DB21-T 3924-2024歐美楊組培育苗技術(shù)規(guī)程

ICS65.020.0121CCSB6421遼 寧 省 地 方 標 準DB21/T3924—2024歐美楊組培育苗技術(shù)規(guī)程Technicalregulationsfortissue-culturedseedingsofPopulus×euramericana2024-01-302024-01-302024-03-01遼寧省市場監(jiān)督管理局發(fā)布DB21/T3924DB21/T3924—2024DB21/T3924DB21/T3924—2024目 錄前言 II范圍 1規(guī)范性引用文件 1術(shù)語和定義 1環(huán)境及器具滅菌 1培養(yǎng)基制備 2外植體選擇及處理 2初代培養(yǎng) 2繼代培養(yǎng) 2生根培養(yǎng) 3煉苗 3室內(nèi)移栽與管理 3大田移栽與管理大田移栽與管理 3病蟲害防治 4檔案管理 4附錄A（資料性）MS培養(yǎng)基配方 5附錄B（資料性）歐美楊組培育苗病蟲害種類及防治措施 6I前 言GT.1—021草。請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機關(guān)不承擔識別專利的責任。本文件由遼寧省林業(yè)和草原局提出并歸口。本文件起草單位：遼寧省楊樹研究所。本文件主要起草人：矯麗曼、楊成超、馮連榮、紀純陽、彭儒勝、李曉宇、李曉鵬、梁立巍、張妍、李文穎。歸口管理部門通訊地址：遼寧省林業(yè)和草原局（沈陽市和平區(qū)太原北街2號），聯(lián)系電話文件起草單位通訊地址：遼寧省楊樹研究所（遼寧省蓋州市北海新區(qū)），聯(lián)系電話IIII歐美楊組培育苗技術(shù)規(guī)程范圍本文件主要適用于歐美楊組培育苗。規(guī)范性引用文件（包括所有的修改單適用于本文件。GT31.10十）YT882YT280術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本文件。下列術(shù)語和定義適用于本文件。3.1歐美楊指歐洲黑楊與美洲黑楊的雜交品種及品種間優(yōu)良雜種，又稱歐美楊無性系。3.2外植體explant用于植物組織培養(yǎng)的離體植物器官、組織、細胞以及原生質(zhì)體。4環(huán)境及器具滅菌培養(yǎng)室滅菌用消毒液（75%酒精等）對地面、組培架等室內(nèi)設(shè)施進行消毒。超凈工作臺滅菌75%75%min～35min，關(guān)閉紫外燈30min后進入工作。接種室滅菌接種室內(nèi)噴灑75%酒精，紫外燈照射25min～35min，關(guān)閉紫外燈30min后進入工作。14.4器具滅菌℃高壓滅菌30min。使用前在超凈工作臺內(nèi)用酒精燈外焰灼燒30s，或用接種器具滅菌器直接滅菌。培養(yǎng)基制備基本培養(yǎng)基MS培養(yǎng)基，配方見附錄A。培養(yǎng)基配制、滅菌及保存按YT882外植體選擇及處理外植體選擇11cm1min左右。外植體處理75%30s0.1%5min，再用無菌蒸餾水沖洗3次，取出后瀝干水分備用。7初代培養(yǎng)初代培養(yǎng)基初代培養(yǎng)基配方為：MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.05mg/L～0.1mg/L+蔗糖20.0g/L+瓊脂6.0g/L，pH6.5。接種1～3個裂口，用3～4個；葉柄用無菌剪刀剪掉兩端，接種方法同葉片。培養(yǎng)條件在溫度25℃±1℃、光照強度2000Lux、光照12h/d～16h/d的培養(yǎng)室內(nèi)進行培養(yǎng)。8繼代培養(yǎng)8.1繼代培養(yǎng)基2繼代培養(yǎng)基配方為：S6-A.3m/L～.5m/LNAA.1m/L～.2m/L+蔗糖5.0L+瓊脂.0/，H6.5。接種初代培養(yǎng)愈傷組織大于1cm2或不定芽大于5個時進行繼代培養(yǎng)。將愈傷組織（含不定芽）剪成2～3塊轉(zhuǎn)接于繼代培養(yǎng)基中。培養(yǎng)條件培養(yǎng)條件同7.3。生根培養(yǎng)生根培養(yǎng)基/MSIBA03m/L～.4mL+0.0L+.0L，H6.0。接種繼代培養(yǎng)不定芽長度≥2.0cm時進行生根培養(yǎng)。選取健壯不定芽，用無菌剪刀剪去下端的葉片，并在培養(yǎng)基上方剪下主莖，用無菌鑷子夾出插入生根培養(yǎng)基中，插入深度1cm，每瓶接種3個。培養(yǎng)條件培養(yǎng)條件同培養(yǎng)條件同7.3。10煉苗選取苗高≥4cm1cm～2cm52d～3d。11室內(nèi)移栽與管理室內(nèi)移栽選擇根系發(fā)達、苗高≥4cm的組培苗，用鑷子輕輕從煉苗培養(yǎng)基中拔出，用清水洗去附著在根部8cm6cm12cm1cm處?；|(zhì)為腐殖土、2﹕1﹕1121℃30min。管理25℃～30℃80%～95%50%～60%。5d～7d后去掉拱棚，適時澆水。待苗高≥10cm時，轉(zhuǎn)移至室外培養(yǎng)，定期澆水。12大田移栽與管理3當苗高≥15cm時，選擇陰天或傍晚進行移栽，移栽前7d大田灌足底水，去掉營養(yǎng)杯，帶基質(zhì)栽植于大田，株行距20cm×50cm，栽完立即澆水。移栽后根據(jù)土壤墑情適時澆水，保持土壤濕度不低于40%。每隔15d除草一次，定期松土，保持土壤通透性。病蟲害防治BGT31.10檔案管理按YT28044MSA.1

附錄A（資料性）MS表A.1MS培養(yǎng)基配方類型成分母液濃度（/L）培養(yǎng)基母液（mL）培養(yǎng)基劑量（/L）名稱分子式大量元素（20倍）硝酸銨NH4NO333.00050.0001650.000硝酸鉀KNO338.0001900.000磷酸二氫鉀KH2PO43.400170.000硫酸鎂MgSO4·7H2O7.400370.000氯化鈣CaCl2·2H2O8.800440.000微量元素（200倍）硫酸錳MnSO4·H2O3.3805.00016.900硫酸鋅ZnSO4·7H2O1.7208.600硼酸H3BO31.2406.200碘化鉀KI0.1660.830鉬酸鈉NaMoO4·2H2O0.0500.250氯化鈷CoCl2·6H2O0.0050.025硫酸銅CuSO4·5H2O0.0050.025鐵鹽（200倍）硫酸亞鐵FeSO4·7H2O5.5605.00027.800乙二胺四乙酸鈉Na2-EDTA·2H2O7.46037.300有機物（200倍）肌醇20.0005.000100.000鹽酸硫胺素0.0200.100鹽酸吡哆素0.1000.500煙酸0.1000.500甘氨酸0.4002.00055附錄B（資料性）歐美楊組培育苗病蟲害種類及防治措施歐美楊組培育苗病蟲害種類及防治措施參照表B.1執(zhí)行。表B.1歐美楊組培育苗病蟲害種類及防治措施病蟲害種類防治措施基腐病組培苗移栽基質(zhì)使用前先滅菌，并用0.1%高錳酸鉀水溶液進行消毒。發(fā)病時要適當減少濕度，加強通風，并用3%甲霜·噁霉靈800倍液進行灌根。立枯病用70%甲基硫菌靈1000倍液～1200倍液或50%多菌靈500倍液～800倍液噴施2次～3次，每次間隔7d～9d。蚜蟲用20%滅蚜松可濕性粉劑1000倍液～1500倍液、10%吡蟲啉4000倍液～6000倍液交替噴灑，每7d～10d噴1次，連噴2次～3次。黑絨金龜子1．成蟲盛發(fā)期，直接向被害苗木部位噴灑擬除蟲菊酯類殺蟲劑1000倍液～2000倍液，5d噴1次，連續(xù)噴灑3次。500倍液～800在苗壟上進行誘殺。蠐螬（黑絨金龜子幼蟲）秋季及時清除雜草，初冬翻地，消滅蟲源。春季作壟時，將甲拌磷25kg/hm2與基肥混合均勻施入土中。用%對硫磷或%辛硫磷75/m2～5/hm2拌谷子等餌料5/m2～0/hm2，撒于壟溝中進行毒餌