更辰片研究結(jié)果的總結(jié)及評價

中藥注冊分類8申報資料4對主要研究結(jié)果的總結(jié)及評價(更辰片)課題名稱更辰片研究單位xxxx制藥有限公司申報單位xxxx制藥有限公司聯(lián)系人xxx聯(lián)系方式Tel:Fax:對主要研究結(jié)果的總結(jié)及評價一、工藝研究的試驗資料藥材的分揀去雜質(zhì)及質(zhì)量驗收處方各中藥材，經(jīng)分揀去雜質(zhì)，按中國藥典20xx年版一部有關(guān)規(guī)定檢驗;其余各原輔料藥按中國藥典20xx年版有關(guān)規(guī)定檢驗，符合規(guī)定者備用。配料與摻混符合規(guī)定的藥材根據(jù)生產(chǎn)批量大小，按處方稱量配伍，將提取與粉碎藥材分別摻混，分開放置。粉碎1、鹿茸的粉碎根據(jù)生產(chǎn)工藝需要，將充分干燥的鹿茸用中藥粉碎機粉碎，過100目篩，備用。經(jīng)對三批中試產(chǎn)品粉碎工藝考查，結(jié)果表明常規(guī)粉碎方法即可符合本品生產(chǎn)需要。2、麝香的粉碎因麝香為貴重藥材，且有油潤性，不易粉碎，故將鹿茸細粉與麝香配研，過100目篩，可得合適的細粉。（四）維生素E的包結(jié)工藝選擇由于維生素E為粘稠狀液體，遇光色漸變深，無法直接加入，壓片容易在生產(chǎn)貯存過程中損失并與薄膜衣層反應(yīng)，擬采用倍他環(huán)糊精包結(jié)的方法。根據(jù)文獻報道，倍他環(huán)糊精包結(jié)維生素E的條件多為倍他環(huán)糊精：維生素E=5∶1；包結(jié)溫度60℃；包結(jié)時間：3小時；攪拌速度：200轉(zhuǎn)/分鐘，根據(jù)此條件設(shè)計正交因素水平表按上述正交試驗設(shè)計表條件，取倍他環(huán)糊精，精密稱定，分別設(shè)定攪拌速度、包結(jié)時間、包結(jié)溫度，進行包結(jié)試驗，包結(jié)混合液在4℃下冷藏24小時，濾過，包結(jié)物在60℃干燥，精密稱定重量（W包），在284nm波長處測定吸收度，計算包結(jié)率，結(jié)果見結(jié)果分析表。表1、正交試驗結(jié)果分析表試驗號因素包結(jié)率（%）ABCD12345678911122233312312312312323131212331223172.5482.5890.6491.8986.4685.8184.5283.8780.31K1245.76248.95242.22239.31K2264.16252.91254.78252.91K3248.70256.76261.62266.40R18.47.8119.4027.09結(jié)果表明，D（包結(jié)溫度）是影響包結(jié)率的主要因素，其次C（包結(jié)時間）、A（油：倍他環(huán)糊精）、B（攪拌速度），最佳工藝為A2B3C3D3，即維生素E∶倍他環(huán)糊精=1∶5，攪拌速度：200轉(zhuǎn)/分鐘，包結(jié)時間：3小時，包結(jié)溫度：60℃。正交結(jié)果確證實驗取維生素E兩份，作為確證實驗用樣品，每份10g。分別取50g倍他環(huán)糊精，設(shè)定攪拌速度（200轉(zhuǎn)/分鐘）、包結(jié)時間（3小時）、包結(jié)溫度（60℃），進行包結(jié)試驗，包結(jié)混合液在4℃下冷藏24小時，濾過，包結(jié)物在60℃干燥，精密稱定重量（W包），在284nm波長處測定吸收度，計算包結(jié)率。結(jié)果表明：確證實驗結(jié)果重復(fù)性及穩(wěn)定性均好，與正交表中最優(yōu)者相當，工藝可行。（五）浸膏的制備工藝1、人參浸膏的制備根據(jù)人參中所含的有效成分的理化性質(zhì)，結(jié)合原工藝的提取方法，擬對藥材進行醇提和水提,現(xiàn)對醇提工藝和水工藝提分別進行考察。（1）醇提工藝考察：取人參藥材適當破碎，制備工藝正交試驗用樣品，每次正交試驗樣品100g。取每正交試驗樣品100g，依正交因素水平表設(shè)計的加醇量，提取時間，乙醇濃度，分別提取，放冷，濾過，合并煎液，濃縮，干燥至恒重，以干膏中人參皂苷Rg1和Re的總量作為評價指標。表2、正交試驗結(jié)果分析表試驗號因素評價指標A（倍）B（小時）C（%）干膏量(g)人參皂苷Rg1和Re含量(mg/g)12345678977755533334534534595%70%50%70%50%95%50%95%70%6.57.48.06.77.66.15.95.25.420.7424.0720.2223.3318.4520.3420.1120.7527.96134.81178.12161.76156.31140.22124.07118.65107.90150.98K1474.69409.77366.78K2420.60426.24485.41K3377.53436.81420.63R97.1627.04118.63由極差分析結(jié)果可得出，其中因素C（乙醇濃度）為顯著因素，其次為A(溶劑量)，而B（提取時間）影響最小，即C>A>B。最優(yōu)條件為A1B3C2；由于A1和A2；B1和B2相差不大，考慮到能源及時間因素，確定提取工藝為5倍溶劑量，70%乙醇回流提取4小時。正交結(jié)果確證實驗取人參藥材兩份，作為確證實驗用藥材，每份100g。分別置燒瓶中，加70%乙醇500ml，回流4小時，濾過，濃縮，干燥至恒重。以干膏中人參皂苷Rg1和Re的總量作為評價指標。結(jié)果表明：確證實驗結(jié)果重復(fù)性及穩(wěn)定性均好，與正交表中最優(yōu)者相當，工藝可行。（2）水提工藝考察：取醇提后人參藥渣，平均分成9份，作為水提工藝考察用樣品。取每正交試驗用樣品，依正交因素水平表設(shè)計的加水量，提取次數(shù)，提取時間，分別提取，放冷，濾過，合并煎液，濃縮，干燥至恒重，以干膏量作為評價指標。表3、正交試驗結(jié)果分析試驗號因素評價指標A（倍）B（次）C（小時）干膏量(g)12345678955544433332132132132121313214.813.28.911.712.711.112.111.79.3K136.9038.6037.60K235.5037.6034.20K333.1029.3033.70R3.89.33.9由極差分析結(jié)果可得出，其中因素B(提取次數(shù))為顯著因素，其次為A（溶劑量），而C（提取時間）影響最小，即B>A>C。最優(yōu)條件為A1B1C1；考慮到時間因素及實際生產(chǎn)因素，確定提取工藝為4倍量水，提取二次，第一次3小時，第二次2小時。正交結(jié)果確證實驗取人參藥材適當破碎，稱取兩份，每份100g。作為確證實驗用樣品。分別置燒瓶中，加水400ml，提取二次，第一次3小時，第二次2小時，濾過，合并濾液，濃縮，干燥至恒重。以干膏量作為評價指標。結(jié)果表明：確證實驗結(jié)果重復(fù)性及穩(wěn)定性均好，與正交表中最優(yōu)者相當，工藝可行。2、肉蓯蓉浸膏的制備根據(jù)肉蓯蓉中所含的有效成分的理化性質(zhì)，結(jié)合原工藝的提取方法，擬選用水作為提取溶劑，以干膏作為評價指標。取肉蓯蓉藥材適當破碎，制備正交樣品。每正交試驗樣品重100g，依正交因素水平表設(shè)計的加水量，提取次數(shù)，提取時間，分別提取，放冷，濾過，合并煎液，靜置，取上清液濃縮，干燥至恒重，以干膏量作為評價指標。表4、正交試驗結(jié)果分析試驗號因素評價指標A（倍）B（次）C（小時）干膏量(g)12345678910101088866632132132132121313226.121.516.620.916.114.315.613.79.2K164.262.654.1K251.351.351.6K338.540.148.3R25.722.55.8由極差分析結(jié)果可得出，其中因素A（溶劑量）為顯著因素，其次為B(提取次數(shù))，而C（提取時間）影響最小，即A>B>C。最優(yōu)條件為A1B1C1；由于C1和C2差別不大，考慮到時間因素及實際生產(chǎn)因素，確定提取工藝為10倍量水煎煮三次，每次2小時。正交結(jié)果確證實驗取肉蓯蓉藥材，稱取兩份，每份100g。作為確證實驗用藥材。加水1000ml，煎煮三次，每次2小時，濾過，合并濾液，濃縮，再置烘箱中80℃干燥至恒重。以干膏量作為評價指標。結(jié)果表明：確證實驗結(jié)果重復(fù)性及穩(wěn)定性均好，與正交表中最優(yōu)者相當，工藝可行。3、淫羊藿浸膏的制備根據(jù)淫羊藿中所含的有效成分的理化性質(zhì)，結(jié)合原工藝的提取方法，擬選用水作為提取溶劑，以淫羊藿苷作為評價指標。取淫羊藿藥材適當粉碎，制備正交樣品。取每正交試驗樣品100g，依正交因素水平表設(shè)計的加水量，提取次數(shù)，提取時間，分別提取，放冷，濾過，合并煎液，靜置，取上清液濃縮，干燥至恒重，以干膏中的淫羊藿苷作為評價指標。二、質(zhì)量研究的試驗資料及文獻資料更辰膠囊收載于國家藥品監(jiān)督管理局《國家中成藥標準匯編》（中成藥地方標準上升國家標準部分外科婦科分冊），更辰片是根據(jù)更辰膠囊改變劑型的中藥8類新藥（減免臨床研究），為了實施更辰片的質(zhì)量標準研究，將成型工藝中制備的樣品（批號：xx0223）用于質(zhì)量標準研究，現(xiàn)將質(zhì)量標準起草說明報告如下：【名稱】更辰片【處方】除輔料外，與原劑型標準一致。【制法】除成型工藝外，與原劑型標準一致。【性狀】以三批中試產(chǎn)品的實際性狀描述?！捐b別】(1)為維生素E的理化鑒別，三批中試產(chǎn)品均呈正反應(yīng)。與原劑型標準一致。（2）為本品中人參的薄層鑒別，經(jīng)與人參對照藥材；缺人參陰性對照樣品對照，斑點顯色清晰，Rf值適宜，專屬性強。予以采用。本鑒別項與原劑型標準一致。（3）原劑型中有淫羊藿苷的薄層鑒別，因含量測定項下測定的就是淫羊藿苷，故撤消該薄層鑒別項?！緳z查】依照《中國藥典》20xx年版一部附錄(ⅠD)的有關(guān)規(guī)定對三批中試產(chǎn)品檢查，均符合藥典有關(guān)規(guī)定。此項與藥典要求一致。重金屬三批中試產(chǎn)品重金屬均低于百萬分之五，暫不設(shè)定重金屬檢查項。砷鹽檢查三批中試產(chǎn)品砷鹽均低于百萬分之二，暫不設(shè)定砷鹽檢查項?！疚⑸餀z查】依《中國藥典》20xx年版一部附錄（ⅩⅢC）的有關(guān)規(guī)定對三批中試產(chǎn)品檢查，均符合藥典有關(guān)規(guī)定。此項是根據(jù)《中國藥典》20xx年版一部與歷版藥典的不同而增加的?！竞繙y定】采用高效液相色譜法（中國藥典20xx年版一部附錄VID）測定。原劑型標準收載了本品淫羊藿中淫羊藿苷的含量測定方法，經(jīng)驗證，原方法樣品制備合理，且峰形對稱，分離度好，陰性無干擾，故采用原標準收載的方法作為含量測定方法。標準曲線:取淫羊藿苷對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1ml含304μg的溶液。以304μg/ml的對照品溶液為母液，分別配制成152μg/ml、121.6μg/ml、76μg/ml、38μg/ml的對照品溶液。分別精密吸取上述各對照品溶液10μl,注入液相色譜儀,測定,計算，即得?；貧w曲線為Y(峰面積)=19.6895X(濃度)+54.5582r=0.9997線性范圍為38～304μg/ml,標準曲線近似過圓點,采用外標一點法定量。供試品溶液制備方法的選擇：1.取重量差異項下本品，除去薄膜衣，研細，取2.5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入70%乙醇50ml，稱定重量，加熱回流1小時，放冷，再稱定重量，用70%乙醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。2.取重量差異項下本品，除去薄膜衣，研細，取2.5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入70%乙醇50ml，稱定重量，超聲處理（功率250W，頻率20KHz）45分鐘，放冷，再稱定重量，用70%乙醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。經(jīng)試驗方法①與方法②比較，結(jié)果基本相同，且方法②簡單，故采用此方法制備供試品。精密度同一樣品連續(xù)進樣測定5次，相對標準偏差為1.15%,小于3.0%。穩(wěn)定性同一樣品,制備后在30分鐘、1小時、6小時、12小時、24小時后分別測定，相對標準偏差為2.42%，小于5.0%,樣品放置24小時內(nèi)穩(wěn)定。重現(xiàn)性同一樣品，取5份，各約2.5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入70%乙醇50ml，稱定重量，超聲處理（功率250W，頻率20KHz）45分鐘，放冷，再稱定重量，用70%乙醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，作為供試品溶液。分別精密吸取上述供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，相對標準偏差為2.03%，小于5.0%。加樣回收率取已知含量的樣品5份，各約2.5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入每1ml含淫羊藿苷對照品1.02mg的對照品溶液5ml，水浴蒸干。精密加入70%乙醇50ml，稱定重量，超聲處理（功率250W，頻率20KHz）45分鐘，放冷，再稱定重量，用70%乙醇補足減失的重量，搖勻，微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液，作為供試品溶液。取上述供試品溶液各10μl,注入液相色譜儀，測定,平均回收率為98.8%。樣品測定對三批中試產(chǎn)品，采用原標準的含量測定方法測定，其結(jié)果如下：【含量測定】照高效液相色譜法（中國藥典20xx年版一部附錄VID）測定。色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈-水（30：70）為流動相；檢測波長為270nm。理論板數(shù)按淫羊藿苷峰計算應(yīng)不低于20xx。對照品溶液的制備精密稱取在105℃干燥至恒重的淫羊藿苷對照品，加甲醇制成每1ml含100μg的溶液，即得。供試品溶液的制備取重量差異項下本品，除去薄膜衣，研細，取2.5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入70%乙醇50ml，稱定重量，超聲處理（功率250W，頻率20KHz）45分鐘，放冷，再稱定重量，用70%乙醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，即得。原劑型標準膠囊每粒0.2g，規(guī)定每粒含淫羊藿以淫羊藿苷（C33H40O15）計，不得少于0.13mg。新標準片基片每片重0.2