實驗一光學(xué)顯微鏡的使用和動物細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)

關(guān)于實驗一光學(xué)顯微鏡的使用和動物細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)光學(xué)顯微鏡和它拍攝的圖片第2頁,共25頁，2024年2月25日，星期天

熟悉光學(xué)顯微鏡基本結(jié)構(gòu)和用途；掌握顯微鏡維護(hù)的基本知識；初步掌握低倍鏡、高倍鏡使用方法；掌握標(biāo)本制備的方法第3頁,共25頁，2024年2月25日，星期天實驗材料與用品材料：生物玻片標(biāo)本用品：普通光學(xué)顯微鏡、相差顯微鏡、暗視野顯微鏡、熒光顯微鏡、倒置顯微鏡、擦鏡紙、乙醚酒精、香柏油。第4頁,共25頁，2024年2月25日，星期天一、顯微鏡的使用1.顯微鏡的結(jié)構(gòu)第5頁,共25頁，2024年2月25日，星期天第6頁,共25頁，2024年2月25日，星期天機(jī)械部分鏡座鏡柱鏡臂鏡筒物鏡轉(zhuǎn)換器標(biāo)本推進(jìn)器載物臺標(biāo)本推進(jìn)器螺旋調(diào)焦螺旋第7頁,共25頁，2024年2月25日，星期天光學(xué)部分目鏡：10×（放大倍數(shù)）物鏡：紅，4×黃，10×藍(lán)，40×白，100×目鏡物鏡10/0.25:放大倍數(shù)/數(shù)值孔徑（分辨率）160/0.17:物鏡長度/允許蓋玻片厚度第8頁,共25頁，2024年2月25日，星期天照明部分燈光：光源光圈（光闌）：控制光束大小

調(diào)節(jié)亮度光圈燈光聚光鏡聚光鏡：將平行光匯聚在物鏡，

可得均勻亮度

升高與降低聚光鏡如何調(diào)節(jié)觀察視野的明暗度？第9頁,共25頁，2024年2月25日，星期天2.顯微鏡的使用方法低倍鏡的使用：（1）取鏡：右手握鏡臂左手托鏡座，（2）置鏡：實驗臺正位偏左，距桌邊5cm；（3）對光：打開光源，調(diào)整粗準(zhǔn)焦螺旋，使載物臺與物鏡分開，轉(zhuǎn)動物鏡轉(zhuǎn)換器將低倍鏡對準(zhǔn)通光孔，確認(rèn)聚光鏡上升、光圈打開，向目鏡觀察，看到明亮視野；第10頁,共25頁，2024年2月25日，星期天（3）裝玻片標(biāo)本：移開物鏡，將玻片標(biāo)本放于載物臺，標(biāo)本推進(jìn)器固定，旋轉(zhuǎn)標(biāo)本推進(jìn)器旋鈕，調(diào)整標(biāo)本目標(biāo)對準(zhǔn)聚光鏡正上方；（4）調(diào)焦：低倍鏡對準(zhǔn)標(biāo)本目標(biāo)，側(cè)面觀察并調(diào)節(jié)粗準(zhǔn)焦螺旋，至標(biāo)本與物鏡相距0.5cm處停止，再觀察目鏡并調(diào)整粗準(zhǔn)焦螺旋轉(zhuǎn)動載物臺下降，直至物像清晰，可用細(xì)準(zhǔn)焦螺旋調(diào)整。第11頁,共25頁，2024年2月25日，星期天高倍鏡的使用：（1）先在低倍鏡下找到目標(biāo)物，移動至視野中央；（2）不動調(diào)焦螺旋，從側(cè)面觀察物鏡，轉(zhuǎn)動物鏡轉(zhuǎn)換器，切換到高倍鏡下，使高倍鏡對準(zhǔn)通光孔；（3）從目鏡下觀察，調(diào)整視野亮度，轉(zhuǎn)動細(xì)準(zhǔn)焦螺旋直至出現(xiàn)清晰的物像；第12頁,共25頁，2024年2月25日，星期天第13頁,共25頁，2024年2月25日，星期天二、臨時制片1.人口腔粘膜上皮細(xì)胞（涂片）

漱口→擦片（載玻片蓋玻片各一張）→取材→

涂片（單方向一次性）→甲苯胺藍(lán)染色（1min）

→蓋片→鏡檢

注意事項：取材注意力度

單方向一次性涂片

蓋片應(yīng)避免氣泡產(chǎn)生第14頁,共25頁，2024年2月25日，星期天口腔粘膜上皮細(xì)胞第15頁,共25頁，2024年2月25日，星期天人口腔上皮細(xì)胞扁平上皮細(xì)胞第16頁,共25頁，2024年2月25日，星期天生物繪圖1.用鉛筆（HB/2H）硬度稍高2.選擇典型結(jié)構(gòu)繪圖，特征、比例等3.線、點繪圖：線繪制輪廓，要平滑；點的疏密表示顏色深淺，點要圓，垂直點點。4.標(biāo)注結(jié)構(gòu)，文字標(biāo)右側(cè)5.圖名稱標(biāo)在圖的正下方，標(biāo)注放大倍數(shù)6.無需邊框第17頁,共25頁，2024年2月25日，星期天生物繪圖注意事項1.表現(xiàn)形式只有點和線，不能涂陰影。2.對各個部位要加以說明。3.引線要平行，前端可以不對齊，后端一定要對齊。4.繪圖用普通鉛筆，不能用彩色鉛筆。第18頁,共25頁，2024年2月25日，星期天2.蛙血細(xì)胞（推片）

擦片（載玻片兩張）→牛蛙處死（雙毀髓）→解剖→心臟采血→滴片→推片→晾干→鏡檢第19頁,共25頁，2024年2月25日，星期天重點：大小、位置、角度、速度第20頁,共25頁，2024年2月25日，星期天雙毀髓法以左手握住蛙，背部向上，用食指壓住其頭部，使其略向下彎，將毀髓針自枕骨大孔插入，先左右橫斷脊髓，再向前伸入顱腔搗毀腦，然后再將毀髓針撤回至枕骨大孔，反向插入脊椎管破壞脊髓，檢查蛙四肢肌肉完全松弛后處死成功。第21頁,共25頁，2024年2月25日，星期天細(xì)胞膜細(xì)胞質(zhì)細(xì)胞核蛙紅細(xì)胞示意圖第22頁,共25頁，2024年2月25日，星期天3.脊髓前角運(yùn)動神經(jīng)細(xì)胞的制備和觀察取脊柱剪去多余的肌肉和結(jié)締組織掰開脊柱，剪下一小段脊髓

壓片甲苯胺藍(lán)染色5分鐘

蓋片吸去多余染液觀察重點：壓片量、力量均勻、不可滑動、云霧狀第23頁,共25頁，2