的電學信號可取代來自傳感器的信號，這種電學信號可判斷該儀器取得的讀數(shù)是否正確；簡單、快速、低成本、無需消耗任何檢測包或?qū)嶋H；直接給出結論：“Yes”或“No”；僅需很少的培訓，無需統(tǒng)計學知識；早有應用：光電檢查、濾光器平衡檢查、反應杯檢查、空白檢查、電壓檢查等；一般與SQC合并使用，單獨使用應慎重?。”仨氃谝欢〞r間內(nèi)在2～8℃或冷凍保存條件下保持穩(wěn)定。無已知的傳染危險性。靶值或預期結果可定。單批可大量獲得。價廉。質(zhì)控品要求自行配制質(zhì)控品需參照標準或經(jīng)驗證的方法特殊例如：核酸檢測質(zhì)量控制特殊要求實驗室分區(qū)和環(huán)境儀器設備質(zhì)量控制試劑質(zhì)量控制檢測過程質(zhì)量控制質(zhì)控基礎：了解質(zhì)控的共性與個性要求丙型肝炎病毒實驗室檢測技術規(guī)范（中國疾病預防控制中心）——規(guī)定了方法學及質(zhì)量控制《全國艾滋病檢測技術規(guī)范》（2015年修訂版）規(guī)定了方法學及質(zhì)量控制（酶免或發(fā)光法抗體檢測的室內(nèi)質(zhì)量控制；快速法抗體檢測質(zhì)控）臨床定性免疫檢驗重要常規(guī)項目分析質(zhì)量要求（征求意見稿）——李金明質(zhì)控基礎：了解法律、法規(guī)、規(guī)范和共識等《臨床血液學檢驗常規(guī)項目分析質(zhì)量要求》（WS/T406--2012）——許多檢測項目可以參照此標準《丙型病毒性肝炎篩查及管理》（WS/T453--2014）規(guī)定了丙型病毒性肝炎篩查的方法學《梅毒診斷標準》（WS273--2007）規(guī)定了方法學——1995年《梅毒診斷標準及處理原則》廢止質(zhì)控基礎：了解法律、法規(guī)、規(guī)范和共識等檢驗結果的干擾因素幾乎涉及所有與實驗有關的環(huán)節(jié)我們認為不可能的常常成為可能，比如：質(zhì)控基礎：了解室內(nèi)質(zhì)控的復雜性關鍵環(huán)節(jié)：加樣

平口、斜口（斜口略多）；

向上、向下（向下則多）；

垂直、傾斜（垂直則多）；

口大、口?。诖髣t多）；

快速、慢速（快速則多）。

加樣量的差異

加樣時間的不一致

樣本與試劑（如酶標抗體）先后加入

……檢測全過程QC何為全過程？？分析前分析或檢測分析后沒有一種質(zhì)控方法可以監(jiān)測全過程??！培訓和教育是非常重要的分析前質(zhì)控??！質(zhì)控方案：ELISA質(zhì)控陰、陽對照是內(nèi)對照，用來保證實驗有效和計算臨界值，室內(nèi)質(zhì)控必須引入外對照（外部質(zhì)控物）。ELISA定性試驗的臨床意義在于是給出陰性或陽性，與檢出量無關，因此質(zhì)量控制的重點是保證試驗的靈敏度和重復性。質(zhì)控品選擇：陰性質(zhì)控品/臨界值質(zhì)控/弱陽性質(zhì)控品/陽性質(zhì)控品/強陽性質(zhì)控品（HOOK效應）。質(zhì)控物：陰性和弱陽性外對照質(zhì)控頻度：檢測日或分析批為單位質(zhì)控判斷：陰、陽性質(zhì)控物的檢測結果分別為陰性和陽性即表明在控。質(zhì)控方案：膠體金免疫層析質(zhì)控準確度與精密度關系準確度是由系統(tǒng)誤差和隨即誤差所決定的而精密度是由隨機誤差決定的在檢測過程中，雖然有很高的精密度，但并不能說明試驗結果準確只有在消除了系統(tǒng)誤差之后，精密度和準確度才是一致的。此時精密度越高，準確度也就越高EQA主要是提高實驗室的準確度，而IQC是對精密度的體現(xiàn)，兩者相輔相成，只有共同符合要求，才能真正地達到實驗室間結果一致化，最終實現(xiàn)結果互認。精密度差（檢測系統(tǒng)不穩(wěn)定）精密度好（檢測系統(tǒng)穩(wěn)定）正確度差（實驗室間結果有偏差）精密度好（檢測系統(tǒng)穩(wěn)定）正確度好（實驗室間結果一致）過程監(jiān)測即時評價結果控制室內(nèi)質(zhì)量控制(IQC)設定檢測系統(tǒng)的均值及質(zhì)控規(guī)則→每日檢測質(zhì)控品→檢測結果根據(jù)均值和質(zhì)控規(guī)則以質(zhì)控圖的形式表現(xiàn)（包括失控處理）→控制系統(tǒng)的穩(wěn)定性常見室內(nèi)質(zhì)控方法1、非統(tǒng)計學方法2、統(tǒng)計學方法室內(nèi)質(zhì)控以批為單位

——批（RUN）的概念批：在相同的條件下（地點、儀器、試劑、人員、時間）所進行的一組測定。一、非統(tǒng)計學質(zhì)控方法

（金標法血清學實驗、ELISA實驗等）在檢測臨床標本的同時，檢測一定數(shù)量（與臨床樣本的數(shù)量相適應）的已知陽性（或存在靶微生物或靶細胞）和陰性的質(zhì)控樣本。檢測有效的質(zhì)控判斷方法：陽性檢測為陽性，陰性檢測為陰性。如基層實驗室的金標法查乙肝表面抗原、HCG等反應強度（滴度）質(zhì)控方法。檢測有效的質(zhì)控判斷方法：一般為預期值±1+。如尿液干化學實驗的蛋白質(zhì)結果（-→1+→4+）雙重反應室內(nèi)質(zhì)量控制質(zhì)控圖定性檢測質(zhì)控圖（血清學實驗、尿液干化學、ELISA實驗等）儀器、儀器編號、檢驗項目、質(zhì)控品批號、效期等質(zhì)控圖相關信息記錄區(qū)（參考定量質(zhì)控圖）+++++++靶值+++±檢測批次12345678910111213……結果+++++++++++++++++++++++++++日期1346789111213171718檢測者***************************************圖注：①實際工作中可以繪制更多質(zhì)控結果；②可以依據(jù)自身工作需要編排圖形格式。定性檢測質(zhì)控記錄表儀器、儀器編號、檢測項目、質(zhì)控品批號、效期等質(zhì)控圖相關信息記錄區(qū)（參考定量質(zhì)控圖）日期檢測批次試劑批號質(zhì)控靶值檢測結果質(zhì)控結論操作者日期檢測批次試劑批號質(zhì)控靶值檢測結果質(zhì)控結論操作者11***2+2+

在控□失控***910***2+2+

在控□失控***12***2+2+

在控□失控***1011***2+2+

在控□失控***23***2+2+

在控□失控***1012***2+3+

在控□失控***34***2++

在控□失控***1113***2+2+

在控□失控***45***2+2+

在控□失控***1214***2+2+

在控□失控***56***2+3+

在控□失控***1315***2++

在控□失控***67***2+2+

在控□失控***1416***2+2+

在控□失控***78***2+2+

在控□失控***1517***2+2+

在控□失控***89***2+2+

在控□失控***1618***2+2+

在控□失控***Levey-Jennings質(zhì)控圖方法也稱Shewhart質(zhì)控圖，是由美國的Shewhart于1924年首先提出，并用于工業(yè)產(chǎn)品的質(zhì)量控制。二十世紀五十年代初，Levey-Jennings將其引入臨床檢驗的質(zhì)量控制。經(jīng)Henry和Segalove的改良，即為目前常用的Levey-Jennings質(zhì)控圖。二、統(tǒng)計學質(zhì)控方法（ELISA實驗等）正態(tài)分布、標準差和可能性+/-1SD68.2%ofthetime+/-2SD95.5%ofthetime+/-3SD99.7%ofthetime68.2%95.5%99.7%Frequency-3s-2s-1sMean+1s+2s+3s正態(tài)分布情況下，數(shù)值集中范圍如下:ELISA實驗每塊板質(zhì)控物的數(shù)量及位置2-3份弱陽性質(zhì)控2-3份陰性質(zhì)控隨機放置于血液本中間外部質(zhì)控品：陰性質(zhì)控品/臨界值質(zhì)控/弱陽性質(zhì)控品/陽性質(zhì)控品/強陽性質(zhì)控品（識別HOOK效應）ELISA實驗統(tǒng)計學質(zhì)控的參考意見系統(tǒng)誤差的失控規(guī)則可以選用41s和/或10x，也就是要求質(zhì)控圖始終保留20個點以上的原因。陰、陽性質(zhì)控物的測定值均應在質(zhì)控圖中標出：陽性重點是下限，陰性重點是上限，這樣的單個超限判為失控；陰、陽性同時上限或同時下限超限判為失控；陽性上限超限而陰性未超或陰性下限超限而陽性未超,可以視為不失控。理論上可選擇S/CO值的均值-3SD時等于或略高于“判斷值”這樣的質(zhì)控品，以保證用這一濃度質(zhì)控品時，有99.7%的把握無陰性發(fā)生的可能。S/CO:1.5～4.0或2.0～4.0為宜Levey-Jennings質(zhì)控圖以結果畫圖+4S+3S+2S+1SX-1S-2S-3S-4SS/CO≥1.0批間CV與濃度關系：批間CV的大小決定弱陽性質(zhì)控物濃度的選擇。CVS/CO臨界值質(zhì)控質(zhì)控品均值質(zhì)控品的分析至少需要來自于30天以上的20個數(shù)據(jù)確保所有程序上的變異因素都得以實質(zhì)體現(xiàn):操作者差異時間差異計算均值，標準差，變異系數(shù)，確定控制范圍建立并繪制Levey-Jennings質(zhì)控圖檢測批HBsAgHCVAbHIVAbTPAbRBCHb12.252.143.923.775.3313521.902.203.374.095.2613432.382.343.783.795.3913342.182.273.893.605.2913452.263.123.243.895.3113362.282.443.633.635.4413271.772.563.554.115.2813481.822.423.423.935.2813192.062.663.583.585.29133102.572.483.353.695.31135112.282.883.603.445.26135122.672.333.163.875.43133132.612.653.333.295.32131142.302.453.413.785.30133152.232.403.563.795.31134162.282.143.343.345.30133172.492.313.233.925.33136182.022.493.203.355.35132192.302.193.543.205.36133202.482.593.123.665.33133212.202.183.763.305.22135S0.2430.2480.2350.2670.0541.3262.252.443.483.675.32133.43CV(%)10.7710.156.757.271.010.99血紅蛋白室內(nèi)質(zhì)量控制圖表面抗原室內(nèi)質(zhì)量控制圖基于日常檢驗的陽性率比值(呈正態(tài)分布)直接概率計算方法（不呈正態(tài)分布）“假陽性”的統(tǒng)計學室內(nèi)質(zhì)控方法圖例：定性免疫測定“假陽性”監(jiān)測質(zhì)控圖圖例：定性免疫測定假陽性監(jiān)測質(zhì)控圖的繪制及應用直接概率計算法直接概率法是針對在每次日常檢測的陽性率比值不成正態(tài)分布，即非正態(tài)分布的情況下，直接計算出某一事件發(fā)生的概率。依據(jù)統(tǒng)計概率學，小概率事件就是對于某事件發(fā)生概率<5%時，也就是說發(fā)生的可能性非常小。當有一個小概率事件發(fā)生時，應需要進行分析調(diào)查事件發(fā)生的原因，因為很有可能存在誤差。計算在N個患者樣本中出現(xiàn)R個陽性結果的概率，檢測項目結果中的陽性率用P進行表示。概率計算的二項式分布公式:P(X=R)=N!/[R!(N-R)!]PR(1-P)N-R。在血液篩查檢測中，對于那些檢測項目中陽性結果率低(如抗HIV、抗HCV)，但檢測標本量又十分龐大，雖然可以使用上述模式進行計算，但還可以使用泊松分布來估算，泊松分布是一種相較于上述模式計算更為簡便的方法。泊松分布的概率計算公式是:P(X=R)=(NP)Re-NP/R!。鄰近標本污染的情況計算概率，即相互交叉污染的概率。對于陽性檢測結果中以連續(xù)性形式出現(xiàn)時，也就是有可能陽性樣本污染了它鄰近的陰性樣本，所產(chǎn)生的標本間的交叉污染，實驗檢測標本數(shù)用N表示，陽性連續(xù)出現(xiàn)的次數(shù)用R表示，這種情況的概率計算公式是：P=(N-R+1)/[N!/R!(N-R)!]。直接概率計算法失控后分析失控后分析是室內(nèi)質(zhì)控的最關鍵環(huán)節(jié)，如果沒有對失控進行分析和處理，室內(nèi)質(zhì)控就毫無意義！定量系統(tǒng)誤差的識別預期值+4S+3S+2S+1SX-1S-2S-3S-4S定量系統(tǒng)誤差的識別預期值+4S+3S+2S+1SX-1S-2S-3S-4S產(chǎn)生系統(tǒng)誤差的因素恒溫系統(tǒng)溫度偏倚或漂移實驗場地室溫或濕度不合適試劑或校準品批號更換試劑在使用、儲存或運送過程中變質(zhì)校準品在使用、儲存或運送過程中變質(zhì)控制品在使用、儲存或運送過程中變質(zhì)控制品處理不當，如：不要求冰凍的卻冰凍了光源壞檢測系統(tǒng)使用非試劑級用水近期做過校準更換操作人員固定系統(tǒng)誤差…………..比例系統(tǒng)誤差…………..固定系統(tǒng)誤差比例系統(tǒng)誤差無誤差隨機誤差的識別預期值+4S+3S+2S+1SX-1S-2S-3S-4S產(chǎn)生隨機誤差的因素(也許不可接受)電源（在一定范圍內(nèi)可以接受）控制品的重復加樣（不可接受，但控制品的加樣誤差是存在的）控制品編號錯誤（不可接受）水中產(chǎn)生氣泡（不可接受）試劑或樣品加樣系統(tǒng)內(nèi)有氣泡（不可接受）控制品復溶不正確（不可接受，但復溶過程的誤差是存在的）控制品儲存于自動化霜冰箱內(nèi)（不可接受，盡量密封存儲）操作人員技術水平（在一定范圍內(nèi)可以接受）ELISA陽性質(zhì)控樣本失控的常見原因污染溫育時