基因工程練習(xí)專題

專題一基因工程練習(xí)①②⑦⑦(3)若④過程為將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞，則將此抗病基因?qū)胫参锛?xì)胞采用最多的措施是 抗枯萎病金茶花培育成功闡明一種生物的基因體現(xiàn)系統(tǒng)可以識(shí)別來自另一種生物的DNA的UU素基因拼接(導(dǎo)人細(xì)菌質(zhì)粒因的質(zhì)粒淋巴細(xì)胞干擾素 tt蘇云金芽孢桿菌目的基因插入了染棉株細(xì)胞Bt毒蛋白基因構(gòu)建基因表達(dá)載體轉(zhuǎn)人農(nóng)桿菌組織培養(yǎng)木抗蟲棉Ti質(zhì)粒感染(1)基因工程的操作程序重要包括的四個(gè)環(huán)節(jié)是： 方法1方法2載體d圖2②c過程稱為,該過程需要的原料是。③要確定獲得的基因與否是所需的目的基因，可以從分子水平上運(yùn)用_技術(shù)檢基因體現(xiàn)載體d,除圖中的標(biāo)示部分外，還必須具有菌轉(zhuǎn)化法培育出轉(zhuǎn)基因煙草。T?溶菌酶的耐熱性。①B②7題圖8題圖(1)獲取目的基因的重要途徑包括從自然界已經(jīng)有的物種中分離和。使目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞C.并將其插入受體細(xì)胞C?中的上，使目的基因的 些宿主細(xì)胞接種到含四環(huán)素的培養(yǎng)基中，能生長的原核宿主細(xì)胞所具有的連接產(chǎn)物圖1啟動(dòng)子質(zhì)粒圖2(2)若用限制酶SmaI完全切割圖1中DNA片段，產(chǎn)生的末端是末端，其產(chǎn)物長度(4)若將圖2中質(zhì)粒和目的基因D通過同種限制酶處理后進(jìn)行連接，形成重組質(zhì)粒，那么應(yīng)選用的限制酶是。在導(dǎo)入重組質(zhì)粒后，為了篩選出含重組質(zhì)粒的大腸桿菌，一般需要用添加的培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。經(jīng)檢測，部分具有重組質(zhì)粒的大腸桿菌菌株中目的基因D不能正常體現(xiàn)，其最也許的原因10.下表中列出了幾種限制酶識(shí)別序列及其切割位點(diǎn)，圈1、圈2中箭頭表達(dá)有關(guān)限制酶的酶切位點(diǎn).請(qǐng)回答問題：限制酶識(shí)別序列及切割位點(diǎn)(1)一種如圖1所示的質(zhì)粒分子經(jīng)SmaI切割前后，分別具有個(gè)游離的磷酸基團(tuán).(2)若對(duì)圖中質(zhì)粒進(jìn)行改造，插入的SmaI酶切位點(diǎn)越多，質(zhì)粒的熱穩(wěn)定性越.(4)與只使用EcoRI相比較，使用BamHI和HindⅢ兩種限制酶同步處理質(zhì)粒、外源DNA的長處在于可(6)重組質(zhì)粒中抗生素抗性基因的作用是為了。(7)為了從cDNA文庫中分離獲取蔗糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因，將重組質(zhì)粒導(dǎo)入喪失吸取蔗糖能力的大腸桿菌突變11、下表是幾種限制酶識(shí)別序列及其切割位點(diǎn)，圖1、圖2中標(biāo)注了有關(guān)限制酶的酶切位點(diǎn)，其中切割限制酶切割位點(diǎn)圖2(3)若BanHI酶切的DNA末端與BclI酶切的DNA末端連接，連接部位的6個(gè)堿基對(duì)序列等措施，導(dǎo)入羊的細(xì)胞中，通過系列操作培育轉(zhuǎn)基因動(dòng)物。(4)怎樣檢測和鑒定目的基因已被成功導(dǎo)入羊體內(nèi)?請(qǐng)寫出兩種措施。病棉花品系.請(qǐng)回答問題：(1)要使運(yùn)載體與該抗病基因連接，首先應(yīng)使用進(jìn)行切割.切割的部位是兩個(gè)核苷酸之間的,假如運(yùn)載體被切割后，得到的分子末端序列為，則能與該運(yùn)載體連接的抗病(2)切割完畢后，采用酶將運(yùn)載體與該抗病基因連接，連接后得到的DNA分子稱(3)將連接得到的DNA分子導(dǎo)入棉花細(xì)胞常用的措施是,運(yùn)用植物細(xì)胞具有的性進(jìn)行組織培養(yǎng).(4)為了確定抗病基因與否插入到棉花染色體DNA上，一般才用技術(shù)，并用 (5)該抗病基因在棉花細(xì)胞中體現(xiàn)的產(chǎn)物是()A.淀粉B.脂類C.蛋白質(zhì)D.核酸E.抗生素 14.如圖甲是目的基因EPSPS(4.0kb,1kb=1000對(duì)堿基)與pUC18質(zhì)粒(2.7kb)重組的示意圖.圖中Ap′是抗氨芐青霉素基因，lacZ是顯色基因，其上的EcoRI識(shí)別位點(diǎn)位于目的基因插入位點(diǎn)的右側(cè)，其控制合成某種酶能將無色染料X-gal變成藍(lán)色，最終能在含無色染料X-gal的培養(yǎng)基上將含該基因的菌甲落染成藍(lán)色.(圖乙中深色圓點(diǎn)即為藍(lán)色菌落)乙(1)將處理后的目的基因EPSPS與pUC18質(zhì)粒、DNA連接酶混合后，再與某菌種混合，若要從混合物中篩選出含EPSPS基因的菌株，在圖乙的培養(yǎng)基中必須加入.請(qǐng)判斷圖乙中所出現(xiàn)的白色和藍(lán)色兩種菌落中，何種顏色菌落會(huì)具有重組質(zhì)粒_.(2)現(xiàn)用EcoRI酶切質(zhì)粒，酶切后進(jìn)行電泳觀測，若出現(xiàn)長度為kb和kb的片段，則可以判斷該質(zhì)粒已與目的基因重構(gòu)成功.(重組質(zhì)粒上目的基因的插入位點(diǎn)與EcoRI的識(shí)別位點(diǎn)之間的堿基對(duì)忽視不計(jì)).(3)假設(shè)EPSPS基因已被成功轉(zhuǎn)移到植物F中，但植物F仍沒有體現(xiàn)出抗性，分析也許的原因是 .15.轉(zhuǎn)基因草莓中有能體現(xiàn)乙肝病毒表面抗原的基因，由此可獲得用來防止乙肝的一種新型疫苗，其培育過程如圖所示(①至④代表過程，A至C代表構(gòu)造或細(xì)胞):③-草莓葉盤ALπ質(zhì)粒④C構(gòu)建篩選菌株分離②構(gòu)建③篩選基因的分離基因1a提取細(xì)胞mRN①b含有抗原基因含有抗原基因的染色體DNA抗原基因②TI酶切①SmaI—重組質(zhì)粒⑥MNS引物對(duì)模板圖2引物對(duì)與模板結(jié)合示意圖切割位點(diǎn)請(qǐng)根據(jù)以上圖表回答問題.(1)在采用常規(guī)PCR措施擴(kuò)增目的基因的過程中，使用的DNA聚合酶不一樣于(2)圖1環(huán)節(jié)③所用的DNA連接酶對(duì)所連接的DNA兩端堿基序列與否有專一性規(guī)定?(3)為將外源基因轉(zhuǎn)入馬鈴薯，圖1環(huán)節(jié)⑥轉(zhuǎn)基因所用的細(xì)菌B一般為(4)對(duì)符合設(shè)計(jì)規(guī)定的重組質(zhì)粒T進(jìn)行酶切。假設(shè)所用的酶均可將識(shí)別位點(diǎn)完全切開，請(qǐng)根據(jù)圖1中標(biāo)示的酶切位點(diǎn)和表2所列的識(shí)別序列，對(duì)如下酶切成果做出判斷。要構(gòu)建該種生物缺失ch1L基因的變異株細(xì)胞。技術(shù)路線如圖甲所示，請(qǐng)據(jù)圖分析回答問題。chlLchlL基因同源替換日chlL基因紅霉素抗性基因基因質(zhì)粒甲(2)①②過程中均使用的工具酶有酶1酶1酶2基因顧乙含chlL基重組質(zhì)粒A(5)可用PCR技術(shù)對(duì)ch1L基因擴(kuò)增時(shí)，需一對(duì)引物I、II,從理論上推測，該DNA分子通過PCR擴(kuò)增四發(fā)運(yùn)用備受關(guān)注.我國科學(xué)家應(yīng)用耐鹽基因培育出了耐鹽水稻新品系.(1)獲得耐鹽基因后，構(gòu)建重組DNA分子所用的限制性內(nèi)切酶作(2)將重組DNA分子導(dǎo)入水稻受體細(xì)胞的常用措施有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法和_法.(3)由導(dǎo)入目的基因的水稻細(xì)胞培養(yǎng)成植株需要運(yùn)用技術(shù)，該技術(shù)的關(guān)鍵是和(4)為了確定耐鹽轉(zhuǎn)基因水稻與否培育成功，既要用放射性同位素標(biāo)識(shí)的做探針進(jìn)行分子雜交檢測，又要用措施從個(gè)體水平鑒定水稻植株的耐鹽性.20、運(yùn)用基因工程技術(shù)培育轉(zhuǎn)基因抗凍番茄，該過程需要用多種限種限制酶(1)上述限制酶在特定位點(diǎn)切割DNA,其實(shí)質(zhì)是斷開DNA分子每條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的 ,切割后產(chǎn)生了末端。(2)運(yùn)用EcoRI和NaeI酶切得某種魚的抗凍蛋白基因，可與被EcoRI和SamI酶切后的