蛋白質(zhì)的提取和分離練習題

\o"點擊文章標題可訪問原文章鏈接"蛋白質(zhì)的提取和分離練習題【基礎(chǔ)達標】

1．選用豬、牛、羊成熟的紅細胞作分離蛋白質(zhì)的實驗材料,下列是其優(yōu)點的是（）

A.血紅蛋白是無色蛋白

B.紅細胞有細胞核

C.紅細胞蛋白質(zhì)含量高

D.紅細胞DNA含量高

【答案】C

【解析】

哺乳動物成熟的紅細胞沒有細胞核,核物質(zhì)也消失,所以紅細胞內(nèi)幾乎沒有DNA；血紅蛋白是有色蛋白，紅細胞蛋白質(zhì)含量高。故選C。

2．血紅蛋白釋放時，紅細胞破裂的原因不包括（）

A.紅細胞吸水膨脹

B.磁力攪拌器的充分攪拌

C.血紅蛋白變性

D.甲苯對細胞膜的溶解

【答案】C

【解析】

血紅蛋白釋放時，紅細胞破裂的原因是紅細胞吸水膨脹、甲苯對細胞膜的溶解、磁力攪拌器的充分攪拌等，血紅蛋白不會變性。故選C。

3．蛋白質(zhì)分離和提取的步驟可分為（）

A.樣品處理、凝膠色譜操作、SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳

B.樣品處理、凝膠色譜操作、純化

C.樣品處理、粗分離、純化、純度鑒定

D.樣品處理、純化、粗分離、純度鑒定

【答案】C

【解析】

蛋白質(zhì)的提取和分離分為樣品處理、粗分離、純化、純度鑒定四步。故選C。

4．將攪拌好的混合液離心來分離血紅蛋白溶液時，第2層是（）

A.甲苯

B.血紅蛋白水溶液

C.脂溶性物質(zhì)的沉淀層

D.其他雜質(zhì)的沉淀

【答案】C

【解析】

A項錯誤：甲苯層位于第1層；

B項錯誤：血紅蛋白水溶液位于第3層；

C項正確：第2層是脂溶性物質(zhì)的沉淀層；

D項錯誤：其他雜質(zhì)的沉淀物位于第4層。

5．下列有關(guān)提取和分離血紅蛋白的程序敘述錯誤的是（）

A.樣品處理就是通過一系列操作收集到血紅蛋白溶液

B.通過透析可以去除樣品中分子質(zhì)量較大的雜質(zhì),此為樣品的粗提取

C.可通過凝膠色譜法將相對分子質(zhì)量大的雜質(zhì)蛋白除去,即樣品的純化

D.可通過SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定血紅蛋白的純度

【答案】B

A項正確：樣品處理是洗滌紅細胞,使血紅蛋白釋放出來,通過離心法得到血紅蛋白溶液；

B項錯誤：透析的原理是透析袋能使小分子物質(zhì)自由進出,而袋內(nèi)的大分子物質(zhì)留在袋內(nèi)即可除去樣品中相對分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)；

C項正確:凝膠色譜法中的凝膠內(nèi)部通道只允許相對分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)通過,而相對分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)則被排阻在凝膠顆粒之外，即達到樣品純化的目的；

D項正確：判斷純化的蛋白質(zhì)是否達到要求,通常用SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳法對蛋白質(zhì)的純度進行鑒定。

【能力提升】

1．在血紅蛋白分離過程中,如果紅色區(qū)帶歪曲、散亂、變寬,與其有關(guān)的是（）

A.血紅蛋白釋放

B.色譜柱的裝填

C.洗脫過程

D.樣品的處理

【答案】B

【解析】

如果凝膠色譜柱裝填得很成功、分離操作也正確的話,能清楚地看到血紅蛋白的紅色區(qū)帶均勻、狹窄、平整,隨著洗脫液緩慢流出；如果紅色區(qū)帶歪曲、散亂、變寬,說明分離的效果不好,這與凝膠色譜柱的裝填有關(guān)。故選B。

2．下列關(guān)于電泳的說法,不正確的是（）

A.電泳是指帶電粒子在電場的作用下發(fā)生遷移的過程

B.帶電分子會向著與其所帶電荷相反的電極移動

C.蛋白質(zhì)在聚丙烯酰胺凝膠中的遷移率取決于它所帶凈電荷的多少

D.用SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳,蛋白質(zhì)的電泳遷移率完全取決于分子的大小

【答案】C

A項正確：電泳是指帶電粒子在電場的作用下發(fā)生遷移的過程；

B項正確：許多重要的生物大分子，如多肽、核酸等都具有可解離的基團，在一定的pH下，這些基團會帶上正電或負電，在電場的作用下，這些帶電分子會向著與其所帶電荷相反的電極移動；

C項錯誤：蛋白質(zhì)在聚丙烯酰胺凝膠中的遷移率取決于它所帶凈電荷的多少及分子大小等因素；

D項正確：SDS能與各種蛋白質(zhì)形成蛋白質(zhì)—SDS復合物,SDS所帶負電荷的量大大超過了蛋白質(zhì)分子原有的電荷量,因而掩蓋了不同種蛋白質(zhì)間的電荷差異,使電泳遷移率完全取決于分子的大小。

3．蛋白質(zhì)的分離與純化是蛋白質(zhì)研究的重要技術(shù)。下列有關(guān)敘述不正確的是（）

A.根據(jù)蛋白質(zhì)分子不能透過半透膜的特性,可將樣品中各種不同的蛋白質(zhì)分離

B.根據(jù)蛋白質(zhì)所帶電荷性質(zhì)的差異及分子大小等,可通過電泳法分離蛋白質(zhì)

C.根據(jù)蛋白質(zhì)相對分子質(zhì)量的大小,可通過凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)

D.根據(jù)蛋白質(zhì)的分子大小、密度不同,可通過離心沉降法分離蛋白質(zhì)

【答案】A

A項錯誤：蛋白質(zhì)分子是生物大分子,都不能通過半透膜,因此不能利用半透膜分離蛋白質(zhì)；

B項正確：蛋白質(zhì)分子所帶電荷性質(zhì)的差異及分子大小可以使蛋白質(zhì)分子在電場中獲得不同的遷移速度,因此可以利用電泳法分離蛋白質(zhì)；

C項正確：蛋白質(zhì)相對分子質(zhì)量的大小不同,通過凝膠柱的時間不同,可通過凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)；

D項正確：蛋白質(zhì)的分子大小、密度不同,具有不同的離心力,可通過離心沉降法分離蛋白質(zhì)。

4．在蛋白質(zhì)的提取和分離中,關(guān)于對樣品處理過程,分析無誤的是（）

A.洗滌紅細胞的目的是去除血漿中的葡萄糖、無機鹽

B.洗滌時離心速度過小,時間過短,白細胞等會沉淀,達不到分離的效果

C.洗滌過程選用質(zhì)量分數(shù)為0.1%的生理鹽水

D.透析的目的是去除樣品中相對分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)

【答案】D

【解析】

A項錯誤：洗滌紅細胞的目的是去除雜蛋白；

B項錯誤：洗滌時離心速度過高,時間過長,會使白細胞等一同沉淀,達不到分離的效果；

C項錯誤：洗滌紅細胞選用0.9%的生理鹽水；

D項正確：透析的目的是去除樣品中相對分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)。5．凝膠色譜柱取長為40cm,內(nèi)徑為1.6cm,有關(guān)說法中,不正確的是（）

A.一般凝膠色譜柱直徑的大小不會影響分離的效果

B.凝膠色譜柱過高,超過1m,不影響分離的效果

C.凝膠色譜柱過矮,則影響混合物的分離度

D.凝膠色譜柱直徑過大會耗用過多洗脫液,樣品的稀釋度過大

【答案】B

【解析】

一般凝膠色譜柱直徑的大小不影響分離的效果,但是直徑過大會造成洗脫液體積增大,樣品的稀釋度過大,因此應選擇直徑不超過2cm的色譜柱。凝膠色譜柱的高度與分離度有關(guān),一般不超過1m。故選B。

【終極闖關(guān)】

1、（2015年廣東省三校聯(lián)考）下列有關(guān)紅細胞的敘述，正確的是（）

A.雞的紅細胞中不含DNA分子

B.通過差速離心法可以從牛成熟紅細胞中分離各種細胞器

C.蛙的紅細胞無絲分裂過程中沒有染色體的復制

D.從紅細胞中提取血紅蛋白過程洗滌的目的是去除雜蛋白

【答案】D

【解析】

雞屬于鳥類，紅細胞中含DNA分子，A項錯誤；

牛屬于哺乳動物，其成熟的紅細胞中沒有各種細胞器，B項錯誤；

無絲分裂有染色體的復制和細胞核的分裂，C項錯誤；

提取血紅蛋白過程洗滌的目的是去除雜蛋白，D項正確。

2．（2015年四川省雅安中學月考）下圖是用除去DNA的濾液進行血紅蛋白的提取和分離實驗的裝置，下列有關(guān)敘述不正確是（）

A．首先用圖甲裝置對濾液進行處理，其目的是去除相對分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)

B．圖乙裝置的試管中收集到的液體中最先出現(xiàn)的是相對分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)

C．用圖乙裝置分離血紅蛋白時，待紅色的蛋白質(zhì)接近色譜柱底端時，用試管收集流出液，每管收集5mL，連續(xù)收集

D．圖丙裝置中電泳法分離提純血紅蛋白的原理是血紅蛋白帶有一定量的電荷，在電場的作用下向一極移動

【答案】B

透析袋是一種半透膜，小分子能自由進出，大分子保留在袋內(nèi)，可去除樣品分子量較小的雜質(zhì)，A正確；

凝膠色譜法最先出現(xiàn)的是相對分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)，B錯誤；

用圖乙裝置分離血紅蛋白時，待紅色的蛋白質(zhì)接近色譜柱底端時，用試管收集流出液，每管收集5mL，連續(xù)收集，C正確；

圖丙裝置中電泳法分離提純血紅蛋白的原理是血紅蛋白帶有一定量的電荷，在電場的作用下向一極移動，D正確。3．（2015屆廣東省江門市高三3月模擬考試生物試卷）下列關(guān)于分離技術(shù)或方法的敘述，錯誤的是（）

A.將細胞勻漿放入離心管中進行差速離心可分離各種細胞器

B.用含有剛果紅的培養(yǎng)基可分離出能分解尿素的微生物

C.利用DNA和其它雜質(zhì)在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同的特性分離出DNA

D.使用凝膠色譜法可以分離不同相對分子質(zhì)量的蛋白質(zhì)

【答案】B

【解析】

分離各種細胞器的常用方法是差速離心法，A項正確；

加入酚紅指示劑可用來鑒定分解尿素的細菌，B項錯誤；

利用DNA和蛋白質(zhì)等其它成分在不同濃度的NaCl溶液中的溶解度不同，利用這一特性，選擇適當?shù)柠}濃度可分離出DNA，C項正確；

凝膠色譜法，是根據(jù)相對分子質(zhì)量的大小分離蛋白質(zhì)的有效方法，D項正確。

4．（2015屆江西南昌二中高三月考）可以利用哺乳動物成熟的紅細胞為實驗材料進行的實驗有（）

①制備較純凈的細胞膜

②運用差速離心法分離各種細胞器

③DNA的粗提取

④分離并純化血紅蛋白

⑤制成細胞懸浮液進行細胞培養(yǎng)

A．②③B．③⑤

C．①④D．④⑤

【答案】C

哺乳動物成熟的紅細胞無細胞核和眾多的細胞器，因此制備較純凈的細胞膜使用哺乳動物成熟的紅細胞為原料最好，故①正確；

由于哺乳動物成熟的紅細胞沒有細胞器，故②錯誤；

由于哺乳動物成熟的紅細胞無細胞核，沒有DNA分子，故③錯誤；

哺乳動物成熟的紅細胞中含有血紅蛋白，故④正確；

哺乳動物成熟的紅細胞無細胞核，不能進行分裂，故⑤錯誤。

綜上所述，故C正確。

5、（2011廣東卷）以下關(guān)于豬血紅蛋白提純的描述,不正確的是（）

A.洗滌紅細胞時,使用生理鹽水可防止紅細胞破裂

B.豬成熟紅細胞中缺少細胞器和細胞核,提純時雜蛋白較少

C.血紅蛋白的顏色可用于凝膠色譜法分離過程的監(jiān)測

D