2007-2012年生物高考題按知識點分類匯編：蛋白質工程

“漢水丑生的生物同行”超級群整理校對PAGE“漢水丑生的生物同行”超級群整理校對蛋白質工程本卷整理：【黑】遛狗的狗狗（2012天津）8.黃曲霉毒素B1（AFB1）存在于被黃曲霉菌污染的飼料中，它可以通過食物鏈進入動物體內并蓄積，引起瘤變。某些微生物能表達AFB1解毒酶.將該酶添加在飼料中可以降解AFB1，清除其毒性。

回答下列問題：（1）AFB1屬于類致癌因子。（2）AFB1能結合在DNA的G上，使該位點受損傷變?yōu)镚'，在DNA復制中，G'會與A配對?，F(xiàn)有受損傷部位的序列為，經兩次復制后，該序列突變?yōu)?。?）下圖為采用基因工程技術生產AFB1解毒酶的流程圖據圖回答問題：①在甲、乙條件下培養(yǎng)含AFB1解毒酶基因的菌株，經測定，甲菌液細胞密度小、細胞含解毒酶：乙菌液細胞密度大、細胞不含解毒酶.過程l應選擇菌液的細胞提取總RNA，理由是②過程Ⅱ中，與引物結合的模版是③檢測酵母菌工程菌是否合成了AFB1解毒酶，應采用方法。（4）選取不含AFB1的飼料和某種實驗動物為材料，探究該AFB1解毒酶在飼料中的解毒效果。實驗設計及測定結果見下表：據表回答問題：①本實驗的兩個自變量，分別為。②本實驗中，反映AFB1解毒酶的解毒效果的對照組是。③經測定，某污染飼料中AFB1含量為100μg/kg，則每千克飼料應添加克AFB1解毒酶.解毒效果最好.同時節(jié)的了成本。（5）采用蛋白質工程進一步改造該酶的基本途徑是：從提高每的活性出發(fā)，設計預期的蛋白質結構，推測應有的氨基酸序列，找到相對應的序列?！敬鸢浮浚?）化學 （2）（3）①甲甲菌液細胞的AFB1解毒酶基因已轉錄生成了mRNA，而在乙菌液細胞中該基因未轉錄②AFB1解毒酶基因的cDNA.③抗原-抗體雜交（4）①AFB1的有無和AFB1解毒酶的含量。②B組（或B組+A組）③5（5）脫氧核苷酸序列?！窘馕觥奎S曲霉毒素B1（AFB1）存在于被黃曲霉菌污染的飼料中，它可以通過食物鏈進入動物體內并蓄積，引起瘤變。某些微生物能表達AFB1解毒酶.將該酶添加在飼料中可以降解AFB1，清除其毒性。（1）黃曲霉毒素B1（AFB1）是化學物質，AFB1屬于化學類致癌因子。

（2）AFB1能結合在DNA的G上.使該位點受損傷變?yōu)镚'，在DNA復制中，G'會與A配對?，F(xiàn)有受損傷部位的序列為，經兩次復制后，該序列突變?yōu)?。?）①在甲、乙條件下培養(yǎng)含AFB1解毒酶基因的菌株.經測定.甲菌液細胞密度小、細胞含解毒酶：乙菌液細胞密度大、細胞不含解毒酶.過程l應選擇甲菌液的細胞提取總RNA，理由是因為甲菌液細胞含解毒酶，意味著完成了基因的表達，所以應選擇甲菌液的細胞提取總RNA②過程Ⅱ中，根據圖示，可以看出與引物結合的模版是cDNA.③檢測酵母菌工程菌是否合成了AFB1解毒酶，檢測對象為蛋白質，應采用抗原-抗體雜交方法。（4）①本實驗的兩個自變量，分別為AFB1的有無和AFB1解毒酶的含量。②本實驗中.反映AFB1解毒酶的解毒效果的對照組是B組。③經測定，某污染飼料中AFB1含量為100μg/kg，則每千克飼料應添加5克AFB1解毒酶.AFB1的殘留量最少，解毒效果最好.繼續(xù)添加AFB1解毒酶解解毒效果不變，因此節(jié)約了成本。（5）采用蛋白質工程進一步改造該酶的基本途徑是：從提高酶的活性出發(fā)，設計預期的蛋白質結構，推測應有的氨基酸序列，找到相對應的脫氧核苷酸序列?！敬鸢浮靠臻g結構，氨基酸序列；（2007年新課標廣東卷）41.香蕉原產熱帶地區(qū)，是我國南方重要的經濟作物之一。廣東省冬季常受強寒潮和霜凍影響，對香蕉生長發(fā)育影響很大。由香蕉束頂病毒（BBTV，單鏈環(huán)狀DNA病毒）引起的香蕉束頂病，對香蕉生產的危害十分嚴重。當前香蕉栽培品種多為三倍體，由于無性繁殖是香蕉繁育的主要方式，缺少遺傳變異性，因此利用基因工程等現(xiàn)代科技手段提高其種質水平，具有重要意義。請根據上述材料，回答下列問題：（1）簡述香蕉大規(guī)?？焖俜敝臣夹g的過程。（2）脫毒香蕉苗的獲得，可采用的方法，此方法的依據是和。（3）建立可靠的BBTV檢測方法可以監(jiān)控脫毒香蕉苗的質量，請問可用哪些方法檢測病毒的存在?（列舉兩種方法）（4）在某些深海魚中發(fā)現(xiàn)的抗凍蛋白基因afp對提高農作物的抗寒能力有較好的應用價值，該基因可以從這些魚的DNA中擴增得到。試述在提取和純化DNA時影響提純效果的因素及其依據。（列舉兩點）（5）如何利用afp基因，通過轉基因技術獲得抗寒能力提高的香蕉植株?在運用轉基因香蕉的過程中，在生態(tài)安全方面可能會出現(xiàn)什么問題?（列舉兩點）（6）從細胞工程的角度出發(fā)，簡述一種培育抗寒香蕉品種的方法及其依據。另外，抑制果膠裂解酶的活性可以延長香蕉果實儲藏期，請描述采用蛋白質工程技術降低該酶活性的一般過程?！敬鸢浮浚?）選取香蕉外植體，通過誘導脫分化產生愈傷組織，然后通過調整植物激素比例，再分化形成芽和根，獲得大量試管苗（或通過誘導大量形成胚狀體，制成人工種子，適宜條件下萌發(fā)長成幼苗）。（2）莖尖（分生組織）組織培養(yǎng)；莖尖不帶病毒（或病毒在植物體內分布不均勻）；植物細胞全能性。（3）①BBTV病毒基因的檢測（DNA分子雜交技術）；②BBTV病毒蛋白的檢測（獲得抗血清，利用抗原一抗體的雜交反應，判斷病毒是否存在）。（4）①選擇NaCl溶液的合適濃度，利用DNA和其它雜質在不同NaCl溶液中溶解度不同的特性，達到分離目的；②加入一定量酒精，使部分蛋白質雜質溶解于酒精，與DNA分離；③加入蛋白酶，除去蛋白質雜質的干擾；④控制DNA提取的溫度，使大多數(shù)蛋白質雜質變性。（5）將afp基因插入土壤農桿菌的質粒，構建表達載體，通過農桿菌的轉化導入香蕉受體細胞，成功轉化的香蕉細胞通過組織培養(yǎng)形成植株。生態(tài)安全問題包括：①外源基因擴散到其他物種（外源基因漂移）；②轉基因植株擴散影響生態(tài)系統(tǒng)的結構和功能；③轉基因植株擴散對生物多樣性的影響；④轉基因植物殘體或分泌物對環(huán)境的影響。（6）體細胞雜交育種，其依據是將不同品種的香蕉體細胞利用細胞融合技術融合成雜種細胞后培育出抗寒香蕉品種（或體細胞誘變育種，其依據是利用誘變劑等方法使香蕉離體培養(yǎng)細胞發(fā)生基因突變，然后篩選培育出抗寒品種）。蛋白質工程方法的步驟為：①果膠裂解酶蛋白的功能