化妝品中限用組分二氨基嘧啶氧化物的測(cè)定 高效液相色譜法-編制說(shuō)明

一、工作簡(jiǎn)況

1.任務(wù)來(lái)源

本標(biāo)準(zhǔn)根據(jù)國(guó)標(biāo)委發(fā)[2021]23號(hào)《國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)關(guān)于下達(dá)2021年第二

批推薦性國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)計(jì)劃及相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)外文版計(jì)劃的通知》立項(xiàng)，項(xiàng)目名稱(chēng)《化妝品中

限用組分二氨基嘧啶氧化物的測(cè)定高效液相色譜法》，項(xiàng)目編號(hào)為20213439-T-607。

主要起草單位：蘇州世譜檢測(cè)技術(shù)有限公司、蘇州質(zhì)量檢測(cè)科學(xué)研究院、廣州質(zhì)量

檢測(cè)研究院、上海市日用化學(xué)工業(yè)研究所（國(guó)家香料香精化妝品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)中心）

等。項(xiàng)目周期24個(gè)月，計(jì)劃應(yīng)完成時(shí)間2023年。

2.主要工作過(guò)程

起草階段：

a)2021年09月-2021年12月，成立標(biāo)準(zhǔn)制定工作組。根據(jù)國(guó)標(biāo)委發(fā)[2021]23

號(hào)下達(dá)的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)制修訂計(jì)劃任務(wù)的通知，項(xiàng)目承擔(dān)單位組建了標(biāo)準(zhǔn)編制工作小組，

查詢(xún)、收集和認(rèn)真研究國(guó)內(nèi)外標(biāo)準(zhǔn)及相關(guān)資料，并結(jié)合實(shí)驗(yàn)室的條件、化妝品基質(zhì)

特性和方法技術(shù)特點(diǎn)，初步設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)方案。

b)2022年1月-2023年03月，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究工作，優(yōu)化確定儀器檢測(cè)條件，優(yōu)

化確定不同基質(zhì)化妝品產(chǎn)品的提取、凈化條件，考察和論證方法的靈敏度、準(zhǔn)確性、

線性范圍和適用性，并組織單位進(jìn)行方法驗(yàn)證；編寫(xiě)標(biāo)準(zhǔn)征求意見(jiàn)稿和編制說(shuō)明。

3.主要參加單位和工作組成員等

本標(biāo)準(zhǔn)由全國(guó)香料香精化妝品標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)（SAC/TC257）歸口。

本標(biāo)準(zhǔn)由蘇蘇州世譜檢測(cè)技術(shù)有限公司、蘇州質(zhì)量檢測(cè)科學(xué)研究院、廣州質(zhì)量

檢測(cè)研究院、上海市日用化學(xué)工業(yè)研究所（國(guó)家香料香精化妝品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)中心）

等負(fù)責(zé)聯(lián)合起草。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：×××。

二、標(biāo)準(zhǔn)編制原則和主要內(nèi)容

1.標(biāo)準(zhǔn)編制原則

1

本標(biāo)準(zhǔn)遵循GB/T1.1-2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和

起草規(guī)則》和GB/T20001.4-2015《標(biāo)準(zhǔn)編寫(xiě)規(guī)則第4部分：試驗(yàn)方法標(biāo)準(zhǔn)》的編

寫(xiě)規(guī)則，并參考了國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局發(fā)布的《化妝品中禁用物質(zhì)和限用物

質(zhì)檢測(cè)方法驗(yàn)證技術(shù)規(guī)范》。

2.標(biāo)準(zhǔn)研制背景

化妝品作為人們?nèi)粘Ｉ畹谋匦杵罚恢笔艿酱蠹业年P(guān)注。隨著經(jīng)濟(jì)的飛速發(fā)

展，生活水平不斷提高，人們的消費(fèi)能力逐漸增強(qiáng)，對(duì)護(hù)理產(chǎn)品的功效也提出了更

高的要求。

二氨基嘧啶氧化物常用于發(fā)用產(chǎn)品中，能抑制毛乳頭內(nèi)膠原地堆積和硬化，防

止毛囊堵塞，保證頭發(fā)充分吸收營(yíng)養(yǎng)，健康生長(zhǎng)，防止因其“窒息”而過(guò)早脫落，

延長(zhǎng)頭發(fā)生命，對(duì)改善脫發(fā)有非常顯著的效果。為了使消費(fèi)者在使用產(chǎn)品后能夠迅

速達(dá)到效果，一些廠商可能會(huì)在其產(chǎn)品中添加過(guò)量的二氨基嘧啶氧化物，因此我國(guó)

《化妝品安全技術(shù)規(guī)范》（2015年版）中明確規(guī)定二氨基嘧啶氧化物在發(fā)用產(chǎn)品中

的最大使用限量為1.5%。因此，制訂化妝品中二氨基嘧啶氧化物的檢測(cè)方法標(biāo)準(zhǔn)，

有助于填補(bǔ)國(guó)內(nèi)相關(guān)領(lǐng)域檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)的空白，健全化妝品中禁限用原料檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)體系，

為政府部門(mén)對(duì)國(guó)內(nèi)化妝品生產(chǎn)、銷(xiāo)售市場(chǎng)的監(jiān)管提供技術(shù)支撐，有效打擊不法企業(yè)，

規(guī)范市場(chǎng)良性競(jìng)爭(zhēng)，解決國(guó)內(nèi)化妝品質(zhì)量存在嚴(yán)重的隱患問(wèn)題，提高我國(guó)化妝品質(zhì)

量水平，切實(shí)保障消費(fèi)者的健康安全和權(quán)益。

目前對(duì)于化妝品中二氨基嘧啶氧化物的測(cè)定還缺乏統(tǒng)一的國(guó)家檢測(cè)方法標(biāo)準(zhǔn)，

也無(wú)相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道。因此研究相關(guān)的檢測(cè)技術(shù)是十分有必要的。本標(biāo)準(zhǔn)采用高效液

相色譜技術(shù)，建立化妝品中二氨基嘧啶氧化物含量的高效液相色譜法，為生產(chǎn)企業(yè)

提供質(zhì)量監(jiān)控方法，主管部門(mén)加強(qiáng)對(duì)化妝品的監(jiān)管提供必要的技術(shù)支持。

3.標(biāo)準(zhǔn)的技術(shù)路線和確定依據(jù)

3.1主要技術(shù)路線

稱(chēng)取1g（精確至0.001g）試樣，置于50mL離心管中，準(zhǔn)確加入20mL10%

甲醇溶液，渦旋混合混勻，超聲5min。然后加入10mL正己烷溶液，渦旋振蕩1min，

4000r/min離心5min，下層清液經(jīng)濾膜過(guò)濾后供高效液相色譜儀測(cè)定。

3.2標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)信息

2

二氨基嘧啶氧化物的結(jié)構(gòu)式如圖1所示，標(biāo)準(zhǔn)品信息可見(jiàn)表1。

圖1二氨基嘧啶氧化物的結(jié)構(gòu)式

表1標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)信息

化合物英文名稱(chēng)CAS號(hào)分子式分子量來(lái)源

二氨基嘧啶2,4-Diamino-pyrimidine-3

74638-76-9CHNO126.12Sigma

氧化物-oxide464

3.3高效液相色譜參數(shù)的選擇與優(yōu)化

3.3.1高效液相色譜參數(shù)的選擇與優(yōu)化

3.3.1.1二氨基嘧啶氧化物的紫外吸收光譜

選用配備二極管陣列檢測(cè)器的高效液相色譜儀（HPLC）進(jìn)行測(cè)定，紫外光譜

圖有助于目標(biāo)物的定性。配制20mg/L的二氨基嘧啶氧化物標(biāo)準(zhǔn)溶液，HPLC檢測(cè)

后獲得其紫外光譜圖如圖2所示。二氨基嘧啶氧化物在200-310nm之間存在紫外吸

收，且含有2個(gè)紫外吸收峰，分別為223.7nm和287.4nm，由于223.7nm吸收波

長(zhǎng)較短，在檢測(cè)過(guò)程中易被干擾，因此在287.4nm檢測(cè)靈敏度滿(mǎn)足檢測(cè)需求的前提

下，選擇了287nm作為檢測(cè)波長(zhǎng)。

3

圖2二氨基嘧啶氧化物紫外光譜圖

3.3.1.2色譜柱的選擇

試驗(yàn)以甲醇/水=10：90為流動(dòng)相，考察了實(shí)驗(yàn)室最常用的C18（250mm×4.6mm，

5μm）色譜柱對(duì)化妝品中的二氨基嘧啶氧化物的分離效果。結(jié)果發(fā)現(xiàn)二氨基嘧啶氧

化物保留很差（見(jiàn)圖3），出峰時(shí)間較短，在2.9min，可能是由于二氨基嘧啶氧化

物極性較大導(dǎo)致。為了增加二氨基嘧啶氧化物的保留，減少樣品中雜質(zhì)干擾，試驗(yàn)

選擇了耐高比例水相，對(duì)有機(jī)酸、縮氨酸、核苷和水溶性維生素等強(qiáng)極性化合物保

留較好的AQC18色譜柱（250mm×4.6mm，5μm）進(jìn)行分離，結(jié)果發(fā)現(xiàn)二氨基嘧

啶氧化物出峰時(shí)間延長(zhǎng)至5.0min（見(jiàn)圖4），且色譜峰尖銳，半峰寬較窄。因此選

用AQC18色譜柱作為本實(shí)驗(yàn)的色譜柱。

4

圖3二氨基嘧啶氧化物在常規(guī)C18色譜柱分離效果

圖4二氨基嘧啶氧化物在AQC18色譜柱分離效果

3.3.1.3流動(dòng)相組成的選擇

選擇AQC18色譜柱（250mm×4.6mm，5μm），考察流動(dòng)相對(duì)二氨基嘧啶氧

化物的分離效果。首先比較甲醇或乙腈為有機(jī)相流動(dòng)相時(shí)的分離效果，有機(jī)相/水相

=10/90時(shí)，以甲醇/水作為流動(dòng)相的色譜峰保留時(shí)間較長(zhǎng)為5.0min，乙腈/水為流動(dòng)

相的保留時(shí)間為4.2min（見(jiàn)圖5和圖7），且甲醇/水作為流動(dòng)相的色譜峰峰形相對(duì)

尖銳，半峰寬窄。

實(shí)驗(yàn)又比較了流動(dòng)相中不同甲醇比例的分離效果，對(duì)比甲醇/水=10：90和甲醇

5

/水=20：80的分離結(jié)果（見(jiàn)圖6和圖7），發(fā)現(xiàn)當(dāng)有機(jī)相比例達(dá)到20%時(shí)，保留時(shí)

間大幅縮短至2.9min，化合物洗脫較快，容易受到樣品中雜質(zhì)干擾。最終選擇甲醇

/水-10：90為流動(dòng)相，等度洗脫。

圖5乙腈/水=10：90為流動(dòng)相時(shí)，二氨基嘧啶氧化物出峰色譜圖

圖6甲醇/水=20：80為流動(dòng)相時(shí)，二氨基嘧啶氧化物出峰色譜圖

6

圖7甲醇/水=10：90為流動(dòng)相時(shí)，二氨基嘧啶氧化物出峰色譜圖

3.3.1.4最終確定的高效液相色譜參數(shù)

a)色譜柱：AQC18柱，5μm，250mm×4.6mm，或性能相當(dāng)者；

b)流動(dòng)相：甲醇（5.2）：水=9：1；

c)流速：0.8mL/min；

d)柱溫：25℃；

e)波長(zhǎng)：287nm；

f)進(jìn)樣量：10μL。

3.4前處理?xiàng)l件的選擇與優(yōu)化

3.4.1前處理?xiàng)l件

由于發(fā)用化妝品多以水劑、乳液、膏霜類(lèi)化妝品存在，且化妝品原料成分復(fù)雜，

部分化妝品的原料多達(dá)40余種，為盡量減少操作步驟和獲得盡可能高的提取效率，

實(shí)驗(yàn)首先選取水劑、乳液、膏霜類(lèi)為代表性基質(zhì)采用混合有機(jī)溶劑直接超聲提取。

由于二氨基嘧啶氧化物在水和甲醇中溶解性良好，在乙腈中溶解度略差，實(shí)驗(yàn)選取

甲醇/水混合溶劑進(jìn)行提取。為系統(tǒng)研究不同比例甲醇水對(duì)化妝品中二氨基嘧啶氧化

物的提取效果，選取水劑、乳液、膏霜3種空白基質(zhì)加標(biāo)，制得含二氨基嘧啶氧化

物0.5g/kg的試樣，分別考察水、10%甲醇水（初始流動(dòng)相）、20%甲醇水、50%甲

醇水、80%甲醇水和甲醇共6種溶劑的提取效果（表2）。

7

表2不同比例混合溶劑對(duì)水劑、乳液、膏霜類(lèi)化妝品中二氨基嘧啶氧化物的提取效果

基質(zhì)提取率（%）

類(lèi)型水10%甲醇水20%甲醇水50%甲醇水80%甲醇水甲醇

水劑88.7101.6102.690.993.596.2

乳液79.687.192.789.585.885.0

膏霜80.793.4102.789.194.789.5

從表2可以看出，水、10%甲醇水（初始流動(dòng)相）、20%甲醇水、50%甲醇水、

80%甲醇水和甲醇對(duì)水劑、乳液和膏霜化妝品中提取回收率均大于80%，這可能是

由于二氨基嘧啶氧化物極性大，在極性溶劑中的提取率較高導(dǎo)致。但是，有機(jī)相比

例高時(shí)，容易引起溶劑效應(yīng)，導(dǎo)致色譜峰前延和保留時(shí)間提前，因此，實(shí)驗(yàn)中最終

選取初始流動(dòng)相比例，即甲醇/水-10：90為混合提取溶劑。

3.4.2超聲提取時(shí)間的設(shè)置

本實(shí)驗(yàn)考察了超聲時(shí)間對(duì)提取率的影響，并進(jìn)行了優(yōu)化，通過(guò)加標(biāo)濃度為

0.5g/kg的乳液和膏霜樣品，分別考察超聲功率為250W時(shí)，超聲1min、5min、10

min、15min、20min、30min對(duì)提取率的影響。試驗(yàn)結(jié)果如表3所示，超聲5min

之后，回收率未有明顯變化，表明超聲5min已提取充分，因此，本實(shí)驗(yàn)選擇超聲

5min。

表3不同超聲時(shí)間對(duì)化妝品中二氨基嘧啶氧化物的提取效果

超聲時(shí)間/min1510152025

乳液樣品提取率/%70.790.892.990.391.889.7

膏霜樣品提取率/%69.491.786.290.391.795.4

3.4.3凈化條件優(yōu)化

由于乳液、膏霜類(lèi)的發(fā)用化妝品中含有大量脂溶性物質(zhì)和大量表面活性劑，這

些物質(zhì)在提取過(guò)程中不僅會(huì)干擾甲醇水溶液的提取效果，出現(xiàn)乳化現(xiàn)象，還會(huì)干擾

目標(biāo)化合物分離效果。為了避免此現(xiàn)象，需對(duì)提取液進(jìn)行進(jìn)化，目前文獻(xiàn)報(bào)道中分

析檢測(cè)前處理中選擇的凈化方式有3種，正己烷（石油醚）凈化、HLB固相萃取柱

凈化和低溫離心凈化。實(shí)驗(yàn)對(duì)比了3種凈化方式，由于化妝品中含有大量表面活性

劑，使用固相萃取柱凈化時(shí)，經(jīng)常堵塞萃取柱，操作較復(fù)雜，且回收率不穩(wěn)定（萃

8

取柱堵塞導(dǎo)致）；低溫離心凈化方式主要是利用低溫，降低脂類(lèi)雜質(zhì)的溶解度，然

后通過(guò)離心去除，此方式難以去除大量表面活性劑，部分樣品過(guò)膜困難；正己烷除

脂凈化方式不僅可以去除大量脂類(lèi)和表面活性劑雜質(zhì)，由于二氨基嘧啶氧化物在正

己烷中溶解度很低，在正己烷除脂過(guò)程中，對(duì)二氨基嘧啶氧化物的提取無(wú)影響。綜

合凈化效果和操作簡(jiǎn)便程度來(lái)看，本標(biāo)準(zhǔn)選擇了正己烷除脂凈化。

3.4.4最終確定的樣品前處理?xiàng)l件

稱(chēng)取1g（精確至0.001g）試樣，置于50mL離心管中，準(zhǔn)確加入20mL10%

甲醇溶液，渦旋混合混勻，超聲5min。然后加入10mL正己烷溶液，渦旋振蕩1min，

4000r/min離心5min，下層清液經(jīng)濾膜過(guò)濾后供高效液相色譜儀測(cè)定。

4、修訂標(biāo)準(zhǔn)時(shí)應(yīng)列出與原標(biāo)準(zhǔn)的主要差異和水平對(duì)比

該標(biāo)準(zhǔn)屬首次起草，無(wú)與原標(biāo)準(zhǔn)的主要差異和水平對(duì)比。

三、主要試驗(yàn)（或驗(yàn)證）情況分析、綜述報(bào)告，技術(shù)經(jīng)濟(jì)論證，預(yù)期的經(jīng)濟(jì)效果

1.試驗(yàn)分析

1.1標(biāo)準(zhǔn)溶液穩(wěn)定性

將配置好的1000μg/mL的單標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)貯備液，在4℃條件下放置6個(gè)月，每隔1

個(gè)月取出標(biāo)液，稀釋為5.0mg/L的測(cè)試液，采用相同的設(shè)備和色譜條件進(jìn)行測(cè)定，

觀察出峰峰面積變化，以此評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)溶液穩(wěn)定性，測(cè)試結(jié)果見(jiàn)表4。結(jié)果表明在6

個(gè)月內(nèi)，二氨基嘧啶氧化物的峰面積變化的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.6%，相對(duì)極差為4.9%；

考慮到不同時(shí)間檢測(cè)時(shí)，配置標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度的誤差，相對(duì)極差未超過(guò)5%表明目標(biāo)

物標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液在6個(gè)月內(nèi)是穩(wěn)定的。

表4二氨基嘧啶氧化物放置不同時(shí)間的峰面積

峰面積

化合物

0天15天1個(gè)月2個(gè)月3個(gè)月4個(gè)月5個(gè)月6個(gè)月

5.0mg/L標(biāo)液峰面

9801710208298539982621002589725399235101326

積

相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（%）1.8

相對(duì)極差（%）4.9

1.2線性關(guān)系、檢出限和定量限

9

使用甲醇配制濃度為0.5μg/mL、1.0μg/mL、2.0μg/mL、5.0μg/mL、10.0μg/mL、

20.0μg/mL、50.0μg/mL的二氨基嘧啶氧化物標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，經(jīng)HPLC測(cè)定，以峰

面積為縱坐標(biāo)，標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為橫坐標(biāo)，進(jìn)行線性回歸，制得標(biāo)準(zhǔn)工作曲線（y為

峰面積，x為濃度，μg/mL）；選擇空白樣品，定量添加混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，按照試

樣前處理方法和儀器條件進(jìn)行測(cè)定，以信噪比S/N=3確定方法檢出限，以信噪比

S/N=10確定方法定量限。最終方法檢出限為3.0mg/kg，方法定量限為10.0mg/kg。

標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)結(jié)果見(jiàn)表5和圖8所示，標(biāo)準(zhǔn)溶液、檢出限和定量限加標(biāo)樣品的色譜

圖見(jiàn)圖9-圖11。

表5二氨基嘧啶氧化物的線性關(guān)系、檢出限和定量限

濃度（μg/mL）0.51.02.05.010.020.050.0

峰面積1042320198419741100282220024401421156945

線性方程y=23137x-6553

相關(guān)系數(shù)（R2）0.9997

圖8二氨基嘧啶氧化物的標(biāo)準(zhǔn)曲線圖

10

0.0005

4.996

0.0000

-0.0005

AU-0.0010

-0.0015

-0.0020

0.002.004.006.008.0010.00

分鐘

圖90.5μg/mL標(biāo)準(zhǔn)溶液的色譜圖

0.050

0.040

0.030

AU

0.020

0.0105.117

0.000

0.002.004.006.008.0010.00

分鐘

圖10乳液樣品檢出限加標(biāo)的色譜圖

11

0.010

0.008

0.006

AU

0.004

0.002

5.079

0.000

0.002.004.006.008.0010.00

分鐘

圖11乳液樣品定量限加標(biāo)的色譜圖

1.3回收率與精密度

選取陰性的水劑（精華液）、乳液（洗發(fā)乳）、膏霜類(lèi)（洗頭膏）等化妝品，

按本方法進(jìn)行4個(gè)添加水平（1倍方法定量限、2倍方法定量限、10倍方法定量限、

及使用限量1.5%，即0.010g/kg、0.020g/kg、0.10g/kg、0.1g/kg）回收試驗(yàn)，平行

測(cè)定6次，計(jì)算回收率和精密度?；厥章屎拖鄬?duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD，n=6）見(jiàn)表6。

可見(jiàn)，在添加濃度范圍內(nèi)，四種樣品基質(zhì)中二氨基嘧啶氧化物的回收率在83.8%~

102.6%之間，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD，n=6）在1.6%~6.8%之間；具有良好的回收

率和精密度，能夠滿(mǎn)足日常檢測(cè)定量分析的要求。

表6回收率和精密度（n=6）

添加量回收率(%)平均值RSD

基質(zhì)-1

(g·kg)123456(%)(%)

0.01085.393.290.786.395.591.290.44.3

0.02093.895.6101.897.091.198.496.33.9

水劑

0.1099.898.4100.095.997.799.398.51.6

15.097.193.097.898.998.297.397.12.1

乳液0.01094.288.799.7101.087.699.295.16.1

12

添加量回收率(%)平均值RSD

基質(zhì)-1

(g·kg)123456(%)(%)

0.02097.396.584.896.288.3100.694.06.4

0.10101.3102.697.896.696.693.198.03.5

15.098.499.893.396.094.497.096.52.5

0.01099.189.897.795.7102.486.995.26.1

膏霜0.02090.096.590.191.9102.283.892.46.8

類(lèi)0.1091.993.886.596.887.397.292.25.0

15.095.199.596.992.795.996.796.12.3

1.4方法穩(wěn)定性

1.4.1日內(nèi)穩(wěn)定性

選取水劑（精華液）、乳液（洗發(fā)乳）、膏霜類(lèi)（洗頭膏）等陰性化妝品樣品

添加2倍和10倍方法定量限水平進(jìn)行加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)，常溫放置24h，選取6個(gè)時(shí)間

段分別進(jìn)行測(cè)定，計(jì)算加標(biāo)回收率及其相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD），結(jié)果見(jiàn)表7。由表7

可知，在24h之內(nèi)，不同化妝品基質(zhì)中二氨基嘧啶氧化物加標(biāo)回收率的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏

差在2.0%~4.2%之間，日內(nèi)穩(wěn)定性良好。

表7日內(nèi)穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果

回收率(%)

加標(biāo)量平均值RSD

基質(zhì)

(g/kg)放置放置放置放置放置放置(%)(%)

0h2h4h8h12h24h

0.02093.894.999.194.4100.897.996.82.9

水劑

0.1095.796.397.091.690.291.193.63.2

0.02096.090.792.595.197.7100.895.53.8

乳液

0.1096.092.289.190.990.799.593.14.2

0.020100.7100.097.596.297.596.198.02.0

膏霜類(lèi)

0.1090.694.796.592.197.797.694.93.1

1.4.2日間穩(wěn)定性

選取水劑（精華液）、乳液（洗發(fā)乳）、膏霜類(lèi)（洗頭膏）等陰性化妝品樣品

添加2倍和10倍方法定量限水平進(jìn)行加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)，常溫放置3天，每天分別進(jìn)行

13

測(cè)定，計(jì)算加標(biāo)回收率和極差，結(jié)果見(jiàn)表8。由表8可知，在3天之內(nèi)，不同基質(zhì)

中二氨基嘧啶氧化物的回收率的極差在3.8%~6.9%之間，極差不超過(guò)平均值的

10%，日間穩(wěn)定性良好。

表8日間穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果

回收率(%)

加標(biāo)量平均值極差

基質(zhì)

(%)(%)

(g/kg)放置0天放置1天放置2天放置3天

0.02092.094.195.592.393.53.8

水劑

0.10100.697.896.2100.898.94.7

0.02089.392.195.295.693.16.8

乳液

0.1096.191.195.297.194.96.3

0.02093.094.898.399.696.46.9

膏霜類(lèi)

0.1091.394.390.596.493.16.4

1.5方法適用性

隨機(jī)抽取市售的54份發(fā)用化妝品，其中16份為育發(fā)類(lèi)特殊用途化妝品；標(biāo)識(shí)

原料中含有二氨基嘧啶氧化物的產(chǎn)品有8個(gè)，分別應(yīng)用本項(xiàng)目建立的方法進(jìn)行檢測(cè)，

以標(biāo)準(zhǔn)曲線法計(jì)算含量。結(jié)果發(fā)現(xiàn)有檢出二氨基嘧啶氧化物的化妝品有7個(gè)，含量

從0.004-1.4%，包含護(hù)發(fā)精華，防脫洗發(fā)水等，檢出含量均符合《化妝品安全技術(shù)

規(guī)范》（2015年版）中關(guān)于發(fā)用產(chǎn)品中最大使用量1.5%的規(guī)定；有1份樣品標(biāo)稱(chēng)

含有二氨基嘧啶氧化物，但實(shí)際產(chǎn)品未檢出；其余46份樣品未檢出二氨基嘧啶氧化

物。不同基質(zhì)樣品圖見(jiàn)圖12-圖16。

14

0.020

0.018

0.016

0.014

0.012

0.010

AU

0.008

0.006

0.004

0.002

0.000

0.002.004.006.008.0010.00

分鐘

圖12膏霜陰性樣品色譜圖

0.050

0.040

0.030

AU

0.020

0.010

0.000

0.002.004.006.008.0010.00

分鐘

圖13乳液陰性樣品色譜圖

15

0.022

0.020

5.059

0.018

0.016

0.014

0.012

AU0.010

0.008

0.006

0.004

0.002

0.000

0.002.004.006.008.0010.00

分鐘

圖14膏霜類(lèi)樣品陽(yáng)性色譜圖

2.00

1.805.011

1.60

1.40

1.20

AU1.00

0.80

0.60

0.40

0.20

0.00

0.002.004.006.008.0010.00

分鐘

圖15水劑類(lèi)樣品（精華液）色譜圖

16

0.016

0.0145.047

0.012

0.010

0.008

AU

0.006

0.004

0.002

0.000

0.002.004.006.008.0010.00

分鐘

圖16乳液樣品陽(yáng)性色譜圖

2.驗(yàn)證分析

選取水劑、乳液、膏霜類(lèi)等陰性化妝品樣品邀請(qǐng)廣東產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)研究院、

河北省食品檢驗(yàn)研究院、南京市產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)院、廣東省疾病預(yù)防控制中心和

深圳市計(jì)量質(zhì)量檢測(cè)研究院5家實(shí)驗(yàn)室對(duì)本標(biāo)準(zhǔn)方法的線性、檢出限和定量限、方

法回收率和精密度進(jìn)行驗(yàn)證，方法添加1倍、2倍、10倍方法定量限和限量水平進(jìn)

行加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)，驗(yàn)證結(jié)果見(jiàn)表10。選取精華液和洗發(fā)乳陽(yáng)性樣品作為盲樣樣品，

進(jìn)行驗(yàn)證，驗(yàn)證結(jié)果見(jiàn)表11。

表10驗(yàn)證結(jié)果匯總表

平均回收率/%（n=5）

化妝品基添加值平均值RSD

質(zhì)(g/kg)單位1單位2單位3單位4單位5（%）(%)

0.01095.593.297.096.493.295.01.9

0.02096.792.792.498.296.995.42.8

水劑

0.1092.592.392.597.794.593.92.5

15.097.595.696.896.792.795.92.0

0.01093.893.392.695.294.793.91.1

0.02092.095.598.494.796.095.32.4

乳液

0.1098.398.697.796.693.997.01.9

15.096.097.891.993.595.094.92.4

17

平均回收率/%（n=5）

化妝品基添加值平均值RSD

質(zhì)(g/kg)單位1單位2單位3單位4單位5（%）(%)

0.01096.696.493.595.198.496.01.9

0.02096.092.695.796.892.694.72.1

膏霜

0.1095.596.792.695.694.695.01.6

15.092.091.897.692.693.393.42.6

表11盲樣含量驗(yàn)證結(jié)果匯總表

含量（%）平均值RSD

盲樣

單位1單位2單位3單位4單位5（%）(%)

精華液0.340.350.360.360.330.353.9

洗發(fā)乳1.221.161.231.211.201.212.3

綜述報(bào)告：5家驗(yàn)證結(jié)果表明，二氨基嘧啶氧化物在0.5~50.0μg/mL范圍內(nèi)線性

關(guān)系良好。目標(biāo)化合物在方法給出的檢出限濃度均可檢出，方法給定的檢出限合理。

不同驗(yàn)證單位測(cè)得二氨基嘧啶氧化物在四水平添加范圍內(nèi)回收率在91.8%~98.6%

之間，實(shí)驗(yàn)室間的精密度為1.1%~2.6%，表明方法具有良好的回收率和精密度。不

同驗(yàn)證單位的盲樣結(jié)果實(shí)驗(yàn)室間精密度為2.3%~3.9%，方法準(zhǔn)確度良好。

3.技術(shù)經(jīng)濟(jì)論證，預(yù)期的經(jīng)濟(jì)效果

國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)“化妝品中二氨基嘧啶氧化物的測(cè)定高效液相色譜法”系統(tǒng)的建立了

化妝品中二氨基嘧啶氧化物的檢測(cè)方法，健全了化妝品中限用原料檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)體系，

填補(bǔ)了國(guó)內(nèi)化妝品中二氨基嘧啶氧化物的檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)空白。該標(biāo)準(zhǔn)的發(fā)布實(shí)施一方面

可以提升行政監(jiān)管部門(mén)監(jiān)管化妝品質(zhì)量安全的履職能力，有效的監(jiān)測(cè)化妝品的安全

性，極大的規(guī)范貿(mào)易市場(chǎng)，保障消費(fèi)者的健康安全和權(quán)益；另一方面可增強(qiáng)檢驗(yàn)機(jī)

構(gòu)的服務(wù)能力，為企業(yè)提供相關(guān)檢測(cè)服務(wù)，保障相關(guān)化妝品生產(chǎn)企業(yè)健康有序發(fā)展，

具有明顯的社會(huì)效益，同時(shí)也可創(chuàng)造出一定的經(jīng)濟(jì)效益。

四、采用國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)和國(guó)外先進(jìn)標(biāo)準(zhǔn)情況，與國(guó)際、國(guó)外同類(lèi)標(biāo)準(zhǔn)水平的對(duì)比情況，

國(guó)內(nèi)外關(guān)鍵指標(biāo)對(duì)比分析或與測(cè)試的國(guó)外樣品、樣機(jī)的相關(guān)數(shù)據(jù)對(duì)比情況

據(jù)查證，目前尚無(wú)該產(chǎn)品國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)或國(guó)外先進(jìn)標(biāo)準(zhǔn)。

五、與現(xiàn)行相關(guān)法律、法規(guī)、規(guī)章及相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)，特別是強(qiáng)制性標(biāo)準(zhǔn)的協(xié)調(diào)性

18

本標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)指標(biāo)符合我國(guó)現(xiàn)行相關(guān)法律、法規(guī)、規(guī)章及相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)要求。

六、重大分歧意見(jiàn)與處理經(jīng)過(guò)與依據(jù)

本標(biāo)準(zhǔn)在制定時(shí)對(duì)制造商、供應(yīng)商、市場(chǎng)的流通與銷(xiāo)售以及消費(fèi)者等各方面的

權(quán)益均作出了分析和考慮。

七、國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)作為強(qiáng)制性國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)或推薦性國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)的建議

建議本標(biāo)準(zhǔn)以推薦性國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)的形式發(fā)布。

八、貫徹標(biāo)準(zhǔn)的要求和措施建議（包括組織措施、技術(shù)措施、過(guò)渡辦法等內(nèi)容）

建議本標(biāo)準(zhǔn)于發(fā)布日期6個(gè)月后實(shí)施。全國(guó)香料香精化妝品標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)

負(fù)責(zé)組織該項(xiàng)標(biāo)準(zhǔn)的宣貫工作。

九、廢止現(xiàn)行相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)的建議

該標(biāo)準(zhǔn)屬首次起草，無(wú)現(xiàn)行相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)廢止。

十、其他應(yīng)予說(shuō)明的事項(xiàng)

無(wú)。

19

一、工作簡(jiǎn)況

1.任務(wù)來(lái)源

本標(biāo)準(zhǔn)根據(jù)國(guó)標(biāo)委發(fā)[2021]23號(hào)《國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)關(guān)于下達(dá)2021年第二

批推薦性國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)計(jì)劃及相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)外文版計(jì)劃的通知》立項(xiàng)，項(xiàng)目名稱(chēng)《化妝品中

限用組分二氨基嘧啶氧化物的測(cè)定高效液相色譜法》，項(xiàng)目編號(hào)為20213439-T-607。

主要起草單位：蘇州世譜檢測(cè)技術(shù)有限公司、蘇州質(zhì)量檢測(cè)科學(xué)研究院、廣州質(zhì)量

檢測(cè)研究院、上海市日用化學(xué)工業(yè)研究所（國(guó)家香料香精化妝品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)中心）

等。項(xiàng)目周期24個(gè)月，計(jì)劃應(yīng)完成時(shí)間2023年。

2.主要工作過(guò)程

起草階段：

a)2021年09月-2021年12月，成立標(biāo)準(zhǔn)制定工作組。根據(jù)國(guó)標(biāo)委發(fā)[2021]23

號(hào)下達(dá)的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)制修訂計(jì)劃任務(wù)的通知，項(xiàng)目承擔(dān)單位組建了標(biāo)準(zhǔn)編制工作小組，

查詢(xún)、收集和認(rèn)真研究國(guó)內(nèi)外標(biāo)準(zhǔn)及相關(guān)資料，并結(jié)合實(shí)驗(yàn)室的條件、化妝品基質(zhì)

特性和方法技術(shù)特點(diǎn)，初步設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)方案。

b)2022年1月-2023年03月，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究工作，優(yōu)化確定儀器檢測(cè)條件，優(yōu)

化確定不同基質(zhì)化妝品產(chǎn)品的提取、凈化條件，考察和論證方法的靈敏度、準(zhǔn)確性、

線性范圍和適用性，并組織單位進(jìn)行方法驗(yàn)證；編寫(xiě)標(biāo)準(zhǔn)征求意見(jiàn)稿和編制說(shuō)明。

3.主要參加單位和工作組成員等

本標(biāo)準(zhǔn)由全國(guó)香料香精化妝品標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)（SAC/TC257）歸口。

本標(biāo)準(zhǔn)由蘇蘇州世譜檢測(cè)技術(shù)有限公司、蘇州質(zhì)量檢測(cè)科學(xué)研究院、廣州質(zhì)量

檢測(cè)研究院、上海市日用化學(xué)工業(yè)研究所（國(guó)家香料香精化妝品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)中心）

等負(fù)責(zé)聯(lián)合起草。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：×××。

二、標(biāo)準(zhǔn)編制原則和主要內(nèi)容

1.標(biāo)準(zhǔn)編制原則

1

本標(biāo)準(zhǔn)遵循GB/T1.1-2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和

起草規(guī)則》和GB/T20001.4-2015《標(biāo)準(zhǔn)編寫(xiě)規(guī)則第4部分：試驗(yàn)方法標(biāo)準(zhǔn)》的編

寫(xiě)規(guī)則，并參考了國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局發(fā)布的《化妝品中禁用物質(zhì)和限用物

質(zhì)檢測(cè)方法驗(yàn)證技術(shù)規(guī)范》。

2.標(biāo)準(zhǔn)研制背景

化妝品作為人們?nèi)粘Ｉ畹谋匦杵?，一直受到大家的關(guān)注。隨著經(jīng)濟(jì)的飛速發(fā)

展，生活水平不斷提高，人們的消費(fèi)能力逐漸增強(qiáng)，對(duì)護(hù)理產(chǎn)品的功效也提出了更

高的要求。

二氨基嘧啶氧化物常用于發(fā)用產(chǎn)品中，能抑制毛乳頭內(nèi)膠原地堆積和硬化，防

止毛囊堵塞，保證頭發(fā)充分吸收營(yíng)養(yǎng)，健康生長(zhǎng)，防止因其“窒息”而過(guò)早脫落，

延長(zhǎng)頭發(fā)生命，對(duì)改善脫發(fā)有非常顯著的效果。為了使消費(fèi)者在使用產(chǎn)品后能夠迅

速達(dá)到效果，一些廠商可能會(huì)在其產(chǎn)品中添加過(guò)量的二氨基嘧啶氧化物，因此我國(guó)

《化妝品安全技術(shù)規(guī)范》（2015年版）中明確規(guī)定二氨基嘧啶氧化物在發(fā)用產(chǎn)品中

的最大使用限量為1.5%。因此，制訂化妝品中二氨基嘧啶氧化物的檢測(cè)方法標(biāo)準(zhǔn)，

有助于填補(bǔ)國(guó)內(nèi)相關(guān)領(lǐng)域檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)的空白，健全化妝品中禁限用原料檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)體系，

為政府部門(mén)對(duì)國(guó)內(nèi)化妝品生產(chǎn)、銷(xiāo)售市場(chǎng)的監(jiān)管提