DB21-T 3717-2023 李、杏品種鑒定SSR分子標(biāo)記法

ICS

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李、杏品種鑒定

分子標(biāo)記法遼寧省市場(chǎng)監(jiān)督管理局??發(fā)

布

1.1-2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則

第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起

repeats，SSR）分子標(biāo)記法進(jìn)行李（Plum）、杏（Apricot）品種鑒定的主要儀器設(shè)備與試劑耗材、試劑配制、參照種質(zhì)、操作步驟、基因型對(duì)比、

李、杏的不同種質(zhì)資源，其基因組存在著能夠進(jìn)行穩(wěn)定遺傳的簡(jiǎn)單重復(fù)序列SSR的重復(fù)次數(shù)差異。

具體見(jiàn)附錄A。

試劑配制方法見(jiàn)附錄B。

參照品種見(jiàn)附錄D。

將液氮冷凍后的葉片樣品放入研缽中磨成粉末，然后迅速將0.2g左右粉末轉(zhuǎn)入2mL離心管中，

取出離心管置于冰上10min，然后置于4℃高速離心機(jī)中，12000rpm離心15min。使用移液槍取

取出離心管并置于4℃高速離心機(jī)中，12000rpm離心30min，棄上清，利用75%乙醇洗滌沉淀兩

加入100μL

TE溶液溶解DNA沉淀，待完全溶解后利用核酸測(cè)定儀檢測(cè)DNA濃度和純度，將DNA

10μL，ddH

置于離心機(jī)4500xg，4℃離心30min后，立即將板反扣在厚的吸水紙上，離心至150xg，去除上

75％乙醇，4500g，4℃離心15min，立即將板反扣在厚的吸水紙上，離心至150g，

每份純化后的PCR產(chǎn)物取1μL于新的96孔PCR板中，每份樣品加入0.5μL內(nèi)標(biāo)（GS500LIZ）及

11

品SSR用Genemapper4.0

圖1

_________________________檢測(cè)平臺(tái)，采用_____位點(diǎn)組合進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果顯示：檢測(cè)位點(diǎn)數(shù)為_(kāi)____，差異位點(diǎn)數(shù)為_(kāi)_________

計(jì)、、磁烯吡咯烷酮（PVP）、氯化鈉、三羥甲

A.1。

稱量

置于

燒杯中，加入約

O，充分?jǐn)嚢枞芙猓脻恹}酸調(diào)節(jié)

pH

pH

mL。

正向引物序列（5’-3’）反向引物序列（3’-5’）

P.

salicina

P.

salicina

P.

salicina

P.

salicina

P.

salicina

P.

salicina

P.

salicina

P.

salicina

P.

salicina

P.

salicina

P.

salicina

P.

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P.

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P.

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P.

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P.

salicina

P.

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P.

salicina

P.

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P.

armeniaca

P.

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P.

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P.

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P.

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P.

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P.

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P.

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P.

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P.

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P.

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P.

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P.

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P.

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