2024年遺傳學研究成果匯報

試驗一植物細胞有絲分裂的制片與觀測摘要：本試驗選用大蒜作為試驗材料，通過對大蒜根尖的培養(yǎng)獲得生長旺盛的植物分生組織，然后對根尖細胞進行前處理、固定、解離、染色、壓片來觀測細胞有絲分裂的全過程。throughcultivatingtherootsofalliumsativum.thenwediofthemitosis.keywords:mitosisinterphaseprophasemetaphaseanaphas有絲分裂是植物體細胞進行的一種重要分裂方式。有絲分裂的目的是增長細胞的數(shù)量而使植物有機體不停生長。在有絲分裂過程中，細胞核內的物質能精確的進行復制，然后有規(guī)律的均勻分派到兩個子細胞中去。植物有絲分裂重要在根尖、節(jié)間、莖的生長點、芽及其他分生組織里進行。將生長旺盛的植物分生組織經取材，固定、解離、染色、壓片，可以觀測到細胞有大蒜(alliumsativum2n=16),carnoy固定液(由95%的乙醇和冰乙酸以3:1的比例配置),1mo1/1的hc1,石炭酸品紅，水浴鍋，顯微鏡，剪刀，礦泉水瓶，蒸餾水1.生根、取材與固定采用水培法于暗處使大蒜生根，每天換水兩次。4天后，根長至2.0cm左右。上午10:00用剪刀將根尖剪下，并直接放入固定液中固定，以保持細胞真實的生活狀態(tài)，防止操作過程中對細胞生活狀態(tài)的破壞。本次試驗固定期間為14h。本次試驗采用了酸解法使細胞散開。將1mo1/1的hc1放入60℃的恒溫水浴鍋中，將固定好的根尖放入.解離4min。用清水沖洗解離后的材料5次，洗去表面的hc1,并引起后低3.染色、壓片與鏡檢、拍照截取根尖上分生組織1/3左右于載玻片上，用鑷子將分生組織碾碎；滴上石炭酸品紅染通過上述試驗措施獲得了一系列分裂的照片，如圖i-1所示。從這一系列圖片我們可以間期(interphase):圖i-1(a)所示，有絲分裂間期染色體以染色質形式染色質纏繞成絲狀的無規(guī)線團。討論1、大蒜根尖的固定期間在上午9:00-11:00和下午15:00-17:00為最佳。posedthecellsinofthemeiosis.keywords:meiosisleptonemazygonemapachynemadipl減數(shù)分裂是生物在形成配子時的一種特殊的分裂方式，是在性母細胞中進行的。減數(shù)分裂產生的每個子細胞染色體數(shù)目減少二分之一。并且第一次分裂前期尤其長，其變化尤其復雜，包括同源染色體配對、互換與分離等。玉米雄花(zeamays2n=20),carncy固定液(由958的乙醇和冰乙酸以3:1的比例配置),鐵礬，蘇木精，恒溫箱，冰乙酸，酒精燈，顯微鏡1、取材與固定(指導老師完畢)采集處在減數(shù)分裂時期的玉米雄花，采集時間為上午8:30—10:30和下午2:00-4:00。采集的雄花直接放入新配制的carnoy固定液中固定一周(中間換固定液兩次)。減數(shù)分裂是同步分裂，由于每朵小花中的所有花藥都處在同一時期，因此剝離的量要充足，在不傷害花藥的前提下，使用鑷子與解剖針玻璃花藥并放入4%硫酸高鐵銨(鐵礬)水溶液中進行媒染，時間為4-24h。媒染后，徹底水洗除凈花藥表面的鐵離子。之后放入0.5%的蘇木精中染4—24h。在25°℃慍箱中進行。染完后再次徹底水洗。除去表面染料。取一枚花藥于載玻片上，滴上一滴45%冰乙酸，并在酒精燈上加熱5秒鐘。材料加熱之通過上述試驗措施得到如下圖i-2:1、在花藥剝離時要注意將穎片剝離潔凈，使用的鑷子和解剖針不可傷害花藥，否則花粉母細胞會從傷口處外流，影響試驗效果2、在挑選花粉粒的時候，應挑選粒大且飽滿的，粒小而癟的花粉往往發(fā)育不良。3、媒染時間不合適過長或過短，染色過深或過淺都會影響最終的試驗成果。4、壓片時用拇指從上往下垂直用力且要防止載玻片與蓋玻片之間的滑動，否則會使細5、觀測時先用低倍鏡找到分裂相的位置，再換高倍鏡觀測特性便可作為此時期的分裂相。試驗三植物細胞多倍體誘導的制片與觀測摘要：本試驗選用大蒜作為試驗材料，通過在培養(yǎng)液中施加秋水仙素的胞從而對其進行多倍體誘導，然后對根尖細胞進行固定、解離、染色、壓片來觀測細胞染色體disposedthepolyploidcells多倍體是指細胞核內具有兩個以上染色體組，它的產生出了自然發(fā)生外還可人工誘導。誘導多倍體的措施有多種，本試驗采用秋水仙素誘導。它重要作用于細胞分裂過程中紡錘體的形成，使細胞分裂后期染色體不能分向兩極而被阻截在中期，通過間期染色體復制，使染色體數(shù)大蒜(alliumsativum2n=16),carnoy固定液(由95%的乙醇和冰乙酸以3:1的比例配置，秋水仙素，1mol/1的hc1,石炭酸品紅，水浴鍋，顯微鏡，剪刀，礦泉采用水培法培養(yǎng)大蒜，直至根長約2.0cm。向培養(yǎng)液中加入濃度為0.18的秋水仙素，培養(yǎng)36～48h。待根尖膨大時可取材固定。2、固定、解離(同有絲分裂過程)取根尖分生組織一部分放在一潔凈的載片上，先用解剖針把材料碾碎并鋪展開，然后滴上一滴石炭酸品紅染色5min,蓋上蓋片，進行壓片。圖i-3大蒜的染色體圖(白點示著絲點)圖(a):2n=16,是未加倍的大蒜細胞中的染圖(b):4n=32,是經秋水仙素加倍后的大蒜細胞染色體。1、染色體加倍的倍數(shù)多少與秋水仙素作用的時間有關。若讓染色體數(shù)目加倍，秋水仙素處理的時間應不不大于等于細胞的一種分裂周期。假如浸泡的時間不不大于細胞周期的二倍，則會出現(xiàn)八倍體。若感愛好，可合適延長處2、不應當觀測到32條染色體就認定此細胞為四倍體，由于染色體為2n細胞的分裂后期染色體數(shù)也為32條，此時的染色體不含姐妹染色單體。而染色體為4n的細胞中期，具有32對姐妹染色單體。3、若大蒜根尖細胞被加倍，其尖端部膨大，是認定細胞加倍的理由之一。4、大蒜根尖的固定期間在上午9:00-11:00和下午15:00-17:00為最佳。由5、解離的時間要合適，大概4min,由于解離時間的長短與試驗成果的好壞有非常直接的影響，時間過長，則不僅破壞分生組織之間的果膠與纖維素等物質，也使分生組織與伸長區(qū)6、在切取根尖時大概切從根尖開始算往上1.5mm左右，若切得太短，則只會看到成熟的根冠細胞，在視野中看不到分裂期細胞；若切得太長，則會看到有諸多伸長區(qū)的成熟細胞，從7、染色時間不合適過長或過短，染色過深或過淺都會影響最終的試驗成果。8、壓片時用拇指從上往下垂直用力且要防止載玻片與蓋玻片之間的滑動，否則會使細胞試驗一果蠅唾腺染色體的觀測摘要：果蠅(drosophilamelanogaster)是研究遺傳學的經典材料，它的染色體數(shù)目是2n=8,易于觀測，尤其是果蠅三齡幼蟲階段的唾腺染色體，其唾腺染色體巨大，又稱巨染色體。本試驗通過對果蠅唾腺染色體進行處理和觀測來探求染色體的構造。關鍵詞：果蠅唾腺染色體ofstudyinggenetics.asweallknow,drosophilachromosome.inthisexperimentthroughtkeywords:drosophilamelane果蠅三齡幼蟲階段的唾腺染色體處在體細胞同源染色體的配對狀態(tài)，多次復制而不分開，因而形成比一般體細胞根染色體長100-200倍的不螺旋的巨大染色質，又稱為多線染色體，此外上面還常能看到帶紋。本試驗即觀測唾腺染色體的特性。1、三齡幼蟲的培養(yǎng)試驗前將果蠅放入新培養(yǎng)基培養(yǎng)，23℃-25℃十天左右。把載玻片置于雙筒鏡下。載玻片上滴加生理鹽水一滴，取三齡幼蟲放在其中，操作者兩手各握一枚解剖針，左手解剖針壓住幼蟲后端1/3處，固定幼蟲。右手的解剖針按住幼蟲頭在載玻片上除去幼蟲其他組織部分，還要把唾腺周圍的白色脂肪剝離潔凈，再把唾腺移到潔凈的、預先準備的滴有1mol/lhcl的載玻片上，解離2-3分鐘。蒸餾水洗滌3—4次。石炭酸品紅染色5分后蓋上蓋玻片，壓片，吸去多出染液。先于低倍鏡下觀測，尋找細胞，再于高倍鏡下觀測染色體形態(tài)特點。唾液腺染色體約5條長臂，點狀染色體附著在染色中心附近，很難看到。在染色體臂上有深淺不一、寬窄不同樣、通過上述試驗措施獲得了圖ii1。2、在解剖時，頭部解剖針的位置大概在果蠅的眼睛處，后端部解剖針的位置為果蠅身體的1/3處。在拉伸果蠅的時候力度要合適，腸管、神經管等所有戳斷從而影響視線。試驗二果蠅的三點測交試驗abstract:drosophilamelanogasterisaclassicmaterialohasa2nnumberOf8,whichmeanswecouldeasytoobsit,furthermore,italsohasnumerousofgenemutans.finally,itsbiocycleisveryshort,thereforeitweperformedthethree-pointmappingin兩個基因在同一條染色體上呈鏈鎖狀態(tài)時基因間常常發(fā)生互換，互換之可作為兩基因間的距離。三個基因在一條染色體上時，通過三點測交可確定三個基因在染色體上的位置次序和基因間的相對距離。試驗用品黑腹果蠅(drosophilamelanogaster),野生型形狀為紅眼(+)、長翅(+)、直剛毛(+);三隱性突變型為白眼(w)、短翅(m)、卷剛毛(sn)。恒溫箱，培養(yǎng)瓶，顯微鏡，乙醚1、試驗果蠅的培養(yǎng)(指導老師完畢)分別培養(yǎng)兩種果蠅，7—8天后，出現(xiàn)幼蟲，去親本。特性雄蠅雌蠅個體小大性狀選擇紅眼、長翅、直剛毛白眼、短翅、卷剛毛(一定要為處女蠅)把挑選的雌雄果蠅分別放入同培養(yǎng)瓶內進行雜交，每瓶3-5對。培養(yǎng)瓶放入25℃溫箱果蠅雜交7-8天后，見到f1幼蟲和蛹出現(xiàn)，清除親本。從f1中選出3～5對果蠅放入同培養(yǎng)瓶內進行雜交，培養(yǎng)瓶放入25溫箱培養(yǎng)7~8f2代的果蠅有性別影響，沒有性狀上的影響，因此代的表型有8種，其中6種是重組合，2毛且雄蠅所有是白眼、短翅、卷剛毛，試驗可繼續(xù)進行。假如不是預期成果，試驗不能盲目往3、在開始挑選親本時，乙醚的量要合適，防止因劑量過大導致親本死亡。判斷果蠅與試驗一小鼠骨髓細胞染色體的制片與觀測學的經典試驗材料。本試驗采用小鼠骨髓細胞作為試驗材料，因其進行離心、低滲、固定、滴片、染色來觀測其染色體的形態(tài)構造。learninggenetics.inthisexperimenmarrow-cellasthematerial.wegota生理鹽水：8.5gnacl,溶解在1000ml蒸餾水中，濃度是0.858低滲溶液：5.59gkc1,用1000ml蒸餾水溶解，濃度是0075%按每克體重約5μg的劑量，在處死小白鼠前2h經腹腔注射秋水仙素。秋水仙素的作用是破壞細胞分裂中紡錘體的形成，積累細胞中期分裂相。3、解剖小鼠頸椎脫臼法處死小白鼠，(用手捏住小白鼠頭的后部，并用力下壓；另一手抓住鼠尾，用力剔凈其上的肌肉。搜集骨髓細胞用2%檸檬酸鈉溶液洗凈股骨和脛骨，剪去關節(jié)頭，暴露骨髓腔。將吸有適量2%檸檬酸鈉溶液的注射器的針頭從股骨和脛骨的一端插入骨髓腔中，用28檸檬酸鈉溶液將骨髓吹洗入離心管中，反復沖洗至骨髓腔呈白色為止。離心管配平后，1000r/min離心10min,棄去上清液。向細胞沉淀中加入5ml低滲液輕輕敲打離心管底部，使其充足接觸，并在37℃k浴中低滲低滲處理后，1000r/min離心10min,棄去上清液，沿管壁加固定液，立即將細胞團吹散打勻，靜置15min,然后離心。反復一次。視離心管底細胞多少再加入甲醇-冰醋酸(1:1)固定液2-3滴，吹打成懸液。將載玻片在潔凈冰水中預冷，取出后平放在桌面。用吸管吸取2滴細胞懸液，從載玻片上方合適高度處滴到載玻片1/3和2/3處，并立即對載玻片上的細胞懸液吹氣，將細胞懸液吹載玻片充足干燥后，平放，用新鮮配制的1:10的giemsa磷酸緩沖液覆蓋載玻片，染色10min,流水緩緩沖去多出染液，再用吸水紙吸干多出水分，晾干后即可鏡檢。根據(jù)上述試驗措施，得到了圖ii+1,從圖中可以清晰地看到小鼠的染色體數(shù)為2n=40,且1、在取骨髓細胞時，應將脛骨兩端切掉，使之相通。在用生理鹽水沖洗時應從上往下沖，2、在滴片的時候為了讓細胞破裂、分散得更好，滴管與載片之間應保持至少1m的距離，讓細胞摔破。因本人在滴片的時侯距離不夠長，從而導致細預期的成果。(上圖摘自同組同學孫海汐的圖片)4、染色時間大概為15min左右，染色過深或過淺都會影響最終的試驗成果。試驗二人染色體的制片與觀測期，再用秋水仙素處理便可得到大量中期分裂相的細胞。本試驗采用人外周血作為試驗材料，通過對其進行離心、培養(yǎng)、秋水仙素處理、低滲處理、預固定、二次固定、滴片、giemsa染色處理來觀測其染色體的形態(tài)構造。keywords:bloodcellchromosome1)固定液，顯微鏡試驗措施1、無菌處理(指導老師完畢)2、培養(yǎng)基配制(指導老師完畢)取m1994ml,小牛血清1ml,青霉素、鏈霉素0.04ml,肝素3-4滴，pha無菌條件下靜脈取血0.2—0.3ml放入培養(yǎng)液中。細胞在37°溫箱中培養(yǎng)72h,期間常常搖動培養(yǎng)瓶。培養(yǎng)68h左右，加入秋水仙素溶液，以獲得較多的中期相，搖勻后，繼續(xù)培養(yǎng)44h,可進行培養(yǎng)物倒入離心管中，1000r/轉離心8分鐘去掉上清液，沉淀物為紅細胞和白細胞，然后加入少許預熱37°的0.075mkc1,小心用吸管吹氣混勻后，放入37亙溫箱中低滲20分鐘左右，低滲的作用在于使紅細胞破碎，白細胞膨脹破裂，最終導致染色體分散。加入1ml新配制的甲醇-冰醋酸(3:1)固定液，均勻后立即以1000r/轉離心7分鐘，用吸管吸去所有上清液，輕彈離心管底部，使沉淀成糊狀。加入5ml固定液，用吹管吹打均勻，固定15分鐘，以1000r/轉離心7分鐘，去掉上清玻片洗凈后放于冰箱中冰凍，滴片時用吹管吹取細胞懸浮液，滴于載片上，滴片高度應少高些，每張片滴1-3滴，滴后用嘴吹，有助于細胞分散，滴片后斜放，在空氣中干燥取1-2張片，用giemsa染液和磷酸緩沖溶液配成1:10的工作液，滴于載片上染色1通過上述試驗措施，得到圖ii+2。從圖中可以清晰地看到人的染色體數(shù)為2n=46。1、在滴片的時候為了讓細胞破裂、分散得更好，滴管與載片之間應保持至少1m的距離，讓細胞摔破。本次試驗吸取上次試驗的教訓，因此獲得了較為成功的制片。3、染色時間大概為15min左右，染色過深或過淺都會影響最終的試驗成果。4、在取血時，手一定要輕，防止紅血細胞混到血清中。試驗三人染色體的分帶染色法摘要：染色體分帶技術是鑒定單個染色體和染色體組的一種手段，它運染色體產生明顯的染色的暗和染色的命帶相間的帶型形成了鮮明的染色體個體性，本試驗因用identifyeachcanmaketheofdifferent人染色體通過胰蛋白酶處理后，染色體上的蛋白質被酶水解只留下裸露的dna,在吉姆薩染液的過程中，不同樣的堿基在吉姆薩中著色深淺不同樣，因此會看到顏色深淺不一的帶紋。試驗用品吉姆薩染液pbs胰將上次試驗制得的人染色體的片子取出在室溫下將玻片標本浸入胰蛋白酶工作液中處理25秒左右。再在pbs中漂洗30秒。在giemsa染液中染7分鐘左右。玻片標本在細流自來水下沖洗直至水流不再有顏色為止，在沖洗成果通過上述試驗措施，得到圖iif3。從圖中可以清晰地看到人的染色體數(shù)為2n=46,明顯的帶紋.1、玻片標本在胰蛋白酶溶液處理前須在37°箱內處理4天左右，才可以得到滿意的2、用胰蛋白酶處理染色體的時間要恰當，方可使染色體外表面的蛋白質水解。3、染色時間不要太長，以防因時間過長而導致染色體沒有明顯分帶，所有染色體染色過試驗四dna的粗提取摘要：雞血紅細胞與人的紅細胞不同樣，存在細胞核，當中含豐富的有dna,并且雞血細胞極易吸水脹破。本試驗以雞血為試驗材料，運用dna在不同樣濃度的nac1下溶解度不同樣的措施來粗提取dna。linchickhasnucleus,wherethere雞血紅細胞與人的紅細胞不同樣，存在細胞核，當中含豐富的有dna,并且雞血細胞極易吸水脹破。首先破壞細胞膜，然后通過高速離心，由于dna的分子量較大，因此會下沉，這樣反復多次可得到較粗的dna。而后運用dna在不同樣濃度的nacl下溶解度不同樣的措施來粗提取dna。10%檸檬酸鈉、2mol/lnacl、二苯胺、0乙醇、紗布、蒸餾水、玻璃棒、雞血、燒杯殺活雞取雞血，同步放入抗凝劑檸檬酸鈉溶液。詳細制備措施如下：取質量濃度為0.1g/ml的檸檬酸鈉溶液100ml,置于500m1燒杯中，注入新鮮的雞血(約180ml),同步用玻璃棒攪拌，使血液與檸檬酸鈉溶液充將血液倒入離心管內進行離心，用1000r/min離心5min,使血細胞沉淀于離心管雞血細胞中的dna與核蛋白結合，位于雞血細胞的細胞核中，正常狀況下是不會釋放出來的。為了使dna從細胞核中釋放出來，需要向雞血細胞液中加入蒸餾水細胞膜和核膜脹破。用玻璃棒攪拌可以加速細胞的破裂。注意應沿一種方向迅速攪拌，但也不能太快太猛，防止打碎dna。一般5-10ml的雞血細胞液加入20ml蒸餾水攪拌5min。釋放出來的大量dna和rna往往與蛋白質結合在一起，用單層紗布進行過濾，除去某4、溶解細胞核內的dna在濃度較高的nac1溶液中核蛋白輕易解聚，游離出的dna溶解在溶液中。在溶液中加入40-60ml體積濃度為2mol/l的nacl溶液，攪拌1min。將溶液中的dna與其他雜質分離，加蒸餾水減少nacl溶液濃度，使dna析出。緩慢貼壁加入蒸餾水，并輕輕地沿一種方向不停地均勻攪拌，以利于dna分子的附著和纏繞。使nac1溶液的終濃度為0.1-0.2mol/1。加水過程分多次進行，當總加水量為80ml左右將dna黏稠物再溶解，繼續(xù)用2mol/1的nacl溶液20ml溶解dna黏稠物，仍舊沿一種方向不停攪拌，使dna充足溶解，以免損失。用2層紗布進行過濾，濾去雜質，搜集具有dna的濾液。向濾液中貼壁緩慢加入等倍體積的冰乙醇，并用玻璃棒朝一種方向緩慢、均勻地攪拌，溶液中會出現(xiàn)dna絲狀物，卷起。用0.02mol/1的nacl溶液1ml溶解絲狀物，同步將對照組(只含二苯胺試劑)與試驗組水浴加熱進行顯色反應。1、在取雞血的時侯，同步用玻璃棒進行攪拌，使血液與檸檬酸鈉溶液充足混合試驗五血影的制備摘要：雞血紅細胞與人的紅細胞不同樣，存在細胞核.本試驗以活雞血為原料通過多次的離雞血細胞的細胞膜具有選擇透過性，較大的物質一般狀況下不會從細胞膜透出。若采用5p7.6溶液作用于細胞，便可以變化細胞膜的通透性，使其通透性增大，從而可以通過高速離108檸檬酸鈉，pbs,5p7.6溶液取10m1血液加入2倍體積的pbs,裝入離心管進行1000r/min,時間為5分鐘的離沉淀中加入20倍體積的5p7.6溶液，混合均勻后在常溫中靜置25min取10ml裝入離心管進行15000r/min,時間為20分鐘的離心。試驗成果通過上述試驗措施，得到了圖iii41、在取雞血的時候，同步用玻璃棒進行攪拌，使血液與檸檬酸鈉溶液充足混合，以免血3、在取細胞膜的時候，要取最上表層，不要獲得過多。防止細胞內容物影響試驗成摘要：粗糙鏈孢霉(nerosporacrassa)屬真菌類，是進行四分子遺傳學分析的好材料。本專題選用粗糙鏈孢霉賴氨酸缺陷型和野生型為試驗材料，對雜交所得后裔的體現(xiàn)型進行觀測分析，進而理解次序排列的四分體的遺傳學分析措施。粗糙鏈孢霉(nerosporacrassa)的菌絲體是單倍體，每一菌絲細胞中具有幾十個細胞核。粗糙鏈孢霉的菌株有兩種不同樣的接合型，它們受一對等位基因控制。不同樣接合型菌株的細胞接合產生有性孢子，這過程稱為有性生殖。通過對粗糙鏈孢霉的賴氨酸缺陷型和野生型雜交所得后裔的體現(xiàn)型的分析，理解次序排列的四分體的遺傳學分析措施，進行有關基因粗糙鏈孢霉(nerosporacras