滅菌方法與無菌操作課件

制藥衛(wèi)生第三節(jié)滅菌方法與無菌操作D值：在一定滅菌溫度下被滅菌物品中微生物數(shù)減少90%所需時間。Z值：在一定溫度下對特定的微生物滅菌時，降低一個lgD所需升高的溫度數(shù)，單位為℃。第三節(jié)滅菌方法與無菌操作一、F與F0值在滅菌中的意義與應用F值：是為了比較不同滅菌溫度的滅菌效果而設計的一個指標。在一定滅菌溫度T，給定Z值所產生的滅菌效果，與設計的參比溫度To給定Z值所產生的滅菌效果相同時所相當?shù)臅r間，單位為min。F0值：是將被滅菌物品在滅菌過程中不同的受熱溫度與時間折算到與熱壓121℃滅菌時熱效力相當?shù)臏缇鷷r間。第三節(jié)滅菌方法與無菌操作一、F與F0值在滅菌中的意義與應用蒸氣滅菌物理滅菌法干熱滅菌法濕熱滅菌法紫外線滅菌法輻射滅菌法微波滅菌法濾過滅菌法化學滅菌法氣體滅菌法浸泡與外表消毒法化學藥劑滅菌法無菌操作法

無菌檢查法第三節(jié)滅菌方法與無菌操作滅菌方法紅外接種環(huán)滅菌二、物理滅菌法第三節(jié)滅菌方法與無菌操作干熱空氣穿透力弱，溫度不易均勻，而且滅菌溫度較高，故不適宜用于大局部藥品及橡膠、塑料制品的滅菌?！惨弧掣蔁釡缇?.干熱空氣滅菌法第三節(jié)滅菌方法與無菌操作〔二〕濕熱滅菌法二、物理滅菌法利用飽和水蒸氣或沸水進行滅菌的方法。分類熱壓滅菌、流通蒸汽滅菌、煮沸滅菌和低溫間歇滅菌等。特點

⑴濕熱蒸氣比熱大，穿透力強；⑵細菌在濕熱條件下菌體吸收水分，蛋白質較易凝固；⑶水蒸氣與物品接觸而凝結成水，放出汽化熱，提高溫度，加速細菌死亡。1.熱壓滅菌法第三節(jié)滅菌方法與無菌操作在高壓滅菌器內，利用高壓水蒸氣殺滅微生物的方法，稱為熱壓滅菌法。

本法是公認的最可靠的濕熱滅菌方法，經熱壓滅菌處理，能殺滅被滅菌物品中的細菌增殖體和芽胞，故凡能耐熱壓滅菌的藥物制劑，均可采用。臥式熱壓滅菌柜1.熱壓滅菌法第三節(jié)滅菌方法與無菌操作熱壓滅菌所需的溫度、壓力與時間溫度（℃）表壓力（kPa）時間（min）11668.640121.598.030126.5137.215第三節(jié)滅菌方法與無菌操作臥式熱壓滅菌柜示意圖第三節(jié)滅菌方法與無菌操作熱壓滅菌器操作注意問題：〔1〕使用前應認真檢查滅菌器的主要部件是否正常完好?！?〕滅菌時，必須首先將滅菌器內的冷空氣排出?！?〕滅菌時間必須從全部待滅菌物品到達預定的溫度時算起，并維持規(guī)定的時間。1.熱壓滅菌法滅菌柜第三節(jié)滅菌方法與無菌操作熱壓滅菌器操作注意問題：〔4〕滅菌完畢后停止加熱，待壓力表逐漸下降至零，才能放出鍋內蒸氣，鍋內外壓力相等后，開啟滅菌器，待被滅菌物品溫度下降至約80℃時，才可以把滅菌器的門全部翻開，這樣可有效防止內外壓相差太大或冷空氣突然進入而造成鍋內玻璃瓶炸裂、藥液沖出鍋外的事故發(fā)生。1.熱壓滅菌法熱壓滅菌法：影響滅菌的因素：〔1〕不同細菌的不同發(fā)育時期與數(shù)量，繁殖期對熱的抵抗力大于衰老期，細菌芽孢的耐熱性更強。細菌越少滅菌時間越短。〔2〕藥物性質與滅菌時間，到達有效滅菌的前提下可適中選擇滅菌時間和溫度。熱壓滅菌法：影響滅菌的因素：〔3〕蒸氣的性質：蒸氣有飽和蒸氣，濕飽和蒸氣和過飽和蒸氣。飽和蒸氣含熱量高，熱的穿透力較大，滅菌效力高，濕飽和蒸氣有水分，穿透力差，滅菌效力低。過熱蒸氣溫度高于飽和蒸氣，但穿透力差，滅菌效力低?！?〕介質的性質，制劑中含有營養(yǎng)物質，增強細菌的抗熱性，細菌也受pH值的影響，中性環(huán)境中的耐熱性最好，堿性次之，酸性不利于細菌的發(fā)育。欣弗事件欣弗事件案例同時，黑龍江省哈醫(yī)大二院收治9例因使用“欣弗〞而產生不良反響的患者。他們的年齡在20歲至75歲之間，均是在當?shù)蒯t(yī)院或在藥店中購置“欣弗〞后在診所靜脈點滴的。結束后，這9名患者均出現(xiàn)寒顫、發(fā)冷、發(fā)熱等病癥，其中5例伴有頑固性低血壓性休克，4例出現(xiàn)意識障礙。2006年7月27日，青海省藥監(jiān)局最先向國家藥監(jiān)局報告，在青海省西寧市局部患者使用了“安徽華源〞生產的“欣弗〞注射液后，先后出現(xiàn)胸悶、心悸、腎區(qū)疼痛、腹痛、過敏性休克、肝腎功能損害等嚴重不良反響。隨后，廣西、浙江、山東等地也相繼出現(xiàn)了相同藥物所引發(fā)的嚴重不良反響病例。女童父親撫著女兒的遺照悲慟不已欣弗事件哈爾濱因靜點欣弗致死女童生前照片圖片湖南教師因注射欣弗導致死亡，親屬悲痛欲絕西安一患者注射欣弗后病危孩子盼望媽媽快快醒來國家食品藥品監(jiān)督管理局會同安徽省食品藥品監(jiān)督管理局對安徽華源生物藥業(yè)進行現(xiàn)場檢查。經查，該公司2006年6月至7月生產的克林霉素磷酸酯葡萄糖注射液未按批準的工藝參數(shù)滅菌，降低滅菌溫度，縮短滅菌時間，增加滅菌柜裝載量，影響了滅菌效果。經中國藥品生物制品檢定所對相關樣品進行檢驗，結果說明，無菌檢查和熱原檢查均不符合規(guī)定。欣弗事件案例安徽華源生物藥業(yè)違反規(guī)定生產，是導致這起不良事件的主要原因。欣弗事件調查藥品監(jiān)管部門根據(jù)?中華人民共和國藥品管理法?有關規(guī)定，對安徽華源生產的“欣弗〞藥品按劣藥論處。并作出如下處理決定：安徽華源生物藥業(yè)因生產劣藥被收回大容量注射劑生產資格和“欣弗〞藥品批準文號，企業(yè)負責人被撤職。由安徽省食品藥品監(jiān)督管理局沒收該企業(yè)違法所得，并處２倍罰款；安徽省食品藥品監(jiān)督管理局監(jiān)督該企業(yè)停產整頓，回收該企業(yè)的大容量注射劑；由國家食品藥品監(jiān)督管理局撤銷該企業(yè)的“欣弗藥品的批準文號，委托安徽省食品藥品監(jiān)督管理局收回批件；對安徽華源召回的“欣弗〞藥品，由安徽省藥監(jiān)部門依法監(jiān)督銷毀。處理欣弗事件采訪2.流通蒸氣滅菌法與煮沸滅菌法3.低溫間歇滅菌法4.影響濕熱滅菌的因素第三節(jié)滅菌方法與無菌操作微生物的種類和數(shù)量藥物與介質的性質蒸氣的性質滅菌時間濕熱滅菌飽和蒸氣濕飽和蒸氣過熱蒸氣不飽和蒸氣在常壓下使用100℃流通蒸氣加熱殺滅微生物的方法。滅菌時間30-60min不能保證殺滅所有的芽孢，非可靠滅菌方法。待滅菌物品放在沸水中解熱滅菌法。第三節(jié)滅菌方法與無菌操作〔三〕紫外線滅菌法紫外線的穿透能力弱，但能穿透清潔的空氣和純潔的水，因而廣泛用于空氣滅菌與外表滅菌。滅菌波長：220~290nm滅菌力最強：254~257nm適宜溫度：10℃~55℃相對濕度：45%~60%滅菌時間：0.5~1h二、物理滅菌法第三節(jié)滅菌方法與無菌操作（四）微波滅菌法微波通常是指頻率在300MHz到300kMHz之間的電磁波。二、物理滅菌法第三節(jié)滅菌方法與無菌操作〔五〕輻射滅菌法輻射滅菌又稱電離輻射滅菌，是利用γ-射線或β-射線進行照射，穿透物品殺滅微生物而到達滅菌目的的方法。60C0γ-射線是高能射線，穿透力強，不僅絕大數(shù)生物體對射線敏感，而且適用于較厚樣品，特別是已包裝密封物品的滅菌，滅菌效果可靠，并可有效地防止“二次污染〞。二、物理滅菌法第三節(jié)滅菌方法與無菌操作〔五〕輻射滅菌法二、物理滅菌法輻射滅菌法的特點不升高滅菌產品的溫度，穿透性強，適合于維生素、抗生素、激素、醫(yī)療器械、高分子材料等的滅菌。輻射滅菌法的缺點設備費用高，有些藥物滅菌后療效可能降低，對液體藥劑的穩(wěn)定性也有影響，同時還要注意平安防護問題。輻射滅菌法的原理射線可直接破壞細菌

DNA，導致微生物死亡。第三節(jié)滅菌方法與無菌操作三、濾過除菌法濾過除菌法，利用物理阻流的作用，主要用于不耐熱的低黏度藥物溶度和相關氣體物質的潔凈除菌處理。〔一〕微孔薄膜濾器是目前應用最廣泛的濾過除菌器，一般應選用0.22μm以下孔徑的濾膜作濾材。第三節(jié)滅菌方法與無菌操作三、濾過除菌法垂熔玻璃濾器的濾板孔徑有多種規(guī)格，上海玻璃廠的6號(孔徑2μm以下)、長春玻璃總廠的G6號(孔徑1.5μm以下)和天津濾器廠的IG6號(孔徑2μm以下)三種規(guī)格濾板制成的垂熔玻璃濾器可以作為濾過除菌器使用?！捕炒谷鄄ＡV器第三節(jié)滅菌方法與無菌操作直徑μm長度μm直徑μm長度μm大腸桿菌0.4~0.71.0~3.0普通變形桿菌0.5~1.01.0~3.0枯草桿菌0.5~0.81.6~4.0枯草桿菌芽孢0.5~1.00.9~1.6綠膿桿菌0.3~1.01.0~2.0痢疾桿菌0.5~1.02.0~3.0肺炎桿菌0.5~1.651.0~2.0金葡菌0.8~1.0繁殖期微生物大小約為1μm，芽孢大小約0.5μm或者更小。三、濾過除菌法第三節(jié)滅菌方法與無菌操作〔三〕砂濾棒應用濾過除菌法的本卷須知①藥液均應經過預濾處理，一般先用粗濾裝置濾除較大顆粒的雜質，再用砂濾棒或G5、G4號垂熔玻璃濾器濾除微細沉淀物或較大桿菌、酵母菌，最后再用微孔薄膜濾器或G6號垂熔玻璃濾器濾過，并收集濾液及時分裝。②必須無菌操作，必要時在濾液中還須添加適當?shù)姆栏瘎Ｈ?、濾過除菌法第三節(jié)滅菌方法與無菌操作〔三〕砂濾棒應用濾過除菌法的本卷須知③對新使用或已屢次重復使用的濾器，須檢查濾過除菌的效果，必要時可測定濾器的孔徑或采樣作細菌學檢查。三、濾過除菌法四、化學滅菌法①使病原體蛋白質變性，發(fā)生沉淀；②與細菌的酶系統(tǒng)結合，影響其代謝功能；③降低細菌的外表張力，增加菌體胞漿膜的通透性，使細胞破裂或溶解?；瘜W藥品殺菌或抑菌的機制第三節(jié)滅菌方法與無菌操作化學滅菌法是使用化學藥品殺滅微生物，到達滅菌目的的方法。化學滅菌法一般包括氣體滅菌法和浸泡與外表消毒法。滅菌指示劑第三節(jié)滅菌方法與無菌操作①殺菌譜廣；②有效殺菌濃度低；③作用速度快；④性質穩(wěn)定，不易受有機物、酸、堿及其他物理、化學因素的影響；四、化學滅菌法理想的化學滅菌劑應具備以下條件：第三節(jié)滅菌方法與無菌操作⑤易溶于水，可在低溫下使用；⑥毒性低，對物品無腐蝕性，不易燃燒爆炸；⑦無色，無味，無臭，滅菌后易于從被滅菌物品上除去，無殘留；⑧價格低廉，來源豐富，便于運輸。四、化學滅菌法理想的化學滅菌劑應具備以下條件