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文檔簡介

人體組織學與解剖學實驗南昌大學生命科學與食品工程學院活體染色法顯示巨噬細胞定義：活體染色(vitalstaining)一般是指用無毒或毒性很小的染料,在不影響細胞的正常生命活動的前提下而使活細胞的某些結(jié)構(gòu)著色的一種實驗方法。最早進行活體染色的是PaulEhrlich(1885)他把剛切下的新鮮組織浸泡在亞甲基藍(美藍)溶液中,再用顯微鏡來觀察尚處在生活狀態(tài)下的活細胞結(jié)構(gòu)。實驗目的1、練習并掌握動物組織活體染色方法。2、學習大鼠腸系膜鋪片制作方法。3、學習大鼠皮下結(jié)締組織鋪片制作方法。4、了解大鼠肝臟石蠟切片制片方法，觀察Kupffer細胞。實驗原理要顯示巨噬細胞多采用活體染色法，即將一種對動物無毒害或毒性很小的染料，用注射器注入動物體的腹膜腔或血管內(nèi)，體內(nèi)有吞噬能力的細胞會將注入的活體染料吞噬入細胞內(nèi)。然后將動物殺死取材，經(jīng)固定、浸洗、復染、脫水、透明、封固等手續(xù)制成玻片標本?；铙w染色一般選用的燃料有臺盼藍、中性紅、鋰洋紅、墨汁等。實驗材料與器材實驗動物：成年大白鼠實驗試劑與器材：1%臺盼藍染液，乙醚，福爾馬林，酒精（梯度），harris蘇木精染液、曙紅染液，二甲苯，中性樹膠；手術(shù)器械一套，5ml注射器，載玻片，蓋玻片，臥式染缸，單面刀片。2、取材動物斷頭處死，取皮下結(jié)締組織、腸系膜、肝臟或大網(wǎng)膜為材料。取小塊結(jié)締組織或腸系膜，置于載玻片上，用解剖針盡量將其鋪平，干燥后浸入10%福爾馬林中固定。3、固定用10%福爾馬林固定12—24h。4、浸洗用70%酒精浸洗數(shù)小時，中間更換數(shù)次新液，再用蒸餾水浸洗片刻，即可進行染色。也可直接進入70%酒精中保存。5、染色固定好的鋪片進行常規(guī)HE染色（詳細過程見石

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