病毒性疾病標本采集要求

關(guān)于病毒性疾病標本采集要求主要內(nèi)容采集臨床標本對于實驗室檢測的意義臨床標本的采集及種類采集技術(shù)要求標本采集情況及存在的問題建議、要求第2頁,共32頁，2024年2月25日，星期天一、臨床標本對實驗室監(jiān)測的作用和意義血清學監(jiān)測：（IgM/IgG）早期診斷(發(fā)熱出疹癥候群、腦膜腦炎癥候群等)人群免疫狀況評價、疫苗效果評價病毒學監(jiān)測：病毒學監(jiān)測與流行病調(diào)查資料結(jié)合在一起，可以:追溯病毒傳播途徑鑒定病毒來源，確定本土還是輸入?yún)^(qū)分疫苗、野毒引起的疑似病例（麻疹；VDPV等）監(jiān)測病毒的變異，開發(fā)新疫苗第3頁,共32頁，2024年2月25日，星期天二、臨床標本采集的基本要求標本是進行一起實驗室檢測的基礎(chǔ)標本采集質(zhì)量（采集時間、部位）影響實驗室檢測的結(jié)果標本采集應根據(jù)不同癥候群采集不同種類的標本標本具有不再獲得性，采集的量應充分滿足檢測工作需要采集的標本應有明確標示，并包含疾病所有的基本信息標本的采集、運送、保存都應符合生物安全要求第4頁,共32頁，2024年2月25日，星期天臨床診斷標本種類血液鼻/咽拭子糞便尿液皰疹液含漱液腦脊液疑似麻疹√√√疑似風疹√√√（CRS）疑似腮腺炎√√√√疑似水痘√√腸道病毒（疑似脊灰）√√疑似肝炎√疑似乙腦√√用于病毒學檢測疑似病例標本采集種類第5頁,共32頁，2024年2月25日，星期天（一）、麻疹、風疹、腮腺炎標本的采集要求三、標本的采集要求第6頁,共32頁，2024年2月25日，星期天071421283542-7-14-210246810RashOnse出疹tDaysafterrashonset出疹天數(shù)IgGIgMInfection感染Relativelevelsofantibody相對抗體水平必要日期:最后接種日期出疹日期出生日期IgMsensitivity~70%IgM敏感性—70%virusexcretion排泄病毒用于IgM檢測的血清標本要在初次接觸病人時馬上采集。用于病毒分離及核酸檢測檢測的標本需在岀疹后5天內(nèi)采集。對于岀疹3天內(nèi)的血清標本：大約30%的病例因未產(chǎn)生IgM抗體不能檢測到，需要采集第二份血標本或采用熒光定量PCR檢測病毒核酸。麻疹病毒感染人體后抗體動態(tài)和病毒的排泄第7頁,共32頁，2024年2月25日，星期天1、合格血標本的基本要求是：出疹后28日內(nèi)采集，血清量不少于0.5ml，無溶血，無污染；2～8℃條件下保存、運送。

2、監(jiān)測病例血標本采集率達到80%以上；出疹后3日內(nèi)血標本麻疹、風疹I(lǐng)gM陰性者，應在出疹后4-28天內(nèi)采集第二份血，與第一份血采集時間相隔10-20天。第2份血標本的比例達到80%以上。

3、麻疹、風疹暴發(fā)疫情實驗室確診率達到90%上。

4、技術(shù)要求：采集病例出疹后28日內(nèi)靜脈血2～3ml，加入到無菌試管中，標明采集日期和病例姓名、編號。1、血標本的采集、運送、保存要求（2014版麻疹監(jiān)測方案）第8頁,共32頁，2024年2月25日，星期天5、1500rpm/20分鐘離心機分離血清。如果沒有離心機，在室溫下凝固分離血清，或2-8°C過夜直到血清完全析出。6、血清標本運送前應可在2～8℃保存，如果7日內(nèi)不能運送的，應置-20℃以下保存，避免反復凍融（會對IgM抗體的穩(wěn)定性產(chǎn)生不利影響）。7、全血標本不能凍結(jié)。8、標本送檢要符合生物安全條件要求。1、血標本的采集、運送、保存要求（2014版麻疹監(jiān)測方案）第9頁,共32頁，2024年2月25日，星期天2、咽拭子、尿液標本的采集、運送、保存要求

（2014版麻疹監(jiān)測方案）1、采集出疹后5天內(nèi)病例咽拭子或尿液標本，用于病毒分離或病毒核酸檢測。2、努力采集每例散發(fā)監(jiān)測病例病原學標本。當確認為麻疹或風疹暴發(fā)疫情時，應至少采集疫情早期5例病例的病原學標本，病例數(shù)小于5例者應全部采集。3、麻疹、風疹暴發(fā)疫情實驗室確診率達到90%以上；麻疹、風疹暴發(fā)疫情采集病原學起數(shù)占暴發(fā)疫情總起數(shù)的比例達到80%以上。第10頁,共32頁，2024年2月25日，星期天2、咽拭子、尿液標本的采集、運送、保存要求

（2014版麻疹監(jiān)測方案）4、技術(shù)要點：（1）出疹當日至出疹后5日采集。（2）用無菌棉拭子適度用力在咽后部及兩側(cè)，反復擦拭，獲得上皮細胞。（3）把拭子放入有外螺旋蓋并裝有2ml病毒運輸液的凍存管中。（4）常用的病毒運輸液（商用）：pH7.4～7.6的Hank’s液：在90ml蒸餾水中加入10mlHank’s，然后加入10ml牛血清和0.2ml0.4％酚紅溶液，過濾消毒。加1ml青/鏈霉素溶液。分裝到無菌管中，于4℃儲存?zhèn)溆谩＜毎囵B(yǎng)液：含2％-5%胎牛血清DMEM第11頁,共32頁，2024年2月25日，星期天2、咽拭子、尿液標本的采集、運送、保存要求

（2014版麻疹監(jiān)測方案）5、咽拭子等標本采集后48小時內(nèi)能送達市級實驗室者，可在2～8℃保存，否則-70℃保存。無-70℃保存條件者，可在-20℃保存并在1周內(nèi)送達。6、尿液標本采集：出疹后5天內(nèi)，最好采集晨尿（其他時段也可），用50ml無菌離心管采集30～50ml尿液。采集后的標本在2-4°C保存，必需在24h內(nèi)離心處理（1500rpm/20min）,用3～5ml病毒保存液懸浮沉渣，轉(zhuǎn)移到咽拭子保存管，-70℃保存。未經(jīng)離心處理不得直接凍存。第12頁,共32頁，2024年2月25日，星期天3、腮腺炎疑似病例標本采集1、血清標本采集同上。2、采集時間：發(fā)病5天內(nèi)采集咽拭子、腺管分泌液。3、方法：咽拭子采集同麻疹。

腺管分泌液采集：用無菌棉拭子，放患者口腔兩邊腮腺管開口處，放置10min后，取出放裝有病毒保存管中。4、標本保存、運送要求同麻疹。采集后盡快送省級實驗室進行病毒分離。第13頁,共32頁，2024年2月25日，星期天1、血清標本：散發(fā)病例，每年以市為單位血清標本合格采集數(shù)不少于100份、水皰液標本采集數(shù)不少于10份；若散發(fā)病例少于100例，血清標本合格采集率應達病例總數(shù)的80%以上。2、暴發(fā)病例，采集暴發(fā)早期5～10例病例血清標本進行確診，同時還要采集3～5例病例水皰液標本，進行病毒分離。3、水泡液采集（用于病毒分離及核酸檢測）：選擇患者5～10個充盈度較好的水皰，在無菌條件下用注射器抽取皰液，保存于裝有2-3mL標本保存液標本管中(同麻疹)。4、皰疹液采集后應在4℃條件下24小時內(nèi)運送至省級實驗室，未能24小時內(nèi)送達的，應置-70℃或以下保存，并于標本采集后7天內(nèi)送達省級實驗室。（二）、水痘-帶狀皰疹標本的采集、運送、保存要求第14頁,共32頁，2024年2月25日，星期天一、AFP病例標本的采集1.

麻痹出現(xiàn)后14天內(nèi)采集；雙份大便；采集時間至少間隔24小時。2.每份標本重量≥5克（約為成人的大拇指末節(jié)大?。?。3.麻痹時間超過3個月，可不采集大便標本。4.

-20℃冰箱儲存，冷藏運送至實驗室。（三）、脊髓灰質(zhì)炎標本采集、

運輸要求第15頁,共32頁，2024年2月25日，星期天標本的采集-2二、AFP病例接觸者標本的采集

以下情況應采集AFP病例的5名接觸者（原則上5歲以下）大便標本1.每年AFP病例大便標本數(shù)少于150份的省。2.未采集到合格大便標本的AFP病例。3.根據(jù)臨床或流行病學資料高度懷疑為脊灰的AFP病例。4.死亡的AFP病例。第16頁,共32頁，2024年2月25日，星期天標本的采集-3三、高變異株AFP病例、VDPV病例、輸入性脊灰野病毒病例接觸者：

標本采集要求見《輸入性脊灰野病毒病例和脊灰疫苗衍生病毒循環(huán)病例應急處理預案》第17頁,共32頁，2024年2月25日，星期天脊灰標本的運送

1.采集后7天內(nèi)送達省級脊灰實驗室。2.冷藏運送，運送時冰袋不少于4個，在送達省脊灰實驗室時應帶冰且包裝完整。3.標本的運送同時要符合實驗室生物安全有關(guān)要求。4.采集的標本應有完整的登記資料（采樣單），一并送達省脊灰實驗室。第18頁,共32頁，2024年2月25日，星期天運輸器材

1.單個病例的標本容器應單放在盒或塑料袋內(nèi)，并做有效的封閉。2.用于運輸標本的器材每次用過后毀掉或者消毒后再用。3.Polio標本不能和疫苗同放在一個冷藏器中。4.用于計免中攜帶疫苗的冷藏箱可用于標本運輸，但不可再用于裝運疫苗。第19頁,共32頁，2024年2月25日，星期天1.血清標本采集：⑴發(fā)病7天內(nèi)采集，血液標本量應≥3ml。⑵如第一份血液標本在發(fā)病7天內(nèi)采集，且乙腦IgM抗體檢測陰性，應于7天后采集第二份血液標本。⑶血清裝于帶螺旋蓋的血清管中保存和送檢，血清管上貼好寫有患者個人資料的標簽。⑷血清應低溫（-80℃）保存，避免反復凍融；標本要冷藏運送（最好用干冰或液氮），同時要符合實驗室生物安全和相關(guān)運輸管理要求。（四）、流行性乙型腦炎檢測標本的

采集、保存與運輸?shù)?0頁,共32頁，2024年2月25日，星期天2、腦脊液標本采集：⑴需要專業(yè)的臨床醫(yī)生來完成。⑵發(fā)病1周內(nèi)采集，每份1～2ml。⑶低溫（-80℃）保存，避免反復凍融；標本要冷藏運送（最好用干冰或液氮），同時要符合實驗室生物安全和相關(guān)運輸管理要3、蚊蟲樣本采集：⑴地點：人房、豬圈、稻田；時間：早晨5點之前和傍晚7點之后。⑵鑒定分類：將蚊蟲于-20℃冰箱中冷凍半個小時左右，將蚊蟲凍暈，以便分揀；對蚊蟲分類時，要在冰排上進行；分類完畢，50只為一批，迅速裝入凍存管，并立即放入液氮中保存。⑶用液氮進行運輸。在蚊蟲標本采集的整個過程中都要保持冷鏈，注意補充液氮。（四）、流行性乙型腦炎檢測標本的

采集、保存與運輸?shù)?1頁,共32頁，2024年2月25日，星期天（四）、流行性乙型腦炎檢測標本的

采集、保存與運輸4、豬血樣本采集：⑴選擇上年11月份以后出生、尚未經(jīng)歷乙腦流行期的仔豬30頭作為觀察對象。⑵每頭豬從流行季節(jié)前的3月份開始，連續(xù)每旬采耳靜脈血一次，直到10月下旬。⑶也可采集屠宰場所宰殺的未經(jīng)過上一次乙腦流行季節(jié)的豬血清，每次不少于30份，從每年的3月份開始采集直到流行季節(jié)結(jié)束。⑷低溫（-20℃）保存，冷藏運送。第22頁,共32頁，2024年2月25日，星期天四、標本采集情況、存在的問題第23頁,共32頁，2024年2月25日，星期天市監(jiān)測病例數(shù)年化排除病例報告發(fā)病率(/10萬)及時性指標特異性指標麻疹病毒分離及核酸檢測48小時完整調(diào)查血清標本散發(fā)病例血標本采集咽拭子標本數(shù)病毒分離

陽性數(shù)核酸檢測陽性數(shù)病例數(shù)調(diào)查率3日內(nèi)送達率結(jié)果4日內(nèi)報告率病例數(shù)采集率濟南1521.1113991.4510098.5713190.97青島8407.7783499.2995.195.1582099.6413547111淄博280.462796.4396.8896.772410013511棗莊2145.2321198.691.0481.2820099.548922東營271.442488.8996962488.89828煙臺941.549196.8196.7797.787796.2540937濰坊2422.0123496.6994.0798.6722796.1970335濟寧1491.7213187.9287.0295.8312687.546432泰安1503.1813992.6792.1490.39990.831845威海1103.7510999.0998.9596.817984.95712756日照1492.0014295.392.6877.979277.97843349萊蕪130.681292.31100100787.52臨沂310.442890.3285.71802589.292德州2244.9821194.299.5310019295.5228321聊城380.353386.841001002884.85717濱州370.713081.0890.9183.332482.76211菏澤410.222765.8555.1752.942583.33合計25392.26242295.3994.2893.5220094.55731483952015.1-5麻疹檢測指標完成情況第24頁,共32頁，2024年2月25日，星期天四、標本采集情況、存在的問題第25頁,共32頁，2024年2月25日，星期天四、標本采集情況、存在的問題第26頁,共32頁，2024年2月25日，星期天年份病例數(shù)血標本采集數(shù)采集率（%）不同時間采集數(shù)3天內(nèi)4-28天>28天20145486535697.6364211.99%467087.19%120.20%2015.1-53239306094.4758819.22%246280.46%80.26%2014-2015.5麻疹血清標本采集情況第27頁,共32頁，2024年2月25日，星期天年份病例數(shù)咽拭子時間分布采集數(shù)采集率（%）岀疹<5天岀疹>5天20145486183533.45131471.60%43729.23%2015.1-53239128339.61106783.16%21016.84%

2014-2015.5全省麻疹疑似病例咽拭子標本采集情況第28頁,共32頁，2024年2月25日，星期天存在問題1、麻疹標本的采集情況：近年來麻疹疑似病例標本采集率、合格標本采集率以及采集質(zhì)量有很大改善，但咽拭子病原學標本整體采集率仍較低，岀疹5天后采集的咽拭子仍占較高的比例，采集合格咽拭子標本