HAVIgM抗體檢測(cè)講解

甲型肝炎病毒IgM抗體檢測(cè)(酶聯(lián)免疫法）【預(yù)期用途】

本試劑盒用于體外定性檢測(cè)人血清中的HAVIgM水平?！緦?shí)驗(yàn)?zāi)康摹?.掌握IgM（酶聯(lián)免疫法）檢測(cè)原理和方法步驟。2.正確判讀實(shí)驗(yàn)結(jié)果。3.質(zhì)控和生物安全意識(shí)建立。【實(shí)驗(yàn)原理】采用捕獲夾心法，測(cè)定人血清/血漿中甲型肝炎病毒IgM抗體。在包被反應(yīng)板上固相包被μ鏈抗體，加入待測(cè)樣本，反應(yīng)后形成固相“抗μ鏈抗體-人IgM抗體”免疫復(fù)和物，經(jīng)充分洗滌后，甲肝抗原和HRP標(biāo)記的甲型肝炎病毒單抗，形成“抗μ鏈抗體-人IgM抗體-甲肝抗原-HRP標(biāo)記的甲型肝炎病毒抗體”免疫復(fù)合物。通過(guò)標(biāo)記物上的HRP催化底物顯色，通過(guò)酶標(biāo)儀測(cè)定450nm的OD值（參考波長(zhǎng)630nm）判定樣品中是否含有甲型肝炎病毒IgM抗體。該產(chǎn)品用于檢測(cè)人血清或血漿樣本中的甲型肝炎病毒IgM抗體(抗-HAV-IgM)?！緦?shí)驗(yàn)器材】1.酶標(biāo)儀2.HAVIgM抗體檢測(cè)試劑盒（酶聯(lián)免疫法）3.洗板機(jī)4.標(biāo)本【實(shí)驗(yàn)方法】1平衡：將試劑盒各組分取出，平衡至室溫18-25°C），微孔板開(kāi)封后，余者及時(shí)以自封袋封存。2配液：濃縮洗滌液配制前充分搖勻（如有晶體應(yīng)充分溶解），濃縮洗滌液和蒸餾水或去離子水按1：19稀釋后使用。3編號(hào)：將微孔條固定于支架，按序編每板應(yīng)設(shè)陰性對(duì)照3孔，陽(yáng)性對(duì)照2孔，空白1孔。4加樣：分別在相應(yīng)孔中加入待測(cè)樣品或陰，陽(yáng)性對(duì)照50微升。5溫育：充分混勻，加上封板膜，置37℃溫育20分鐘。6洗滌：用洗滌液充分洗滌5次，洗滌完扣干（每次應(yīng)保持30-60秒的浸泡時(shí)間）。7加酶：除空白孔外，分別在每孔中加入酶標(biāo)記抗體100l，輕拍混勻。充分混勻，加上封板膜，置37℃溫育40分鐘。8.洗滌：用洗滌液充分洗滌5次，洗滌完扣干（每次應(yīng)保持30-60秒的浸泡時(shí)間）。9.顯色：每孔加入底物A、B各50l，輕拍混勻，置37℃暗處15分鐘。10.終止：每孔加終止液50l，混勻。11.測(cè)定：用酶標(biāo)儀單波長(zhǎng)450nm或雙波長(zhǎng)450/630nm測(cè)定各孔OD值（用單波長(zhǎng)測(cè)定時(shí)需設(shè)空白對(duì)照一孔，30分鐘內(nèi)完成測(cè)定，并記錄結(jié)果）?！娟?yáng)性判斷值與分析】1.臨界值（C.O.）的計(jì)算：臨界值＝陰性對(duì)照孔OD值N×2.1，陰性對(duì)照OD均值大于0.1時(shí)應(yīng)重新試驗(yàn)，小于0.05時(shí)以0.05計(jì)算。2.結(jié)果判定：樣品OD值S/C.O>=1者為陽(yáng)性樣品OD值S/C.O<1者為陰性【臨床意義】

血清中抗HAV-IgM在亞臨床