2023-2024學年江蘇省蘇州市張家港市高二下學期4月期中考試生物試題（解析版）

高級中學名校試卷PAGEPAGE2江蘇省蘇州市張家港市2023-2024學年高二下學期4月期中試題2024.04注意事項：1．本試卷分選擇題和非選擇題兩部分。選擇題共40分，非選擇題共60分．試卷滿分100分，考試時間75分鐘．2．請把選擇題的〖答案〗用2B鉛筆填涂在答題紙的指定位置，把非選擇題的〖答案〗用0.5mm黑色墨水簽字筆寫在答題紙上的指定位置．一、單項選擇題：本部分包括14題，每題2分，共計28分。每題只有一個選項最符合題意。1.下列有關(guān)群落的敘述，正確的是（）A.區(qū)別自然濕地生物群落與人工濕地生物群落的重要特征是物種組成B.生活在一定區(qū)域中，不同季節(jié)的各種生物種群的簡單集合可以構(gòu)成一個群落C.群落中新物種的引入會提高該群落的物種豐富度D.一個生物群落中的兩種生物總是只存在一種類型的種間關(guān)系〖答案〗A〖祥解〗群落是指在一定的時間和空間內(nèi)，具有直接或間接關(guān)系的所有生物；物種組成是區(qū)分不同群落的重要特征；群落的空間結(jié)構(gòu)包括垂直結(jié)構(gòu)和水平結(jié)構(gòu)，群落的垂直結(jié)構(gòu)是指群落中不同種群在空間上分布具有垂直分層的現(xiàn)象；群落的水平結(jié)構(gòu)是指不同地段上由于土壤濕度、鹽堿度不同、光照強度的差異及其他因素對生物的影響，不同地段分布的生物不同，即使是同一生物，不同地段的種群密度也不同?！驹斘觥緼、群落的物種組成是區(qū)別不同群落的重要特征，故區(qū)別自然濕地生物群落與人工濕地生物群落的重要特征是物種組成，A正確；B、在相同時間內(nèi)，生活在一定區(qū)域中的各種生物種群的集合才可以構(gòu)成一個群落，且不是簡單隨機聚集，B錯誤；C、新引入的物種，只有能適應此環(huán)境且不對其他生物的生存造成威脅，才能提高該群落的物種豐富度，C錯誤；D、一個生物群落中的兩種生物可能只存在一種類型的種間關(guān)系，也可能存在面積或兩種以上的種間關(guān)系，D錯誤。故選A。2.物種多樣性受多種因素的影響，可用“物種多樣性指數(shù)=1-隨機取樣的兩個個體屬于同一物種的概率”來計算，多樣性指數(shù)數(shù)值越大物種多樣性越高。下列敘述正確的是（）A.不同物種的種群大小不會對物種多樣性指數(shù)產(chǎn)生影響B(tài).若兩個群落的物種數(shù)相同，則兩者的物種多樣性指數(shù)也相同C.森林生態(tài)系統(tǒng)物種多樣性的高低與森林蟲害的擴散有關(guān)系D.物種多樣性隨緯度的增高而增高，隨海拔的增加而降低〖答案〗C〖祥解〗根據(jù)“物種多樣性指數(shù)=1-隨機取樣的兩個個體屬于同一物種的概率”可知，物種多樣性指數(shù)=1-每個物種的個體數(shù)與整個群落個體數(shù)比值的平方的和。故群落中物種數(shù)越多，各物種個體數(shù)分配越均勻，物種多樣性指數(shù)越高?！驹斘觥緼、根據(jù)題意，若存在占比較大的種群時，即各物種個體數(shù)分配不均勻，物種多樣性指數(shù)會變小，故不同物種的種群大小可能會對物種多樣性指數(shù)產(chǎn)生影響，A錯誤；B、根據(jù)題意，若兩個群落的物種數(shù)相同，但兩個群落物種個體數(shù)分配不均勻，則兩者的物種多樣性不一定相同，B錯誤；C、森林生態(tài)系統(tǒng)物種多樣性越高，抵抗力穩(wěn)定性越高，森林蟲害就越難以擴散，反之森林蟲害則越容易擴散，C正確；D、物種多樣性隨緯度的增高而降低，隨海拔的增高而降低，D錯誤。故選C。3.設(shè)計生態(tài)工程的常用方法之一是給食物鏈（網(wǎng)）“加環(huán)”，如圖就是一種“加環(huán)”示意圖，據(jù)圖判斷下列敘述正確的是（）①該生態(tài)工程通過“加環(huán)”提高了能量傳遞效率②用玉米的副產(chǎn)品玉米芯生產(chǎn)木糖醇，可增加經(jīng)濟效益③用蛆、蛹糞便作為有機肥還田，能為農(nóng)作物提供能量④用殘渣來培育食用菌和蛆、蛹，實現(xiàn)了物質(zhì)的多級利用⑤在離開人的管理條件下，該生態(tài)工程仍可以正常運轉(zhuǎn)A.②③ B.①②④ C.②④ D.③④⑤〖答案〗C〖祥解〗分析題圖：該生態(tài)系統(tǒng)中，人起到了決定性的作用。玉米和農(nóng)作物屬于生產(chǎn)者，是生態(tài)系統(tǒng)的主要成分；畜、禽屬于消費者；食用菌和蛆、蛹屬于分解者，用殘渣來培育食用菌和蛆蛹，實現(xiàn)了物質(zhì)的多級利用；用玉米的副產(chǎn)品玉米芯生產(chǎn)木糖醇，可提高經(jīng)濟效益?！驹斘觥竣佗苡脷堅鼇砼嘤秤镁颓⒂?，實現(xiàn)了物質(zhì)和能量的多級利用，提高了能量利用率，但不能提高能量傳遞效率，能量傳遞效率是指相鄰兩個營養(yǎng)級之間能量傳遞的效率，①錯誤，④正確；②玉米的副產(chǎn)品玉米芯人類不能直接食用，用其生產(chǎn)木糖醇再供給人類，廢物資源化，可提高經(jīng)濟效益，②正確；③有機肥可為農(nóng)作物提供礦質(zhì)營養(yǎng)和二氧化碳，但不能提供能量，因為能量不能循環(huán)利用，③錯誤；⑤該生態(tài)系統(tǒng)人起到了決定性的作用，所以在離開人的管理條件下，該生態(tài)工程就不能正常運轉(zhuǎn)，⑤錯誤。故選C。4.當散居型蝗蟲密度增大時，體內(nèi)會釋放大量“集群信息素”，蝗蟲通過觸角感知該種信息素，從而使蝗蟲由散居轉(zhuǎn)化為群居，對生態(tài)系統(tǒng)造成嚴重的破壞。下列相關(guān)敘述正確的是（）A.若要預測蝗蟲種群數(shù)量的變化趨勢，則需要調(diào)查蝗蟲種群密度B.天敵青蛙和流行性疾病均屬于蝗蟲種群的非密度制約因素C.可根據(jù)“集群信息素”的分子結(jié)構(gòu)人工合成拮抗劑，阻止蝗蟲的聚集D.蝗蟲釋放的“集群信息素”體現(xiàn)了化學信息可以調(diào)節(jié)生物的種間關(guān)系〖答案〗C〖祥解〗影響種群數(shù)量變化的因素分兩類：一類是密度制約因素，即影響程度與種群密度有密切關(guān)系的因素，如食物、流行性傳染病等；另一類是非密度制約因素，即影響程度與種群密度無關(guān)的因素，氣候、季節(jié)、降水等的變化，影響程度與種群密度沒有關(guān)系，屬于非密度制約因素。【詳析】A、年齡結(jié)構(gòu)可以預測蝗蟲種群數(shù)量的變化趨勢，A錯誤；B、天敵青蛙和流行性疾病是影響程度與種群密度有密切關(guān)系的因素，屬于密度制約因素，B錯誤；C、散居型蝗蟲密度增大時，體內(nèi)會釋放大量“集群信息素”，在蝗蟲的觸角上的嗅覺受體可感知該種信息素，從而使蝗蟲由散居轉(zhuǎn)化為群居，可根據(jù)“集群信息素”的分子結(jié)構(gòu)人工合成拮抗劑，阻止蝗蟲的聚集，C正確；D、蝗蟲釋放的“集群信息素”使蝗蟲由散居轉(zhuǎn)化為群居，無法體現(xiàn)生物的種間關(guān)系，D錯誤。故選C。5.下列關(guān)于泡菜家庭制作的敘述，正確的是（）A.泡菜腌制時間過長，食鹽用量過高易造成細菌大量滋生B.制作泡菜時可向壇中加入適量陳泡菜水C.泡菜生產(chǎn)過程中亞硝酸鹽隨腌制時間逐漸積累D.為了避免雜菌污染，泡菜壇需嚴格滅菌處理，鹽水需煮沸冷卻待用〖答案〗B〖祥解〗泡菜發(fā)酵的實驗原理：（1）乳酸菌在無氧條件下，將糖分解為乳酸。（2）利用乳酸菌制作泡菜的過程中會引起亞硝酸鹽的含量的變化。溫度過高，食鹽用量不足10%、腌制時間過短，容易造成細菌大量繁殖，亞硝酸鹽含量增加。一般在腌制10天后，亞硝酸鹽的含量開始下降?！驹斘觥緼、食鹽用量過高會抑制細菌大量繁殖，A錯誤；B、家庭制作泡菜時，往往需要向泡菜壇內(nèi)加入“陳泡菜水”，這樣做的目的是提供乳酸菌菌種，B正確；C、在整個發(fā)酵過程中，亞硝酸鹽的含量表現(xiàn)為先增加后下降的趨勢，C錯誤；D、泡菜壇需要進行消毒，由于發(fā)酵過程中環(huán)境條件變化可以抑制雜菌生長，故泡菜壇不需要嚴格滅菌，鹽水需要煮沸冷卻待用，D錯誤。故選B。6.下表為某培養(yǎng)基的配方，有關(guān)敘述正確的是（）成分蛋白胨乳糖K2HPO4伊紅亞甲藍蒸餾水瓊脂含量10g10g2g0.4g0.065g1000mL15gA.根據(jù)表格成分可知，該培養(yǎng)基屬于液體培養(yǎng)基B.蛋白胨、乳糖和瓊脂都能為微生物提供碳源C.配制好培養(yǎng)基后，應先調(diào)節(jié)pH后進行滅菌D.該培養(yǎng)基是選擇培養(yǎng)基，可用于篩選大腸桿菌〖答案〗C〖祥解〗1、微生物的營養(yǎng)物質(zhì)主要包括氮源、碳源、水和無機鹽等。2、液體培養(yǎng)基與固體培養(yǎng)基的區(qū)別是否添加適量的凝固劑。詳析】A、該培養(yǎng)基中沒有加入凝固劑，故從物理性質(zhì)看該培養(yǎng)基屬于液體培養(yǎng)基，A錯誤；B、瓊脂不能提供碳源，只能作為凝固劑，B錯誤；C、配制好培養(yǎng)基后，應先調(diào)節(jié)pH后進行滅菌，C正確；D、該培養(yǎng)基中加入了伊紅、亞甲藍，伊紅亞甲藍指示劑可以專一檢測大腸桿菌菌落，故從用途看該培養(yǎng)基屬于鑒別培養(yǎng)基，D錯誤。故選C。7.實驗室常用消毒和滅菌方法有多種。下列物品對應的消毒或滅菌方法錯誤的是（）A.培養(yǎng)基——高壓蒸汽滅菌 B.牛奶——紫外線消毒C.培養(yǎng)皿——干熱滅菌 D.接種環(huán)——灼燒滅菌〖答案〗B〖祥解〗1、無菌技術(shù)的主要內(nèi)容：①對實驗操作的空間、操作者的衣著和手，進行清潔和消毒；②將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等器具進行滅菌；③為避免周圍環(huán)境中微生物的污染，實驗操作應在酒精燈火焰附近進行；④實驗操作時應避免已經(jīng)滅菌處理的材料用具與周圍的物品相接觸；2、實驗室常用的消毒方法煮沸消毒；化學藥物消毒；紫外線消毒；3、實驗室常用的滅菌方法：①灼燒滅菌：將微生物的接種工具，如接種環(huán)、接種針或其他金屬工具，直接在酒精燈火焰的充分燃燒層灼燒，可以迅速徹底地滅菌。此外，在接種過程中，試管口或瓶口等容易被污染的部位，也可以通過火焰燃燒來滅菌；②干熱滅菌：能耐高溫的，需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培養(yǎng)皿）和金屬用具等，可以采用這種方法滅菌；③高壓蒸汽滅菌：如培養(yǎng)基的滅菌?！驹斘觥緼、培養(yǎng)基常用高壓蒸汽滅菌法處理，一般在壓力100kPa，121攝氏度下處理15-30min，A正確；B、牛奶常用巴氏消毒法處理，B錯誤；C、培養(yǎng)皿一般采用干熱滅菌，C正確；D、接種環(huán)等接種工具常用灼燒滅菌法處理，D正確。故選B。8.下圖是實驗室培養(yǎng)某種微生物得到的結(jié)果。下列敘述正確的是（）A.該圖最可能是用稀釋涂布平板法進行接種的B.該培養(yǎng)基上的菌落分布不均勻，說明純培養(yǎng)失敗C.該種微生物有可能是T?噬菌體D.該培養(yǎng)基必須經(jīng)高壓滅菌鍋滅菌后才能倒掉〖答案〗D〖祥解〗分析題圖可知，表示的是用平板劃線法接種后微生物的生長情況，其中需要用到的工具有培養(yǎng)皿、接種環(huán)、酒精燈等，整個過程需要嚴格進行無菌操作?！驹斘觥緼、該圖表示的是用平板劃線法接種后微生物的生長情況，A錯誤；B、平板劃線法隨劃線次數(shù)的增加，菌落密度逐漸減小，因此分布不均勻，B錯誤；C、病毒不能在培養(yǎng)基上生存繁殖，因此該種微生物不可能是T?噬菌體，C錯誤；D、為了防止培養(yǎng)基及其中的微生物對環(huán)境造成污染，該培養(yǎng)基必須經(jīng)高壓滅菌鍋滅菌后才能倒掉，D正確。故選D。9.下圖為獲得抗蟲棉的技術(shù)流程。有關(guān)敘述正確的是（）A.形成轉(zhuǎn)基因抗蟲植株的變異類型屬于染色體變異B.卡那霉素抗性基因中應含有相關(guān)限制酶的識別位點C.重組質(zhì)粒構(gòu)建過程中需要限制酶和DNA連接酶D.轉(zhuǎn)基因抗蟲棉有性生殖的后代都能表現(xiàn)出抗蟲性狀〖答案〗C〖祥解〗分析題圖：圖示為轉(zhuǎn)基因抗蟲棉的培育過程圖，主要包括四步：①目的基因（抗蟲基因）的獲??；②基因表達載體的構(gòu)建；③將目的基因?qū)胧荏w細胞（采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法）；④目的基因的檢測與鑒定．將離體棉花植株培育成抗蟲棉還需采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)。【詳析】A、形成轉(zhuǎn)基因抗蟲植株是通過基因工程技術(shù)來實現(xiàn)的，原理是基因重組，變異類型屬于基因重組，A錯誤；B、卡那霉素抗性基因是標記基因，用來鑒別含有目的基因的受體細胞，不應應含有相關(guān)限制酶的識別位點，否則會被破壞，不能起到鑒別作用，B錯誤；C、重組質(zhì)粒構(gòu)建過程中需要限制酶切割目的基因和質(zhì)粒，產(chǎn)生黏性不相關(guān)，再用DNA連接酶連接起來，構(gòu)建基因表達載體，C正確；D、轉(zhuǎn)基因抗蟲棉有性生殖的后代可能會發(fā)生性狀分離而不表現(xiàn)出抗蟲性狀，D錯誤。故選C。10.下列有關(guān)目的基因?qū)胧荏w細胞和檢測的敘述，正確的是（）A.將目的基因?qū)胫参锛毎捎米疃嗟姆椒ㄊ腔ǚ酃芡ǖ婪˙.將某種藥用蛋白基因?qū)雱游锶橄偌毎锌色@得乳腺生物反應器C.對目的基因進行擴增時，通過熒光標記技術(shù)實時定量測定產(chǎn)物的量D.驗證轉(zhuǎn)基因抗蟲棉是否成功時，通過RNA分子標記檢測目的基因是否表達〖答案〗C〖祥解〗基因工程技術(shù)基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成；（2）基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等；（3）將目的基因?qū)胧荏w細胞：根據(jù)受體細胞不同，導入的方法也不一樣．將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法；（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)；個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?！驹斘觥緼、將目的基因?qū)胫参锛毎捎米疃嗟姆椒ㄊ寝r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，A錯誤；B、將某種藥用蛋白基因?qū)雱游锸芫阎屑纯色@得乳腺生物反應器，B錯誤；C、對目的基因進行擴增時，可通過熒光標記技術(shù)，利用熒光基團和淬滅基團制成探針，實時定量測定產(chǎn)物的量，C正確；D、驗證轉(zhuǎn)基因抗蟲棉是否成功時，應該通過接種實驗驗證，即為轉(zhuǎn)基因抗蟲棉接種相應抗的害蟲，檢測抗蟲棉是否表現(xiàn)出抗蟲特性，D錯誤。故選C。11.下列有關(guān)DNA片段的擴增及電泳鑒定實驗的敘述，正確的是（）A.PCR緩沖液中一般要加Mg2＋，用于激活RNA聚合酶B.瓊脂糖熔化后加入適量的核酸染料混勻，用來指示DNA遷移的位置C.在凝膠中的DNA分子的遷移速率只與DNA分子大小有關(guān)D.電泳緩沖液加入電泳槽時，需要沒過凝膠1mm為宜〖答案〗D〖祥解〗1、多聚酶鏈式反應（PCR）是一種體外迅速擴增DNA片段的技術(shù)，它能以極少量的DNA為模板，在幾小時內(nèi)復制出，上百萬份的DNA拷貝。2、利用PCR可以在體外進行DNA片段的擴增。PCR利用了DNA的熱變性原理，通過調(diào)節(jié)溫度來控制DNA雙鏈的解聚與結(jié)合。PCR儀實質(zhì)上就是一臺能夠自動調(diào)控溫度的儀器，一次PCR一般要經(jīng)歷30次循環(huán)?！驹斘觥緼、DNA聚合酶需要Mg2＋激活，PCR緩沖液中一般要加Mg2＋，用于激活DNA聚合酶，A錯誤；B、瓊脂糖熔化，要稍冷卻后加入適量的核酸染料混勻，用來指示DNA遷移的位置，B錯誤；C、在凝膠中DNA分子的遷移速率與凝膠的濃度、DNA分子的大小和構(gòu)象等有關(guān)，C錯誤；D、電泳緩沖液加入電泳槽時，需要沒過凝膠1mm為宜，D正確。故選D。12.研究人員利用蛋白質(zhì)工程將細菌纖維素酶的第137、179、194位相應氨基酸替換為賴氨酸后，纖維素酶熱穩(wěn)定性得到了提高。下列敘述錯誤的是（）A.改造纖維素酶也需要構(gòu)建基因表達載體B.對纖維素酶的改造是通過直接改造mRNA實現(xiàn)的C.經(jīng)改造后的纖維素酶熱穩(wěn)定性提高這一性狀可遺傳D.蛋白質(zhì)工程可以改造現(xiàn)有蛋白質(zhì)或者制造新的蛋白質(zhì)〖答案〗B〖祥解〗蛋白質(zhì)工程的過程：預期蛋白質(zhì)功能→設(shè)計預期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測應有氨基酸序列→找到對應的脫氧核苷酸序列（基因）?！驹斘觥緼B、蛋白質(zhì)工程是對基因進行修飾改造或創(chuàng)造合成新基因（而不是直接改造mRNA實現(xiàn)的），然后進行表達，故必須構(gòu)建基因表達載體，A正確，B錯誤；C、蛋白質(zhì)工程是對基因進行修飾改造或創(chuàng)造合成新基因，然后進行表達，改造后的蛋白質(zhì)的性狀能遺傳給子代，因此經(jīng)蛋白質(zhì)工程改造后的纖維素酶熱穩(wěn)定性提高這一性狀可遺傳，C正確；D、蛋白質(zhì)工程獲得的是自然界沒有的蛋白質(zhì)，蛋白質(zhì)工程可以改造現(xiàn)有蛋白質(zhì)或者制造新的蛋白質(zhì)，D正確。故選B。13.下圖分別表示某種質(zhì)粒和含目的基因的DNA片段，利用相關(guān)工具酶將二者構(gòu)建成基因表達載體并導入受體菌。幾種可供使用的限制酶識別序列及其切割位點為EcoRⅠ：-G↓AATTC-；BamHⅠ：-G↓GATCC-；BclⅠ：-T↓GATCA-；Sau3AⅠ：-↓GATC-；SmaⅠ：-CCC↓GGG-。注：TetR表示四環(huán)素抗性基因；AmpR表示氨芐青霉素抗性基因。下列關(guān)于構(gòu)建基因表達載體時限制酶的選擇及其相關(guān)敘述，錯誤的是（）A.若單獨使用SmaI，則目的基因表達的產(chǎn)物可能不相同B.若單獨使用SmaⅠ，則含有目的基因的受體菌不能在氨芐青霉素培養(yǎng)基中生長C.若選擇BamHⅠ和SmaI，能在四環(huán)素培養(yǎng)基中生長的受體菌一定含有目的基因D.若用EcoRI和BclⅠ切割質(zhì)粒，則需用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割含目的基因的DNA〖答案〗C〖祥解〗限制酶能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂，形成黏性末端或平末端?！驹斘觥緼、用同一種限制酶切割質(zhì)粒和含目的基因的DNA片段后，目的基因可能會反向連接到質(zhì)粒上，因此目的基因表達的產(chǎn)物可能不相同，A正確；B、若單獨使用SmaⅠ切割質(zhì)粒和含目的基因的DNA片段，會破壞質(zhì)粒上的氨芐青霉素抗性基因，使含有目的基因的受體菌不能在氨芐青霉素培養(yǎng)基中生長，B正確；C、若選擇BamHⅠ和SmaⅠ切割質(zhì)粒和含目的基因的DNA片段，重組質(zhì)粒上含有正常的四環(huán)素抗性基因：能在四環(huán)素培養(yǎng)基中生長的受體菌有可能獲得了重組質(zhì)粒，也有可能獲得的是普通質(zhì)粒，C錯誤；D、含目的基因的DNA片段上沒有BclⅠ的識別序列，不能使用BclⅠ切割含目的基因的DNA片段，但Sau3AⅠ切割DNA后產(chǎn)生的黏性末端與BclⅠ相同，故若用EcoRⅠ和BclⅠ切割質(zhì)粒，則需用EcoRⅠ和Sau3AI切割含目的基因的DNA片段，D正確。故選C。14.CRISPR/Cas9系統(tǒng)主要由向?qū)NA（SgRNA）和Cas9蛋白兩部分組成，SgRNA可引導Cas9蛋白到特定基因位點進行切割，其機制如圖所示。下列敘述正確的是（）A.Cas9蛋白相當于限制酶，能作用于脫氧核糖和堿基之間的磷酸二酯鍵B.對不同目標DNA進行編輯時，可使用相同的Cas9蛋白和SgRNA進行基因編輯C.SgRNA可以在逆轉(zhuǎn)錄酶的催化下合成，合成的原料包括四種核糖核苷酸D.其他DNA序列含有與SgRNA互補配對的序列，造成SgRNA錯誤結(jié)合而脫靶〖答案〗D〖祥解〗限制酶能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開，因此具有專一性?！驹斘觥緼、Cas9蛋白切割特定基因位點，相當于限制酶，作用于脫氧核糖和磷酸之間的磷酸二酯鍵，A錯誤；B、SgRNA可引導Cas9蛋白到特定基因位點進行切割，在對不同目標DNA進行編輯時，應使用Cas9蛋白和不同的sgRNA結(jié)合進而實現(xiàn)對不同基因的編輯，B錯誤；C、SgRNA是以DNA的一條鏈為模板通過轉(zhuǎn)錄形成的，可以在RNA聚合酶的催化下合成，合成的原料包括四種核糖核苷酸，C錯誤；D、CRISPR/Cas9因編輯技術(shù)有時存在編輯出錯而造成脫靶，其最可能的原因是其他DNA序列也含有與向?qū)NA（sgRNA）互補配對的序列，造成向?qū)NA（sgRNA）錯誤結(jié)合而脫靶，D正確。故選D。二、多項選擇題：本部分包括4題，每題3分，共計12分。每題有不止一個選項符合題意。每題全選對者得3分，選對但不全的得1分，錯選或不答的得0分。15.生態(tài)浮島技術(shù)是指將水生植物種植在能漂浮在水面的載體上，以治理水體富營養(yǎng)化的技術(shù)。下列相關(guān)敘述正確的是（）A.選擇及搭配生態(tài)浮島上的植物時需要遵循協(xié)調(diào)原理B.生態(tài)浮島主要利用植物分解并吸收水體中的N、P等元素C.生態(tài)浮島的鋪設(shè)增加了水生生態(tài)系統(tǒng)的抵抗力穩(wěn)定性D.生態(tài)浮島使水體凈化污染能力提升，導致該城市的生態(tài)足跡增加〖答案〗AC〖祥解〗生態(tài)浮床是指將植物種植于浮于水面的床體上，體現(xiàn)了群落的空間結(jié)構(gòu)，可以為鳥類及魚類提供棲息環(huán)境和食物。其處理污水具有簡單有效、花費少、耗能低和無二次污染等優(yōu)勢，同時浮床還可以美化環(huán)境。【詳析】A、選擇及搭配生態(tài)浮島上的植物時需遵循協(xié)調(diào)原理，既要考慮生物與環(huán)境的適應性，還需要考慮環(huán)境的承載力，A正確；B、生態(tài)浮島主要是利用了植物根系吸收水中的N、P等營養(yǎng)物質(zhì)，從而對水質(zhì)起到了凈化作用，植物為生產(chǎn)者，沒有分解作用，進入水體的污染物可被分解者分解形成無機鹽，B錯誤；C、據(jù)題干鋪設(shè)生態(tài)浮床增加了水體生物組成，該生態(tài)系統(tǒng)物種豐富度增加，從而增加了水生生態(tài)系統(tǒng)的抵抗力穩(wěn)定性，C正確；D、生態(tài)足跡，又叫生態(tài)占用，是指在現(xiàn)有技術(shù)條件下，維持某一人口單位(一個人、一個城市、一個國家或全人類)生存所需的生產(chǎn)資源和吸納廢物的土地及水域的面積，而生態(tài)浮床使得水體凈化污染的能力提升，從而使得該城市的生態(tài)足跡減少，D錯誤。故選AC。16.下列有關(guān)DNA粗提取與鑒定的敘述，正確的是（）A.新鮮洋蔥、菠菜、豬血都是DNA粗提取的理想實驗材料B.將過濾液放入4℃冰箱或加入預冷的酒精都可抑制DNA酶的活性C.DNA析出過程中，攪拌操作要速度均勻有力以利于DNA析出D.用二苯胺試劑鑒定DNA需要進行水浴加熱〖答案〗B〖祥解〗DNA、RNA、蛋白質(zhì)和脂質(zhì)等在物理和化學性質(zhì)方面存在差異，可以利用這些差異，選用適當?shù)奈锢砘蚧瘜W方法對它們進行提取。DNA不溶于酒精，但某些蛋白質(zhì)溶于酒精；DNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同，它能溶于2mol/L的NaCl溶液；在一定溫度下，DNA遇二苯胺試劑會呈藍色，因此二苯胺可以作為鑒定DNA的試劑。【詳析】A、哺乳動物成熟紅細胞沒有細胞核，因此新鮮豬血不能作為提取DNA的材料，而新鮮洋蔥、菠菜、豬肝等都是DNA粗提取的理想實驗材料，A錯誤；B、將過濾液放入4℃冰箱或加入預冷的酒精都可抑制DNA酶的活性，避免DNA被水解，另一方面加入預冷酒精溶液可以析出DNA，B正確；C、DNA分子從細胞中被釋放出來且除去蛋白后是非常脆弱的，如果太過劇烈的攪動DNA鏈可能會被打斷，強調(diào)要輕輕攪拌輕輕混勻，是為了獲得較完整的DNA分子，C錯誤；D、用二苯胺試劑鑒定DNA時，需要沸水浴加熱，D錯誤。故選B。17.下列有關(guān)倒平板的操作正確的是（）A.倒平板過程需要在酒精燈火焰旁進行B.待培養(yǎng)基冷卻到室溫時進行倒平板C.倒平板時培養(yǎng)皿蓋打開的開口要盡量小D.培養(yǎng)基冷凝后需要將平板倒置保存〖答案〗ACD〖祥解〗倒平板操作的步驟：待培養(yǎng)基冷卻到50℃左右時，在酒精燈火焰附近倒平板。將滅過菌的培養(yǎng)皿放在火焰旁的桌面上，右手拿裝有培養(yǎng)基的錐形瓶，左手拔出棉塞;右手拿錐形瓶，將瓶口迅速通過火焰；用左手的拇指和食指將培養(yǎng)皿打開一條稍大于瓶口的縫隙，右手將錐形瓶中的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿，左手立即蓋上培養(yǎng)皿的皿蓋；等待平板冷卻凝固后，將平板倒過來放置，使皿蓋在下、皿底在上，這樣可以防止皿蓋上的水分滴到培養(yǎng)基上造成培養(yǎng)基的污染。【詳析】A、倒平板過程需要在酒精燈火焰旁進行，防止空氣中的雜菌污染，A正確；B、待培養(yǎng)基冷卻到50℃左右時，在酒精燈火焰附近倒平板，B錯誤；C、倒平板時培養(yǎng)皿蓋打開的開口要盡量小，用拇指和食指將培養(yǎng)皿打開一條稍大于錐形瓶瓶口的縫隙，將培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿，以防空氣中雜菌的污染，C正確；D、培養(yǎng)基冷凝后需要將平板倒置，防止皿蓋上的水珠滴落到培養(yǎng)基上，D正確。故選ACD。18.如圖是被農(nóng)桿菌侵染的水稻植株的DNA片段，研究者將其連接成環(huán)，并以此環(huán)為模板進行PCR，擴增出T-DNA插入位置兩側(cè)的未知序列，據(jù)此來確定T-DNA插入的具體位置。有關(guān)說法正確的是（）A.農(nóng)桿菌在自然條件下主要侵染單子葉植物和裸子植物，T-DNA存在于其Ti質(zhì)粒上B.利用圖中的引物②③組合可擴增出兩側(cè)的未知序列C.若擴增循環(huán)n次，需要2n+1-2個引物D.將擴增出的未知序列與水稻基因組序列比對可確定T-DNA的插入位置〖答案〗CD〖祥解〗PCR是聚合酶鏈式反應的縮寫。它是一項根據(jù)DNA半保留復制的原理，在體外提供參與DNA復制的各種組分與反應條件，對目的基因的核苷酸序列進行大量復制的技術(shù)。引物是根據(jù)一段已知目的基因的核苷酸序列來設(shè)計的，其作用是使DNA聚合酶能夠從引物的3’端開始連接脫氧核苷酸。農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法：目的基因插入Ti質(zhì)粒的T-DNA中進入農(nóng)桿菌，農(nóng)桿菌侵染植物細胞時T-DNA攜帶目的基因整合到植物染色體的DNA中，目的基因能夠穩(wěn)定維持表達。【詳析】A、農(nóng)桿菌在自然條件下主要侵染雙子葉植物和裸子植物，對大多數(shù)單子葉植物沒有感染能力，A錯誤；B、耐高溫的DNA聚合酶可在引物的3'端延伸子鏈，因此可利用圖中的引物①④組合可擴增出兩側(cè)的未知序列，B錯誤；C、擴增循環(huán)n次，得到2n個DNA分子，總單鏈數(shù)為2×2n即2n+1條，只有最初的兩條母鏈不需要引物，因此共需要2n+1-2個引物，C正確；D、不同的DNA分子或DNA區(qū)段具有特異性，將擴增出的未知序列與水稻基因組序列比對可確定T-DNA的插入位置，D正確。故選CD。三、非選擇題：本部分包括5題，共計60分。19.“蓮蝦共作”是某地推廣的一種水田立體生態(tài)種養(yǎng)模式，取得了顯著的經(jīng)濟效益和生態(tài)效益，其模式如圖所示。請回答下列問題：（1）該生態(tài)系統(tǒng)中生產(chǎn)者除蓮藕外還有______等，它們?yōu)樾↓埼r提供______，有利于小龍蝦的養(yǎng)殖。“蓮蝦共作”通過蓮藕莖葉還田和蝦糞蝦殼回田的措施，有效提高土壤肥力的原因是______。（2）小龍蝦攝食多種雜草和病蟲（卵），蓮田中病蟲、草害的發(fā)生率大幅度下降，使蓮藕增產(chǎn)。結(jié)合種間關(guān)系，從能量流動的角度分析蓮藕增產(chǎn)的原因是______。（3）為確?！吧徫r共作”種養(yǎng)模式正常高效運行，應將蓮藕種植與小龍蝦養(yǎng)殖在時空上銜接耦合。第一年秋季將親蝦（約30g/只）投入蓮田，投放量不宜超過20kg/667m2，否則會引起系統(tǒng)失衡，這運用了生態(tài)工程的______原理。親蝦在蓮田中打洞交配產(chǎn)卵越冬，第二年3月下旬，親蝦和孵化出的幼蝦出洞覓食。而4月上旬到5月中旬是蓮藕的幼苗期，親蝦會取食其幼嫩的立葉造成蓮藕減產(chǎn)。為保障后期蓮藕的產(chǎn)量，可采取的措施及處理時間是______。（4）與單一種植蓮藕相比，“蓮蝦共作”提高了生態(tài)系統(tǒng)的______穩(wěn)定性，除此之外，該模式優(yōu)點還有：______。〖答案〗（1）①.浮游藻類和雜草②.食物和棲息場所③.蝦糞和蝦殼回田也可有效促進物質(zhì)循環(huán)，增加土壤養(yǎng)分，提高土壤肥力（2）通過小龍蝦的攝食，蓮藕的捕食者（寄生者）和種間競爭者的數(shù)量減少，使能量更多地流向蓮藕，實現(xiàn)蓮藕增產(chǎn)。

（3）①.協(xié)調(diào)②.3月下旬到4月上旬之間，陸續(xù)將蓮田中的親蝦捕撈完（4）①.抵抗力②.充分利用了空間和資源，獲得了較高的經(jīng)濟效益?！枷榻狻缴鷳B(tài)農(nóng)業(yè)是一個農(nóng)業(yè)生態(tài)經(jīng)濟復合系統(tǒng)，將農(nóng)業(yè)生態(tài)系統(tǒng)同農(nóng)業(yè)經(jīng)濟系統(tǒng)綜合統(tǒng)一起來，以取得最大的生態(tài)經(jīng)濟整體效益。它也是農(nóng)、林、牧、副、漁各業(yè)綜合起來的大農(nóng)業(yè)，又是農(nóng)業(yè)生產(chǎn)、加工、銷售綜合起來，適應市場經(jīng)濟發(fā)展的現(xiàn)代農(nóng)業(yè)。與傳統(tǒng)農(nóng)業(yè)相比，生態(tài)農(nóng)業(yè)的優(yōu)點有實現(xiàn)對物質(zhì)再循環(huán)利用；實現(xiàn)對能量的多級利用，提高了能量的利用率；有利于生態(tài)環(huán)境的保護等。（1）該生態(tài)系統(tǒng)中生產(chǎn)者主體是蓮藕，此外還有浮游藻類和雜草等生產(chǎn)者。生產(chǎn)者指的是能用簡單的無機物制造成有機物的自養(yǎng)型生物，小龍蝦能以這些生產(chǎn)者為食，因此它們?yōu)樾↓埼r提供食物和棲息場所，利于小龍蝦的養(yǎng)殖。據(jù)圖可知，子蓮的莖葉還田，能增加土壤有機質(zhì)；蝦糞和蝦殼回田也可有效促進物質(zhì)循環(huán)，增加土壤養(yǎng)分，提高土壤肥力，因此與傳統(tǒng)農(nóng)業(yè)相比，“蓮蝦共作”能有效地提高蓮田肥力。（2）小龍蝦可攝食多種雜草和病蟲（卵），通過小龍蝦的攝食，蓮藕的捕食者（寄生者）和種間競爭者的數(shù)量減少，使能量更多地流向蓮藕（必須提到能量），實現(xiàn)蓮藕增產(chǎn)。（3）協(xié)調(diào)是指生物與環(huán)境、生物與生物的協(xié)調(diào)與適應，第一年秋季將親蝦（約30g/只）投入蓮田，投放量不宜超過20kg/667m2，否則會引起系統(tǒng)失衡，這運用了生態(tài)工程的協(xié)調(diào)原理。據(jù)題意可知，3月下旬，親蝦和孵化出的幼蝦出洞覓食，4月上旬到5月中旬親蝦會取食蓮藕幼嫩的立葉造成蓮藕減產(chǎn)，因此為保障后期蓮藕的產(chǎn)量，可采取的措施及處理時間是3月下旬到4月上旬之間，陸續(xù)將蓮田中的親蝦捕撈完（或?qū)⒂H蝦與蓮藕在空間上分隔開）。（4）與單一種植蓮藕相比，“蓮蝦共作”生態(tài)系統(tǒng)的食物網(wǎng)更復雜，系統(tǒng)提高了生態(tài)系統(tǒng)抵抗力穩(wěn)定性，除此之外，“蓮蝦共作”立體生態(tài)種養(yǎng)模式充分利用了空間和資源，獲得了較高的經(jīng)濟效益。20.研究人員對某公園進行了生態(tài)修復實踐，其生態(tài)修復與景觀營造模式如圖所示。請回答下列問題：（1）從茂密森林到“白色沙漠”的演變，說明人類活動會影響群落演替的______。在生態(tài)修復的最初階段，人們種植品種單一的人工林，結(jié)果出現(xiàn)了病蟲害嚴重等問題，原因是______。將一個已經(jīng)受損的生態(tài)系統(tǒng)恢復到原貌是很困難的，修復成功的標志是該生態(tài)系統(tǒng)的______能夠保持長期穩(wěn)定。（2）不同于傳統(tǒng)園藝化程度較高的園林植物配置方式，本案設(shè)計兼具了生產(chǎn)、生態(tài)、觀賞和游憩功能的近自然景觀修復等，這遵循了______生態(tài)工程原理。（3）圖中蜜源、食源草花植物群系和食源、宿主果樹植物群系的層次分布體現(xiàn)了群落的______結(jié)構(gòu)。確定了采樣點后，再用______法調(diào)查該公園土壤中小動物類群的豐富度。（4）用樣方法調(diào)查該公園植物類群豐富度時，隨著樣方面積的擴大，樣方內(nèi)的物種種類變化如下圖所示。據(jù)圖可推測樣方面積通常是______，此外取樣時還需遵循______（5）該公園中既有人工養(yǎng)殖的魚、螺，又有野生的鳥類、蝴蝶等，這些動物在生態(tài)系統(tǒng)中的作用是______。（回答2點）（6）修復后公園的揚塵污染等問題得到基本解決，此外還大力發(fā)展生態(tài)旅游、體育健身等產(chǎn)業(yè)，生動詮釋了“綠水青山就是金山銀山”的理念，這些體現(xiàn)了生物多樣性的______價值?！即鸢浮剑?）①.速度和方向②.品種單一的人工林，生物種類少，營養(yǎng)結(jié)構(gòu)簡單，自我調(diào)節(jié)能力弱，抵抗力穩(wěn)定性低③.結(jié)構(gòu)和功能（2）整體（3）①.水平②.取樣器取樣（4）①.S2②.隨機取樣（5）維持自然界中生態(tài)平衡，促進生態(tài)系統(tǒng)的物質(zhì)循環(huán)，幫助植物傳粉、種子傳播（6）直接和間接〖祥解〗生態(tài)系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)包括生態(tài)系統(tǒng)的組成成分和營養(yǎng)結(jié)構(gòu)，組成成分包括生產(chǎn)者、消費者、分解者，非生物的物質(zhì)和能量，營養(yǎng)結(jié)構(gòu)指的是食物鏈和食物網(wǎng)。人類活動會影響群落演替的速度與方向。生物多樣性具有直接價值、間接價值和潛在價值。（1）從茂密森林到“白色沙漠”的演變，說明人類活動會影響群落演替的速度和方向；品種單一的人工林，生物種類少，營養(yǎng)結(jié)構(gòu)簡單，自我調(diào)節(jié)能力弱，抵抗力穩(wěn)定性低，容易受病蟲害；將一個已經(jīng)受損的生態(tài)系統(tǒng)恢復到原貌是很困難的，修復成功的標志是該生態(tài)系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)和功能能夠保持長期穩(wěn)定；（2）不同于傳統(tǒng)園藝化程度較高的園林植物配置方式，兼具了生產(chǎn)、生態(tài)、觀賞和游憩功能的近自然景觀修復等，這遵循了整體性生態(tài)工程原理；（3）蜜源、食源草花植物群系和食源、宿主果樹植物群系的層次分布是生物群落中的生物在水平方向上的配置，體現(xiàn)了群落的水平結(jié)構(gòu)；確定了采樣點后，再用取樣器取樣法調(diào)查該公園土壤中小動物類群的豐富度；（4）據(jù)圖可推測樣方面積通常是S2，用樣方法調(diào)查該公園植物類群豐富度時為確定合理的樣方面積，應逐漸增大樣方，統(tǒng)計樣方內(nèi)植物物種數(shù)，直到樣方內(nèi)能包括群落所有的物種為止，取樣時還需遵循隨機取樣的原則。（5）動物在自然界中作用：維持自然界中生態(tài)平衡，促進生態(tài)系統(tǒng)的物質(zhì)循環(huán)，幫助植物傳粉、傳播種子；（6）修復后公園的揚塵污染等問題得到基本解決，此外還大力發(fā)展生態(tài)旅游、體育健身等產(chǎn)業(yè)，體現(xiàn)了生物多樣性的直接和間接價值。21.水產(chǎn)品作為人類獲取蛋白質(zhì)的重要來源之一，其需求量的提升促進了集約化養(yǎng)殖模式的發(fā)展。隨著養(yǎng)殖密度的不斷提高，環(huán)境污染問題也愈發(fā)嚴重，尋找到能夠維持水產(chǎn)行業(yè)可持續(xù)發(fā)展的方式成為了當務之急。請回答下列問題。（1）養(yǎng)殖過程中產(chǎn)生的氨氮主要由生態(tài)系統(tǒng)中的______來吸收、分解和轉(zhuǎn)化，投飼率的提高會導致氨氮的迅速積累，而有限的轉(zhuǎn)化能力達不到凈水的效果。（2）傳統(tǒng)養(yǎng)殖模式通過高成本大批量換水的方式來保持水質(zhì)的優(yōu)良。為實現(xiàn)低成本高效解決富氮問題，有人從污水中篩選出異養(yǎng)硝化細菌ZW2和ZW5菌株，并研究其去氮能力。①硝化細菌屬于好氧性細菌，以O(shè)2為最終電子受體，可以推測其有氧呼吸的場所發(fā)生在______，通常以______方式增殖。②進行ZW2和ZW5菌株初步篩選時，通常采用______法或______法進行接種。初步篩選時，樣品中含有多種微生物，培養(yǎng)后，一般依據(jù)______來區(qū)分不同的微生物。③從污水中分離ZW2和ZW5菌株時，培養(yǎng)基中需要加入硝酸銨等營養(yǎng)物質(zhì)、瓊脂和酚紅指示劑。培養(yǎng)后，這兩種細菌都能生長并形成菌落，結(jié)果如圖所示，______（填“ZW2”或“ZW5”）菌株的去氮能力更強，判斷依據(jù)是______。④在實驗過程中，檢測培養(yǎng)基是否被雜菌污染的過程是：______〖答案〗（1）生產(chǎn)者（2）①.細胞質(zhì)基質(zhì)②.二分裂③.稀釋涂布平板④.平板劃線

⑤.菌落特征（或菌落的形狀、大小、隆起程度和顏色等）⑥.ZW5

⑦.ZW5菌落周圍的紅色圈面積大，其降解硝酸銨產(chǎn)生氨的能力更強⑧.將未接種的培養(yǎng)基放在恒溫箱中培養(yǎng)〖祥解〗1、微生物常見的接種的方法：①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落。②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)基表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落。2、統(tǒng)計菌落數(shù)目的方法：（1）顯微鏡直接計數(shù)法①原理：利用特定細菌計數(shù)板或血細胞計數(shù)板，在顯微鏡下計算一定容積的樣品中微生物數(shù)量；②方法：用計數(shù)板計數(shù)；③缺點：不能區(qū)分死菌與活菌。（2）間接計數(shù)法（活菌計數(shù)法）原理：當樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌。通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)，就能推測出樣品中大約含有多少活菌。（1）養(yǎng)殖過程中產(chǎn)生的氨氮主要由生態(tài)系統(tǒng)中的生產(chǎn)者如水生植物、藍細菌、綠藻來吸收、分解和轉(zhuǎn)化。（2）①硝化細菌為原核生物，原核生物進行有氧呼吸的場所是細胞質(zhì)基質(zhì)，以二分裂的方式進行增殖。②對微生物進行分離、純化可用平板劃線法或稀釋涂布法。進行ZW2和ZW5菌株初步篩選時，通常采用稀釋涂布平板法或平板劃線法進行接種。一般來說，在相同的培養(yǎng)條件下，同種微生物表現(xiàn)出穩(wěn)定的菌落特征。故初步篩選時，可根據(jù)菌落的形狀、大小、隆起程度和顏色等方面的菌落特征區(qū)別不同微生物。③由圖可知，ZW5菌落周圍的紅色圈面積大，說明其降解硝酸較產(chǎn)生氨的能力更強，故如果要得到目標菌，應該選擇ZW5。④若要檢測該培養(yǎng)基是否有雜菌污染，最有效的方法是將未接種的培養(yǎng)基作為對照組放在恒溫箱中培養(yǎng)，若出現(xiàn)菌落，則說明培養(yǎng)基被污染。22.特異性重組的Cre/loxP敲除系統(tǒng)是首先利用同源重組將基因組上的靶基因替換為兩端帶有重組位點loxP的kanR基因，然后由重組酶Cre識別loxP位點并發(fā)生重組反應，去除基因組上的kanR基因，進一步利用質(zhì)粒的溫敏特性將其消除，從而實現(xiàn)靶基因的敲除。下圖是研究人員利用Cre/loxP敲除系統(tǒng)敲除谷氨酸棒狀桿菌argR基因（精氨酸代謝的調(diào)控因子），獲得高產(chǎn)精氨酸菌株的過程，其中kanR是卡那霉素抗性基因，cat是氯霉素抗性基因，HindⅢ、BanHⅠ是限制酶。請據(jù)圖回答下列問題：（1）①過程的原料是_____，所需的酶是_____。（2）下列引物1、引物2用于擴增argR基因上游序列，引物3、引物4用于擴增argR基因下游序列，下劃線序列是相關(guān)限制酶識別序列，則HindⅢ、BamHⅠ的識別序列分別是_____、_____。引物1：5'-GTCGACGGTATCGATAAGCTTAGGACTCAAACTTATGACTTCACAACCA-3'引物2：5-CGCCCTATAGTGAGTCGTATTGGGATTTAAGTTTTCCGGTGTTGACG-3'引物3：5'-CTTTAGTGAGGGTTAATTGCGCGTTAATCGCTTGTTAATGCAGGCA-3'引物4：5'-CGCTCTAGAACTAGTGGATCCCAAAGCCTCGTGAGCCTTAATC-3'（3）②過程（融合PCR）是采用具有互補末端引物，形成具有重疊鏈的PCR引物，通過PCR引物重疊鏈的延伸，從而將不同來源的DNA片段連接起來。下列引物5、引物6用于擴增兩端含loxP的kanR片段，引物5、引物6可分別與_____、_____（引物1、引物2、引物3、引物4）重疊從而實現(xiàn)不同DNA片段的連接。引物5：5'-CGTCAACACCGGAAAACTTAAATCCCAATACGACTCACTATAGGGCG-3'引物6：5-TGCCTGCATTAACAAGCGATTAACGCGCAATTAACCCTCACTAAAG-3'（4）④過程將質(zhì)粒3導入_____態(tài)谷氨酸棒狀桿菌，⑤過程在同源重組的作用下谷氨酸棒狀桿菌株的argR基因被替換為_____片段。（5）⑥過程導入質(zhì)粒4的目的是_____。（6）由于質(zhì)粒4的溫敏特性，⑦過程先在37℃條件下培養(yǎng)消除質(zhì)粒4，然后用影印接種（A、B、C三個培養(yǎng)基中接種菌種的位置相同）培養(yǎng)驗證其抗性，其結(jié)果如下圖，則_____是目的基因被敲除的目的菌株?！即鸢浮剑?）①.dNTP②.Taq酶（2）①.AAGCTT②.GGATCC（3）①.引物2②.引物3（4）①.感受②.兩端含有l(wèi)oxP位點的karR（5）利用重組酶Cre識別loxP位點并發(fā)生重組反應，去除基因組上的karR基因（6）能在A培養(yǎng)基上生長，不能在B、C培養(yǎng)基上生長的菌株〖祥解〗基因工程技術(shù)的基本步驟：(1)目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成。(2)基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子、復制原點和標記基因等。(3)將目的基因?qū)胧荏w細胞：根據(jù)受體細胞不同，導入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法。(4)目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA-分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)一抗原-抗體雜交技術(shù)。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。（1）由圖可知，①過程是PCR技術(shù)，所需的原料是dNTP，所需的酶是Taq酶。（2）結(jié)合質(zhì)粒2上的限制酶切割位點，HindⅢ切割argR基因上游序列，BmHI切割argR基因下游序列，則它們的識別序列分別是引物1和引物4上的下劃線序列AAGCTT和GGATCC。（3）引物5、引物6分別引物2、引物3堿基互補配對因此可以形成重疊鏈，進而實現(xiàn)不同DNA片段的連接。（4）④過程將質(zhì)粒3導入感受態(tài)谷氨酸棒狀桿菌，以便吸收外源DNA分子。據(jù)圖可知，⑤過程在同源重組的作用下谷氨酸棒狀桿菌株的argR基因被替換為兩端含有l(wèi)oxP位點的kanR基因片段。（5）由題干信息結(jié)合圖可知，⑥過程導入質(zhì)粒4的目的是利用重組酶Cre識別loxP位點并發(fā)生重組反應，去除基因組上的kanR基因。（6）目的基因被敲除的目的菌株不含卡那霉素抗性基因和氯霉素抗性基因，因此只能在不含卡那霉素和氯霉素的培養(yǎng)基（A）上生長，不能在含有卡那霉素（B）和含有氯霉素（A）的培養(yǎng)基生長。23.實時熒光定量PCR（qPCR）實現(xiàn)了PCR從定性到定量的飛躍。TaqMan探針是qPCR技術(shù)中一種常用探針（如圖1），其5＇末端連接熒光基團（R），3＇末端連接淬滅劑（Q）。當探針完整時，R發(fā)出的熒光信號被Q吸收而不發(fā)熒光。在qPCR擴增過程中，當Taq酶遇到探針時會使探針水解而釋放出游離的R和Q，R發(fā)出的熒光信號被相應儀器檢測到。請回答下列問題：（1）PCR實驗中引物的長度應設(shè)計得適當，若設(shè)計過短，可能會______。（2）根據(jù)圖1、2，TaqDNA聚合酶的功能有______、______。若最初該反應體系中只有一個DNA分子，經(jīng)n次循環(huán)后，則共需要消耗______個TaqMan探針。（3）分析圖2，TaqMan探針的退火溫度應比引物的______（填“高”或“低”），原因是______（4）結(jié)合圖3分析，普通PCR完成即進入曲線的______（填序號）時期后進行鑒定PCR反應的產(chǎn)物，但無法獲得PCR完成前的變化。而qPCR不僅能夠檢測到PCR過程中的變化，并能測定起始模板的量。大致原理是qPCR每擴增一條DNA鏈，就有______個熒光分子形成，在曲線的______（填序號）階段，PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系。Ct值是qPCR技術(shù)中引入的重要參數(shù)之一，是指產(chǎn)物熒光強度達到設(shè)定閾值時的PCR循環(huán)數(shù)，因為在①期很難識別出熒光，原因是______。若甲樣本的Ct值為17，而乙樣本的Ct值為23，從理論上估算，在PCR擴增23個循環(huán)的產(chǎn)物中，甲樣本的目的產(chǎn)物大約是乙的______倍?！即鸢浮剑?）引物的特異性差（2）①.催化游離脫氧核苷酸連接到脫氧核苷酸鏈上②.催化RNA水解③.2n-1（3）①.高②.有利于保證退火時探針先于引物與模板DNA結(jié)合（4）①.③②.1③.②④.DNA數(shù)太少，熒光信號變化不大，⑤.256〖祥解〗PCR技術(shù)：（1）概念：PCR全稱為聚合酶鏈式反應，是一項在生物體外復制特定DNA的核酸合成技術(shù)。（2）原理：DNA復制。（3）前提條件：要有一段已知目的基因的核苷酸序列以便合成一對引物。（4）條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）。（5）過程：①高溫變性：DNA解旋過程；②低溫復性：引物結(jié)合到互補鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈。PCR擴增中雙鏈DNA解開不需要解旋酶，高溫條件下氫鍵可自動解開。（1）PCR實驗中引物長度不能過短，否則會由于引物與模板隨機結(jié)合，引物的特異性差。（2）Taq酶能夠催化游離脫氧核苷酸連接到脫氧核苷酸鏈上，由1可知，探針中含有U，由此可知探針是一條單鏈的RNA，根據(jù)圖2，“當Taq酶遇到探針時會使探針水解而釋放出游離的R和Q”，因此該酶能夠催化RNA水解。由于每擴增1個DNA分子，就有一個熒光分子形成，經(jīng)n次循環(huán)后共有2n個DNA，跟初始相比，新增2n-1個DNA，所以需要TaqMan熒光探針2n-1個。（3）引物的化學本質(zhì)是DNA單鏈，通常情況下，TaqMan探針的退火溫度應比引物的高，這有利于保證退火時探針先于引物與模板DNA結(jié)合。（4）由圖3可知，使用普通PCR技術(shù)，當?shù)玫降腄NA分子足量時，即PCR完成即進入曲線的③時，就能鑒定PCR反應的產(chǎn)物，但只能得到一個最終值，無法獲得PCR完成前的變化。在qPCR中，由于Taq酶遇到探針時會使探針水解而釋放出游離的R，R發(fā)出的熒光信號被相應儀器檢測到，理論上qPCR每擴增一條DNA鏈，就有1個熒光分子形成。在①階段，擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化；在③階段，擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級增加，PCR產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系，無法根據(jù)最終PCR產(chǎn)物量算出起始DNA復制數(shù)。只有在②階段，PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系，可以選擇在這個階段進行定量分析。在最初數(shù)個循環(huán)里即①階段，由于DNA數(shù)太少，熒光信號變化不大，故在①期很難識別出熒光。圖中Ct值是PCR擴增過程中，擴增產(chǎn)物的熒光信號達到設(shè)定的閾值時所經(jīng)過的擴增循環(huán)次數(shù)，則Ct值越小，起始模板量越多。設(shè)甲樣本初始DNA數(shù)為x，乙樣本初始DNA數(shù)為y，則有x×217=y×223，x=28y，即從理論上估算，在PCR擴增23個循環(huán)的產(chǎn)物中，甲樣本的目的產(chǎn)物大約是乙的28=256倍。江蘇省蘇州市張家港市2023-2024學年高二下學期4月期中試題2024.04注意事項：1．本試卷分選擇題和非選擇題兩部分。選擇題共40分，非選擇題共60分．試卷滿分100分，考試時間75分鐘．2．請把選擇題的〖答案〗用2B鉛筆填涂在答題紙的指定位置，把非選擇題的〖答案〗用0.5mm黑色墨水簽字筆寫在答題紙上的指定位置．一、單項選擇題：本部分包括14題，每題2分，共計28分。每題只有一個選項最符合題意。1.下列有關(guān)群落的敘述，正確的是（）A.區(qū)別自然濕地生物群落與人工濕地生物群落的重要特征是物種組成B.生活在一定區(qū)域中，不同季節(jié)的各種生物種群的簡單集合可以構(gòu)成一個群落C.群落中新物種的引入會提高該群落的物種豐富度D.一個生物群落中的兩種生物總是只存在一種類型的種間關(guān)系〖答案〗A〖祥解〗群落是指在一定的時間和空間內(nèi)，具有直接或間接關(guān)系的所有生物；物種組成是區(qū)分不同群落的重要特征；群落的空間結(jié)構(gòu)包括垂直結(jié)構(gòu)和水平結(jié)構(gòu)，群落的垂直結(jié)構(gòu)是指群落中不同種群在空間上分布具有垂直分層的現(xiàn)象；群落的水平結(jié)構(gòu)是指不同地段上由于土壤濕度、鹽堿度不同、光照強度的差異及其他因素對生物的影響，不同地段分布的生物不同，即使是同一生物，不同地段的種群密度也不同?！驹斘觥緼、群落的物種組成是區(qū)別不同群落的重要特征，故區(qū)別自然濕地生物群落與人工濕地生物群落的重要特征是物種組成，A正確；B、在相同時間內(nèi)，生活在一定區(qū)域中的各種生物種群的集合才可以構(gòu)成一個群落，且不是簡單隨機聚集，B錯誤；C、新引入的物種，只有能適應此環(huán)境且不對其他生物的生存造成威脅，才能提高該群落的物種豐富度，C錯誤；D、一個生物群落中的兩種生物可能只存在一種類型的種間關(guān)系，也可能存在面積或兩種以上的種間關(guān)系，D錯誤。故選A。2.物種多樣性受多種因素的影響，可用“物種多樣性指數(shù)=1-隨機取樣的兩個個體屬于同一物種的概率”來計算，多樣性指數(shù)數(shù)值越大物種多樣性越高。下列敘述正確的是（）A.不同物種的種群大小不會對物種多樣性指數(shù)產(chǎn)生影響B(tài).若兩個群落的物種數(shù)相同，則兩者的物種多樣性指數(shù)也相同C.森林生態(tài)系統(tǒng)物種多樣性的高低與森林蟲害的擴散有關(guān)系D.物種多樣性隨緯度的增高而增高，隨海拔的增加而降低〖答案〗C〖祥解〗根據(jù)“物種多樣性指數(shù)=1-隨機取樣的兩個個體屬于同一物種的概率”可知，物種多樣性指數(shù)=1-每個物種的個體數(shù)與整個群落個體數(shù)比值的平方的和。故群落中物種數(shù)越多，各物種個體數(shù)分配越均勻，物種多樣性指數(shù)越高?！驹斘觥緼、根據(jù)題意，若存在占比較大的種群時，即各物種個體數(shù)分配不均勻，物種多樣性指數(shù)會變小，故不同物種的種群大小可能會對物種多樣性指數(shù)產(chǎn)生影響，A錯誤；B、根據(jù)題意，若兩個群落的物種數(shù)相同，但兩個群落物種個體數(shù)分配不均勻，則兩者的物種多樣性不一定相同，B錯誤；C、森林生態(tài)系統(tǒng)物種多樣性越高，抵抗力穩(wěn)定性越高，森林蟲害就越難以擴散，反之森林蟲害則越容易擴散，C正確；D、物種多樣性隨緯度的增高而降低，隨海拔的增高而降低，D錯誤。故選C。3.設(shè)計生態(tài)工程的常用方法之一是給食物鏈（網(wǎng)）“加環(huán)”，如圖就是一種“加環(huán)”示意圖，據(jù)圖判斷下列敘述正確的是（）①該生態(tài)工程通過“加環(huán)”提高了能量傳遞效率②用玉米的副產(chǎn)品玉米芯生產(chǎn)木糖醇，可增加經(jīng)濟效益③用蛆、蛹糞便作為有機肥還田，能為農(nóng)作物提供能量④用殘渣來培育食用菌和蛆、蛹，實現(xiàn)了物質(zhì)的多級利用⑤在離開人的管理條件下，該生態(tài)工程仍可以正常運轉(zhuǎn)A.②③ B.①②④ C.②④ D.③④⑤〖答案〗C〖祥解〗分析題圖：該生態(tài)系統(tǒng)中，人起到了決定性的作用。玉米和農(nóng)作物屬于生產(chǎn)者，是生態(tài)系統(tǒng)的主要成分；畜、禽屬于消費者；食用菌和蛆、蛹屬于分解者，用殘渣來培育食用菌和蛆蛹，實現(xiàn)了物質(zhì)的多級利用；用玉米的副產(chǎn)品玉米芯生產(chǎn)木糖醇，可提高經(jīng)濟效益?！驹斘觥竣佗苡脷堅鼇砼嘤秤镁颓?、蛹，實現(xiàn)了物質(zhì)和能量的多級利用，提高了能量利用率，但不能提高能量傳遞效率，能量傳遞效率是指相鄰兩個營養(yǎng)級之間能量傳遞的效率，①錯誤，④正確；②玉米的副產(chǎn)品玉米芯人類不能直接食用，用其生產(chǎn)木糖醇再供給人類，廢物資源化，可提高經(jīng)濟效益，②正確；③有機肥可為農(nóng)作物提供礦質(zhì)營養(yǎng)和二氧化碳，但不能提供能量，因為能量不能循環(huán)利用，③錯誤；⑤該生態(tài)系統(tǒng)人起到了決定性的作用，所以在離開人的管理條件下，該生態(tài)工程就不能正常運轉(zhuǎn)，⑤錯誤。故選C。4.當散居型蝗蟲密度增大時，體內(nèi)會釋放大量“集群信息素”，蝗蟲通過觸角感知該種信息素，從而使蝗蟲由散居轉(zhuǎn)化為群居，對生態(tài)系統(tǒng)造成嚴重的破壞。下列相關(guān)敘述正確的是（）A.若要預測蝗蟲種群數(shù)量的變化趨勢，則需要調(diào)查蝗蟲種群密度B.天敵青蛙和流行性疾病均屬于蝗蟲種群的非密度制約因素C.可根據(jù)“集群信息素”的分子結(jié)構(gòu)人工合成拮抗劑，阻止蝗蟲的聚集D.蝗蟲釋放的“集群信息素”體現(xiàn)了化學信息可以調(diào)節(jié)生物的種間關(guān)系〖答案〗C〖祥解〗影響種群數(shù)量變化的因素分兩類：一類是密度制約因素，即影響程度與種群密度有密切關(guān)系的因素，如食物、流行性傳染病等；另一類是非密度制約因素，即影響程度與種群密度無關(guān)的因素，氣候、季節(jié)、降水等的變化，影響程度與種群密度沒有關(guān)系，屬于非密度制約因素。【詳析】A、年齡結(jié)構(gòu)可以預測蝗蟲種群數(shù)量的變化趨勢，A錯誤；B、天敵青蛙和流行性疾病是影響程度與種群密度有密切關(guān)系的因素，屬于密度制約因素，B錯誤；C、散居型蝗蟲密度增大時，體內(nèi)會釋放大量“集群信息素”，在蝗蟲的觸角上的嗅覺受體可感知該種信息素，從而使蝗蟲由散居轉(zhuǎn)化為群居，可根據(jù)“集群信息素”的分子結(jié)構(gòu)人工合成拮抗劑，阻止蝗蟲的聚集，C正確；D、蝗蟲釋放的“集群信息素”使蝗蟲由散居轉(zhuǎn)化為群居，無法體現(xiàn)生物的種間關(guān)系，D錯誤。故選C。5.下列關(guān)于泡菜家庭制作的敘述，正確的是（）A.泡菜腌制時間過長，食鹽用量過高易造成細菌大量滋生B.制作泡菜時可向壇中加入適量陳泡菜水C.泡菜生產(chǎn)過程中亞硝酸鹽隨腌制時間逐漸積累D.為了避免雜菌污染，泡菜壇需嚴格滅菌處理，鹽水需煮沸冷卻待用〖答案〗B〖祥解〗泡菜發(fā)酵的實驗原理：（1）乳酸菌在無氧條件下，將糖分解為乳酸。（2）利用乳酸菌制作泡菜的過程中會引起亞硝酸鹽的含量的變化。溫度過高，食鹽用量不足10%、腌制時間過短，容易造成細菌大量繁殖，亞硝酸鹽含量增加。一般在腌制10天后，亞硝酸鹽的含量開始下降?！驹斘觥緼、食鹽用量過高會抑制細菌大量繁殖，A錯誤；B、家庭制作泡菜時，往往需要向泡菜壇內(nèi)加入“陳泡菜水”，這樣做的目的是提供乳酸菌菌種，B正確；C、在整個發(fā)酵過程中，亞硝酸鹽的含量表現(xiàn)為先增加后下降的趨勢，C錯誤；D、泡菜壇需要進行消毒，由于發(fā)酵過程中環(huán)境條件變化可以抑制雜菌生長，故泡菜壇不需要嚴格滅菌，鹽水需要煮沸冷卻待用，D錯誤。故選B。6.下表為某培養(yǎng)基的配方，有關(guān)敘述正確的是（）成分蛋白胨乳糖K2HPO4伊紅亞甲藍蒸餾水瓊脂含量10g10g2g0.4g0.065g1000mL15gA.根據(jù)表格成分可知，該培養(yǎng)基屬于液體培養(yǎng)基B.蛋白胨、乳糖和瓊脂都能為微生物提供碳源C.配制好培養(yǎng)基后，應先調(diào)節(jié)pH后進行滅菌D.該培養(yǎng)基是選擇培養(yǎng)基，可用于篩選大腸桿菌〖答案〗C〖祥解〗1、微生物的營養(yǎng)物質(zhì)主要包括氮源、碳源、水和無機鹽等。2、液體培養(yǎng)基與固體培養(yǎng)基的區(qū)別是否添加適量的凝固劑。詳析】A、該培養(yǎng)基中沒有加入凝固劑，故從物理性質(zhì)看該培養(yǎng)基屬于液體培養(yǎng)基，A錯誤；B、瓊脂不能提供碳源，只能作為凝固劑，B錯誤；C、配制好培養(yǎng)基后，應先調(diào)節(jié)pH后進行滅菌，C正確；D、該培養(yǎng)基中加入了伊紅、亞甲藍，伊紅亞甲藍指示劑可以專一檢測大腸桿菌菌落，故從用途看該培養(yǎng)基屬于鑒別培養(yǎng)基，D錯誤。故選C。7.實驗室常用消毒和滅菌方法有多種。下列物品對應的消毒或滅菌方法錯誤的是（）A.培養(yǎng)基——高壓蒸汽滅菌 B.牛奶——紫外線消毒C.培養(yǎng)皿——干熱滅菌 D.接種環(huán)——灼燒滅菌〖答案〗B〖祥解〗1、無菌技術(shù)的主要內(nèi)容：①對實驗操作的空間、操作者的衣著和手，進行清潔和消毒；②將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等器具進行滅菌；③為避免周圍環(huán)境中微生物的污染，實驗操作應在酒精燈火焰附近進行；④實驗操作時應避免已經(jīng)滅菌處理的材料用具與周圍的物品相接觸；2、實驗室常用的消毒方法煮沸消毒；化學藥物消毒；紫外線消毒；3、實驗室常用的滅菌方法：①灼燒滅菌：將微生物的接種工具，如接種環(huán)、接種針或其他金屬工具，直接在酒精燈火焰的充分燃燒層灼燒，可以迅速徹底地滅菌。此外，在接種過程中，試管口或瓶口等容易被污染的部位，也可以通過火焰燃燒來滅菌；②干熱滅菌：能耐高溫的，需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培養(yǎng)皿）和金屬用具等，可以采用這種方法滅菌；③高壓蒸汽滅菌：如培養(yǎng)基的滅菌。【詳析】A、培養(yǎng)基常用高壓蒸汽滅菌法處理，一般在壓力100kPa，121攝氏度下處理15-30min，A正確；B、牛奶常用巴氏消毒法處理，B錯誤；C、培養(yǎng)皿一般采用干熱滅菌，C正確；D、接種環(huán)等接種工具常用灼燒滅菌法處理，D正確。故選B。8.下圖是實驗室培養(yǎng)某種微生物得到的結(jié)果。下列敘述正確的是（）A.該圖最可能是用稀釋涂布平板法進行接種的B.該培養(yǎng)基上的菌落分布不均勻，說明純培養(yǎng)失敗C.該種微生物有可能是T?噬菌體D.該培養(yǎng)基必須經(jīng)高壓滅菌鍋滅菌后才能倒掉〖答案〗D〖祥解〗分析題圖可知，表示的是用平板劃線法接種后微生物的生長情況，其中需要用到的工具有培養(yǎng)皿、接種環(huán)、酒精燈等，整個過程需要嚴格進行無菌操作?！驹斘觥緼、該圖表示的是用平板劃線法接種后微生物的生長情況，A錯誤；B、平板劃線法隨劃線次數(shù)的增加，菌落密度逐漸減小，因此分布不均勻，B錯誤；C、病毒不能在培養(yǎng)基上生存繁殖，因此該種微生物不可能是T?噬菌體，C錯誤；D、為了防止培養(yǎng)基及其中的微生物對環(huán)境造成污染，該培養(yǎng)基必須經(jīng)高壓滅菌鍋滅菌后才能倒掉，D正確。故選D。9.下圖為獲得抗蟲棉的技術(shù)流程。有關(guān)敘述正確的是（）A.形成轉(zhuǎn)基因抗蟲植株的變異類型屬于染色體變異B.卡那霉素抗性基因中應含有相關(guān)限制酶的識別位點C.重組質(zhì)粒構(gòu)建過程中需要限制酶和DNA連接酶D.轉(zhuǎn)基因抗蟲棉有性生殖的后代都能表現(xiàn)出抗蟲性狀〖答案〗C〖祥解〗分析題圖：圖示為轉(zhuǎn)基因抗蟲棉的培育過程圖，主要包括四步：①目的基因（抗蟲基因）的獲??；②基因表達載體的構(gòu)建；③將目的基因?qū)胧荏w細胞（采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法）；④目的基因的檢測與鑒定．將離體棉花植株培育成抗蟲棉還需采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)?！驹斘觥緼、形成轉(zhuǎn)基因抗蟲植株是通過基因工程技術(shù)來實現(xiàn)的，原理是基因重組，變異類型屬于基因重組，A錯誤；B、卡那霉素抗性基因是標記基因，用來鑒別含有目的基因的受體細胞，不應應含有相關(guān)限制酶的識別位點，否則會被破壞，不能起到鑒別作用，B錯誤；C、重組質(zhì)粒構(gòu)建過程中需要限制酶切割目的基因和質(zhì)粒，產(chǎn)生黏性不相關(guān)，再用DNA連接酶連接起來，構(gòu)建基因表達載體，C正確；D、轉(zhuǎn)基因抗蟲棉有性生殖的后代可能會發(fā)生性狀分離而不表現(xiàn)出抗蟲性狀，D錯誤。故選C。10.下列有關(guān)目的基因?qū)胧荏w細胞和檢測的敘述，正確的是（）A.將目的基因?qū)胫参锛毎捎米疃嗟姆椒ㄊ腔ǚ酃芡ǖ婪˙.將某種藥用蛋白基因?qū)雱游锶橄偌毎锌色@得乳腺生物反應器C.對目的基因進行擴增時，通過熒光標記技術(shù)實時定量測定產(chǎn)物的量D.驗證轉(zhuǎn)基因抗蟲棉是否成功時，通過RNA分子標記檢測目的基因是否表達〖答案〗C〖祥解〗基因工程技術(shù)基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成；（2）基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等；（3）將目的基因?qū)胧荏w細胞：根據(jù)受體細胞不同，導入的方法也不一樣．將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法；（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)；個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。【詳析】A、將目的基因?qū)胫参锛毎捎米疃嗟姆椒ㄊ寝r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，A錯誤；B、將某種藥用蛋白基因?qū)雱游锸芫阎屑纯色@得乳腺生物反應器，B錯誤；C、對目的基因進行擴增時，可通過熒光標記技術(shù)，利用熒光基團和淬滅基團制成探針，實時定量測定產(chǎn)物的量，C正確；D、驗證轉(zhuǎn)基因抗蟲棉是否成功時，應該通過接種實驗驗證，即為轉(zhuǎn)基因抗蟲棉接種相應抗的害蟲，檢測抗蟲棉是否表現(xiàn)出抗蟲特性，D錯誤。故選C。11.下列有關(guān)DNA片段的擴增及電泳鑒定實驗的敘述，正確的是（）A.PCR緩沖液中一般要加Mg2＋，用于激活RNA聚合酶B.瓊脂糖熔化后加入適量的核酸染料混勻，用來指示DNA遷移的位置C.在凝膠中的DNA分子的遷移速率只與DNA分子大小有關(guān)D.電泳緩沖液加入電泳槽時，需要沒過凝膠1mm為宜〖答案〗D〖祥解〗1、多聚酶鏈式反應（PCR）是一種體外迅速擴增DNA片段的技術(shù)，它能以極少量的DNA為模板，在幾小時內(nèi)復制出，上百萬份的DNA拷貝。2、利用PCR可以在體外進行DNA片段的擴增。PCR利用了DNA的熱變性原理，通過調(diào)節(jié)溫度來控制DNA雙鏈的解聚與結(jié)合。PCR儀實質(zhì)上就是一臺能夠自動調(diào)控溫度的儀器，一次PCR一般要經(jīng)歷30次循環(huán)?！驹斘觥緼、DNA聚合酶需要Mg2＋激活，PCR緩沖液中一般要加Mg2＋，用于激活DNA聚合酶，A錯誤；B、瓊脂糖熔化，要稍冷卻后加入適量的核酸染料混勻，用來指示DNA遷移的位置，B錯誤；C、在凝膠中DNA分子的遷移速率與凝膠的濃度、DNA分子的大小和構(gòu)象等有關(guān)，C錯誤；D、電泳緩沖液加入電泳槽時，需要沒過凝膠1mm為宜，D正確。故選D。12.研究人員利用蛋白質(zhì)工程將細菌纖維素酶的第137、179、194位相應氨基酸替換為賴氨酸后，纖維素酶熱穩(wěn)定性得到了提高。下列敘述錯誤的是（）A.改造纖維素酶也需要構(gòu)建基因表達載體B.對纖維素酶的改造是通過直接改造mRNA實現(xiàn)的C.經(jīng)改造后的纖維素酶熱穩(wěn)定性提高這一性狀可遺傳D.蛋白質(zhì)工程可以改造現(xiàn)有蛋白質(zhì)或者制造新的蛋白質(zhì)〖答案〗B〖祥解〗蛋白質(zhì)工程的過程：預期蛋白質(zhì)功能→設(shè)計預期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測應有氨基酸序列→找到對應的脫氧核苷酸序列（基因）?！驹斘觥緼B、蛋白質(zhì)工程是對基因進行修飾改造或創(chuàng)造合成新基因（而不是直接改造mRNA實現(xiàn)的），然后進行表達，故必須構(gòu)建基因表達載體，A正確，B錯誤；C、蛋白質(zhì)工程是對基因進行修飾改造或創(chuàng)造合成新基因，然后進行表達，改造后的蛋白質(zhì)的性狀能遺傳給子代，因此經(jīng)蛋白質(zhì)工程改造后的纖維素酶熱穩(wěn)定性提高這一性狀可遺傳，C正確；D、蛋白質(zhì)工程獲得的是自然界沒有的蛋白質(zhì)，蛋白質(zhì)工程可以改造現(xiàn)有蛋白質(zhì)或者制造新的蛋白質(zhì)，D正確。故選B。13.下圖分別表示某種質(zhì)粒和含目的基因的DNA片段，利用相關(guān)工具酶將二者構(gòu)建成基因表達載體并導入受體菌。幾種可供使用的限制酶識別序列及其切割位點為EcoRⅠ：-G↓AATTC-；BamHⅠ：-G↓GATCC-；BclⅠ：-T↓GATCA-；Sau3AⅠ：-↓GATC-；SmaⅠ：-CCC↓GGG-。注：TetR表示四環(huán)素抗性基因；AmpR表示氨芐青霉素抗性基因。下列關(guān)于構(gòu)建基因表達載體時限制酶的選擇及其相關(guān)敘述，錯誤的是（）A.若單獨使用SmaI，則目的基因表達的產(chǎn)物可能不相同B.若單獨使用SmaⅠ，則含有目的基因的受體菌不能在氨芐青霉素培養(yǎng)基中生長C.若選擇BamHⅠ和SmaI，能在四環(huán)素培養(yǎng)基中生長的受體菌一定含有目的基因D.若用EcoRI和BclⅠ切割質(zhì)粒，則需用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割含目的基因的DNA〖答案〗C〖祥解〗限制酶能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂，形成黏性末端或平末端?！驹斘觥緼、用同一種限制酶切割質(zhì)粒和含目的基因的DNA片段后，目的基因可能會反向連接到質(zhì)粒上，因此目的基因表達的產(chǎn)物可能不相同，A正確；B、若單獨使用SmaⅠ切割質(zhì)粒和含目的基因的DNA片段，會破壞質(zhì)粒上的氨芐青霉素抗性基因，使含有目的基因的受體菌不能在氨芐青霉素培養(yǎng)基中生長，B正確；C、若選擇BamHⅠ和SmaⅠ切割質(zhì)粒和含目的基因的DNA片段，重組質(zhì)粒上含有正常的四環(huán)素抗性基因：能在四環(huán)素培養(yǎng)基中生長的受體菌有可能獲得了重組質(zhì)粒，也有可能獲得的是普通質(zhì)粒，C錯誤；D、含目的基因的DNA片段上沒有BclⅠ的識別序列，不能使用BclⅠ切割含目的基因的DNA片段，但Sau3AⅠ切割DNA后產(chǎn)生的黏性末端與BclⅠ相同，故若用EcoRⅠ和BclⅠ切割質(zhì)粒，則需用EcoRⅠ和Sau3AI切割含目的基因的DNA片段，D正確。故選C。14.CRISPR/Cas9系統(tǒng)主要由向?qū)NA（SgRNA）和Cas9蛋白兩部分組成，SgRNA可引導Cas9蛋白到特定基因位點進行切割，其機制如圖所示。下列敘述正確的是（）A.Cas9蛋白相當于限制酶，能作用于脫氧核糖和堿基之間的磷酸二酯鍵B.對不同目標DNA進行編輯時，可使用相同的Cas9蛋白和SgRNA進行基因編輯C.SgRNA可以在逆轉(zhuǎn)錄酶的催化下合成，合成的原料包括四種核糖核苷酸D.其他DNA序列含有與SgRNA互補配對的序列，造成SgRNA錯誤結(jié)合而脫靶〖答案〗D〖祥解〗限制酶能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開，因此具有專一性。【詳析】A、Cas9蛋白切割特定基因位點，相當于限制酶，作用于脫氧核糖和磷酸之間的磷酸二酯鍵，A錯誤；B、SgRNA可引導Cas9蛋白到特定基因位點進行切割，在對不同目標DNA進行編輯時，應使用Cas9蛋白和不同的sgRNA結(jié)合進而實現(xiàn)對不同基因的編輯，B錯誤；C、SgRNA是以DNA的一條鏈為模板通過轉(zhuǎn)錄形成的，可以在RNA聚合酶的催化下合成，合成的原料包括四種核糖核苷酸，C錯誤；D、CRISPR/Cas9因編輯技術(shù)有時存在編輯出錯而造成脫靶，其最可能的原因是其他DNA序列也含有與向?qū)NA（sgRNA）互補配對的序列，造成向?qū)NA（sgRNA）錯誤結(jié)合而脫靶，D正確。故選D。二、多項選擇題：本部分包括4題，每題3分，共計12分。每題有不止一個選項符合題意。每題全選對者得3分，選對但不全的得1分，錯選或不答的得0分。15.生態(tài)浮島技術(shù)是指將水生植物種植在能漂浮在水面的載體上，以治理水體富營養(yǎng)化的技術(shù)。下列相關(guān)敘述正確的是（）A.選擇及搭配生態(tài)浮島上的植物時需要遵循協(xié)調(diào)原理B.生態(tài)浮島主要利用植物分解并吸收水體中的N、P等元素C.生態(tài)浮島的鋪設(shè)增加了水生生態(tài)系統(tǒng)的抵抗力穩(wěn)定性D.生態(tài)浮島使水體凈化污染能力提升，導致該城市的生態(tài)足跡增加〖答案〗AC〖祥解〗生態(tài)浮床是指將植物種植于浮于水面的床體上，體現(xiàn)了群落的空間結(jié)構(gòu)，可以為鳥類及魚類提供棲息環(huán)境和食物。其處理污水具有簡單有效、花費少、耗能低和無二次污染等優(yōu)勢，同時浮床還可以美化環(huán)境。【詳析】A、選擇及搭配生態(tài)浮島上的植物時需遵循協(xié)調(diào)原理，既要考慮生物與環(huán)境的適應性，還需要考慮環(huán)境的承載力，A正確；B、生態(tài)浮島主要是利用了植物根系吸收水中的N、P等營養(yǎng)物質(zhì)，從而對水質(zhì)起到了凈化作用，植物為生產(chǎn)者，沒有分解作用，進入水體的污染物可被分解者分解形成無機鹽，B錯誤；C、據(jù)題干鋪設(shè)生態(tài)浮床增加了水體生物組成，該生態(tài)系統(tǒng)物種豐富度增加，從而增加了水生生態(tài)系統(tǒng)的抵抗力穩(wěn)定性，C正確；D、生態(tài)足跡，又叫生態(tài)占用，是指在現(xiàn)有技術(shù)條件下，維持某一人口單位(一個人、一個城市、一個國家或全人類)生存所需的生產(chǎn)資源和吸納廢物的土地及水域的面積，而生態(tài)浮床使得水體凈化污染的能力提升，從而使得該城市的生態(tài)足跡減少，D錯誤。故選AC。16.下列有關(guān)DNA粗提取與鑒定的敘述，正確的是（）A.新鮮洋蔥、菠菜、豬血都是DNA粗提取的理想實驗材料B.將過濾液放入4℃冰箱或加入預冷的酒精都可抑制DNA酶的活性C.DNA析出過程中，攪拌操作要速度均勻有力以利于DNA析出D.用二苯胺試劑鑒定DNA需要進行水浴加熱〖答案〗B〖祥解〗DNA、RNA、蛋白質(zhì)和脂質(zhì)等在物理和化學性質(zhì)方面存在差異，可以利用這些差異，選用適當?shù)奈锢砘蚧瘜W方法對它們進行提取。DNA不溶于酒精，但某些蛋白質(zhì)溶于酒精；DNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同，它能溶于2mol/L的NaCl溶液；在一定溫度下，DNA遇二苯胺試劑會呈藍色，因此二苯胺可以作為鑒定DNA的試劑?！驹斘觥緼、哺乳動物成熟紅細胞沒有細胞核，因此新鮮豬血不能作為提取DNA的