轉(zhuǎn)Bar、Bt基因雙抗稻米定性檢測(cè)及其重組DNA降解的研究的開(kāi)題報(bào)告

轉(zhuǎn)Bar、Bt基因雙抗稻米定性檢測(cè)及其重組DNA降解的研究的開(kāi)題報(bào)告開(kāi)題報(bào)告題目：Bar、Bt基因雙抗稻米定性檢測(cè)及其重組DNA降解的研究一、選題背景隨著轉(zhuǎn)基因技術(shù)的快速發(fā)展，轉(zhuǎn)基因作物的使用越來(lái)越普遍。然而，考慮到可能產(chǎn)生的對(duì)環(huán)境、人類和動(dòng)物的潛在風(fēng)險(xiǎn)，大多數(shù)國(guó)家都采取嚴(yán)格的轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品監(jiān)管措施。因此，對(duì)轉(zhuǎn)基因作物進(jìn)行快速、準(zhǔn)確的檢測(cè)與鑒定是至關(guān)重要的。本研究以Bar、Bt基因雙抗稻米為對(duì)象，旨在探索一種快速、準(zhǔn)確的定性檢測(cè)方法，并測(cè)試其是否能夠有效降解重組DNA，為轉(zhuǎn)基因食品檢測(cè)技術(shù)的提高提供一定的技術(shù)支持。二、研究?jī)?nèi)容1.稻米中Bar、Bt基因的快速、準(zhǔn)確定性檢測(cè)方法的建立采用PCR技術(shù)，結(jié)合特異性引物和酶解鑒定方法，建立稻米中Bar、Bt基因的定性檢測(cè)方法。2.利用酶解方法降解Bar、Bt基因在稻米中的DNA構(gòu)建Bar、Bt基因特異性的核酸酶，通過(guò)稻米樣品進(jìn)行試驗(yàn)，考察其降解Bar、Bt基因在稻米中的DNA效果，確定最優(yōu)反應(yīng)條件。3.檢測(cè)酶解后的樣品中Bar、Bt基因殘留量采用PCR技術(shù)或熒光定量PCR技術(shù)，檢測(cè)經(jīng)過(guò)酶解處理后的稻米中Bar、Bt基因的殘留量，并比較降解前后的差異以及不同反應(yīng)條件下的效果。三、研究意義本研究旨在探索一種新的稻米轉(zhuǎn)基因檢測(cè)方法，能夠快速、準(zhǔn)確地檢測(cè)出稻米中的Bar、Bt基因是否存在，并能有效地降解轉(zhuǎn)基因稻米中的DNA，為轉(zhuǎn)基因食品檢測(cè)技術(shù)的提高提供一定的技術(shù)支持。四、研究方法1.實(shí)驗(yàn)所需材料:a.轉(zhuǎn)基因稻米樣品b.重組核酸酶c.實(shí)驗(yàn)所需酶解試劑d.PCR試劑盒e.相應(yīng)的引物和探針2.實(shí)驗(yàn)的步驟:a.提取稻米中的DNA樣本b.利用PCR技術(shù)建立Bar、Bt基因特異性檢測(cè)方法c.構(gòu)建Bar、Bt基因特異性的核酸酶d.利用酶解方法降解Bar、Bt基因在稻米中的DNAe.檢測(cè)酶解后的樣品中Bar、Bt基因的殘留量五、進(jìn)度計(jì)劃本研究計(jì)劃于2021年3月開(kāi)始，到2023年6月結(jié)束。1.2021年3月-2021年6月：完成實(shí)驗(yàn)所需材料的采購(gòu)和處理。2.2021年7月-2022年3月：建立稻米中Bar、Bt基因的特異性PCR檢測(cè)方法，確定最優(yōu)實(shí)驗(yàn)條件。3.2022年4月-2023年3月：構(gòu)建Bar、Bt基因特異性的核酸酶，確定最優(yōu)反應(yīng)條件。4.2023年4月-2023年6月：檢測(cè)酶解后的樣品中Bar、Bt基因的殘留量，并對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)和分析。六、預(yù)期結(jié)果本研究預(yù)計(jì)能夠建立一種快速、準(zhǔn)確的Bar、Bt基因雙抗稻米定性檢測(cè)方法，并測(cè)試其對(duì)重組DNA的降解效果，為進(jìn)一步提高轉(zhuǎn)基因食品檢測(cè)技術(shù)提供一定的技術(shù)支持。七、參考文獻(xiàn)[1]Yang,L.,Han,S.,Li,G.,Yang,Y.,Xu,X.,&Wu,S.(2016).ArecombinantnucleicacidenzymeassayforvisualandrapiddetectionofBargeneingeneticallymodifiedcrops.Journalofagriculturalandfoodchemistry,64(21),4280-4285.[2]Zhang,L.,Zhang,X.,Wen,L.,He,J.,Wang,G.,Zhang,Y.,...&Wu,G.(2014).Arapidandsensitiveloop-mediatedisothermalamplificationmethodfortransgenicricedetection.PloSone,9(3),e90847.[3]Liu,W.,Wei,F.,Gao,Y.,Yang,L.,Su,X.,&Li,X.(2018).MethodforrapidandsensitivedetectionoftheCry1Abproteiningeneticallymodifiedmaizeusingasingle-ch