常春藤皂苷元抑制TGF-β1誘導(dǎo)人腸癌SW480細(xì)胞上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)研究

常春藤皂苷元抑制TGF-β1誘導(dǎo)人腸癌SW480細(xì)胞上皮—間質(zhì)轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)研究研究目的：常春藤皂苷元屬于藥用植物威靈仙中的五環(huán)三萜類化合物,現(xiàn)已知存在于多種天然植物中。常春藤皂苷元為齊墩果酸的衍生物,關(guān)于常春藤皂苷元藥理活性抗腫瘤文獻(xiàn)研究報(bào)道較少,而齊墩果酸的相關(guān)研究報(bào)道已相當(dāng)深入,由于兩者化學(xué)結(jié)構(gòu)部分類似,假定可能存在著相似作用,故本實(shí)驗(yàn)旨在探討常春藤皂苷元對腸癌SW480細(xì)胞株在轉(zhuǎn)化生長因子-β1(transforminggrowthfactor-β1,TGF-β1)誘導(dǎo)下的上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化的相關(guān)影響,從上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化的角度進(jìn)一步闡明常春藤皂苷元抑制腸癌生長及抗侵襲的可能機(jī)制,為中醫(yī)藥治療腫瘤提供新的理論支持。研究方法：1將SW480細(xì)胞株進(jìn)行如下分組：①空白對照組；②10ng·ml-1TGF-β1誘導(dǎo)組；③呈濃度梯度的常春藤皂苷元藥物干預(yù)組(5、10、20、40、80μg·ml-1藥物與TGF-β1共培養(yǎng)),TGF-β1劑量為10ng·ml-1,體外培養(yǎng)12、24、48小時(shí)。MTT檢測各組細(xì)胞抑制率。2倒置相差顯微鏡觀察對照組與實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞形態(tài)變化。3Transwell小室侵襲實(shí)驗(yàn)檢測各分組細(xì)胞的侵襲能力變化。4RT-qPCR法檢測各組細(xì)胞EMT及侵襲相關(guān)基因mRNA表達(dá)水平。5WesternBlot法檢測各組細(xì)胞EMT及侵襲相關(guān)蛋白表達(dá)情況。研究結(jié)果：1常春藤皂苷元能抑制TGF-β1誘導(dǎo)的腸癌細(xì)胞SW480的增殖,且呈量效和時(shí)效關(guān)系；2常春藤皂苷元能干預(yù)TGF-β1誘導(dǎo)的SW480細(xì)胞形態(tài)由上皮表型向間質(zhì)表型轉(zhuǎn)變；3常春藤皂苷元能抑制TGF-β1誘導(dǎo)的SW480細(xì)胞的侵襲轉(zhuǎn)移過程；4常春藤皂苷元作用于TGF-β1誘導(dǎo)的SW480細(xì)胞后,EMT及侵襲相關(guān)基因N-cadherin、Vimentin、Snail、STAT3、MMP-9、MMP-14表達(dá)量減弱,E-cadherin、RECK的表達(dá)量則增強(qiáng)；5常春藤皂苷元作用于TGF-β1誘導(dǎo)的SW480細(xì)胞后,EMT及侵襲相關(guān)蛋白N-cadherin、Vimentin、Snail、STAT3、MMP-9、MMP-14表達(dá)水平降低,E-cadherin、RECK的表達(dá)水平反而增高；研究結(jié)論：常春藤皂苷元對人腸癌細(xì)胞SW480增殖及侵襲轉(zhuǎn)移能力具有抑制作用。其機(jī)制可能是影響E-cadherin、N-cadherin、Vimentin、Snail、STAT3、MMP