微生物的選擇培養(yǎng)和計(jì)數(shù)+高二下學(xué)期生物人教版（2019）選擇性必修3

第1章第2節(jié)二微生物的選擇培養(yǎng)和計(jì)數(shù)1分離特定種類(lèi)的微生物實(shí)驗(yàn)室分離微生物的原理；選擇培養(yǎng)基的概念。二微生物的選擇培養(yǎng)和計(jì)數(shù)2對(duì)微生物進(jìn)行計(jì)數(shù)稀釋涂布平板法的步驟；微生物計(jì)數(shù)的方法。資料

PCR是體外擴(kuò)增DNA片段的聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，此項(xiàng)技術(shù)要求使用耐高溫的DNA聚合酶。1973年，科學(xué)家從美國(guó)黃石國(guó)家公園的熱泉中篩選出水生棲熱菌，進(jìn)而從這種菌中提取出耐高溫的DNA聚合酶。任務(wù)一分離特定種類(lèi)的微生物1、水生棲熱菌被篩選出來(lái)的條件是什么？提示水生棲熱菌能在70～80℃的高溫條件下生存，而絕大多數(shù)微生物在此條件下不能生存。2、這對(duì)實(shí)驗(yàn)室篩選微生物有什么啟示？提示提供有利于目的菌生長(zhǎng)的條件（包括營(yíng)養(yǎng)、溫度和pH等），同時(shí)抑制或阻止其他微生物的生長(zhǎng)。任務(wù)一分離特定種類(lèi)的微生物選擇培養(yǎng)基在微生物學(xué)中，將允許特定種類(lèi)的微生物生長(zhǎng)，同時(shí)抑制或阻止其他種類(lèi)微生物生長(zhǎng)的培養(yǎng)基，稱(chēng)為選擇培養(yǎng)基。任務(wù)一分離特定種類(lèi)的微生物現(xiàn)學(xué)現(xiàn)用一：

地球上的植物每年產(chǎn)生的纖維素超過(guò)70億噸，其中40%~60%能被土壤中某些微生物分解利用，這是因?yàn)樗鼈兡軌虍a(chǎn)生纖維素酶。對(duì)這些酶的研究與應(yīng)用，使人們能夠利用秸稈等生產(chǎn)酒精，用纖維素酶處理服裝面料等。任務(wù)一分離特定種類(lèi)的微生物1）你打算到什么環(huán)境中去尋找纖維素分解菌？提示纖維素分解菌大多數(shù)分布在富含纖維素的環(huán)境中，尋找纖維素分解菌時(shí)，可以選擇纖維素豐富的環(huán)境，如樹(shù)林中多年落葉形成的腐殖土等。任務(wù)一分離特定種類(lèi)的微生物2）有同學(xué)說(shuō)，可以把濾紙埋在土壤中，一段時(shí)間后，再?gòu)囊迅癄€的濾紙上篩選纖維素分解菌。提示這是人工設(shè)置適合纖維素分解菌生存的環(huán)境，腐爛的濾紙上很可能有纖維素分解菌。任務(wù)一分離特定種類(lèi)的微生物現(xiàn)學(xué)現(xiàn)用二：

尿素含氮量高，是一種重要的氮肥。尿素施入土壤后，會(huì)被土壤中的某些細(xì)菌分解成氨，氨再轉(zhuǎn)化為NO??、NH4+等被植物吸收。這些細(xì)菌能合成脲酶，脲酶催化尿素分解產(chǎn)生氨，氨可作為細(xì)菌生長(zhǎng)的氮源。任務(wù)一分離特定種類(lèi)的微生物1）如何篩選能分解尿素的細(xì)菌？提示設(shè)計(jì)一種選擇培養(yǎng)基，用尿素作為唯一氮源，可以將分解尿素的細(xì)菌分離出來(lái)。2）怎么證明選擇培養(yǎng)基具有選擇作用？提示設(shè)置一個(gè)完全培養(yǎng)基作為對(duì)照，若完全培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的菌落數(shù)多于該選擇培養(yǎng)基，則該培養(yǎng)基具有選擇作用。任務(wù)一分離特定種類(lèi)的微生物1、稀釋涂布平板法任務(wù)二對(duì)微生物進(jìn)行計(jì)數(shù)1、稀釋涂布平板法任務(wù)二對(duì)微生物進(jìn)行計(jì)數(shù)1、稀釋涂布平板法任務(wù)二對(duì)微生物進(jìn)行計(jì)數(shù)1）設(shè)置空白對(duì)照組的目的是什么？提示檢測(cè)培養(yǎng)基滅菌是否徹底，保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。2）稀釋涂布平板法的統(tǒng)計(jì)原理？提示當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)單菌落，來(lái)源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌。任務(wù)二對(duì)微生物進(jìn)行計(jì)數(shù)

①為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在30-300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。

②為了增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)的說(shuō)服力，應(yīng)至少對(duì)3個(gè)平板進(jìn)行重復(fù)計(jì)數(shù)，然后求出平均值。

③分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果時(shí)，如果重復(fù)組結(jié)果相差太大，表示操作有誤，需要重新實(shí)驗(yàn)。任務(wù)二對(duì)微生物進(jìn)行計(jì)數(shù)3）稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)的細(xì)菌數(shù)量準(zhǔn)確嗎？提示

稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目少，這是因?yàn)楫?dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上的觀察到的只是一個(gè)菌落。任務(wù)二對(duì)微生物進(jìn)行計(jì)數(shù)4）如何從平板上的菌落數(shù)推測(cè)出每克樣品中的菌落數(shù)？提示每克樣品中的菌落數(shù)=（C÷V）×MC：某一稀釋度下平板上生長(zhǎng)的平均菌落數(shù)V：涂布平板時(shí)所用的稀釋液的體積M：稀釋倍數(shù)任務(wù)二對(duì)微生物進(jìn)行計(jì)數(shù)

（2020年全國(guó)卷I節(jié)選）實(shí)驗(yàn)中初步估測(cè)搖瓶M中細(xì)菌數(shù)為2×107個(gè)/mL，若要在每個(gè)平板上涂布100μL稀釋后的菌液，且保證每個(gè)平板上長(zhǎng)出的菌落數(shù)不超過(guò)200個(gè)，則至少應(yīng)將搖瓶M中的菌液稀釋_____________倍。提示每克樣品中的菌落數(shù)=（C÷V）×M

2×107=（200÷0.1）×MM=1×104任務(wù)二對(duì)微生物進(jìn)行計(jì)數(shù)1×1042、顯微鏡直接計(jì)數(shù)提示

顯微鏡直接計(jì)數(shù)不能區(qū)分死菌與活菌，因此統(tǒng)計(jì)的結(jié)果一般是活菌數(shù)和死菌數(shù)的總和，統(tǒng)計(jì)結(jié)果往往比實(shí)際值偏大。任務(wù)二對(duì)微生物進(jìn)行計(jì)數(shù)

1、允許特定種類(lèi)微生物生長(zhǎng)，同時(shí)抑制或阻止其他種類(lèi)微生物生長(zhǎng)的培養(yǎng)基，稱(chēng)為選擇培養(yǎng)基。2、制備以尿素作為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基是篩選分解尿素細(xì)菌的基礎(chǔ)。3、可以利用稀釋涂布平板法和顯微鏡直接計(jì)數(shù)的方法對(duì)微生物進(jìn)行計(jì)數(shù)。小結(jié)從下列項(xiàng)目中選做一個(gè)：1.空氣中微生物總數(shù)的檢測(cè)；2.水中細(xì)菌總數(shù)的檢測(cè)；3.牛奶中細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)；4.土壤中真菌（或放線(xiàn)菌）的分離與計(jì)數(shù)。到社會(huì)中去1、根據(jù)選擇培養(yǎng)