醒腦解郁膠囊對(duì)卒中后抑郁癥大鼠影響的實(shí)驗(yàn)研究

醒腦解郁膠囊對(duì)卒中后抑郁癥大鼠影響的實(shí)驗(yàn)研究

中風(fēng)后抑郁（psd）在中國(guó)發(fā)病率很高，通常發(fā)生在腦血管疾病的早期階段，嚴(yán)重影響患者的恢復(fù)，降低神經(jīng)功能恢復(fù)率，導(dǎo)致中風(fēng)和腦損失率降低。通過(guò)多年臨床觀(guān)察我們認(rèn)為卒中后抑郁癥多為痰瘀交阻、氣郁不暢,采用醒腦解郁膠囊治療,前期臨床療效滿(mǎn)意,通過(guò)實(shí)驗(yàn)研究試圖進(jìn)一步闡明醒腦解郁膠囊的作用機(jī)制,具體實(shí)驗(yàn)如下。1中藥來(lái)源及實(shí)驗(yàn)條件選用清潔級(jí)健康成年SD大鼠60只,雌雄各半,周齡為24周,由西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。醒腦解郁膠囊(由石菖蒲、遠(yuǎn)志、半夏、郁金、陳皮、竹茹、巴戟天、川芎、雞血藤組成),0.3g/粒,含生藥3.5g,中藥的提取條件采用正交實(shí)驗(yàn)法,由陜西中醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院制劑中心制備。百憂(yōu)解由美國(guó)禮來(lái)蘇州制藥有限公司生產(chǎn)。2方法2.1青少年抑郁癥模型造模及觀(guān)察大鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)1周后,隨機(jī)分為空白對(duì)照組、模型對(duì)照組、陽(yáng)性藥物組、醒腦解郁膠囊大劑量組、醒腦解郁膠囊中劑量組、醒腦解郁膠囊小劑量組。除空白對(duì)照組外其余各組先進(jìn)行卒中模型復(fù)制(單側(cè)頸總動(dòng)脈不全結(jié)扎術(shù))。手術(shù)成功3d后,進(jìn)行抑郁癥模型復(fù)制。孤養(yǎng)法結(jié)合小劑量利血平皮下注射,1次/d,共14d。造模成功后,分別在實(shí)驗(yàn)第14和21天進(jìn)行OFT評(píng)分。并觀(guān)察大鼠一般狀態(tài),進(jìn)行第一次糖水消耗實(shí)驗(yàn)。經(jīng)治療21d后,并觀(guān)察大鼠一般狀態(tài),進(jìn)行第2次糖水消耗實(shí)驗(yàn)。大鼠斷頭后在冰上剝離腦組織,稱(chēng)重,冷凍保存。2.2糖的消耗實(shí)驗(yàn)2.2.1原理利用大鼠對(duì)蔗糖水的嗜好,用以模擬人類(lèi)的興趣感。若PSD大鼠的蔗糖水飲用量下降則可模擬PSD患者以興趣感下降為核心的抑郁癥狀。2.2.2實(shí)驗(yàn)設(shè)備純正砂糖;100ml量筒(西安市化學(xué)玻璃儀器廠(chǎng))。2.2.3為水之道實(shí)驗(yàn)第7天、第14天和第21天,讓各組動(dòng)物任意飲用兩種不同的水:其中一瓶為含1%蔗糖的自來(lái)水,一瓶為自來(lái)水。通過(guò)稱(chēng)飲水瓶重量測(cè)定7:00AM至次日7:00AM自來(lái)水和蔗糖水飲用量,以蔗糖偏嗜度(Sucrsepreference)[蔗糖偏嗜度(%)=蔗糖水飲用量/(蔗糖水飲用量+自來(lái)水飲用量)×100]作為衡量標(biāo)準(zhǔn),比較實(shí)驗(yàn)前后各組動(dòng)物蔗糖偏嗜度的變化(糖水消耗反映動(dòng)物的獎(jiǎng)賞反應(yīng)程度)。2.3動(dòng)物活動(dòng)評(píng)分reging行為學(xué)測(cè)定(Open-Field):實(shí)驗(yàn)采用敞箱為立柱體,高為40cm,長(zhǎng)寬各為80cm,周壁為黑色,底面由面積相等的25塊組成。以動(dòng)物穿越地面塊數(shù)為水平活動(dòng)得分(crossing),動(dòng)物穿越1格為1次,如動(dòng)物沿線(xiàn)行走,以每10cm為1次。以直立次數(shù)為垂直活動(dòng)得分(rearing),動(dòng)物雙足離開(kāi)底面為標(biāo)志,無(wú)論動(dòng)物站立多長(zhǎng)時(shí)間直至放下雙足為1次活動(dòng)。在實(shí)驗(yàn)的第14天和21天分別進(jìn)行測(cè)定。每只動(dòng)物進(jìn)行1次,每次3min(敞箱試驗(yàn)水平運(yùn)動(dòng)反映了動(dòng)物的活動(dòng)度,垂直運(yùn)動(dòng)反映了動(dòng)物對(duì)新鮮環(huán)境的好奇程度)。2.4海馬神經(jīng)元形態(tài)觀(guān)察大鼠斷頭后剝離腦組織,分離雙側(cè)海馬區(qū),標(biāo)本在10%甲醛溶液中固定,然后按常規(guī)步驟制做病理切片,采用蘇木-伊紅(HE)染色,電鏡下觀(guān)察海馬神經(jīng)元形態(tài)。2.5統(tǒng)計(jì)處理以平均值xˉ±sxˉ±s表示,并對(duì)組間差異采用方差分析q檢驗(yàn),顯著性水平設(shè)定α=0.05。3結(jié)果3.1大、中劑量組與大、中劑量組大鼠養(yǎng)殖血糖及醉腦解郁膠囊添加量的比較表1從表1可以看出,醒腦解郁膠囊大、中、小劑量組和百憂(yōu)解組均能增加大鼠糖水消耗量(P<0.05或P<0.01),但醒腦解郁膠囊大、中劑量組與百憂(yōu)解組無(wú)顯著差異(P>0.05)。醒腦解郁膠囊大、中劑量組和百憂(yōu)解組升高程度明顯優(yōu)于小劑量組(P<0.05)。3.2組大鼠自發(fā)行為情況從表2、3可以看出,醒腦解郁膠囊大、中、小劑量組和百憂(yōu)解組均能增加大鼠自發(fā)行為(P<0.05或P<0.01),但醒腦解郁膠囊大、中劑量組與百憂(yōu)解組無(wú)顯著差異(P>0.05)。醒腦解郁膠囊大、中劑量組和百憂(yōu)解組升高程度明顯優(yōu)于小劑量組(P<0.05)。3.3大、中、小劑量對(duì)大鼠額葉及海馬區(qū)神經(jīng)元形態(tài)、細(xì)胞間隙的影響空白組大鼠大腦額葉及海馬區(qū)神經(jīng)元細(xì)胞形態(tài)規(guī)則,細(xì)胞間隙正常,排列整齊。模型對(duì)照組大鼠額葉及海馬區(qū)神經(jīng)元的大小、數(shù)量及膠質(zhì)細(xì)胞均明顯減少,細(xì)胞形態(tài)不規(guī)則,細(xì)胞間隙增大,排列疏松不齊,有的細(xì)胞尼氏體消失,經(jīng)計(jì)數(shù)發(fā)現(xiàn)細(xì)胞數(shù)量明顯減少。醒腦解郁膠囊大、中、小劑量組和百憂(yōu)解組大鼠額葉及海馬區(qū)神經(jīng)元的大小、數(shù)量及膠質(zhì)細(xì)胞均增加,細(xì)胞形態(tài)、細(xì)胞間隙較模型對(duì)照組改善。醒腦解郁膠囊大、中劑量組和百憂(yōu)解組較小劑量組改善明顯。醒腦解郁膠囊大劑量組改善優(yōu)于百憂(yōu)解組。4討論4.1直接醫(yī)療費(fèi)用支出腦卒中是危害人類(lèi)生命與健康的常見(jiàn)病和多發(fā)病,具有發(fā)病率高、死亡率高、致殘率高、復(fù)發(fā)率高的特點(diǎn),位居人類(lèi)死亡原因第三位和致殘?jiān)虻谝晃弧?008年我國(guó)衛(wèi)生部公布的“第三次全國(guó)居民死因調(diào)查”顯示:腦血管病為第一死因,占22.45%;每年新發(fā)200萬(wàn)人,死亡150萬(wàn)人,75%致殘,5年復(fù)發(fā)率41%;現(xiàn)有患者600萬(wàn)～700萬(wàn)人,每年的直接醫(yī)療費(fèi)用支出為200億元。由于腦卒中不僅給患者身心造成極大的痛苦,而且給社會(huì)和家庭帶來(lái)巨大的精神和經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān),因此,醫(yī)學(xué)界越來(lái)越關(guān)注對(duì)腦卒中的發(fā)生、發(fā)展和防治措施研究。4.2腦卒中的腦中神經(jīng)功能缺失卒中后抑郁癥(Post-StrokeDepression,PSD)是指有明顯臨床癥狀的卒中后引發(fā)的抑郁癥,表現(xiàn)為憂(yōu)傷或郁悶,情緒低落,是對(duì)喪失、失望或者失敗所產(chǎn)生的一種異常的負(fù)面情緒反應(yīng)。卒中后抑郁癥患者由于悲觀(guān)失望,認(rèn)知能力下降,對(duì)疾病康復(fù)喪失信心,不能積極主動(dòng)配合治療,甚至拒絕治療,絕食、絕望自殺,延緩神經(jīng)功能缺損的恢復(fù)時(shí)間,使勞動(dòng)力喪失,嚴(yán)重影響卒中患者預(yù)后,使患者的生存質(zhì)量和生活滿(mǎn)意度下降,延長(zhǎng)住院時(shí)間,甚至增加卒中的死亡率。國(guó)際多中心臨床試驗(yàn)的循證醫(yī)學(xué)證據(jù)表明,腦卒中患者的情緒穩(wěn)定,對(duì)腦卒中的康復(fù)與治療起著關(guān)鍵的作用。卒中后抑郁癥的死亡率是非卒中后抑郁癥的3～4倍,不僅給患者帶來(lái)軀體和精神上的痛苦,亦增加了家庭和社會(huì)的負(fù)擔(dān)。隨著生物-心理-社會(huì)醫(yī)學(xué)模式的轉(zhuǎn)變和全球老齡化階段的到來(lái),對(duì)卒中后抑郁癥的研究得到國(guó)內(nèi)外學(xué)者的廣泛關(guān)注。4.3抑郁癥患者整體形態(tài)的改變臨床資料越來(lái)越提示抑郁癥并非完全功能性的精神障礙,部分類(lèi)型確有其器質(zhì)性基礎(chǔ)。利用計(jì)算機(jī)斷層掃描、正電子斷層掃描和核磁共振等影像技術(shù)進(jìn)行檢查,發(fā)現(xiàn)抑郁癥患者大腦及海馬存在與慢性應(yīng)激動(dòng)物相似的整體形態(tài)的改變,機(jī)體可能通過(guò)一系列的神經(jīng)生化機(jī)制導(dǎo)致腦組織器質(zhì)性損害,而與情緒密切相關(guān)的邊緣系統(tǒng)尤其是海馬結(jié)構(gòu)最易受到損害。包括海馬及杏仁體容積的縮小和邊緣系統(tǒng)神經(jīng)元的損傷,表現(xiàn)為側(cè)腦室擴(kuò)大、腦溝變寬、前腦體積縮小、海馬容量減少。整體形態(tài)的改變正是從宏觀(guān)上支持微細(xì)結(jié)構(gòu)改變。這些都可能構(gòu)成了抑郁癥的重要解剖學(xué)基礎(chǔ)。其中以額葉及海馬區(qū)病理改變最明顯。4.4中醫(yī)治療psd我們經(jīng)長(zhǎng)期臨床研究認(rèn)為卒中后抑郁癥病機(jī)是氣郁不暢、痰瘀交阻,采用醒腦解郁、化痰活血為法,研制醒腦解郁膠囊。方中以石菖蒲為君藥,取其味辛能開(kāi)竅寧神,溫以化濕豁痰。《重慶堂隨筆》中早就指出:“石菖蒲舒心氣,暢心神,怡心情,益心志,妙藥也”。石菖蒲、遠(yuǎn)志相須,醒腦解郁,祛痰開(kāi)竅,且遠(yuǎn)志又能安神益智;輔以半夏、郁金、柴胡,前者辛溫燥濕化痰,鎮(zhèn)靜降血脂,后者辛寒活血化瘀,行氣解郁、清心。君臣配合,開(kāi)竅解郁,活血化痰并舉,且方中溫涼平衡。天竺黃味甘、性寒歸心、肝經(jīng),清熱豁痰、鎮(zhèn)心定驚。丹參、雞血藤共為佐藥。丹參活血化瘀,清心安神。雞血藤養(yǎng)血活血,舒筋通絡(luò)。二者共奏活血化瘀、舒筋通絡(luò)作用。巴戟天補(bǔ)腎解郁,滋補(bǔ)肝腎以治本。已有實(shí)驗(yàn)室研究及臨床觀(guān)察發(fā)現(xiàn)巴戟天的水提物具有抗抑郁的藥理活性,且毒副作