歸脾湯治療抑郁癥的實驗研究

歸脾湯治療抑郁癥的實驗研究

桂脾湯來自濟生方。這是治療心脾氣血兩虛證的常用方劑。抑郁癥病程較長,辨證屬氣血兩虛者,歸脾湯臨床療效確切。本實驗通過觀察抑郁大鼠模型腦內(nèi)5-HT及NE含量的變化,探討歸脾湯抗抑郁的中樞作用機制。1材料和方法1.1實驗材料1.1.1實驗動物由黑龍江中醫(yī)藥大學實驗動物中心提供Wistar大鼠雄性30只,雌性30只,體質(zhì)量(200±20)g。1.1.2原生藥材的制備歸脾湯由人參6g,白術(shù)9g,黃芪12g,當歸9g,茯神9g,遠志6g,炒酸棗仁12g,木香6g,龍眼肉12g,炙甘草3g組成,煎煮2次,合并濾液,濃縮至每毫升藥液分別含原生藥材煎出物0.4g,0.8g,1.6g。百優(yōu)解(禮來蘇州制藥有限公司,20mg/粒)。1.1.3生物工程研究院5-HT(5-羥色胺)ELISA檢測試劑盒(南京建成生物工程研究所,批號20100818);NE(去甲腎上腺素)ELISA檢測試劑盒(南京建成生物工程研究所,批號20100818)。1.2實驗方法1.2.1中、低劑量組大鼠適應性飼養(yǎng)1周后,隨機分為6組,即正常組,模型組,百優(yōu)解組和歸脾湯高、中、低劑量組。從第22天開始,每日灌胃1次,正常組和模型組給予0.9%生理鹽水10ml/kg,百優(yōu)解組給予百優(yōu)解1.8mg/kg,歸脾湯高、中、低劑量組分別給予歸脾湯15.12g/kg,7.56g/kg,3.78g/kg,連續(xù)21天。1.2.2日多次在期間間刺激除正常組外,其余各組大鼠隔離孤養(yǎng),在實驗的第1~21天,每天接受冰水游泳,夾尾,潮濕飼養(yǎng),傾斜鼠籠,晝夜顛倒,禁食,禁水等7種不同刺激中的1種,同種刺激間隔出現(xiàn)。1.2.3重量稱重大鼠每周稱量體質(zhì)量1次。1.2.4行為測試在實驗的第0天,第21天和第42天,通過敞箱實驗對大鼠進行行為學檢測,統(tǒng)計大鼠垂直運動得分和水平運動得分,計時3min。1.2.5酶聯(lián)免疫法檢測5-ht及en水平第42天,處死大鼠,迅速分離大鼠全腦,去除小腦及腦干后勻漿,4℃3000rpm離心10min,放置-20℃冰箱保存,采用酶聯(lián)免疫法測定5-HT及NE水平。1.2.6統(tǒng)計處理計量資料用(ue0af±s)表示,組間比較用t檢驗。2結(jié)果2.1大鼠體質(zhì)量比較第21天,模型組及各給藥組與正常組比較,大鼠體質(zhì)量減輕,差異顯著(P<0.05)。第42天,各給藥組與模型組比較,大鼠體質(zhì)量增加,差異極顯著(P<0.01)。結(jié)果見表1。2.2大鼠行為評分第21天,模型組及各給藥組大鼠垂直運動和水平運動得分均低于正常組,差異極顯著(P<0.01)。第42天,給藥各組大鼠行為學得分均高于模型組,差異極顯著(P<0.01)。結(jié)果見表2~3。2.3各組大鼠血清5-ht、n的水平比較模型組大鼠腦內(nèi)5-HT,NE水平低于正常組,差異極顯著(P<0.01)。各給藥組5-HT水平高于模型組,其中歸脾湯高、中劑量組與模型組比較,差異極顯著(P<0.01);各給藥組NE水平與模型組比較,無顯著性差異(P>0.05)。結(jié)果見表4。3各組大鼠腦內(nèi)5-ht及ni的含量變化腦內(nèi)5-HT含量下降,出現(xiàn)抑郁,情緒焦慮,強迫行為,攻擊行為,睡眠障礙和認知障礙。對情感障礙患者腦內(nèi)單胺變化的研究發(fā)現(xiàn),抑郁癥自殺者腦內(nèi)5-HT含量下降,更新率比正常人低。利血平消耗腦內(nèi)5-HT,引起抑郁,進一步支持精神障礙中5-HT系統(tǒng)降低的假說。NE參與意識、情感、食欲等生理活動,作用于突觸后膜α受體,使之興奮,出現(xiàn)覺醒,情緒愉快,進食活動等表現(xiàn)。腦內(nèi)中樞神經(jīng)系統(tǒng)中NE含量不足則發(fā)生抑郁癥。本實驗測定了各組大鼠腦內(nèi)5-HT及NE含量,結(jié)果顯示,模型組5-HT及NE水平降低,歸脾湯各組5-HT水平升高,高劑量組提高最顯著,NE水平無明顯改變,提示歸脾湯抗抑郁可能是通過提