臨床酶學(xué)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的研制

JJF1644—20171臨床酶學(xué)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的研制1范圍本規(guī)范規(guī)定了臨床酶學(xué)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(以下簡稱酶標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì))的研制策劃、制備、均勻性評(píng)估、穩(wěn)定性評(píng)估、互換性評(píng)估、定值、不確定度評(píng)定、研制報(bào)告和證書、包裝和貯存等要求,適用于指導(dǎo)臨床酶學(xué)一級(jí)、二級(jí)有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的研制,也可為其他類型標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和臨床酶學(xué)測量質(zhì)量控制樣品的研制提供參考。2引用文件JJF1001通用計(jì)量術(shù)語及定義JJF1005標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)常用術(shù)語和定義JJF1265生物計(jì)量術(shù)語及定義JJF1343標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)定值的通用原則及統(tǒng)計(jì)學(xué)原理JJF1059.1測量不確定度的評(píng)定與表示JJF1186標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)認(rèn)定證書和標(biāo)簽內(nèi)容編寫規(guī)則JJF1218標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研制報(bào)告編寫規(guī)則(ISO15194,IDT)WS/T419—2013參考物質(zhì)中酶活性濃度的賦值WS/T356—2011基質(zhì)效應(yīng)與互通性評(píng)估指南CLSIEP30-A醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)用可互換標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的定值與鑒定(Characterizationandqualificationofcommutablereferencematerialsforlaboratorymedicine)CLSIEP14-A3加工后樣品的互換性評(píng)估(Evaluationofcommutabilityofpro-凡是注日期的引用文件,僅注日期的版本適用于本規(guī)范。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改單)適用于本規(guī)范。3術(shù)語和定義JJF1001《通用計(jì)量術(shù)語及定義》、JJF1005《標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)常用術(shù)語和定義》、JJF1265《生物計(jì)量術(shù)語及定義》中規(guī)定的術(shù)語及以下術(shù)語適用于本規(guī)范。3.1酶enzyme催化特定化學(xué)反應(yīng)的蛋白質(zhì)、RNA或其復(fù)合體。[JJF12654.8]注:通過人工合成所謂人工酶也具有與酶類似的催化活性,包括人工合成的DNA等生物大分子。3.2酶活性enzymaticactivity酶催化特定化學(xué)反應(yīng)的能力?？捎妹富盍挝槐硎?。[JJF12654.9]JJF1644—201723.3酶活力單位unitofenzymaticactivity用于建立酶活性測量量制,是酶活性大小的度量單位,用國際單位IU(或U)或國際單位制(SI)中katal表示。注1:國際單位指在規(guī)定的條件下,1min催化轉(zhuǎn)化1μmol底物的酶量,用IU1IU=1μmol/min。在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)領(lǐng)域,酶活力單位習(xí)慣用IU注2:katal單位指在規(guī)定條件下,1s催化轉(zhuǎn)化1mol底物的酶量,1katal=3.4酶的濃1atalyticactivityconcentration簡稱:酶活性濃度(enzymaticactivityconcentration)以單位體積樣品中的酶活力單位表示,通過測定酶促反應(yīng)過程中單位時(shí)間內(nèi)底物的減少量或產(chǎn)物的生成量,即測定酶促反應(yīng)的速率來獲得。4研制策劃4.1需求及預(yù)期性能要求4.1.1標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研制者應(yīng)承擔(dān)研制項(xiàng)目的策劃和管理、特性值及其不確定度的賦予、特性值的認(rèn)定和報(bào)批,不能分包。4.1.2應(yīng)根據(jù)臨床診斷利用頻率、臨床診斷價(jià)值、標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的預(yù)期用途確定標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研制品種、類型及制備規(guī)模。4.1.3標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)特性值的量值范圍和不確定度、基體、互換性、均勻性、穩(wěn)定性、有效期、安全性等,應(yīng)滿足用于醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)常規(guī)測量方法校準(zhǔn)、參考測量方法或常規(guī)測量方法正確度驗(yàn)證、測量質(zhì)量控制的要求,一般應(yīng)包含不同濃度水平的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)以滿足臨床診斷需求。4.2研制的可行性評(píng)估4.2.1應(yīng)了解與標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研制相關(guān)的法規(guī)和標(biāo)準(zhǔn),評(píng)估所需要的資源和參與方的職責(zé)、能力等。4.2.2應(yīng)評(píng)估用于研制酶標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的材料的來源和特性是否滿足要求。4.2.3應(yīng)評(píng)估保證酶標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)計(jì)量學(xué)溯源性的參考測量程序的可獲得性和計(jì)量學(xué)等級(jí)。4.2.4應(yīng)評(píng)估保證酶標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)均勻性、穩(wěn)定性、互換性等技術(shù)的可獲得性和確認(rèn)方法。4.2.5應(yīng)評(píng)估酶標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)定值實(shí)驗(yàn)室的數(shù)量、質(zhì)量和能力等是否滿足要求。4.2.6應(yīng)評(píng)估擬研制的酶標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的特性值和濃度水平等是否可滿足用戶需求。5制備5.1原料要求5.1.1酶標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的原料可來源于人或動(dòng)物的組織器官、血清,也可來源于基因工程重組蛋白。用于制備酶標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的原料來源應(yīng)符合有關(guān)法律法規(guī)、安全要求和倫理學(xué)要求。5.1.2應(yīng)了解所用材料的適用性、潛在的生物危險(xiǎn)因子等信息,需要時(shí),采取相應(yīng)的JJF1644—20173處理措施。5.1.3直接從人體采集的材料用于酶標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)制備時(shí),應(yīng)符合倫理學(xué)規(guī)范,保護(hù)個(gè)人隱私,需要時(shí)應(yīng)簽署知情同意書。5.1.4利用動(dòng)物材料制備酶標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)時(shí),應(yīng)保證動(dòng)物來源清楚,使用野生動(dòng)物或保護(hù)動(dòng)物應(yīng)得到相關(guān)主管部門的批準(zhǔn)。5.1.5采用微生物或基因工程材料時(shí),所有活動(dòng)應(yīng)符合國家法規(guī)和標(biāo)準(zhǔn)的要求。5.2制備要求5.2.1酶標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的制備場所、設(shè)施設(shè)備、人員防護(hù)、廢物處理等應(yīng)滿足相應(yīng)安全防護(hù)級(jí)別的要求,一般應(yīng)達(dá)到生物安全二級(jí)防護(hù)水平。5.2.2制備的酶標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)應(yīng)與實(shí)際分析樣品盡可能保持一致,適用時(shí)可采用人工材料。制備工藝包括萃取、提純或基因工程方法等。5.2.3應(yīng)考慮采用適當(dāng)?shù)墓に嚧胧┍ＷC酶標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的穩(wěn)定性和均勻性等,應(yīng)盡量避免污染及防止待測特性值發(fā)生變化。5.2.4應(yīng)保證酶標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的安全性符合國家對(duì)生物安全的要求和用戶在通常條件下使用的要求,需要時(shí),應(yīng)明確說明在使用時(shí)的防護(hù)要求和廢物處置要求。6均勻性及穩(wěn)定性評(píng)估6.1均勻性評(píng)估6.1.1JJF1343對(duì)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)均勻性評(píng)估的要求適用于酶標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。6.1.2應(yīng)根據(jù)酶標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的類型、制備工藝、制備量、預(yù)期用途、使用方式等制定均勻性評(píng)估方案。均勻性評(píng)估方案和穩(wěn)定性評(píng)估方案宜同步設(shè)計(jì)。6.1.3應(yīng)在標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)分裝成最小包裝單元后采用隨機(jī)抽樣或分層隨機(jī)的原則進(jìn)行均勻性評(píng)估,應(yīng)以統(tǒng)計(jì)學(xué)為依據(jù)規(guī)定足夠大的抽樣量。6.1.4宜采用常規(guī)測量方法進(jìn)行均勻性評(píng)估,測量次數(shù)、測量順序、數(shù)據(jù)處理、結(jié)果分析等應(yīng)符合統(tǒng)計(jì)學(xué)原則。應(yīng)考慮采用不同測量方法進(jìn)行均勻性評(píng)估所得結(jié)果的差異,需要時(shí),應(yīng)在證書使用說明中描述。6.1.5某些制備、分裝等工藝可能影響酶標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的均勻性,如凍干樣品可能存在干燥程度不同的問題等,應(yīng)通過方案設(shè)計(jì)與優(yōu)化盡量避免或降低其影響。6.1.6當(dāng)同一標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)含有多個(gè)被測量時(shí),每個(gè)被測量的最小取樣量可能不同,需要基于實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)或經(jīng)驗(yàn)確定。如果僅對(duì)代表性被測量進(jìn)行均勻性評(píng)估時(shí),應(yīng)通過文獻(xiàn)、隨后的定值及穩(wěn)定性評(píng)估獲得有關(guān)其他被測量均勻性及最小取樣量的證據(jù)。6.1.7應(yīng)評(píng)估單元內(nèi)、單元間、測量程序等引起的結(jié)果分散性,利用統(tǒng)計(jì)方法綜合判斷其對(duì)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)預(yù)期用途的影響程度。6.2穩(wěn)定性評(píng)估6.2.1JJF1343對(duì)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)穩(wěn)定性評(píng)估的要求適用于酶標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。6.2.2應(yīng)對(duì)酶標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的運(yùn)輸穩(wěn)定性、開瓶后的穩(wěn)定性、長期穩(wěn)定性進(jìn)行評(píng)估,明確相應(yīng)的環(huán)境條件、貯存和使用要求及穩(wěn)定時(shí)間。6.2.3宜采用常規(guī)測量方法進(jìn)行穩(wěn)定性評(píng)估,評(píng)估方案應(yīng)考慮實(shí)際檢驗(yàn)工作的需要和JJF1644—20174工作方式。應(yīng)考慮采用不同測量方法進(jìn)行穩(wěn)定性評(píng)估所得結(jié)果的差異,需要時(shí),應(yīng)在證書使用說明中描述。6.2.4對(duì)具有多個(gè)被測量的酶標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),應(yīng)通過文獻(xiàn)、經(jīng)驗(yàn)或?qū)嶒?yàn)評(píng)估所有被測量的穩(wěn)定性。6.2.5酶標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)中的蛋白等成分可能發(fā)生降解、聚集、沉淀等化學(xué)、物理或生物活性變化,其對(duì)均勻性和穩(wěn)定性的潛在影響程度不同,應(yīng)保證酶標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的均勻性和穩(wěn)定性在聲明的有效期內(nèi)可同時(shí)滿足使用要求。7互換性評(píng)估7.1評(píng)估原則7.1.1凡是用于不同測量程序的酶標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)應(yīng)進(jìn)行互換性評(píng)估,包括所有用其校準(zhǔn)的測量程序。酶標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的互換性僅存在于測量方法與比對(duì)方法之間,當(dāng)任意一個(gè)方法發(fā)生變化時(shí),互換性需重新評(píng)估。7.1.2進(jìn)行互換性評(píng)估前應(yīng)設(shè)計(jì)互換性評(píng)估方案,方案中應(yīng)明確被測量、測量方法、比對(duì)方法、實(shí)驗(yàn)樣品、統(tǒng)計(jì)方法等內(nèi)容。7.1.3應(yīng)在相同的條件下測量臨床樣本和待評(píng)價(jià)的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),通過數(shù)學(xué)相關(guān)性確定互換性。7.2評(píng)估方法7.2.1應(yīng)優(yōu)先選用新鮮單人份有代表性的臨床樣本,樣本數(shù)不少于20份,濃度范圍需覆蓋待評(píng)估標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的濃度,評(píng)估方法可參見WS/T356和附錄A。7.2.2應(yīng)設(shè)定互換性評(píng)估的決定限值,通常以基于統(tǒng)計(jì)學(xué)的特定置信區(qū)間作為限值,或根據(jù)臨床需求選用固定值作為限值。如果測量結(jié)果分散性大,則不宜用基于統(tǒng)計(jì)學(xué)的置信區(qū)間作為限值。7.2.3測量環(huán)境、儲(chǔ)存時(shí)間、試劑批號(hào)等可能因?qū)Σ煌瑴y量程序的影響不同而影響標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的互換性評(píng)估結(jié)果。需要時(shí),應(yīng)評(píng)估測量環(huán)境、儲(chǔ)存時(shí)間、試劑批號(hào)等變化對(duì)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)互換性評(píng)估結(jié)果的影響程度。8定值8.1定值原則8.1.1JJF1343對(duì)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)定值的要求適用于酶標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。8.1.2定值活動(dòng)應(yīng)符合國家法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)、國際公約等對(duì)生物制品安全、倫理等方面的相關(guān)要求。8.2定值方案設(shè)計(jì)8.2.1標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研制者應(yīng)組織協(xié)作定值實(shí)驗(yàn)室共同設(shè)計(jì)定值方案,并形成書面文件。8.2.2應(yīng)根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的計(jì)量學(xué)級(jí)別、類型、預(yù)期用途、定值實(shí)驗(yàn)室的經(jīng)驗(yàn)和能力、所用的方法特性、相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)的要求等選擇適宜的定值方案。完整的定值方案還應(yīng)包含實(shí)驗(yàn)室定值狀態(tài)的確認(rèn)和定值期間質(zhì)控方案。8.2.3應(yīng)選擇具有提供計(jì)量學(xué)服務(wù)資格的實(shí)驗(yàn)室,采用國際或國家權(quán)威機(jī)構(gòu)發(fā)布的參JJF1644—20175考測量程序定值,參與協(xié)作定值實(shí)驗(yàn)室的數(shù)量不應(yīng)少于3個(gè)。8.3質(zhì)量控制8.3.1與參與協(xié)作定值實(shí)驗(yàn)室簽訂的定值合同中應(yīng)包括定值的質(zhì)量控制要求和方案。8.3.2實(shí)驗(yàn)室應(yīng)根據(jù)定值合同的要求實(shí)施測量活動(dòng),包括測量的天數(shù)、批次、總次數(shù)等。每批次標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)應(yīng)至少分2日測量,每日測量1~3瓶,每瓶樣本至少重復(fù)測量3次。8.3.3有確保測量獨(dú)立性的措施,如利用不同的操作人員、不同的實(shí)驗(yàn)裝置等。8.3.4每日測量標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)前、后均應(yīng)測量室內(nèi)質(zhì)控樣品。需要時(shí),還應(yīng)增加質(zhì)控頻次。8.3.5應(yīng)記錄所有與標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)定值相關(guān)的重要活動(dòng)和數(shù)據(jù),如測量期間比色杯的溫度等,并保證可追溯。8.3.6各參與協(xié)作定值實(shí)驗(yàn)室應(yīng)按照J(rèn)JF1059.1的原則識(shí)別、控制和評(píng)定測量不確定度,其中部分因素引入的不確定度可按B類評(píng)定。8.3.7參與協(xié)作定值的實(shí)驗(yàn)室應(yīng)定期參加國際、國家組織的室間比對(duì)或計(jì)量比對(duì)。若提供定值服務(wù)的項(xiàng)目比對(duì)不合格,應(yīng)在整改合格后方可提供定值服務(wù)。8.4數(shù)據(jù)評(píng)估8.4.1定值數(shù)據(jù)審核、數(shù)據(jù)評(píng)估和統(tǒng)計(jì)處理應(yīng)按JJF1343的要求進(jìn)行。8.4.2應(yīng)記錄所有被剔除的數(shù)據(jù)并說明原因。數(shù)據(jù)剔除量應(yīng)小于5%,否則此次定值數(shù)據(jù)無效。8.5協(xié)作定值報(bào)告8.5.1各參與協(xié)作定值的實(shí)驗(yàn)室應(yīng)向標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研制者提供本實(shí)驗(yàn)室的協(xié)作定值報(bào)告。8.5.2酶標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)協(xié)作定值報(bào)告應(yīng)按定值合同約定的內(nèi)容編寫,并參照GB/T19703的要求,適用時(shí),至少包含協(xié)作定值實(shí)驗(yàn)室名稱、定值程序、測量不確定度評(píng)定方法、原始數(shù)據(jù)、統(tǒng)計(jì)方法、特性值、測量不確定度等信息。8.5.3由于生物源性樣本的不穩(wěn)定性等特征,實(shí)驗(yàn)室若預(yù)計(jì)到某些因素將對(duì)最終用戶產(chǎn)生顯著影響,應(yīng)通知標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研制者。8.6標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的賦值和不確定度評(píng)定8.6.1標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研制者應(yīng)負(fù)責(zé)確定酶標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的特性值及其不確定度,相關(guān)實(shí)例可參考WS/T419附錄C。8.6.2標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)特性值的確定應(yīng)根據(jù)協(xié)作定值所用方法、定值方案、結(jié)果的分布特征等,選擇適宜的統(tǒng)計(jì)方法確定;應(yīng)充分考慮各種影響因素和風(fēng)險(xiǎn)后合理評(píng)定酶標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)特性值的不確定度。8.6.3應(yīng)按照J(rèn)JF1343和WS/T419對(duì)因瓶間不均勻性、不穩(wěn)定性和定值過程等引起的不確定度分量進(jìn)行評(píng)定,并應(yīng)將之合成在標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)特性值的不確定度中,至少應(yīng)考慮的不確定度分量包括:1)瓶間不均勻性引入的不確定度分量;2)長期不穩(wěn)定性引入的不確定度分量;3)短期不穩(wěn)定性引入的不確定度分量;4)定值過程引入的不確定度分量。JJF1644—201769研制報(bào)告和證書9.1研制報(bào)告9.1.1應(yīng)依據(jù)JJF1218、JJF1343、GB/T19703的要求以及標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)管理部門的規(guī)定,編制酶標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研制報(bào)告。9.1.2研制報(bào)告應(yīng)描述標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的研制策劃、制備、均勻性評(píng)估、穩(wěn)定性評(píng)估、互換性評(píng)估、定值、不確定度評(píng)定、證書、包裝和貯存等信息,并提供充分的數(shù)據(jù)及分析信息;應(yīng)說明涉及影響標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)使用的任何信息,包括生物安全信息等。9.2證書9.2.1酶標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)證書的內(nèi)容應(yīng)依據(jù)JJF1186、JJF1218、GB/T19703的要求提供。9.2.2若預(yù)計(jì)到來源于生物材料的酶標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的某些特性可能影響用戶使用時(shí),應(yīng)在證書中進(jìn)行說明。9.2.3應(yīng)說明酶標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的生物安全信息。9.2.4若國際公約、國家法規(guī)有規(guī)定時(shí),應(yīng)說明酶標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的材料來源和合法性。9.2.5應(yīng)使用國際通用的命名原則、術(shù)語、符號(hào)和標(biāo)識(shí)。10包裝、貯存及維護(hù)10.1包裝及標(biāo)簽10.1.1包裝應(yīng)滿足該標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的預(yù)期用途。一般情況下應(yīng)選用密封性好、便于使用和品質(zhì)良好的玻璃瓶或中高密度聚乙烯瓶包裝。10.1.2不同濃度水平的酶標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)應(yīng)獨(dú)立包裝,每一獨(dú)立包裝量應(yīng)至少滿足一次測量所需要的用量,包裝應(yīng)符合生物制品運(yùn)輸和使用的要求。10.1.3最小包裝單元的包裝量宜根據(jù)測量的取樣量和樣品穩(wěn)定時(shí)間確定,也可根據(jù)用戶的實(shí)際需要確定。10.1.4最小包裝單元應(yīng)貼有標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)標(biāo)簽,標(biāo)簽內(nèi)容應(yīng)符合JJF1186的要求。10.2貯存10.2.1應(yīng)以穩(wěn)定性評(píng)估為依據(jù),在適宜的條件下安全貯存標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)以保證在有效期內(nèi)保持其性能參數(shù)。10.2.2標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)應(yīng)儲(chǔ)存于干燥、陰涼、潔凈的環(huán)境中。10.2.3某些標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)需要儲(chǔ)存于特定的環(huán)境,如血清基質(zhì)的酶標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)通常需要貯存在-80℃低溫條件下。10.2.4有生物風(fēng)險(xiǎn)的酶標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的貯存應(yīng)符合國家法規(guī)和標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)定。10.3維護(hù)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研制者應(yīng)建立標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)長期監(jiān)測、用戶反饋收集、持續(xù)改進(jìn)等機(jī)制。在批準(zhǔn)之后獲得的涉及影響標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)使用的任何信息,應(yīng)及時(shí)通知給相關(guān)方和標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)管理部門。7A.1互換性評(píng)估互換性評(píng)估是用不同測量方法同時(shí)對(duì)選定的一系列具有代表性的實(shí)驗(yàn)樣品和標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)進(jìn)行分析，利用測量實(shí)驗(yàn)樣品的結(jié)果建立數(shù)學(xué)關(guān)系(回歸),觀察測量標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的結(jié)果偏離這一數(shù)學(xué)關(guān)系的程度，偏離越大，說明標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)在所用方法之間的互換性越差。A.2評(píng)估程序A.2.1本附錄介紹了兩種方法之間比對(duì)的評(píng)估程序。A.2.2在比對(duì)方法線性濃度范圍內(nèi)，應(yīng)選擇具有代表性的單一人份的臨床樣品(包括健康人和患者)至少20份，避免使用含有已知干擾物的樣品；應(yīng)首選新鮮臨床樣品，但若明確冰凍樣本不影響測定，可選擇新鮮冰凍樣本；臨床樣品濃度范圍須覆蓋標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)濃度，且應(yīng)兼顧在標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)值附近的樣本比例數(shù)。A.2.3根據(jù)測量結(jié)果的分布特點(diǎn)選擇適宜的回歸分析方法，一般采用最小二乘法進(jìn)行線性回歸。以標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)定值方法(參考測量方法)所得結(jié)果為x軸，比對(duì)方法的結(jié)果為y軸，利用公式(1)獲得回歸曲線在95%置信水平下的預(yù)測區(qū)間(a=0.05),n——臨床樣品數(shù)量；x?——x軸上的一個(gè)給定值；x;——采用參考方法得到的第i個(gè)樣品測量值；x——采用參考方法得到的n個(gè)樣品測量值的均值；t?/z.(n-2)——自由度為(n-2),置信水平為(1-a)時(shí)的t分布臨界值；syx——回歸曲線的殘余標(biāo)準(zhǔn)偏差：y;——采用比對(duì)方法得到的第i個(gè)樣品測量值；y;——y;的預(yù)測值。A.3某GGT標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的互換性評(píng)估示例評(píng)估某GGT標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)用于臨床檢驗(yàn)常規(guī)方法的互換性。JJF1644—20178A.3.2材料與方法實(shí)驗(yàn)樣品為臨床新鮮血液樣品40例;某GGT標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì);參考測量方法為IFCC一級(jí)參考測量方法;比對(duì)方法為臨床檢驗(yàn)常規(guī)方法。將標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)隨機(jī)排列在實(shí)驗(yàn)樣品之中,所有樣品重復(fù)測量2次,用參考測量方法及比對(duì)方法同時(shí)對(duì)所有樣品進(jìn)行測量,測量后的樣本置于-70℃貯存,以便后續(xù)研究。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,選擇適宜的規(guī)則進(jìn)行離群值檢查;用所有樣品的均值制作散點(diǎn)圖,x軸為參考測量方法的結(jié)果,y軸為比對(duì)測量方法的結(jié)果,選用最小二乘法進(jìn)行線性回歸。鑒于所選用測量方法的精密度性能良好,將互換性決定限定為95%置信區(qū)間,即用比對(duì)方法測量標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)得到的均值如果落在該區(qū)間內(nèi),說明該GGT標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)在參考測量方法和常規(guī)測量方法間具有互換性。A.3.3實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)見表A.1表A.1互換性評(píng)估數(shù)據(jù)樣本參考測量方法結(jié)果(U/L)常規(guī)方法結(jié)果(U/L)結(jié)果1結(jié)果2均值結(jié)果1結(jié)果2均值18.68.88.77.46.26.8211.411.311.410.39.49.9314.814.814.813.312.512.9419.419.419.417.316.416.9526.026.026.022.922.822.9628.929.129.026.426.526.5734.534.634.632.732.332.5845.145.245.242.240.541.4946.246.446.344.242.243.21050.050.550.346.945.846.41157.958.458.254.354.354.31259.860.059.955.956.056.01363.964.464.259.659.659.61465.565.865.762.161.161.61569.869.269.565.665.465.51669.969.969.965.665.365.51775.575.675.672.072.272.11880.080.580.375.675.175.41983.383.583.479.079.079.0JJF1644—2017表A.1(續(xù))樣本參考測量方法結(jié)