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分光光度計操作規(guī)程一、儀器設(shè)備721、723可見分光光度計、752紫外可見分光光度計、比色液及標準溶液、濾紙等。二、原 理器測定的波長范圍不同,可以依據(jù)自己的需要選擇要使用的儀器?!不蛘咄高^率〕與溶質(zhì)的濃度成正比〔玻爾定律。通過準確濃度的〔透過率測定未知濃度的待測樣品的吸光值〔透過率,與標準曲線相比較就可以得到其濃度。四、適用范圍可廣泛用于醫(yī)學衛(wèi)生、臨床檢測、生物化學、石油化工、環(huán)保檢測、質(zhì)量掌握等方面作定量、定性分析。具體到我們試驗室,可以對多糖、蛋白、核酸等物質(zhì)進展定性、定量UV-3150PC紫外可見近紅外分光光度計還可以測量近紅數(shù)據(jù)處理與分析。五、操作步驟我們以UV-3150PC紫外可見近紅外分光光度計為例表達光譜儀器的性能和操作方法。1、插上電源,翻開光度計前面的電源開關(guān)。2UVProbeUVProbeUVProbe中“Connect”圖標聯(lián)機,消滅自檢畫面。3、如自檢完全部綠燈亮,則點擊“OK”進入系統(tǒng)。假設(shè)消滅紅燈亮,可關(guān)掉光度計重連接,假設(shè)仍未通過自檢,應馬上報告儀器負責教師。4UVProbe菜單欄和工具欄。UVProbe有四大主要模塊,包括光譜掃描模塊、光度測量模塊、時間掃描模塊法。5、點下光譜掃描圖標,消滅光譜掃描界面。6、點擊方法按鈕,消滅方法設(shè)置對話框。在此可以設(shè)置掃描波長范3200~190nm??梢栽O(shè)置掃描速度,一般可選中速〔Medium〕或快速〔Fast〕進展掃描。采樣間隔表示光度計nm讀一個吸光度值,如沒有特別要求,選擇自動即可。可選擇是否重復掃描曲線,假設(shè)重復則設(shè)置重復次數(shù)和間隔時間。7“SamplePreparation”稀釋倍數(shù)和測量光程等。也可以輸入樣品的其他信息。8、點擊“InstrumentParameters〔儀器參數(shù)〕”設(shè)置測量方式和儀器的一些參數(shù)。在測量模式中可選擇“Transmittance〔透過率〕”、吸光度能量和反射其中Reflectance一般用積分球測定固體樣品時使用。狹縫設(shè)置在1500~500nm5nm。9、換燈和檢測器可依據(jù)所測樣品進展設(shè)置,換燈在393~282nm范895~750nm范圍內(nèi)任設(shè)一個值即可。樣品吸取峰位置以免影響測定值。10樣的空白溶液,點擊“Baseline”,開頭進展基線校正,儀器掃描完成0“Start”0.001,750nm0重進展基線掃描。11、基線校正完成后,取出樣品架的空白溶液,放入樣品溶液,點擊“Start”開頭掃描曲線。掃描完成后,消滅保存路徑框和文件名框,設(shè)置好后消滅掃描曲線。12、曲線掃描完成后,在譜圖上點擊鼠標右鍵,消滅快捷菜單。點擊“AutoScale”“CrossHair>Display”鼠標顯示為穿插線,用鼠標將穿插線放到曲線上某點即可顯示該點的波長和吸光度值。13、點擊“Label”可以在譜圖上添加標簽,可在其中輸入文本以標記“Legend”據(jù),則在左面重疊圖上顯示其曲線。14、假設(shè)從右鍵快捷菜單中選擇“Customize〔自定義〕”,可以自定義曲線顯示顏色還可定義坐標軸的數(shù)值。15、得出曲線后可以對譜圖進展一系列的處理。點擊“DataPrint〔顯示數(shù)據(jù)〕”圖標可以將譜圖曲線直接顯示為數(shù)值。除空白、倒數(shù)光譜、對數(shù)光譜等處理。點擊“PeakPoint〔顯示峰值〕”按鈕顯示“波峰”和“波谷”的數(shù)值。點擊“PointPick”圖標,輸入要顯示的波長值,馬上顯示出所輸入波特長的吸光度值。點擊“PeakArea”,設(shè)定峰閾值,即顯示大于此閾值的峰區(qū)域。點擊“Sewingbox〔裁縫〕”圖標,可以進展譜圖的裁剪和縫合。16“SomeSpectrumdatahasnotbeensaved!Doyoustillwanttoexitandlostunsavedchange?〔還有光譜數(shù)據(jù)尚未保存,你是要離開而不保存數(shù)據(jù)嗎?〕”選擇“No”返回主界面保存全部數(shù)據(jù)。六、留意事項1、光度計燈源壽命有限,假設(shè)長時間不測量,應通過UVProbe軟件斷開連接〔,然后關(guān)閉光度計電源。2、使用分光光度計時要保證樣品室確定干凈,留神放入樣品,放入樣品池和光度計外外表。3、儀

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