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2024屆遼寧省營口市開發(fā)區(qū)第一高級中學高三第二次聯(lián)考生物試卷注意事項:1.答卷前,考生務(wù)必將自己的姓名、準考證號填寫在答題卡上。2.回答選擇題時,選出每小題答案后,用鉛筆把答題卡上對應(yīng)題目的答案標號涂黑,如需改動,用橡皮擦干凈后,再選涂其它答案標號?;卮鸱沁x擇題時,將答案寫在答題卡上,寫在本試卷上無效。3.考試結(jié)束后,將本試卷和答題卡一并交回。一、選擇題:(共6小題,每小題6分,共36分。每小題只有一個選項符合題目要求)1.下列哪一項不是生物多樣性的內(nèi)容()A.多種多樣的基因 B.豐富的物種數(shù)目C.豐富的個體數(shù)量 D.多種多樣的生態(tài)系統(tǒng)2.我國科學家屠呦呦因發(fā)現(xiàn)青蒿素而獲得諾貝爾獎。青蒿細胞中青蒿素的合成途徑如下圖實線方框內(nèi)所示,酵母細胞也能夠產(chǎn)生合成青蒿酸的中間產(chǎn)物FPP(如虛線方框內(nèi)所示)??茖W家向酵母菌導入相關(guān)基因培育產(chǎn)青蒿素酵母菌。下列敘述正確的是()A.過程①需要逆轉(zhuǎn)錄酶催化B.培育產(chǎn)青蒿素酵母菌,必須導入FPP合成酶基因和ADS酶基因C.由于ERG9酶等的影響,培育的產(chǎn)青蒿素酵母合成的青蒿素仍可能很少D.在野生植物中提取青蒿素治療瘧疾,體現(xiàn)了生物多樣性的間接價值3.葦草主要生長于瑞士阿爾卑斯山的高山盛夏牧場,是一種依賴風力傳粉的植物。不同種群的葦草對銅耐受力不同,有耐受性基因的個體在無銅污染地區(qū)生長很緩慢。調(diào)查廢棄銅礦區(qū)及附近葦草種群對銅的耐受力,結(jié)果如圖所示。下列敘述正確的是()A.距離礦區(qū)160m的葦草種群對銅耐受基因主要來自基因突變B.礦區(qū)內(nèi)葦草與距離礦區(qū)100m的葦草存在地理隔離C.礦區(qū)土壤的選擇導致葦草耐受基因頻率高于非礦區(qū)D.非礦區(qū)葦草耐受性基因頻率與風力和風向無關(guān)4.下列關(guān)于不同條件下馬鈴薯葉肉細胞相關(guān)生理活動的敘述合理的是()A.當光照條件適宜時,葉肉細胞產(chǎn)生ATP的場所只有葉綠體基粒B.在土壤缺Mg的條件下,葉肉細胞捕獲藍紫光的能力減弱C.光補償點條件下,葉肉細胞的光合速率大于植株的呼吸速率D.黑暗且缺氧條件下,細胞質(zhì)基質(zhì)中的[H]能將丙酮酸還原成乳酸5.下圖是多種生物學現(xiàn)象或過程模型,相關(guān)敘述不正確的是()A.若表示體液免疫過程,a為吞噬細胞,e為淋巴因子B.若d、e表示有氧呼吸的第一、二階段,則e一定發(fā)生在線粒體C.若表示基因表達過程,a為DNA,b為mRNA,d過程需要RNA聚合酶D.若表示減數(shù)分裂,b為次級卵母細胞,則等位基因分離可發(fā)生在d過程6.有氧呼吸和光合作用是生物兩個重要的代謝過程,以下不屬于它們共有的特征是()A.需要水的參與,有ATP產(chǎn)生B.需要多種酶的催化C.速率受CO2濃度影響D.全程發(fā)生在雙層膜結(jié)構(gòu)中二、綜合題:本大題共4小題7.(9分)神經(jīng)纖毛蛋白-1(NRP-1)能在腫瘤細胞內(nèi)表達,是血管內(nèi)皮生長因子家族成員的受體,通過參與多種信號轉(zhuǎn)導來促進腫瘤血管的生成。研究人員從腫瘤細胞中擴增出NRP-1基因并將其導入大腸桿菌體內(nèi)進行發(fā)酵培養(yǎng),分離提純相應(yīng)NRP-1,并將其免疫小鼠,以制備抗NRP-1的單克隆抗體(NRP-1MAb)。分析回答下列回題:(1)利用PCR技術(shù)可以從腫瘤細胞的基因組中分離擴增得到完整的NRP基因,其原因是__________。將擴增后的目的基因構(gòu)建成表達載體后,導入用__________處理的大腸桿菌體內(nèi)完成轉(zhuǎn)化。(2)研究人員將分離提純的NRP-1免疫小鼠后,取其脾臟中B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合,用特定的選擇培養(yǎng)基進行篩選,在該培養(yǎng)基上不能存活的是__________。選取檢測抗體陽性的雜交瘤細胞進行體外培養(yǎng)時需要的氣體環(huán)境是__________。(3)為進一步確定NRP-1MAb靶向治療時的用藥方式,研究人員將直腸癌組織塊制成單細胞懸液,等量注入4組裸鼠右前腋下,接種3后天開始向培養(yǎng)液中施加NRP-1MAb藥物,每隔10天給藥1次,共4次。給藥后測算一次腫瘤體積,結(jié)果如下圖所示:分析上圖可以得出的結(jié)論是__________。根據(jù)實驗結(jié)果,請給出使用NRP-1MAb進行靶向治療癌癥時的臨床建議:__________。8.(10分)前不久,某生物公司的百白破疫苗檢驗不符合規(guī)定。為生產(chǎn)高效價疫苗和簡化計劃免疫程序,科學家研制出基因工程乙肝-百白破(rHB-DTP)四聯(lián)疫苗,經(jīng)各項檢測均通過rHB-DTP四聯(lián)疫苗制檢規(guī)程的要求。其有效成分是乙肝病毒表面抗原、百日咳桿菌、白喉桿菌和破傷風桿菌的四種類毒素。請分析回答:(1)為獲取百日咳桿菌類毒素的基因,可從百日咳桿菌的細胞中提取對應(yīng)mRNA,在______的作用下合成雙鏈cDNA片段,獲得的cDNA片段與百日咳桿菌中該基因堿基序列_____(填“相同”或“不同”)。(2)由于乙肝病毒表面抗原的基因序列比較小,且序列已知,獲得目的基因可采用________,然后通過PCR技術(shù)大量擴增,此技術(shù)的前提是已知________________________________。(3)把目的基因?qū)胧荏w細胞時,科學家采用了改造后的腺病毒作為載體,寫出你認為科學家選它的理由_________________________________________________。(寫出2點)(4)研究發(fā)現(xiàn),如果將白喉桿菌類毒素20位和24位的氨基酸改變?yōu)榘腚装彼?,免疫效果更好,請寫出此種技術(shù)的基本流程_____________________________________。(5)實驗證明,一定時間內(nèi)間隔注射該疫苗3次效果更好,其主要原因是體內(nèi)產(chǎn)生的_____細胞數(shù)量增多,當同種抗原再次侵入人體時二次免疫的特點是_____。9.(10分)β-葡萄糖苷酶是一種存在于微生物中的可水解纖維素的酶,可用于生產(chǎn)燃料乙醇,也可作為洗滌劑的有效成分。某科研小組進行了β-葡萄糖苷酶高產(chǎn)菌株的分離、鑒定、提純產(chǎn)物等研究。已知七葉靈能在β-葡萄糖苷酶的作用下水解,其水解產(chǎn)物七葉苷原能和Fe3+作用呈現(xiàn)棕黑色。請回答:(1)為篩選出β-葡萄糖苷酶高產(chǎn)菌株,應(yīng)到_____________環(huán)境中取樣,取樣后要在液體培養(yǎng)基中進行選擇培養(yǎng),其目的是_________________。(2)選擇培養(yǎng)后要初步分離鑒定出目的菌株,請寫出實驗思路:___________________。(3)用接種針挑取棕黑色的菌落用_____________法進一步純化,進而篩選出高產(chǎn)菌株。(4)將高產(chǎn)菌株擴大培養(yǎng),獲得發(fā)酵液,用___________法去除發(fā)酵液中分子量小的雜質(zhì),再用_________法進一步純化,最終獲得純度較高的β-葡萄糖苷酶。(5)生產(chǎn)中為降低成本,β-葡萄糖苷酶最好采用________法固定,以便重復(fù)使用。10.(10分)為提高糧食產(chǎn)量,科研工作者以作物甲為材料,探索采用生物工程技術(shù)提高光合作用效率的途徑。(1)圖1是葉肉細胞中部分碳代謝過程的模式圖。其中環(huán)形代謝途徑表示的是光合作用中的________反應(yīng)。(2)如圖1所示,在光合作用中R酶催化C5與CO2形成2分子3-磷酸甘油酸。在某些條件下,R酶還可以催化C5和O2反應(yīng)生成1分子C3和1分子2-磷酸乙醇酸,后者在酶的催化作用下轉(zhuǎn)換為___________后通過膜上的載體(T)離開葉綠體。再經(jīng)過代謝途徑Ⅰ最終將2分子乙醇酸轉(zhuǎn)換為1分子甘油酸,并釋放1分子CO2。(3)為了減少葉綠體內(nèi)碳的丟失,研究人員利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)將編碼某種藻類C酶(乙醇酸脫氫酶)的基因和某種植物的M酶(蘋果酸合成酶)基因轉(zhuǎn)入作物甲,與原有的代謝途徑Ⅲ相連,人為地在葉綠體中建立一個新的乙醇酸代謝途徑(圖2中的途徑Ⅱ)。①將C酶和M酶的編碼基因轉(zhuǎn)入作物甲,能夠?qū)崿F(xiàn)的目的是:利用途徑Ⅱ,通過__________,降低葉綠體基質(zhì)中該物質(zhì)的含量,減少其對葉綠體的毒害作用。②轉(zhuǎn)基因操作后,途徑Ⅲ能夠提高光合作用效率的原因是______________。(4)在圖2所述研究成果的基礎(chǔ)上,有人提出“通過敲除T蛋白基因來進一步提高光合作用效率”的設(shè)想。你認為該設(shè)想是否可行并闡述理由。_____________11.(15分)國家標準規(guī)定每毫升鮮奶產(chǎn)品中大腸桿菌數(shù)不得超過個,鮮奶中大腸桿菌的數(shù)目可用濾膜法來測定,流程為:用濾膜過濾1ml待測牛奶→牛奶中的細菌留在濾膜上→將濾膜轉(zhuǎn)移到伊紅美藍的培養(yǎng)基(EMB培養(yǎng)基)上培養(yǎng)→統(tǒng)計菌落數(shù)目。(1)制備培養(yǎng)基:培養(yǎng)基中能夠同時提供氮源和碳源的是_____________(填“蛋白胨”“乳糖”或“”),從培養(yǎng)基功能上劃分,EMB培養(yǎng)基屬于_____________。(2)為檢測該培養(yǎng)基滅菌是否徹底,對于該培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測方法是_____________。(3)培養(yǎng)與統(tǒng)計:在適宜的條件下培養(yǎng)一段時間后,應(yīng)選擇顏色為_____________的菌落數(shù)進行統(tǒng)計,結(jié)果如下:培養(yǎng)時間12h24h平板對照組123對照組123大腸桿菌菌落數(shù)(個)01321211450132121145其他細菌菌落數(shù)(個)112253222244112253222244(4)培養(yǎng)12h和24h的大腸桿菌菌落特征有何差異?_____________。(5)根據(jù)表中的數(shù)據(jù)不能判斷該鮮奶樣品中的大腸桿菌數(shù)是否超標,請說明理由:_____________。
參考答案一、選擇題:(共6小題,每小題6分,共36分。每小題只有一個選項符合題目要求)1、C【解題分析】
物多樣性的內(nèi)涵通常包括三個方面,即基因的多樣性、物種多樣性和生態(tài)系統(tǒng)的多樣性?!绢}目詳解】ABD、生物多樣性通常有三個主要的內(nèi)涵,即基因的多樣性、物種多樣性和生態(tài)系統(tǒng)的多樣性,ABD正確。C、豐富的個體數(shù)量不是生物多樣性的內(nèi)容,C錯誤。故選C?!绢}目點撥】解答此類題目的關(guān)鍵是理解生物多樣性的內(nèi)涵。2、C【解題分析】
分析題圖:圖中實線方框中表示青蒿細胞中青蒿素的合成途徑,青蒿素的合成需要FPP合成酶和ADS酶等。虛線方框表示酵母細胞合成FPP合成酶及固醇的過程,酵母細胞只能合成FPP合成酶,不能合成ADS酶,因此其不能合成青蒿素?!绢}目詳解】A、過程①是FPP合成酶基因轉(zhuǎn)錄形成mRNA,需要RNA聚合酶,A錯誤;B、由圖可知,酵母細胞能合成FPP合成酶,但不能合成ADS酶和CYP71AV1酶,即酵母細胞缺乏ADS酶基因和CYP71AV1酶基因.因此,要培育能產(chǎn)生青蒿素的酵母細胞,需要向酵母細胞中導入ADS酶基因、CYP71AV1酶基因,B錯誤;C、圖示可知,F(xiàn)PP轉(zhuǎn)化成固醇需要ERG9酶催化,故由于ERG9酶等的影響,培育的產(chǎn)青蒿素酵母合成的青蒿素仍可能很少,C正確;D、在野生植物中提取青蒿素治療瘧疾,體現(xiàn)了生物多樣性的直接價值,D錯誤。故選C。3、C【解題分析】
1、基因突變具有低頻性、不定向性、多害少利性等,由于葦草是一種依賴風力傳粉的植物,推測礦區(qū)內(nèi)葦草與距離礦區(qū)100m-160m的葦草不存在地理隔離。
2、據(jù)圖分析可知:礦區(qū)葦草銅耐受指數(shù)高于非礦區(qū),推測可能是礦區(qū)土壤的選擇導致了葦草耐受基因頻率高于非礦區(qū)。【題目詳解】A、基因突變具有低頻性,距離礦區(qū)160m的葦草種群對銅耐受基因主要來自基因重組,A錯誤;B、根據(jù)題干信息,葦草是一種依賴風力傳粉的植物,故礦區(qū)內(nèi)葦草與距離礦區(qū)100m的葦草不存在地理隔離,B錯誤;C、據(jù)圖分析可知,礦區(qū)葦草銅耐受指數(shù)高于非礦區(qū),故推測可能是礦區(qū)土壤的選擇導致了葦草耐受基因頻率高于非礦區(qū),C正確;D、葦草是一種依賴風力傳粉的植物,非礦區(qū)葦草耐受性基因頻率與風力和風向有關(guān),D錯誤。故選C。4、B【解題分析】
影響光合速率的外界因素有:光照強度、CO2濃度、溫度等,影響光合速率的內(nèi)因有:葉綠素的含量、酶等?!绢}目詳解】A、當光照條件適宜時,葉肉細胞既進行光合作用,也進行呼吸作用,產(chǎn)生ATP的場所有葉綠體基粒和線粒體、細胞質(zhì)基質(zhì),A錯誤;B、在土壤缺Mg的條件下,導致葉綠素的含量降低,葉肉細胞捕獲藍紫光的能力減弱,B正確;C、在葉肉細胞的光補償點條件下,葉肉細胞的光合速率等于其呼吸速率,但小于整個植株的呼吸速率,C錯誤;D、黑暗且缺氧條件下,馬鈴薯葉肉細胞進行無氧呼吸,細胞質(zhì)基質(zhì)中的[H]能將丙酮酸還原成酒精;而馬鈴薯塊莖細胞進行無氧呼吸,細胞質(zhì)基質(zhì)中的[H]能將丙酮酸還原成乳酸,D錯誤。故選B。5、B【解題分析】
在特異性免疫中,T細胞可產(chǎn)生淋巴因子,受到抗原刺激的B細胞可在該因子的作用下,增殖分化為漿細胞,漿細胞產(chǎn)生抗體,參與體液免疫過程?;虻谋磉_包括轉(zhuǎn)錄和翻譯過程,轉(zhuǎn)錄需要RNA聚合酶催化。等位基因的分離和非等位基因的自由組合均發(fā)生在減數(shù)第一次分裂過程中。【題目詳解】A、若表示體液免疫過程,經(jīng)過吞噬細胞處理的抗原呈遞給T淋巴細胞,T淋巴細胞釋放淋巴因子作用于B淋巴細胞,促進B淋巴細胞的增殖、分化,所以a為吞噬細胞,b為T淋巴細胞,e為淋巴因子,c為B淋巴細胞,A正確;B、原核生物有氧呼吸第二階段發(fā)生在細胞質(zhì)基質(zhì)中,B錯誤;C、若表示基因表達過程,a為DNA,d為轉(zhuǎn)錄,需要RNA聚合酶的催化,b為mRNA,e為翻譯,C正確;D、若表示減數(shù)分裂,b為次級卵母細胞,則d為減數(shù)第一次分裂,等位基因分離可發(fā)生在d過程中,D正確。故選B。6、D【解題分析】
有氧呼吸:第一階段C6H12O6(葡萄糖)4[H](還原氫)+2C3H4O3(丙酮酸)+少量能量;場所細胞質(zhì)基質(zhì)中。第二階段2C3H4O3(丙酮酸)+6H2O(水)20[H](還原氫)+6CO2(二氧化碳)+少量能量;場所:線粒體基質(zhì)中。第三階段24[H](還原氫)+6O2(氧氣)12H2O(水)+大量能量;場所:線粒體內(nèi)膜。總反應(yīng)式C6H12O6+6H2O+6O26CO2+12H2O+大量能量2、光合作用的過程包括光反應(yīng)和暗反應(yīng)兩個階段:①光反應(yīng)階段:場所是類囊體薄膜a.水的光解:2H2O4[H]+O2b.ATP的生成:ADP+Pi+光能ATP。②暗反應(yīng)階段:場所是葉綠體基質(zhì):a.CO2的固定:CO2
+C52C3b.三碳化合物的還原:2C3
(CH2O)+C5【題目詳解】A、有氧呼吸第二階段有水參加,光反應(yīng)有光解水;光反應(yīng)產(chǎn)生ATP,呼吸作用也會產(chǎn)生ATP,A正確;B、有氧呼吸和光合作用都需要多種酶的催化,B正確;C、高濃度CO2會抑制有氧呼吸,有利于暗反應(yīng)的進行,故有氧呼吸和光合作用的速率受CO2濃度影響,C正確;D、有氧呼吸第一階段發(fā)生在細胞質(zhì)基質(zhì),D錯誤。故選D。二、綜合題:本大題共4小題7、使用與NRP-1基因兩端特異性結(jié)合的引物可以從模板DNA中擴增出該基因Ca2+未融合的親本細胞和融合的具有同種核的細胞95%的空氣和5%的CO2NRP-1MAb能有效的降低腫瘤的體積,中、高劑量抗體的降低效果比低劑量的更顯著使用中劑量給藥【解題分析】
1、利用PCR技術(shù)擴增目的基因時,由于DNA聚合酶只能從3′端延伸DNA鏈,因此要用兩種引物才能確保DNA兩條鏈同時被擴增;引物I延伸而成的DNA單鏈會與引物Ⅱ結(jié)合,進行DNA的延伸,這樣,DNA聚合酶能特異地復(fù)制處于兩個引物之間的DNA序列。2、分析圖可知,實驗組與對照組比較,NRP-1MAb能有效的降低腫瘤的體積;低、中、高劑量組比較可知,中、高劑量抗體的降低效果比低劑量的更顯著。【題目詳解】(1)由分析可知,使用與NRP-1基因兩端特異性結(jié)合的引物,可以從模板DNA中擴增出處于兩個引物之間的該基因。將目的基因?qū)氪竽c桿菌,最常用的轉(zhuǎn)化方法是,用Ca2+處理細胞使其處于感受態(tài)。(2)用特定的選擇培養(yǎng)基進行篩選,在該培養(yǎng)基上不能存活的是B淋巴細胞、骨髓瘤細胞、B淋巴細胞與B淋巴細胞融合的細胞、骨髓瘤細胞與骨髓瘤細胞融合的細胞。進行動物細胞培養(yǎng)時,通常將培養(yǎng)基放置于95%的空氣和5%的CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。(3)由圖示可以看出,與對照組比較,NRP-1MAb能有效的降低腫瘤的體積;低、中、高劑量組比較可知,中、高劑量抗體的降低效果比低劑量的更顯著,因此使用NRP-1MAb進行靶向治療癌癥時采用中劑量給藥,用藥量少,效果明顯。【題目點撥】本題考查PCR擴增目的基因和單克隆抗體的相關(guān)知識,要求考生識記PCR技術(shù)的原理、動物細胞培養(yǎng)的條件;識記制備單克隆抗體的原理及過程,能結(jié)合所學的知識準確答題。8、逆轉(zhuǎn)錄酶不同化學方法人工合成(人工化學合成)一段目的基因的核苷酸序列以便合成引物能自主復(fù)制、有多個限制酶切位點、有標記基因、對宿主細胞無害從預(yù)期蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測應(yīng)有的氨基酸序列→找到相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列記憶短時間內(nèi)迅速產(chǎn)生大量的抗體和記憶細胞,免疫預(yù)防作用更強【解題分析】
1、基因工程技術(shù)的基本步驟:(1)目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成。(2)基因表達載體的構(gòu)建:是基因工程的核心步驟,基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。(3)將目的基因?qū)胧荏w細胞:根據(jù)受體細胞不同,導入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法;將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法;將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法。2、記憶細胞使得二次免疫反應(yīng)快而強。【題目詳解】(1)由mRNA合成cDNA的過程屬于逆轉(zhuǎn)錄過程,需要逆轉(zhuǎn)錄酶。獲得的cDNA片段只包含基因的編碼區(qū),沒有非編碼區(qū),因此與百日咳桿菌中該基因堿基序列不同。(2)可通過化學方法人工合成(人工化學合成)序列較小且已知的基因片段。通過PCR技術(shù)大量擴增目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列,以便合成引物。(3)改造后的腺病毒具有能自主復(fù)制、有多個限制酶切位點、有標記基因、對宿主細胞無害等特點,故可用做載體。(4)將白喉桿菌類毒素20位和24位的氨基酸改變?yōu)榘腚装彼釋儆诘鞍踪|(zhì)工程的范疇,故其基本流程是從預(yù)期蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測應(yīng)有的氨基酸序列→找到相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列。(5)一定時間內(nèi)間隔注射該疫苗3次效果更好,其主要原因是體內(nèi)產(chǎn)生的記憶細胞數(shù)量增多,當同種抗原再次侵入人體時二次免疫的特點是短時間內(nèi)迅速產(chǎn)生大量的抗體和記憶細胞,免疫預(yù)防作用更強。【題目點撥】本題考查了基因工程中目的基因的獲取、表達載體的構(gòu)建、蛋白質(zhì)工程以及免疫預(yù)防等相關(guān)知識,綜合性較強,要求考生需掌握各知識之間的聯(lián)系,做到靈活應(yīng)用,熟能生巧。9、富含纖維素增加產(chǎn)β-葡萄糖苷酶菌株的濃度配制含基本成分的培養(yǎng)基,加入七葉靈、Fe3+,用稀釋涂布平板法接種并在適宜條件下培養(yǎng),粽黑色圈大的菌落即為目標菌落平板劃線透析法凝膠色譜法化學結(jié)合或物理吸附【解題分析】
1.尋找目的菌株的原理是需要根據(jù)它對生存環(huán)境的要求,到相應(yīng)的環(huán)境中去尋找。2.固定化酶和固定化細胞技術(shù)是指利用物理或化學方法,將酶或細胞固定在一定空間內(nèi)的技術(shù),包括包埋法、化學結(jié)合法和物理吸附法。3.凝膠色譜法也稱為分配色譜法,是根據(jù)相對分子質(zhì)量的大小分離蛋白質(zhì)的有效方法。當相對分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)通過凝膠時,相對分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)容易進入凝膠內(nèi)部的通道,路程較長,移動的速度較慢,而相對分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì),無法進入凝膠內(nèi)部的通道,只能在凝膠外部移動,路程較短,移動的速度較快,相對分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)分子得以分離。【題目詳解】(1)實驗?zāi)康氖且Y選出β-葡萄糖苷酶高產(chǎn)菌株,而β-葡萄糖苷酶是一種存在于微生物中的可水解纖維素的酶,據(jù)此可知要找到目的菌需要到富含纖維素的環(huán)境中取樣,取樣后,為了增加產(chǎn)β-葡萄糖苷酶菌株的濃度,要將樣品菌在液體培養(yǎng)基中進行選擇培養(yǎng)。(2)題意顯示七葉靈能在β-葡萄糖苷酶的作用下水解,其水解產(chǎn)物七葉苷原能和Fe3+作用呈現(xiàn)棕黑色,若要初步分離鑒定出目的菌株,需要在鑒定培養(yǎng)基中加入七葉靈(能在β-葡萄糖苷酶作用下分解)、Fe3+(與七葉靈的水解產(chǎn)物發(fā)生顏色反應(yīng)),為得到單菌落需用稀釋涂布平板法接種,然后置于適宜條件下培養(yǎng),在該培養(yǎng)基中呈現(xiàn)棕黑色的菌落即為目的菌。(3)用接種針挑取棕黑色的菌落,然后用平板劃線法接種,置于適宜條件下進一步純化培養(yǎng),進而篩選出高產(chǎn)菌株。(4)將高產(chǎn)菌株擴大培養(yǎng),獲得發(fā)酵液,因為透析袋允許小分子自由出入,而不能讓大分子透過,故用透析法處理之后,發(fā)酵液中分子量小的雜質(zhì)就能夠被除去,再用凝膠色譜法進一步純化,最終獲得純度較高的β-葡萄糖苷酶。(5)生產(chǎn)中為降低成本,β-葡萄糖苷酶最好采用化學結(jié)合或物理吸附法固定,以便重復(fù)使用,同時也能與產(chǎn)物有效的分離?!绢}目點撥】熟知相關(guān)的基礎(chǔ)知識是解答本題的關(guān)鍵!能夠從題目中找到關(guān)鍵信息解答本題中篩選目的菌的原理是解答本題的另一關(guān)鍵!10、碳(暗)乙醇酸將乙醇酸轉(zhuǎn)換為蘋果酸由于途徑Ⅱ提高了蘋果酸的含量,使葉綠體基質(zhì)內(nèi)CO2的濃度增加,直接增加了碳(暗)反應(yīng)的反應(yīng)(底)物該設(shè)想可行。理由是:葉綠體膜上的載體T仍有可能輸出部分乙醇酸,造成葉綠體中碳的丟失。找到并敲除載體T的基因,即可減少這一部分碳的丟失,進一步提高光合作用效率。【解題分析】
分析圖1可知:葉綠體中所示的環(huán)形反應(yīng)的生理過程為卡爾文循環(huán),該循環(huán)過程中發(fā)生的反應(yīng)為:在光合作用中R酶催化C5與CO2形成2分子3-磷酸甘油酸,3-磷酸甘油酸轉(zhuǎn)化成C3,然后C3在來自光反應(yīng)的ATP和還原劑NADPH以及酶的催化作用下形成有機物和C5。R酶還可以催化C5和O2反應(yīng)生成1分子C3和1分子2-磷酸乙醇酸,后者在酶的催化作用下轉(zhuǎn)換為乙醇酸后通過膜上的載體(T)離開葉綠體。再經(jīng)過代謝途徑最終將2分子乙醇酸轉(zhuǎn)換為1分子甘油酸,并釋放1分子CO2。分析圖2可知:通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)人為地在葉綠體中建立一個新的乙醇酸代謝途徑Ⅱ,即將乙醇酸通過C酶和M酶的催化作用轉(zhuǎn)化為蘋果酸,由于途徑Ⅱ提高了蘋果酸的含量,蘋果酸通過代謝途徑Ⅲ,使葉綠體基質(zhì)內(nèi)CO2的濃度增加,有利于提高光合速率。【題目詳解】(1)分析圖1可知,圖1是葉肉細胞中部分碳代謝過程,表示碳(暗)反應(yīng)的過程圖。(2)分析圖1可知,在某些條件下,R酶還可以催化C5和O2反應(yīng)生成1分子C3和1分子2-磷酸乙
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