7、實(shí)驗(yàn)七 動(dòng)物染色體標(biāo)本的制備與觀察_第1頁
7、實(shí)驗(yàn)七 動(dòng)物染色體標(biāo)本的制備與觀察_第2頁
7、實(shí)驗(yàn)七 動(dòng)物染色體標(biāo)本的制備與觀察_第3頁
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7、實(shí)驗(yàn)七 動(dòng)物染色體標(biāo)本的制備與觀察_第5頁
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動(dòng)物染色體標(biāo)本的制備與觀察一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康亩?shí)驗(yàn)原理三、實(shí)驗(yàn)步驟四、作業(yè)一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?.掌握動(dòng)物骨髓細(xì)胞染色體標(biāo)本制備基本過程，了解各個(gè)操作步驟的原理。2.了解常用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物染色體的數(shù)目及特點(diǎn)。二、實(shí)驗(yàn)原理凡處于增殖狀態(tài)的細(xì)胞，或者經(jīng)過處理進(jìn)入分裂的細(xì)胞即可用于染色體分析。在動(dòng)物的各種組織中，骨髓是不斷分裂的組織之一，是細(xì)胞遺傳學(xué)研究的好材料。進(jìn)行染色體觀察、分析，需要選擇處于分裂中期的細(xì)胞。給動(dòng)物注射一定量的秋水仙素即可使許多處于早期分裂相的細(xì)胞停滯于中期。三、實(shí)驗(yàn)步驟動(dòng)物按30μg/g體重的劑量經(jīng)腹腔注射秋水仙素，7—8小時(shí)后殺死蛙，取后肢股骨和脛骨，剝掉全部肌肉，剪去股骨和脛骨兩端?！?/p>

用注射器將

6ml1%檸檬酸鈉溶液通過針頭注入骨髓腔，沖出骨髓細(xì)胞至小碟內(nèi)，直至股骨變?yōu)榘咨珵橹埂Ｕ翎橆^，用注射器輕輕反復(fù)吸打，使分散成單個(gè)細(xì)胞。將骨髓細(xì)胞轉(zhuǎn)入離心管，以1500r/min離心8min，棄上清。★在離心管中加入事先預(yù)熱至30℃的0.4%KCL溶液5ml，將沉淀輕輕吹散，置30℃水浴中低滲30min。以1500r/min離心8min。棄上清液，沿離心管壁緩慢加入新配制的甲醇:冰醋酸(3:1)固定液5ml，加固定液時(shí)注意不要沖動(dòng)細(xì)胞團(tuán)塊。加完固定液后，立即用吸管將細(xì)胞輕輕吸打均勻,靜置固定10min，1500r/min離心10min

，棄上清液。如此反復(fù)固定1次，離心10min。固定的細(xì)胞經(jīng)離心后，吸去上層固定液，視管底細(xì)胞多寡加入1--2ml新配制的固定液，將細(xì)胞團(tuán)塊輕輕吸打成懸液?！镌诟蓛?、濕、冷的載玻片上滴2--3滴上層細(xì)胞懸液，自然干燥（滴片）。將玻片標(biāo)本插入吉姆薩染液中，染色5min。用小燒杯盛蒸餾水略洗，再用吸水紙擦干玻片標(biāo)本底面和四周，顯微鏡觀察和分析。青蛙骨髓細(xì)胞染色體核型（2n=26）四、作業(yè)

繪制染色體圖并作簡要分析。

例如：細(xì)胞密度是否適中，分裂細(xì)胞的比例如

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