逍遙散的抗抑郁作用機制研究

逍遙散的抗抑郁作用機制研究【摘要】目的:研究逍遙散對慢性溫和不可預(yù)知應(yīng)激（CUMS）小鼠的影響及其通過抑制炎癥反應(yīng)改善抑郁狀態(tài)的機制。方法:以逍遙散為干預(yù)藥物，對小鼠進行4周CUMS造模，同時對實驗小鼠進行藥物干預(yù)。4周后停止給予小鼠刺激，給小鼠進行行為學檢測，包括糖水偏好實驗、曠場實驗、強迫游泳實驗，通過以上實驗來評價小鼠的抑郁狀態(tài)，確認是否造模成功。待小鼠完成行為學檢測后，麻醉小鼠，摘除小鼠眼球采集血樣，離心處理后，取上清液，采用Elisa法，測定各組小鼠血清中炎癥因子IL-1β、IL-6、TNF-α的水平。結(jié)果：模型組較空白組小鼠造模4周，小鼠糖水偏好率顯著降低（P<0.01），曠場運動總距離、直立次數(shù)、中心區(qū)域停留時間明顯減少（P<0.01,P<0.05,P<0.01），游泳不動時間明顯增加（P<0.01）。連續(xù)給藥4周，逍遙散組較模型組小鼠糖水偏好率介于空白組和模型組之間，小鼠曠場運動總距離、中心區(qū)域停留時間和游泳不動時間明顯增加（P<0.01，P<0.05，P<0.01），直立次數(shù)也有所增加，逍遙散組能明顯降低模型小鼠血清中IL-1β、IL-6、TNF-α的含量（P<0.01，P<0.01，P<0.01）。結(jié)論：逍遙散對應(yīng)用CUMS程序的小鼠表現(xiàn)出抗抑郁作用,抗抑郁機制是通過下調(diào)小鼠血清中炎癥因子IL-1β、IL-6、TNF-α的水平。

【關(guān)鍵詞】逍遙散;抗抑郁;炎癥因子;慢性溫和不可預(yù)知應(yīng)激StudyonantidepressantmechanismofXiaoyaoPowder[Abstract]Objective:TostudytheeffectofXiaoyaoPowderonchronicunpredictablemildstress(CUMS)miceanditsmechanismofimprovingdepressionbyinhibitinginflammatoryresponse.Methods:ThemiceweremodeledbyCUMSfor4weekswithXiaoyaosanastheinterventiondrug,anddruginterventionwasperformedonexperimentalmiceatthesametime.After4weeks,thestimulationwasstopped,andthemiceweresubjectedtobehavioraltests,includingsucrosepreferencetest,openfieldtestandforcedswimmingtest,throughtheaboveexperiments,thedepressionstateofmicewasevaluatedtoconfirmwhetherthemodelwassuccessful.Afterthemicecompletedthebehavioraltest,themicewereanesthetized,theeyeballsofthemicewereremoved,andbloodsampleswerecollected.ThelevelsofinflammatoryfactorsIL-1β,IL-6andTNF-αinserumofeachgroupweredeterminedbyElisamethod.RESULTS:Comparedwiththeblankgroup,thesucrosepreferencerateofthemiceinthemodelgroupwassignificantlydecreased(P<0.01),thetotaldistanceofopenfieldexercise,thenumberofuprights,andthecentralarearesidencetimeweresignificantlydecreased(P<0.01,P<0.05,P<0.01),andtheswimmingimmobilitytimewassignificantlyincreased(P<0.01).After4weeksofcontinuousadministration,comparedwiththemodelgroup,thesucrosepreferencerateoftheXiaoyaoPowdergroupwasbetweentheblankgroupandthemodelgroup.Thetotaldistanceofopenfieldexercise,thetimeofstayinginthecentralareaandthetimeofswimmingimmobilityweresignificantlyincreased(P<0.01,P<0.05,P<0.01),andthenumberofuprightswasalsoincreased.TheXiaoyaoPowdergroupcouldsignificantlyreducethecontentofIL-1β,IL-6andTNF-αintheserumofmodelmice(P<0.01,P<0.01,P<0.01).Conclusion:XiaoyaoPowdershowsantidepressanteffectonmicewithCUMSprogram.Theantidepressantmechanismistodown-regulatethelevelsofinflammatoryfactorsIL-1β,IL-6andTNF-αinserumofmice.[Keywords]XiaoyaoPowderanti-depressioninflammatoryfactorschronicmildunpredictablestress

目錄前言 前言抑郁癥對于當代人來說，已成為了一種發(fā)病率高的精神疾病。抑郁癥主要癥狀表現(xiàn)為持續(xù)性的情緒低落[1]，精神不集中以及對活動失去愉悅感等，而更為嚴重的，甚至可以造成患者自殺，是一種嚴重危害人的心理健康的疾病。隨著日常生活節(jié)奏的加快，競爭壓力的不斷增大以及新冠疫情的出現(xiàn)，抑郁癥患者人數(shù)不斷增加。據(jù)我國精神衛(wèi)生調(diào)查顯示，我國成人抑郁障礙終生患病率約為6.8%，其中抑郁癥約為3.4%[2]。抑郁癥患者這個群體不斷在增大，給社會帶來了極大的潛在危機，抗抑郁藥物的研究也面臨巨大的挑戰(zhàn)。抑郁癥的發(fā)病機制較為復(fù)雜，尚未明確，且完全根除治愈也不容易，而且該病復(fù)發(fā)率也很高。抑郁癥臨床表現(xiàn)與中醫(yī)典籍中“郁證”等[3]較為相似，郁證的致病臟腑主要為肝、心、脾，常見病機有肝氣郁結(jié)、心陰虧虛、心脾兩虛、肝郁脾虛等，故常用逍遙散論治。逍遙散主要通過對腸腦軸、下丘腦-垂體-腎上腺（HPA）軸、腦源性神經(jīng)營因子（BNDF）、炎癥因素和單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的影響來發(fā)揮抗抑郁作用[4]。賈廣成等[5]研究發(fā)現(xiàn)逍遙散對大鼠大腦突觸體攝取5-羥色胺（5-HT）、去甲腎上腺素（NA）和多巴胺（DA）能夠起到抑制作用，而逍遙散分離組分主要對5-HT、NA起抑郁作用。彭希等[6]發(fā)現(xiàn)，經(jīng)逍遙散治療后CUMS模型小鼠海馬BNDF和皮質(zhì)BNDFmRNA的表達量提高。于林等[7]發(fā)現(xiàn)加味逍遙散可以增強抑郁大鼠的胃腸功能，于是推測通過腦腸軸途徑調(diào)節(jié)腦肽異常水平可能是加味逍遙散改善抑郁大鼠胃腸功能失調(diào)的作用途徑之一。石博宇[8]發(fā)現(xiàn)逍遙散可以抑制炎癥因子IL-6、TNF-α的分泌來發(fā)揮抗神經(jīng)炎癥細胞損傷作用。許二平等[9]發(fā)現(xiàn)加味丹梔逍遙散可以降低抑郁大鼠血漿中皮質(zhì)醇（CORT）和促腎上腺皮質(zhì)激素（ACTH）水平，從而拮抗HPA軸亢奮，使抑郁大鼠得到治療。本實驗是研究逍遙散對給予CUMS小鼠抗抑郁作用，以此深入了解逍遙散通過抑制炎癥反應(yīng)而改善抑郁狀態(tài)的作用機制，為抑郁癥靶向治療的研究開展提供一定的實驗基礎(chǔ)。

1材料1.1動物本實驗所用實驗動物基本信息詳見表1-1。表1-1實驗動物基本信息實驗動物性別體質(zhì)量（g）數(shù)量（只）來源SPF級昆明小鼠雄18-2520廣東省醫(yī)學實驗動物中心本實驗動物飼養(yǎng)條件與要求基本信息詳見表1-2。表1-2實驗動物飼養(yǎng)條件與要求飼養(yǎng)地點動物飲食控制飼養(yǎng)天數(shù)（天）廣東藥科大學動物實驗中心SPF級實驗室自由攝食飲水30本實驗動物在室溫25℃，相對濕度40-60%的環(huán)境下飼養(yǎng)。

1.2試劑表1-3實驗試劑實驗試劑廠家生理鹽水逍遙散蔗糖4%水合氯醛小鼠白細胞介素-1β(IL-1β)ELISA試劑盒小鼠白細胞介素-6(IL-6)ELISA試劑盒小鼠腫瘤壞死因子-α(TNF-α)ELISA試劑盒廣東環(huán)凱生物科技有限公司北京同仁堂sigmaaldrichsigmaaldrich南京建成科技有限公司南京建成科技有限公司南京建成科技有限公司1.3儀器表1-4所用實驗儀器儀器名稱型號-80℃超低溫冰箱多用途臺式高速冷凍離心機酶標儀移液器槍頭熒光分光光度計高速勻漿機LRH-100恒溫恒濕培養(yǎng)箱超凈臺ThermoForma995BackmanALLEGRAX-22R128CEppendorfAxgenRF-5301PCFS-1DOWESTON蘇凈

2方法2.1動物分組與給藥隨機將18只SPF級雄性小鼠分為3組，每組6只。每天在同一個時間段給小鼠給藥，給藥方式為灌胃給藥，與造模同時進行。分組與給藥基本信息詳見表2-1。表2-1分組與給藥基本信息組別藥物空白組生理鹽水模型組生理鹽水逍遙散組逍遙散灌胃體積根據(jù)小鼠體重而定，1ml/100g，一共給藥28天，不間斷，行為學檢測在最后一次給小鼠給藥24h后進行。2.2慢性溫和不可預(yù)知應(yīng)激模型的建立空白組小鼠除外，7種刺激因子，每天隨機給CUMS模型組、逍遙散組小鼠一種刺激因子。刺激因子基本信息詳見表2-2。表2-2刺激種類基本信息刺激種類禁食24h禁水24h熱刺激45℃通宵照明潮濕墊料24h在4℃水中游泳5min籠具45°傾斜7h共造模28天，待造模結(jié)束后給各組小鼠進行行為學檢測。

2.3糖水偏好實驗1)糖水偏好訓練：在開啟CUMS程序造模前的2天，需要對每只小鼠進行2次1%蔗糖水偏好訓練，在每個籠子中放置2個大小完全一致的水瓶，讓小鼠自由攝取。水瓶裝有基本信息詳見表2-3。表2-3水瓶裝有基本信息天數(shù)水瓶裝有第1天2瓶均為1%蔗糖水第2天1瓶1%蔗糖水，1瓶純水2）糖水偏好實驗：造模結(jié)束后，給小鼠進行一次糖水偏好實驗。具體實驗要求如表2-4。表2-4實驗要求實驗要求禁水禁食24h后進行單籠進行實驗每籠放置2個水瓶，1瓶1%的蔗糖水，1瓶純水實驗進行24h編號：給每一個水瓶編號，如蔗糖1、純水1。稱重：實驗結(jié)束后，取下水瓶，稱重，按照編號記錄數(shù)據(jù)，包括糖水消耗量、純水消耗量。計算：計算糖水偏好率，作為評價小鼠快感缺失的指標。糖水偏好率=2.4曠場實驗1）在安靜的條件下，將小鼠置于曠場實驗箱中央?yún)^(qū)域，與此同時，通過攝像機攝像、秒表計時。2）觀察5min內(nèi)小鼠在曠場實驗箱中的運動情況，5min后結(jié)束攝像和計時。3）每只小鼠實驗完成后，都要用紙巾清理小鼠殘留在曠場實驗箱中的排泄物，并用75%的酒精給曠場實驗箱擦拭，以此消除氣味，減少影響實驗結(jié)果的因素，待酒精晾干后，隨機更換動物，繼續(xù)實驗。4）統(tǒng)計5min內(nèi)小鼠曠場運動總距離、中心區(qū)域停留時間以及直立次數(shù)，通過以上行為指標評估小鼠焦慮狀態(tài)。2.5強迫游泳實驗1）適應(yīng)：該實驗在曠場實驗結(jié)束后一天進行，在實驗開始前，提前把小鼠置于實驗房間內(nèi)適應(yīng)環(huán)境30min，必須保持實驗環(huán)境安靜，避免造成小鼠受驚影響實驗結(jié)果。2）實驗：在小鼠適應(yīng)結(jié)束后，將小鼠放入玻璃缸中進行實驗。實驗要求見表2-5。表2-5實驗要求水深（cm）水溫（℃）1522±33）拍攝與計算：拍攝視頻記錄小鼠在玻璃缸中的6min游泳活動，觀察并計算后４min內(nèi)小鼠的游泳不動時間。2.6取材待小鼠完成行為學試驗后：1）麻醉：通過腹腔注射給小鼠注射4%水合氯醛進行麻醉。2）取血：通過摘除小鼠眼球的方法取血，用離心管收集血液。3）離心：將取得的血液離心，離心要求詳見表2-6。表2-6小鼠摘取眼球取血離心處理離心溫度（℃）離心速度（r/min）離心時間（min）4300010分離得到血清，將實驗剩余的血清放置于-80℃的冰箱內(nèi)保存，用來備用。

2.7小鼠血清中IL-1β、IL-6、TNF-α含量的測定根據(jù)小鼠ELISA試劑盒說明書測定小鼠血清中IL-1β、IL-6、TNF-α含量。具體步驟如下：1）平衡：使用前在18-25℃下給各試劑盒平衡20min。2）加樣：分別設(shè)置標準品孔、待測樣本孔和空白孔。加樣后輕輕晃動使混勻。加樣情況如表2-7。表2-7加樣情況標準品孔待測樣本孔空白孔各加不同濃度的標準品50μl先加樣品稀釋液40μl，再加待測樣品10μl不加3）加酶標試劑，加酶標試劑量見表2-8。表2-8加酶標試劑量標準品孔（μl）待測樣本孔（μl）空白孔（μl）10010004）封板孵育，37℃孵育60min。5）配液：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用。6）洗滌：取下封板膜，棄去液體再甩干，然后每孔加入適量的洗滌液浸泡30秒，甩干，重復(fù)5次。7）顯色：每孔先后加入顯色劑A、B50μl，混勻。在37℃避光環(huán)境下顯色15min。8）終止：都加入50μl終止液，待藍色轉(zhuǎn)變?yōu)辄S色時，終止反應(yīng)。9）測定：終止反應(yīng)后立刻進行各孔的吸光度（OD值）的測定，在450nm波長下按順序測定，以空白孔調(diào)零。10）通過Excel工作表繪圖，標準品濃度作橫坐標，OD值作縱坐標，得出曲線方程，將樣本的OD值代入曲線方程式，計算樣本濃度。最終樣本濃度乘以稀釋倍數(shù)。

2.8統(tǒng)計學處理實驗數(shù)據(jù)使用SPSS19.0軟件進行分析，數(shù)據(jù)以均數(shù)±標準誤表示，采用單因素方差分析，方差齊兩兩比較采用LSD法，方差不齊采用Dunnett3法，以P<0.05為差異具有統(tǒng)計學意義。

3結(jié)果3.1對CUMS模型小鼠糖水偏好實驗的影響結(jié)果如表3-1與圖1所示。1）模型組較空白組小鼠糖水偏好率具顯著性差異（P<0.01），由此可知，CUMS程序可小鼠對蔗糖水的喜愛度下降，說明小鼠快感缺失，處于抑郁狀態(tài)，即造模成功。2）逍遙散組較空白組小鼠糖水偏好率具顯著性差異（P<0.01），較模型組小鼠糖水偏好率無顯著性差異，但逍遙散組較模型組小鼠糖水偏好率升高，不明顯，由此可知，逍遙散對CUMS模型小鼠起到一定的治療效果。表3-13組小鼠開始實驗28天后糖水偏好率的結(jié)果n=6,X±S組別糖水偏好率（%）空白組85.21±9.27模型組63.28±10.93**逍遙散組71.98±5.94**與空白組比較,*P<0.05,**P<0.01；與模型組比較,△P<0.05，△△P<0.01圖1各組小鼠糖水偏好率注：空白組，control；模型組，cums；逍遙散組，cums+xys

3.2對CUMS模型小鼠曠場實驗的影響3.2.1對CUMS模型小鼠曠場實驗運動總距離的影響結(jié)果如表3-2與圖2。1）模型組較空白組小鼠運動總距離顯著較少（P<0.01），表明小鼠經(jīng)CUMS程序干預(yù)后，活動能力下降，說明小鼠出現(xiàn)抑郁狀態(tài)。2）逍遙散組較模型組小鼠運動總距離顯著增加（P<0.01），說明小鼠經(jīng)逍遙散治療后，活動能力得到恢復(fù)，抑郁狀態(tài)得到了好轉(zhuǎn)。表3-2小鼠曠場實驗運動總距離結(jié)果n=6,X±S組別運動總距離（cm）空白組395.67±20.96模型組293.00±24.09**逍遙散組377.83±20.03△△與空白組比較,*P<0.05,**P<0.01；與模型組比較,△P<0.05，△△P<0.01圖2各組小鼠曠場實驗運動總距離注：空白組，control；模型組，cums；逍遙散組，cums+xys

3.2.2對CUMS模型小鼠曠場實驗中心區(qū)域停留時間的影響結(jié)果如表3-3與圖3。1）模型組較空白組小鼠中心區(qū)域停留時間顯著減少（P<0.01），表明小鼠經(jīng)CUMS程序干預(yù)后，小鼠對周圍環(huán)境的好奇程度降低，說明小鼠出現(xiàn)焦慮行為。2）逍遙散組較空白組小鼠中心區(qū)域停留時間顯著減少（P<0.01），說明逍遙散組小鼠也存在焦慮行為，但逍遙散組較模型組小鼠中心區(qū)域停留時間顯著增加(P<0.05)，說明逍遙散能一定程度上改善小鼠抑郁狀態(tài)。表3-3小鼠曠場實驗中心區(qū)域停留時間結(jié)果n=6,X±S組別中心區(qū)域停留時間（s）空白組51.83±6.05模型組22.67±4.08**逍遙散組30.83±7.55**△與空白組比較,*P<0.05,**P<0.01；與模型組比較,△P<0.05，△△P<0.01圖3各組小鼠曠場實驗中心區(qū)域停留時間注：空白組，control；模型組，cums；逍遙散組，cums+xys

3.2.3對CUMS模型小鼠曠場實驗直立次數(shù)的影響結(jié)果如表3-4與圖4所示。1）模型組較空白組小鼠運直立次數(shù)（P<0.05）顯著降低，由此可知，小鼠對周圍環(huán)境的探索欲望減少，表現(xiàn)出抑郁狀態(tài)。2）逍遙散組較模型組小鼠直立次數(shù)無顯著性差異，但逍遙散組小鼠直立次數(shù)有所增加，介于空白組與模型組之間，可說明小鼠經(jīng)逍遙散治療后探索能力得到部分恢復(fù)，抑郁狀態(tài)得到改善。表3-43組小鼠開曠場實驗直立次數(shù)結(jié)果n=6,X±S組別直立次數(shù)（per）空白組27.67±4.72模型組21.67±4.46*逍遙散組24.83±4.75與空白組比較,*P<0.05,**P<0.01；與模型組比較,△P<0.05，△△P<0.01圖4各組小鼠曠場實驗直立次數(shù)注：空白組，control；模型組，cums；逍遙散組，cums+xys

3.3對CUMS模型小鼠強迫游泳實驗的影響結(jié)果如表3-5與圖5所示。1）模型組較空白組小鼠游泳不動時間顯著升高（P<0.01），說明小鼠的求生欲望不強，行為絕望程度高，說明小鼠抑郁程度重。2）逍遙散組較空白組小鼠游泳不動時間顯著升高（P<0.01），說明小鼠處于抑郁狀態(tài)，且程度不高，較模型組小鼠游泳不動時間顯著降低（P<0.01），說明經(jīng)逍遙散治療后，小鼠求生欲增強，行為絕望程度下降，抑郁狀態(tài)得到改善。表3-53組小鼠開始實驗4周后強迫游泳實驗的結(jié)果n=6,X±S組別強迫游泳不動時間（s）空白組117.50±7.31模型組208.50±5.99**逍遙散組146.17±9.35**△△與空白組比較,*P<0.05,**P<0.01；與模型組比較,△P<0.05，△△P<0.01圖5各組小鼠強迫游泳不動時間注：空白組，control；模型組，cums；逍遙散組，cums+xys

3.4對CUMS模型小鼠血清中炎癥因子的影響結(jié)果如表3-6與圖6、7、8所示。1）模型組較空白組小鼠血清中IL-1β（P<0.01）、IL-6（P<0.01）、TNF-α（P<0.01）水平顯著升高，說明經(jīng)CUMS程序干預(yù)的小鼠會產(chǎn)生抑郁樣行為，從而引起上述炎癥因子水平上升。2）逍遙散組較模型組小鼠血清中IL-1β（P<0.01）、IL-6（P<0.01）、TNF-α（P<0.01）水平顯著降低，說明逍遙散能夠?qū)UMS程序干預(yù)引起的IL-1β、IL-6、TNF-α水平上升起到下調(diào)作用。表3-63組小鼠開始實驗4周后血清中IL-1β、IL-6、TNF-α含量的結(jié)果n=6,X±S組別IL-1β（pg/ml）IL-6（pg/ml）TNF-α（pg/ml）空白組18.71±0.8623.37±1.76107.36±9.82模型組30.61±1.65**31.67±1.18**140.61±12.07**逍遙散組23.64±2.12**△△26.01±2.84△△119.05±11.85△△與空白組比較,*P<0.05,**P<0.01；與模型組比較,△P<0.05，△△P<0.01圖6各組小鼠血清中IL-1β水平注：空白組，control；模型組，cums；逍遙散組，cums+xys

圖7各組小鼠血清中IL-6水平注：空白組，control；模型組，cums；逍遙散組，cums+xys圖8各組小鼠血清中TNF-α水平注：空白組，control；模型組，cums；逍遙散組，cums+xys

4討論本實驗結(jié)果顯示，逍遙散組較模型組小鼠血清中IL-1β、IL-6、TNF-α的含量下降，小鼠糖水偏好率提高，曠場實驗小鼠總運動量增加，小鼠曠場中心區(qū)域停留時間和強迫游泳實驗游泳不動時間減少。CUMS模型，通過溯源肝郁證患者的發(fā)病因素，模擬人類在日常生活工作學習中作息不規(guī)律、飲食不節(jié)等不良生活習慣，各種升學、工作壓力等引起的負面情緒，居住或工作空間狹窄，不舒適等社會生活的不良事件長期刺激采用多種慢性的、不可預(yù)知的、溫和的、低強度的應(yīng)激事件進行造模[10]。本實驗通過對小鼠實施CUMS程序，通過糖水偏好實驗判定肝郁小鼠的核心癥狀快感是否缺失，通過糖水偏好實驗來判斷小鼠是否快感缺失，通過強迫游泳實驗來反映肝郁小鼠的活動能力和求生欲，通過曠場實驗觀測小鼠的焦慮樣行為及小鼠的活動能力，綜合判定小鼠抑郁狀況。實驗結(jié)果顯示，模型組較空白組小鼠糖水偏好率下降，曠場實驗總運動量減少，強迫游泳不動時間增加，即小鼠快感缺失，運動能力下降，提示小鼠造模成功，可判斷小鼠處于肝郁樣狀態(tài)。祖國醫(yī)學認為[11]，抑郁癥屬中醫(yī)“郁證”的范疇。抑郁癥的形成的主要病機為肝氣郁結(jié)[12]，而肝主疏泄，可以調(diào)節(jié)氣機、維持氣血運行等。逍遙散出自《太平惠民和劑局方》,主要功效為疏肝解郁、調(diào)和肝脾,現(xiàn)代藥理研究也證實逍遙散有明顯的抗抑郁作用，是目前中醫(yī)抗抑郁的首選方藥[13]。與西藥相比，逍遙散抗抑郁療效與西藥相當，但逍遙散具有不良反應(yīng)少[14-15]、療效穩(wěn)定、依從性較好的優(yōu)點，西藥如阿替米林、帕羅西汀[16]等出現(xiàn)的不良反應(yīng)危及神經(jīng)、心血管等多個功能部位。陳智龍等[11]研究發(fā)現(xiàn)，逍遙散改善患者抑郁狀態(tài)的綜合療效高于了西藥組。賀宏偉[17]研究發(fā)現(xiàn)，乳腺癌相關(guān)性焦慮抑郁障礙患者經(jīng)過丹梔逍遙散治療，臨床表現(xiàn)有所改善，且提高患者生存質(zhì)量的療效優(yōu)于黛力新，也沒有明顯的不良反應(yīng)。此外，逍遙散多靶點、安全高效的抗抑郁作用也被科研人員證，成為近年來的研究熱點之一。因此，本實驗選用逍遙散作為干預(yù)藥物，通過對小鼠實施CUMS程序，探究逍遙散通過抑制炎癥反應(yīng)而改善抑郁狀態(tài)的作用機制，希望能為抑郁癥靶向治療的研究開展提供一定的實踐基礎(chǔ)，為研發(fā)新型抗抑郁藥物提供了一定的理論基礎(chǔ)和實踐經(jīng)驗，并為臨床抑郁藥物治療提供更多的選擇以及臨床用藥依據(jù)。炎癥反應(yīng)在精神疾病病理生理學上起到了舉足輕重的作用[18]。相關(guān)研究顯示，抑郁癥與炎癥反應(yīng)有關(guān)[19]。在抑郁癥中，炎癥反應(yīng)系統(tǒng)（IRS）會激活HPA軸，使促腎上腺皮質(zhì)激素釋放激素（CRH）和促腎上腺皮質(zhì)激素（ACTH）含量增加，以及血清素和兒茶酚胺的周轉(zhuǎn)增加，但IRS同樣可以利用巨噬細胞，T細胞等細胞產(chǎn)生的炎癥因子來驅(qū)動響應(yīng)免疫激活[18]。Liu等[20]發(fā)現(xiàn)，抑郁癥患者血清中相關(guān)的炎癥標志物水平有所升高，其中包括CRP、IL-6。也有研究提示，炎癥因子會誘發(fā)抑郁樣行為，例如SukoffRizzo等[21]將重組的IL-6注入小鼠腦室內(nèi)，小鼠產(chǎn)生了抑郁樣行為，這表明IL-6是抑郁癥的標志物之一。除此之外，在抗TNF治療的研究中發(fā)現(xiàn)，抗TNF治療后患者的抑郁癥癥狀得到改善[22]。因此，炎癥反應(yīng)與抑郁癥之間存在著相互作用的關(guān)系，抑郁癥與炎癥反應(yīng)息息相關(guān)。通過互聯(lián)網(wǎng)查閱大量文獻，本實驗通過下調(diào)炎癥因子水平來抑制炎癥反應(yīng)而改善CUMS模型小鼠的抑郁狀態(tài)的想法是可行的。萬小敏等[23]研究顯示，CUMS模型組大鼠海馬區(qū)IL-6、TNF-α平均光密度值高于正常組與逍遙散組，說明經(jīng)逍遙散治療后的大鼠海馬區(qū)IL-6、TNF-α的分泌減少。周巖[24]在慢性束縛應(yīng)激模型大鼠中發(fā)現(xiàn)血清中IL-1β、IL-6、IL-10和TNF-α含量較正常組明顯上升，而大鼠血清中IL-1β、IL-6、IL-10和TNF-α含量逍遙散組較模型組明顯下降。本實驗的小鼠經(jīng)過逍遙散治療后運動能力得到恢復(fù)，抑郁狀態(tài)得到改善，且是通過下調(diào)炎癥因子IL-1β、IL-6、TNF-α水平發(fā)揮抗抑郁作用。本實驗結(jié)果與萬小敏、周巖等人的研究結(jié)果均表明逍遙散可以通過下調(diào)炎癥因子來改善抑郁狀態(tài)，即通過抑制炎癥反應(yīng)而發(fā)揮抗抑郁作用。除此之外，本實驗也存在一些不足，曠場實驗和強迫游泳實驗的數(shù)據(jù)是通過人工觀察記錄的，主觀性較強，可能會對實驗結(jié)果造成一定的影響，實驗數(shù)據(jù)應(yīng)采用動物行為分析系統(tǒng)來進行分析才更加準確，避免系統(tǒng)誤差。5問題與展望由于逍遙散抗抑郁作用的機制頗多，科研人員提出了多種假說，如神經(jīng)遞質(zhì)假說[25]、神經(jīng)可塑性假說等，但各種假說的研究不夠完善，近年來主要著重于神經(jīng)遞質(zhì)假說的研究，其他假說仍需要付出更多的努力去研究完善，利用新技術(shù)和方法去闡明逍遙散的抗抑郁作用機制。逍遙散發(fā)揮抗抑郁作用的有效組分很多，但明確發(fā)揮藥效的研究仍不足，而且逍遙散具有多靶點、多層次的作用功能，有效成分發(fā)揮作用之間是否有影響，需要進一步細分研究。逍遙散作為抗抑郁的最佳中藥復(fù)方，不良反應(yīng)少，多靶點，多層次，為抗抑郁藥物研究提供了方向。而且，現(xiàn)在的科學技術(shù)越來越先進，可以綜合運用科學技術(shù)從各個方向來研究逍遙散，不斷積累理論實踐，為新型抗抑郁藥物以及抗抑郁的靶向治療的研究奠定基礎(chǔ)，為抑郁癥患者這個群體帶去福音。

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