HJ 632-2011 土壤 總磷的測定 堿熔-鉬銻抗分光光度法（正式版）

1土壤總磷的測定堿熔-鉬銻抗分光光度法1適用范圍本標準規(guī)定了測定土壤中總磷的堿熔-鉬銻抗分光光度法。本標準適用于土壤中總磷的測定。當試樣量為0.2500g,采用30mm比色皿時，本方法的檢出限為10.0mg/kg,測定下限為40.0mg/kg。2規(guī)范性引用文件本標準內(nèi)容引用了下列文件或其中的條款。凡是不注明日期的引用文件，其有效版本適用于本標HJ613土壤干物質(zhì)和水分的測定重量法HJ/T166土壤環(huán)境監(jiān)測技術(shù)規(guī)范3方法原理經(jīng)氫氧化鈉熔融，土壤樣品中的含磷礦物及有機磷化合物全部轉(zhuǎn)化為可溶性的正磷酸鹽，在酸性條件下與鉬銻抗顯色劑反應生成磷鉬藍，在波長700nm處測量吸光度。在一定濃度范圍內(nèi)，樣品中的總磷含量與吸光度值符合朗伯-比爾定律。4試劑和材料除非另有說明，分析時均使用符合國家標準的分析純化學試劑。實驗用水為新制備的去離子水或蒸餾水，電導率(25℃)≤5.0μS/cm。4.2氫氧化鈉：顆粒狀，優(yōu)級純。4.3無水乙醇：p(CH?CH?OH)=0.789g/ml。4.5磷酸二氫鉀：優(yōu)級純?nèi)∵m量磷酸二氫鉀(KH?PO?)于稱量瓶中，在110℃下烘干2h,置于干燥器中放冷，備用。于800ml水中，在不斷攪拌下緩慢加入168ml濃硫酸(4.1),待溶液冷卻后加水至1000ml,混4.7硫酸溶液：c(H?SO?)=0.5mol/L于800ml水中，在不斷攪拌下緩慢加入28ml濃硫酸(4.1),待溶液冷卻后加水至1000ml,混勻。4.8硫酸溶液：1+1用濃硫酸(4.1)配制。24.9氫氧化鈉溶液：c(NaOH)=2mol/L稱取20.0g氫氧化鈉(4.2),溶解于200ml水中，待溶液冷卻后加水至250ml,混勻。稱取10.0g抗壞血酸溶于適量水中，溶解后加水至100ml,混勻。該溶液貯存在棕色玻璃瓶中，在約4℃可穩(wěn)定兩周。如顏色變黃，則棄去重配。稱取13.0g鉬酸銨溶于適量水中，溶解后加水至100ml,混勻。4.12酒石酸銻氧鉀溶液：p[K(SbO)C?H?O?·1/2H?O]=0.0035g/ml稱取0.35g酒石酸銻氧鉀溶于適量水中，溶解后加水至100ml,混勻。4.13鉬酸鹽溶液在不斷攪拌下，將100ml鉬酸銨溶液(4.11)緩慢加入至已冷卻的300ml硫酸溶液(4.8)中，再加入100ml酒石酸銻氧鉀溶液(4.12),混勻。該溶液貯存在棕色玻璃瓶中，在4℃下可以穩(wěn)定兩個月。4.14磷標準貯備溶液(以P計):p=50.0mg/L稱取0.2197g磷酸二氫鉀(4.5)溶于適量水中，溶解后移入1000ml容量瓶，再加入5ml硫酸溶液(4.8),加水至標線，混勻。該溶液貯存在棕色玻璃瓶中，在4℃下可穩(wěn)定六個月。4.15磷標準工作溶液(以P計):p=5.00mg/L量取25.00ml磷標準貯備溶液(4.14)于250ml容量瓶中，加水至標線，混勻。該溶液臨用時現(xiàn)配。4.162,4-二硝基酚(或2,6-二硝基酚)指示劑：p=0.002g/ml稱取0.2g2,4二硝基酚(或2,6-二硝基酚)溶于適量水中，溶解后加水至100ml,混勻。5儀器和設備5.1分光光度計：配有30mm比色皿。5.2馬弗爐。5.3離心機：2500～3500r/min,配有50ml離心杯。5.4鎳坩堝：容量大于30ml。5.5天平：精度為0.0001g。5.6樣品粉碎設備：土壤粉碎機(或球磨機)。5.7土壤篩：孔徑為1mm、0.149mm(100目)。5.8具塞比色管：50ml。5.9一般實驗室常用儀器和設備。6樣品6.1樣品的采集與保存參照HJ/T166的相關(guān)規(guī)定進行土壤樣品的采集和保存。6.2試樣的制備將采集好的樣品置于風干盤中，攤成2～3cm的薄層，適時地壓碎、翻動，揀出碎石、沙礫、植物殘體。用木棒研壓，然后去雜物，粉碎，充分混勻，通過1mm土壤篩，然后將土樣在牛皮紙上鋪成薄3層，劃分成四分法小方格。用小勺在每個方格中取出等量土樣(總量大于20g),在土壤粉碎機(或球磨機)中進行研磨，使其全部通過0.149mm(100目)土壤篩，混勻后裝入磨口瓶中，備用。7.1試料的制備稱取0.2500g試樣(6.2)于鎳坩堝底部，用幾滴無水乙醇(4.3)濕潤樣品；然后加入2g氫氧化鈉(4.2)平鋪于樣品的表面，將樣品覆蓋，蓋上坩堝蓋；將坩堝放入馬弗爐中升溫，當溫度升至400℃左右時，保持15min;然后繼續(xù)升溫至640℃,保持15min,取出冷卻。再向坩堝中加入10ml水加熱至80℃,待熔塊溶解后，將坩堝內(nèi)的溶液全部轉(zhuǎn)入50ml離心杯中，再用10ml硫酸溶液(4.6)分三3500r/min離心分離10min管中加入2～3滴指示劑(4.16),再用硫酸溶液(4.7)和氫氧化鈉溶液(4.9)調(diào)節(jié)pH值為4.4左右，使溶液剛呈微黃色，再加入1.0ml抗壞血酸溶液(4.10),混勻。30s后加入2.0ml鉬酸鹽溶液(4.13),充分混勻，于20～30℃下放置15min。用30mm比色皿，于700nm波長處，以水為參比，測量吸光7.3測定量取10.0ml(或根據(jù)樣品濃度確定量取體積)試料(7.1)于50ml具塞比色管中，加水至刻度。然后按照與繪制校準曲線(7.2)相同操作步驟進行顯色和測量。不加入土壤試樣，按照與試料的制備(7.1)和測定(7.3)相同操作步驟，進行顯色和測量。8結(jié)果計算與表示土壤中總磷的含量w(mg/kg),按照式(1)進行計算。4A——空白試驗的吸光度值；a——校準曲線的截距；V?——試樣定容體積，ml;b——校準曲線的斜率；Wm——土壤的干物質(zhì)含量(質(zhì)量分數(shù)),%。8.2結(jié)果表示測量結(jié)果保留三位有效數(shù)字。9精密度和準確度9.1精密度5家實驗室分別對28mg/kg、400mg/kg、800mg/kg的樣品進行了測定：實驗室內(nèi)相對標準偏差分%;實驗室間相對標準偏差分別為：8.6%、3.5%、1.4%;重復性限分別為：7.42mg/kg、23.6mg/kg、21.4mg/kg;再現(xiàn)性限分別為：12.6mg/kg、45.4mg/kg、準確度5家實驗室分別對(410±73)mg/kg、(323±69)mg/kg、(492±50)mg/kg了分析測定：相對誤差分別為：8.3%～16.6%、3.1%～10.5%、0.6%～5.5的有證土壤標準樣品進行%,相對誤差最終值分別為：5家實驗室分別對實際樣品進行了加標分析測定，加標量為100μg時，加標回收率分別為：91.2%~103.0%、91.1%～97.3%、90.6%～96.0%,加標回收率最終值分別為：95.1%±9.2%、93.8%±5.6%、10質(zhì)量保證和質(zhì)量控制10.1每批樣品應做空白試驗，其測定結(jié)果應低于方法檢出限。10.2每批樣品應至少測定10%的平行雙樣，樣品數(shù)量少于10個時，應至少測定一個平行雙樣。兩個測定結(jié)果的相對偏差應不超過15%。10.3每批樣品應帶一個中間校核