HIV實(shí)驗(yàn)室安全防護(hù)

艾滋病實(shí)驗(yàn)室平安防護(hù)

1艾滋病對(duì)醫(yī)務(wù)人員健康

的危險(xiǎn)2醫(yī)務(wù)人員有職業(yè)性HIV感染的危險(xiǎn)我國(guó)已經(jīng)出現(xiàn)艾滋病發(fā)病的頂峰,大批病人到醫(yī)院求醫(yī),病人中HIV陽性的比例越來越大.診斷和治療的過程難免接觸病人的血液和體液,皮膚受傷的時(shí)機(jī)很大.調(diào)查顯示醫(yī)務(wù)人員發(fā)生針刺傷的頻率是大約5-10%,手術(shù)人員受傷的時(shí)機(jī)是12%以上.3血液和體液傳播是HIV感染的主要途徑,效率高已經(jīng)出現(xiàn)職業(yè)性感染的病例：美國(guó)麻省護(hù)理學(xué)會(huì)主席KarenDaley就是因?yàn)樵趤G棄用過的針頭時(shí)刺傷了手指不幸感染了HIV和和HCV醫(yī)務(wù)人員有職業(yè)性HIV感染的危險(xiǎn)4經(jīng)血或體液傳播的職業(yè)暴露經(jīng)皮膚或粘膜暴露HIV、HBV、HCV感染為主傳播方式：針刺或其他銳器損害*病毒入皮膚抓傷、皮損、擦傷、燒傷*病毒因意外濺入眼、鼻、口三種病毒不會(huì)經(jīng)空氣傳播5美國(guó)對(duì)職業(yè)性HIV感染的研究感染的人員:檢驗(yàn)人員,護(hù)士,內(nèi)科醫(yī)生,外科技師,透析醫(yī)師,停尸房技師.感染的途徑:皮膚或粘膜暴露傳染性物質(zhì):血液,血性體液,體液,實(shí)驗(yàn)室濃縮的病毒使皮膚受傷的物品:注射或縫合針,碎玻璃,手術(shù)刀等6有傳染性的體液包括血液精液陰道分泌物腦脊液羊水胸水,腹水心包液滑膜液一切有可見的血液污染的體液7沒有傳染性的體液是唾液淚液汗液尿液糞便8HIV職業(yè)暴露感染率〔平均感染率〕 職業(yè)暴露后存在著感染HIV的危險(xiǎn)性，但實(shí)際感染HIV的機(jī)率是很低的。有研究資料說明：皮膚破損：0.33%〔CI%〕粘膜接觸：0.09%〔CI%〕9職業(yè)暴露預(yù)防的關(guān)鍵一、實(shí)驗(yàn)室生物平安級(jí)別的正確設(shè)置二、做好實(shí)驗(yàn)室平安防護(hù)三、廢棄物的處置和消毒四、實(shí)驗(yàn)室意外和事故處理10一、實(shí)驗(yàn)室生物平安級(jí)別血清學(xué)檢測(cè)〔含初篩及確認(rèn)實(shí)驗(yàn)室〕、免疫學(xué)和核酸檢測(cè)：II級(jí)生物平安實(shí)驗(yàn)室HIV別離、細(xì)胞培養(yǎng)及研究工作：III級(jí)生物平安實(shí)驗(yàn)室〔BSL-3)11二、實(shí)驗(yàn)室平安防護(hù)〔一〕個(gè)人防護(hù)及保健1.防護(hù)服：白大衣、隔離衣、一次性工作服等2.一次性手套、一次性口罩、平安防護(hù)眼鏡及沖眼器3.專用工作鞋：鞋面覆蓋足背，鞋底防滑4.個(gè)人保健12二、實(shí)驗(yàn)室平安防護(hù)(cont.)〔二〕實(shí)驗(yàn)室管理要求1.建立平安制度2.人員管理和培訓(xùn)3.建立嚴(yán)格的保密制度并定期檢查4.嚴(yán)格質(zhì)量管理5.對(duì)存放試劑和有毒區(qū)域的監(jiān)控6.建立應(yīng)付突發(fā)時(shí)間的措施13二、實(shí)驗(yàn)室平安防護(hù)(cont.)〔二〕實(shí)驗(yàn)室管理要求1.建立平安制度實(shí)驗(yàn)室的儀器設(shè)備、建筑和設(shè)施的平安性應(yīng)符合要求制訂平安工作制度或平安標(biāo)準(zhǔn)操作程序〔S-SOP)定期修訂平安工作制度或平安標(biāo)準(zhǔn)操作程序及其實(shí)施情況的檢查和修訂，并有記錄制定意外事故處理預(yù)案，建立意外事故的登記報(bào)告制度實(shí)驗(yàn)室主任負(fù)責(zé)組織對(duì)事故的調(diào)查、登記、處理和報(bào)告14二、實(shí)驗(yàn)室平安防護(hù)(cont.)〔二〕實(shí)驗(yàn)室管理要求2.人員培訓(xùn)和管理管理人員和所有檢測(cè)人員要進(jìn)行充足有效的技術(shù)培訓(xùn)須告知新上崗人員實(shí)驗(yàn)室工作的潛在危險(xiǎn)，進(jìn)行平安教育實(shí)驗(yàn)室主任對(duì)區(qū)域及人員的合理安排，做好平安檢查新入、外來人員進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室時(shí)須經(jīng)過室主任的批準(zhǔn)工作人員須進(jìn)行年度采血檢測(cè)HIV抗體和備案制度，血清應(yīng)長(zhǎng)期保存。15二、實(shí)驗(yàn)室平安防護(hù)(cont.)〔二〕實(shí)驗(yàn)室管理要求3.建立嚴(yán)格的保密制度并定期檢查所有資料均應(yīng)嚴(yán)格保密，如送檢單、記錄、報(bào)告單等檢測(cè)人員應(yīng)具有高度保密意識(shí)保密制度納入年度考核，發(fā)現(xiàn)問題幾時(shí)處理并根據(jù)情況修訂保密制度4.嚴(yán)格質(zhì)量管理：做好平安操作及試劑選擇、檢測(cè)工作的質(zhì)量控制；對(duì)檢測(cè)報(bào)告須嚴(yán)格把關(guān)16二、實(shí)驗(yàn)室平安防護(hù)(cont.)〔二〕實(shí)驗(yàn)室管理要求5.對(duì)存放試劑和有毒物區(qū)域的監(jiān)控存放試劑和有毒物的冷藏柜、冰箱、培養(yǎng)箱和容器在工作人員視線外地點(diǎn)時(shí)應(yīng)上鎖設(shè)置專門的儲(chǔ)存陽性血清、質(zhì)控品的冰柜或毒種庫應(yīng)上鎖，專人管理

17二、實(shí)驗(yàn)室平安防護(hù)(cont.)〔二〕實(shí)驗(yàn)室管理要求6.建立應(yīng)付突發(fā)事件的措施在緊急預(yù)案種要包括在緊急事件發(fā)生時(shí)通知相關(guān)領(lǐng)導(dǎo)和工作人員實(shí)驗(yàn)室主任和設(shè)備平安員要遵循有關(guān)規(guī)定，報(bào)告、調(diào)查和處理突發(fā)事件及可能發(fā)生的意外專業(yè)暴露18二、實(shí)驗(yàn)室平安防護(hù)(cont.)〔三〕實(shí)驗(yàn)室的平安操作1.在安排工作人員的實(shí)驗(yàn)室區(qū)域時(shí)，要根據(jù)其工作的種類和所涉及的生物試劑，對(duì)實(shí)驗(yàn)室環(huán)境做好平安檢查。2.進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室需穿隔離衣、戴手套，必要時(shí)戴防護(hù)眼鏡。不要用手觸摸暴露的皮膚、口唇、眼、耳及頭發(fā)。3.必要時(shí)可戴雙層手套。手套破損時(shí)應(yīng)立即丟棄、洗手并戴上新手套。19二、實(shí)驗(yàn)室平安防護(hù)(cont.)〔三〕實(shí)驗(yàn)室的平安操作(cont.)4.禁止口吸吸液管，須使用移液器5.操作中有標(biāo)本、檢測(cè)試劑外濺時(shí)應(yīng)及時(shí)消毒。對(duì)大量濺出的濃度高的傳染物在清潔之前應(yīng)先用1%次氯酸鈉溶液浸泡，然后戴上手套擦凈。

20二、實(shí)驗(yàn)室平安防護(hù)(cont.)〔三〕實(shí)驗(yàn)室的平安操作(cont.)6.工作完畢，要對(duì)工作臺(tái)面消毒。工作臺(tái)面應(yīng)當(dāng)用0.1%-0.2%次氯酸溶液消毒；用消毒液洗后要枯燥20min以上；7.工作完畢，脫去手套后洗手，再脫去工作衣，用肥皂和流動(dòng)水洗手。8.血清及其它體液樣品均應(yīng)嚴(yán)格按要求妥善保存，HIV抗體陽性樣品應(yīng)做好標(biāo)記單獨(dú)保存。21二、實(shí)驗(yàn)室平安防護(hù)(cont.)〔四〕防止利器的使用1.盡量防止在實(shí)驗(yàn)室使用針頭、刀片、玻璃器皿等利器，以防刺傷。如果必須使用，在處理或清洗時(shí)應(yīng)采取措施防止刺傷或劃傷，并應(yīng)對(duì)用過的物品進(jìn)行消毒處理；2.盡量使用平安針具采血，如蝶形真空針，自毀性針具等，以降低直接接觸血液和刺傷的危險(xiǎn)性；3.應(yīng)將用過的銳器直接放入耐刺、防滲漏的利器盒，針頭直接放入鞏固的容器內(nèi)，消毒后廢棄。22二、實(shí)驗(yàn)室平安防護(hù)(cont.)〔五〕樣品的采集：所有的血液、血清、未固定的組織和組織液樣品，均應(yīng)視為有潛在傳染性，都應(yīng)以平安的方式進(jìn)行操作。1.小心存放、拿取和使用所有可能有傳染性的質(zhì)量控制和參考物質(zhì)。用后的包裹應(yīng)進(jìn)行消毒;2.采血時(shí)一定要注意平安，謹(jǐn)慎操作，防止發(fā)生刺傷皮膚和造成外界污染;濾紙采樣后要待血樣枯燥后再包裝送檢;23二、實(shí)驗(yàn)室平安防護(hù)(cont.)〔五〕樣品的采集(cont.)3.離心機(jī)要使用密閉的罐和密封頭，以防液體溢出或在超/高速離心時(shí)形成氣溶膠;4.室間傳遞的樣品應(yīng)為血清或血漿除特殊情況一般不運(yùn)送全血；5.運(yùn)送樣品時(shí)應(yīng)用WHO提出的三級(jí)包裝系統(tǒng)，運(yùn)送感染材料必須有記錄。24二、實(shí)驗(yàn)室平安防護(hù)(cont.)〔六〕帶入和帶出實(shí)驗(yàn)室的物品1.對(duì)所有帶入實(shí)驗(yàn)室的物品都應(yīng)進(jìn)行檢查。含有測(cè)試樣品的包裹應(yīng)在平安柜或送到適宜的實(shí)驗(yàn)室方可翻開;2.翻開標(biāo)本容器時(shí)要小心，以防內(nèi)容物潑濺。如發(fā)現(xiàn)溢漏應(yīng)立即將尚存留的樣品移出，對(duì)樣品管和盛器消毒，同時(shí)要報(bào)告有關(guān)領(lǐng)導(dǎo)和專家;3.檢查樣品的狀況，如果污染過重或者認(rèn)為樣品不能被接受，那么應(yīng)將樣品平安廢棄。要將情況立即通知送樣人。25二、實(shí)驗(yàn)室平安防護(hù)(cont.)〔六〕帶入和帶出實(shí)驗(yàn)室的物品(cont.)4.對(duì)血液和體液常規(guī)操作要在工作臺(tái)上進(jìn)行。樣品處理時(shí)假設(shè)內(nèi)容物有可能濺出，那么應(yīng)在生物平安柜中戴手套進(jìn)行；5.在將HIV/AIDS樣本轉(zhuǎn)到其它實(shí)驗(yàn)室時(shí)，運(yùn)送時(shí)應(yīng)防止造成污染。送樣品人應(yīng)明確接收地點(diǎn)和接收人，平安將樣品送到；6.污染或可能造成污染的材料在帶出實(shí)驗(yàn)室前應(yīng)進(jìn)行消毒。26三、廢棄物處置和消毒〔一〕廢棄物處置從艾滋病實(shí)驗(yàn)室出來的所有廢棄物，包括不再需要的樣品、培養(yǎng)物和其它物品，均應(yīng)視為感染性廢棄物，應(yīng)置于專用的密封防漏容器中，平安運(yùn)至消毒室，并在高壓消毒后再進(jìn)行處理或廢棄。27HIV對(duì)環(huán)境的抵抗力HIV對(duì)外界環(huán)境中物理和化學(xué)因素抵抗力均較低,比乙型肝炎病毒(HBV)的抵抗力低得多.因此,對(duì)HBV的消毒和滅活方法對(duì)HIV均可使用對(duì)熱的抵抗力對(duì)化學(xué)品的抵抗力對(duì)紫外線的抵抗力28對(duì)熱的抵抗力在室溫(22-27℃)液體環(huán)境下可存活15天以上在54-56℃時(shí)病毒活性約每20分鐘下降1個(gè)對(duì)數(shù)TCID50(細(xì)胞的半數(shù)感染單位)56℃30分鐘可使HIV在體外對(duì)人的T淋巴細(xì)胞失去感染性,但不能完全滅活血清中的HIV經(jīng)過60℃3小時(shí)或80℃30分鐘作用,不能檢出感染性病毒,對(duì)逆轉(zhuǎn)錄病毒滅活,WHO推薦100℃20分鐘29不同溫度對(duì)HIV活性降低10倍所需的時(shí)間溫度（℃）HIV病毒活力下降10倍的作用時(shí)間3711.6h453.3h5024m56121s6024s653.5s700.5s30對(duì)熱的抵抗力在-70℃不加保護(hù)劑冷凍保存,其感染性可喪失.但假設(shè)在-70℃保存于35%山梨醇或50%胎牛血清(FBS)中可存活3個(gè)月以上美國(guó)CDC證明枯燥環(huán)境中的HIV濃度在幾個(gè)小時(shí)內(nèi)降低1-2log(即降低90－99％)在枯燥的室溫下HIV的感染性持續(xù)時(shí)間可達(dá)3天以上,并按每小時(shí)1個(gè)對(duì)數(shù)級(jí)TCID50減少,但其RT酶活性的檢出時(shí)間不超過3天31對(duì)化學(xué)品的抵抗力HIV不耐酸,pH3.0時(shí)病毒滴度在10分鐘下降4個(gè)對(duì)數(shù)HIV較耐堿,pH高達(dá)9.0時(shí),病毒滴度下降甚微HIV對(duì)消毒劑、去污劑等化學(xué)因素一般敏感:0.2%次氯酸鈉

0.1%家用漂白粉

0.1%戊二醛

0.5%多聚甲醇等,5分鐘可滅活HIV32對(duì)化學(xué)品的抵抗力酒精具有良好的滅活作用:30%酒精溶液5分鐘

20%酒精10分鐘,可滅活HIV在室溫中:0.5%次氯酸鈉或70%酒精只需1分鐘即不能檢出RT酶活性,如用19%酒精處理病毒5分鐘后,仍有1%RT酶可被檢出0.08%氯化銨在10分鐘內(nèi)病毒滴度降至低于檢出水平.

·33對(duì)化學(xué)品的抵抗力0.1%羥丙酸-丙醇(BpL)、1:1000甲醛、50%乙醚、0.5%三硝基甲苯X-100均可使1x104-1x107感染劑量的制品中HIV全部滅活.去垢劑NP40在制備病毒蛋白時(shí)常規(guī)使用,HIV對(duì)其抵抗力很弱,HIV接觸NP401分鐘內(nèi),其傳染性降低≥8個(gè)對(duì)數(shù)TCID50.吐溫-20〔2.5%〕對(duì)HIV無滅活作用。標(biāo)本經(jīng)冷丙酮或甲醛及丙酮固定，可使標(biāo)本中HIV滅活。34各種化學(xué)品對(duì)HIV滅活的作用名稱時(shí)間0.5%NP401min0.5%次氯酸鈉1min70%酒精1min0.08%氯化胺10min40%福爾馬林溶液（5ml/10ml水）至少4hr，最好過夜35對(duì)紫外線的抵抗力對(duì)紫外線或射線不敏感紫外線、射線不能滅活HIV36三、廢棄物處置和消毒〔二〕HIV常用的消毒方法1.物理消毒方法：高壓蒸汽消毒:121℃，保持15-20min枯燥空氣烘箱消毒〔干烤消毒〕:140℃，保持2-3h37三、廢棄物處置和消毒〔二〕HIV常用的消毒方法(cont.)2.HIV常用的化學(xué)消毒方法:HIV最常用的化學(xué)消毒劑是含氯消毒劑〔次氯酸鈉，含有效氯2000-5000mg/L〕、75%乙醇和2%戊二醛，保持10-30min。廢棄物缸、溢出物：5000mg/L次氯酸鈉。生物平安柜工作臺(tái)面和儀器外表：75%乙醇污染的臺(tái)面和器具：2000mg/L次氯酸鈉，或用過氧化氫或過氧乙酸。器械可用2%戊二醛消毒38四、實(shí)驗(yàn)室意外和事故處理

意外—發(fā)生了未導(dǎo)致個(gè)人傷害偶然發(fā)生的危險(xiǎn)，但也可能已經(jīng)發(fā)生了傷害。事故—發(fā)生了人身傷害。

意外和事故均可被分為小型和重大的39四、實(shí)驗(yàn)室意外和事故處理(cont)小型意外：少量潛在傳染性物質(zhì)漏到椅子上，常用于這種情況的有效處理措施是消毒污染處。重大意外：任何情況下，如果疑心有嚴(yán)重的意外都將被視為重要的，實(shí)驗(yàn)室必須被清空，鎖上，并且實(shí)驗(yàn)室管理者要請(qǐng)教平安專家，聽從他們的意見40四、實(shí)驗(yàn)室意外和事故處理(cont)皮膚刺傷或切割傷：立即用肥皂