現(xiàn)代生物技術(shù)概論復(fù)習(xí)題

現(xiàn)代生物技術(shù)概論復(fù)習(xí)題名詞解釋細(xì)胞工程、基因工程、酶工程、蛋白質(zhì)工程、發(fā)酵工程、蛋白質(zhì)組學(xué)、組織培養(yǎng)、同裂酶、同尾酶、人工種子、細(xì)胞分化、愈傷組織、分批發(fā)酵、干細(xì)胞、酶分子修飾、酶反映器、細(xì)胞融合、組織培養(yǎng)、單倍體、單克隆抗體、體細(xì)胞克隆、受體細(xì)胞、載體、PCR、限制性內(nèi)切酶、目的基因、轉(zhuǎn)化子、花粉管通道法、報(bào)告基因、重組子、轉(zhuǎn)基因技術(shù)、離子互換、外植體、繼代培養(yǎng)、懸浮培養(yǎng)、固定化培養(yǎng)、DNA粘性末端、重組質(zhì)粒、核移植1、生物技術(shù)：也稱生物工程，是人們以現(xiàn)代生命科學(xué)為基礎(chǔ)，結(jié)合先進(jìn)的工程技術(shù)手段和其他基礎(chǔ)科學(xué)的科學(xué)原理，按照預(yù)先的設(shè)計(jì)，改造生物體或加工生物原料，為人類生產(chǎn)出所需產(chǎn)品或達(dá)成某種目的的一門新興的、綜合性的學(xué)科。2、基因組DNA文庫(kù)：將某一種基因DNA用適當(dāng)?shù)南拗泼盖袛嗪螅c載體DNA重組，再所有轉(zhuǎn)化宿主細(xì)胞，得到含所有基因組DNA的種群，稱為基因組DNA文庫(kù)。選擇標(biāo)記基因：是指該基因的表達(dá)產(chǎn)物對(duì)選擇劑產(chǎn)生抗性，致使轉(zhuǎn)化細(xì)胞不受選擇劑影響，能正常生長(zhǎng)、發(fā)育、分化，從而把轉(zhuǎn)化體選擇出來(lái)的一類基因?；蚝突蚪MDNA分子中具有特定生物學(xué)功能的片段稱為基因（gene）。一個(gè)生物體的所有DNA序列稱為基因組（genome）5、載體：把一個(gè)有用的目的DNA片段通過(guò)重組DNA技術(shù)，送進(jìn)受體細(xì)胞中去進(jìn)行繁殖或表達(dá)的工具稱為載體。6、cDNA文庫(kù)：即由mRNA通過(guò)反轉(zhuǎn)錄成cDNA,然后來(lái)構(gòu)建文庫(kù)，構(gòu)建的文庫(kù)不包含內(nèi)含子。7、轉(zhuǎn)化:外源DNA導(dǎo)入宿主細(xì)胞的過(guò)程稱之為轉(zhuǎn)化。8、重疊基因：一個(gè)基因序列中，具有另一基因的部分或所有序列。9、基因組文庫(kù)：把某種生物基因組的所有遺傳信息通過(guò)載體貯存在一個(gè)受體菌克隆子群體中，這個(gè)群體即為這種生物的基因組文庫(kù)。10、細(xì)胞工程：以生物細(xì)胞、組織或器官為研究對(duì)象，運(yùn)用工程學(xué)原理，按照預(yù)定目的，改變生物性狀,生產(chǎn)生物產(chǎn)品，為人類生產(chǎn)或生活服務(wù)的科學(xué)。11、.外植體：指用于離體培養(yǎng)的活的植物組織、器官等材料。12、愈傷組織：在離體培養(yǎng)過(guò)程中形成的具有分生能力的一團(tuán)不規(guī)則細(xì)胞，多在外植體切面上產(chǎn)生。13、體細(xì)胞雜交：（原生質(zhì)體融合）指在人工控制條件下不通過(guò)有性過(guò)程，兩種體細(xì)胞原生質(zhì)體互相融合產(chǎn)生雜種的方法。14、懸浮培養(yǎng)：是將植物游離細(xì)胞或細(xì)小的細(xì)胞團(tuán)，在液體培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)的方法。15、原生質(zhì)體：指除去細(xì)胞壁的細(xì)胞或是說(shuō)一個(gè)被質(zhì)膜所包圍的裸露細(xì)胞。16、傳代：將細(xì)胞從一個(gè)培養(yǎng)瓶轉(zhuǎn)移到此外一個(gè)培養(yǎng)瓶即稱為傳代或傳代培養(yǎng)。17、原代培養(yǎng)：也稱初代培養(yǎng)期。從體內(nèi)取出組織接種在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)到第一次傳代前階段，一般連續(xù)1-4周。18、細(xì)胞系：通過(guò)再培養(yǎng)后而形成的具有增殖能力、特性專一、類型均勻的培養(yǎng)細(xì)胞。22、誘變育種是指用物理、化學(xué)因素誘導(dǎo)植物的遺傳特性發(fā)生變異，再?gòu)淖儺惾后w中選擇符合人們某種規(guī)定的單株，進(jìn)而哺育成新的品種或種質(zhì)的育種方法。23、基因的直接進(jìn)化：在分子水平上，對(duì)目的基因直接解決，然后通過(guò)高通量的篩選方法，提高目的蛋白的性能?；虻闹苯舆M(jìn)化，可使已有基因獲得新的特性，可獲得自然界中不存在的基因，可解決許多新的理論和應(yīng)用問(wèn)題。24、酶工程：研究酶的生產(chǎn)和應(yīng)用的技術(shù)過(guò)程，涉及酶的制備、酶的固定化、酶分子修飾與改性和酶反映器等。26、酶分子修飾：通過(guò)各種方法是酶分子結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，從而改變酶的催化特性的技術(shù)。27、固定化酶：固定在一定載體上并在一定空間范圍發(fā)生催化反映的酶。28、酶分子定向進(jìn)化：模擬自然進(jìn)化過(guò)程（隨機(jī)突變和自然選擇），在體外進(jìn)行酶基因的人工隨機(jī)突變，建立突變基因文庫(kù)，在人工控制條件的特殊環(huán)境下，定向選擇得到具有優(yōu)良催化特性的酶的突變體的技術(shù)過(guò)程。同尾酶：辨認(rèn)的序列不同，但能切出相同的粘性末端基因文庫(kù)：從特定生物個(gè)體中分離的所有基因，這些基因以克隆的形式存在（人工構(gòu)建）。根據(jù)構(gòu)建方法的不同，基因文庫(kù)分為：基因組文庫(kù)cDNA文庫(kù)DNA重組技術(shù)：采用分子生物學(xué)手段，在體外將DNA分子插入病毒、質(zhì)?；蚱渌d體，構(gòu)成重組的遺傳物質(zhì)，導(dǎo)入宿主細(xì)胞并且連續(xù)穩(wěn)定的表達(dá)，從而獲得新特性或新品種。人工種子：即人為制造的種子，它是一種具有植物胚狀體或芽、營(yíng)養(yǎng)成分、激素以及其它成分的人工膠囊。干細(xì)胞：動(dòng)物胚胎及某些器官中具有自我復(fù)制和多向分化潛能的原始細(xì)胞，是重建、修復(fù)病損或者衰老組織、器官功能的抱負(fù)種子細(xì)胞。反義RNA技術(shù)：與靶核酸(如mRNA或有義DNA)鏈互補(bǔ)的RNA分子，可克制靶核酸的功能?；虮磉_(dá)載體：將目的基因?qū)胨拗骷?xì)胞，并可以表達(dá)目的基因的載體。二、選擇題1.基因工程的實(shí)質(zhì)是（A）A.基因重組

B.基因突變C.產(chǎn)生新的蛋白質(zhì) D.產(chǎn)生新的基因2.植物組織培養(yǎng)是指（C） A.離體的植物器官或細(xì)胞哺育成愈傷組織B.愈傷組織哺育成植株C.離體的植物器官、組織或細(xì)胞培養(yǎng)成完整植物體D.愈傷組織形成高度液泡化組織3.植物體細(xì)胞雜交要先去除細(xì)胞壁的因素是（C） A.植物體細(xì)胞的結(jié)構(gòu)組成中不涉及細(xì)胞壁B.細(xì)胞壁使原生質(zhì)體失去活力C.細(xì)胞壁阻礙了原生質(zhì)體的融合D.細(xì)胞壁不是原生質(zhì)的組成部分4.植物體細(xì)胞雜交的結(jié)果是（A）A.產(chǎn)生雜種植株 B.產(chǎn)生雜種細(xì)胞C.原生質(zhì)體融合 D.形成愈傷組織5.科學(xué)家把天竺葵的原生質(zhì)體和香茅草的原生質(zhì)體進(jìn)行誘導(dǎo)融合，哺育出的驅(qū)蚊草具有香茅醛，能散發(fā)出一種特殊的達(dá)成驅(qū)蚊且對(duì)人體無(wú)害的效果。下列關(guān)于驅(qū)蚊草哺育的敘述中，錯(cuò)誤的是（C）A.驅(qū)蚊草的哺育屬于細(xì)胞工程育種，其優(yōu)點(diǎn)是能克服遠(yuǎn)源雜交不親和的障礙 B.驅(qū)蚊草哺育過(guò)程要用到纖維素酶、果膠酶、PEG等試劑或離心、振動(dòng)、電刺激等方法 C.驅(qū)蚊草哺育過(guò)程是植物體細(xì)胞雜交，不同于植物組織培養(yǎng)，無(wú)愈傷組織和試管苗形成 D.驅(qū)蚊草不能通過(guò)天竺葵和香茅草雜交而獲得是由于不同物種間存在生殖隔離6.將胡蘿卜韌皮部細(xì)胞培養(yǎng)成幼苗時(shí)，下列條件中不需要的是（D） A.具有完整細(xì)胞核的細(xì)胞 B.一定的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和植物激素 C.離體狀態(tài) D.導(dǎo)入指定基因7.植物體細(xì)胞雜交的目的中錯(cuò)誤的是（B）A.把兩個(gè)植物體的優(yōu)良性狀集中在雜種植株上 B.獲得雜種植株C.克服遠(yuǎn)源雜交不親和的障礙 D.實(shí)現(xiàn)原生質(zhì)體的融合8.植物組織培養(yǎng)的用途中不對(duì)的的是（D）A.快速繁殖 B.生產(chǎn)新品種C.生產(chǎn)生物堿 D.生產(chǎn)白細(xì)胞介素－29.A種植物的細(xì)胞和B種植物細(xì)胞的結(jié)構(gòu)如下圖所示（僅顯示細(xì)胞核），將A、B兩種植物細(xì)胞去掉細(xì)胞壁后，誘導(dǎo)兩者的原生質(zhì)體融合，形成單核的雜種細(xì)胞，若通過(guò)組織培養(yǎng)后得到了雜種植株，則該雜種植株是（C）A.二倍體；基因型是DdYyRr B.三倍體；基因型是DdYyRr C.四倍體；基因型是DdYyRr D.四倍體；基因型是DdddYYyyRRrr10.以下關(guān)于原生質(zhì)的敘述，對(duì)的的是（C）A.原生質(zhì)泛指細(xì)胞內(nèi)的基質(zhì)B.原生質(zhì)就是細(xì)胞質(zhì)C.一個(gè)動(dòng)物細(xì)胞就是一團(tuán)原生質(zhì)D.細(xì)胞膜、細(xì)胞核和細(xì)胞壁是原生質(zhì)11.不能人工誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的方法是（D）A.振動(dòng)B.電刺激C.PEG試劑D.重壓12.植物細(xì)胞表現(xiàn)出全能性的必要條件是（C）A.給予適宜的營(yíng)養(yǎng)和外界條件B.導(dǎo)入其他植物細(xì)胞的基因C.脫離母體后，給予適宜的營(yíng)養(yǎng)和外界條件D.將成熟篩管的細(xì)胞核移植到去核的卵細(xì)胞內(nèi)13.細(xì)胞具有全能性的因素是（C）A.生物體細(xì)胞具有使后代細(xì)胞形成完整個(gè)體的潛能B.生物體的每一個(gè)細(xì)胞都具有全能性C.生物體的每一個(gè)細(xì)胞都具有個(gè)體發(fā)育的所有基因D.生物體的每一個(gè)細(xì)胞都是由受精卵發(fā)育來(lái)的14.植物組織培養(yǎng)過(guò)程中的脫分化是指（C）A.植物體的分生組織通過(guò)細(xì)胞分裂產(chǎn)生新細(xì)胞B.未成熟的種子通過(guò)解決哺育出幼苗的過(guò)程C.植物的器官、組織或細(xì)胞，通過(guò)離體培養(yǎng)產(chǎn)生愈傷組織的過(guò)程

D.取植物的枝芽哺育成一株新植物的過(guò)程14.下列植物細(xì)胞全能性最高的是（A）A.形成層細(xì)胞B.韌皮部細(xì)胞C.木質(zhì)部細(xì)胞D.葉肉細(xì)胞15.植物組織培養(yǎng)過(guò)程的順序是（A）①離體的植物器官、組織或細(xì)胞②根、芽③愈傷組織④脫分化⑤再分化⑥植物體A.①④③⑤②⑥B.①④③②⑤⑥C.①⑤④③②⑥D(zhuǎn).⑥①④③⑤②16.下列有關(guān)細(xì)胞工程的敘述不對(duì)的的是（C）A.在細(xì)胞整體水平上定向改變遺傳物質(zhì)B.在細(xì)胞器水平上定向改變遺傳物質(zhì)C.在細(xì)胞器水平上定向改變細(xì)胞核的遺傳物質(zhì)D.在細(xì)胞整體水平上獲得細(xì)胞產(chǎn)品17.下列細(xì)胞全能性最高的是（C）A.植物的卵細(xì)胞B.植物的精子細(xì)胞C.被子植物的受精卵D.被子植物的的葉肉細(xì)胞18.植物體細(xì)胞雜交的目的是（C）A.用酶解法去掉細(xì)胞壁分離出有活力的原生質(zhì)體B.以人工誘導(dǎo)法使兩個(gè)不同植物的原生質(zhì)體融合C.用植物組織培養(yǎng)法培養(yǎng)融合的原生質(zhì)體得到雜種植株D.通過(guò)以上三者來(lái)完畢19.下列提法對(duì)的的是（D）A.原生質(zhì)專指細(xì)胞質(zhì)B.人體內(nèi)的水都屬于原生質(zhì)C.細(xì)胞核不是原生質(zhì)D.一個(gè)動(dòng)物細(xì)胞就是一團(tuán)原生質(zhì)20.（多選）有關(guān)原生質(zhì)體的下列敘述中，對(duì)的的是（AC）A.組成原生質(zhì)體的重要生命物質(zhì)是蛋白質(zhì)和核酸B.原生質(zhì)體涉及細(xì)胞膜、液泡膜及兩者之間的原生質(zhì)C.被脫掉細(xì)胞壁的植物裸露細(xì)胞是原生質(zhì)體D.原生質(zhì)體只能用于植物細(xì)胞工程21.（多選）下圖為植物組織培養(yǎng)過(guò)程示意圖，則下列敘述對(duì)的的是（ABD）A.植物組織培養(yǎng)依據(jù)的生物學(xué)原理是細(xì)胞的全能性B.③→④過(guò)程是指植物的營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)和生殖生長(zhǎng)階段C.將①經(jīng)脫分化培養(yǎng)成②時(shí)，再植上人造種皮即可獲得人工種子D.②→③的再分化過(guò)程中，誘導(dǎo)②生根的激素為細(xì)胞分裂素和生長(zhǎng)素22、基因工程操作的三大基本元件是（A）

I供體II受體III載體IV抗體V配體

ＡI+II+III

ＢI+III+IV

ＣII+III+IV

ＤII+IV+V

ＥIII+IV+V23、基因工程的單元操作順序是（B）Ａ增，轉(zhuǎn)，檢，切，接

Ｂ切，接，轉(zhuǎn)，增，檢

Ｃ接，轉(zhuǎn)，增，檢，切

Ｄ檢，切，接，增，轉(zhuǎn)

Ｅ切，接，增，轉(zhuǎn)，檢24、mRNA分離純化技術(shù)的關(guān)鍵是（E）

Ａ細(xì)胞的溫和破碎

Ｂ分離系統(tǒng)中不得具有痕量的SDS

Ｃ高離子強(qiáng)度緩沖液的使用

Ｄ密度梯度超離心

Ｅ嚴(yán)防核酸酶的降解25、cDNA第一鏈合成所需的引物是（D）ＡPolyA

ＢPolyC

ＣPolyG

ＤPolyT

Ｅ發(fā)夾結(jié)構(gòu)26、cDNA法獲得目的基因的優(yōu)點(diǎn)是(B)Ａ成功率高

Ｂ不含內(nèi)含子

Ｃ操作簡(jiǎn)便

Ｄ表達(dá)產(chǎn)物可以分泌

Ｅ能糾正密碼子的偏愛性27、下列基因調(diào)控元件中屬于反式調(diào)控元件的是（A）Ａ阻遏蛋白

Ｂ啟動(dòng)子

Ｃ操作子

Ｄ終止子

Ｅ增強(qiáng)子28、外源基因在大腸桿菌中以融合蛋白的形式表達(dá)的優(yōu)點(diǎn)是【B】

I融合基因能穩(wěn)定擴(kuò)增II融合蛋白能抗蛋白酶的降解III表達(dá)產(chǎn)物易于親和層析分離

ＡIII

ＢI+II

ＣI+III

ＤII+III

ＥI+II+III29、基因工程菌中重組質(zhì)粒的丟失機(jī)制是（B）Ａ重組質(zhì)粒滲透至細(xì)胞外

Ｂ重組質(zhì)粒被細(xì)胞內(nèi)核酸酶降解

Ｃ重組質(zhì)粒在細(xì)胞分裂時(shí)不均勻分派

Ｄ重組質(zhì)粒殺死受體細(xì)胞

Ｅ重組質(zhì)粒刺激受體細(xì)胞提高其通透性30、細(xì)胞具有全能性的因素是（C）A．生物體細(xì)胞具有發(fā)育成完整個(gè)體的潛能B．生物體的每一個(gè)細(xì)胞都具有全能性C．生物體的每一個(gè)細(xì)胞都具有個(gè)體發(fā)育的所有基因D．生物體的每一個(gè)細(xì)胞都是由受精卵發(fā)育來(lái)的31、與傳統(tǒng)育種相比，植物體細(xì)胞雜交在育種作物新品種方面的重大突破表現(xiàn)在（B）A．證明雜種細(xì)胞具有全能性B．克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙C．縮短育種周期，減少盲目性D．快速哺育無(wú)病毒植株，保存雜種優(yōu)勢(shì)32、下列關(guān)于植物體細(xì)胞雜交過(guò)程的敘述中，不對(duì)的的是（C）A．用酶解法去掉細(xì)胞壁分離出有活力的原生質(zhì)體B．誘導(dǎo)兩種植物的原生質(zhì)體融合進(jìn)而形成雜種細(xì)胞C．單個(gè)的雜種細(xì)胞在組織培養(yǎng)過(guò)程中不要通過(guò)脫分化D．雜種細(xì)胞最終培養(yǎng)為雜種植株33、下列哪種生物技術(shù)能有效的打破物種的界線，定向地改造生物的遺傳性狀，哺育新的農(nóng)作物優(yōu)良品種（D）A．單倍體育種技術(shù)B．誘變育種技術(shù)C．雜交育種技術(shù)D．細(xì)胞工程技術(shù)34、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的理論基礎(chǔ)是（A）A．細(xì)胞分裂B．細(xì)胞分化C．細(xì)胞全能性D．細(xì)胞癌變35、單克隆抗體的制備過(guò)程中引入骨髓瘤細(xì)胞的目的是（A）A．能使雜交細(xì)胞大量增殖B．產(chǎn)生特異性強(qiáng)的個(gè)體C．是細(xì)胞融合容易進(jìn)行D．是產(chǎn)生的抗體純度更高36、下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述中，不對(duì)的的是（C）A．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)前要用胰蛋白酶或膠原蛋白酶使細(xì)胞分散開來(lái)B．通常將動(dòng)物組織細(xì)胞消化后的初次培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng)C．細(xì)胞的癌變通常發(fā)生在原代培養(yǎng)向傳代培養(yǎng)的過(guò)渡過(guò)程中D．傳代培養(yǎng)的細(xì)胞在傳至10~50代左右時(shí)，部分細(xì)胞的核型也許發(fā)生變化37、在下列自然現(xiàn)象或科學(xué)研究成果中，能為“動(dòng)物細(xì)胞具有全能性”觀點(diǎn)提供直接證據(jù)的是（B）A．壁虎斷尾后重新長(zhǎng)出尾部B．蜜蜂的未受精卵細(xì)胞發(fā)育成雄蜂C．用體外培養(yǎng)的皮膚治療燒傷病人D．小鼠腺細(xì)胞的自我復(fù)制38、細(xì)胞株的特點(diǎn)是（C）A．遺傳物質(zhì)沒有改變，可以無(wú)限傳代B．遺傳物質(zhì)發(fā)生改變，不可無(wú)限傳代C．遺傳物質(zhì)沒有改變，不可無(wú)限傳代D．遺傳物質(zhì)發(fā)生改變，有癌變特點(diǎn)，可以無(wú)限傳代39、生物技術(shù)的發(fā)展速度不久，已滅絕生物的“復(fù)生”將不再是神話。假如世界上最后一只野驢剛死亡，以下較易成功“復(fù)生”野驢的方法是（C）A．將野驢的體細(xì)胞取出，運(yùn)用組織培養(yǎng)技術(shù)，經(jīng)脫分化、再分化，哺育成新個(gè)體B．將野驢的體細(xì)胞兩兩融合，再經(jīng)組織培養(yǎng)哺育成新個(gè)體C．取出野驢的體細(xì)胞核移植到母家驢的去核卵母細(xì)胞中，經(jīng)孕育培養(yǎng)成新個(gè)體D．將野驢的基因?qū)爰殷H的受精卵中，哺育成新個(gè)體40、酶工程的技術(shù)過(guò)程是（C）A、運(yùn)用酶的催化作用將底物轉(zhuǎn)化為產(chǎn)物B、通過(guò)發(fā)酵生產(chǎn)和分離純化獲得所需酶C、酶的生產(chǎn)與應(yīng)用D、酶在工業(yè)上大規(guī)模應(yīng)用42、酶分子的物理修飾是通過(guò)物理方法改變酶分子結(jié)構(gòu)而改變酶的催化特性（C）A、組成單位B、側(cè)鏈基團(tuán)C、空間構(gòu)象D、空間構(gòu)型43、酶分子氨基酸修飾的分子修飾（C）A、只能用于核酸類酶B、只能用于蛋白類酶C、可以用于蛋白類酶和核酸類酶D、不能用于蛋白類酶和核酸類酶44、酶的膜反映器是（A）A、將酶催化反映與膜分離組合在一起B(yǎng)、運(yùn)用酶膜進(jìn)行反映C、運(yùn)用半透膜進(jìn)行底物與產(chǎn)物分離D、運(yùn)用半透膜進(jìn)行酶與產(chǎn)物分離三、判斷題基因是不可分割的最小的重組單位和突變單位。（×）cDNA文庫(kù)不包含內(nèi)含子。（√）Western雜交是DNA—RNA之間的雜交。（×）4、假如需要得到真核生物基因的完整序列，必須用基因組文庫(kù)方能達(dá)成。（√）5、基因是不可分割的最小的重組單位和突變單位。（×）6、克隆的本質(zhì)特性是生物個(gè)體在遺傳組成上的完全一致性。（√）7、假基因不能合成功能蛋白質(zhì)，是相應(yīng)的正?；蛲蛔円鸬?。（√）8、Northern雜交是DNA-RNA之間的雜交。（√）9、核酸Tm的高低與DNA分子中G+C的含量有關(guān)，堿基數(shù)相同的情況下，其含量越高，則Tm越高。（√）10、農(nóng)桿菌介導(dǎo)法和基因槍法是植物轉(zhuǎn)化的重要方法（√）11、（√）有一些來(lái)源不同的限制性內(nèi)切酶辨認(rèn)的是同樣的核苷酸序列，這類酶稱為同裂酶。12、檢測(cè)外源基因的導(dǎo)入時(shí)，PCR的準(zhǔn)確性要高于Southern雜交的準(zhǔn)確性。（×）13、轉(zhuǎn)基因食品目前存在的最大問(wèn)題是我們無(wú)法檢測(cè)某種食品到底是不是轉(zhuǎn)基因食品。（×）14、轉(zhuǎn)基因生物直接食用的，稱為“轉(zhuǎn)基因食品”，而作為加工原料生產(chǎn)的食品，則不能被稱為“轉(zhuǎn)基因食品”。（×）15、質(zhì)粒DNA進(jìn)行電泳時(shí)，其三種構(gòu)型中，開環(huán)DNA跑的最快，共價(jià)閉環(huán)形DNA跑得最慢。（×）16、在生物技術(shù)的五大工程中，生化工程是核心技術(shù)，它能帶動(dòng)其他技術(shù)的發(fā)展。（×）17、cDNA是以DNA為起始材料，通過(guò)復(fù)制得到的互補(bǔ)DNA。（×）18、DNA的復(fù)制是全保存不連續(xù)復(fù)制。（×）19、基因是一個(gè)功能單位，但不是一個(gè)不可分割的最小的重組單位和突變單位。（√）20、Western雜交可以檢測(cè)外源DNA的導(dǎo)入與否。（×）21、生物技術(shù)是由多學(xué)科綜合而成的一門新學(xué)科。（√）22、1977年，美國(guó)一方面采用大腸桿菌生產(chǎn)了人類第一個(gè)基因工程藥物——人生長(zhǎng)激素釋放克制劑激素。（√）23、生物技術(shù)是一門新興學(xué)科，它涉及當(dāng)代生物技術(shù)和現(xiàn)代生物技術(shù)兩部分.（√）24、生物技術(shù)重要涉及五項(xiàng)技術(shù)（工程）。（√）25、現(xiàn)代生物技術(shù)是所有自然科學(xué)領(lǐng)域中涵蓋范圍最廣的學(xué)科之一。（√）26、本世紀(jì)初，遺傳學(xué)的建立及其應(yīng)用，產(chǎn)生了遺傳育種學(xué)，并于60年代取得了輝煌的成就，被譽(yù)為“第一次綠色革命”。（√）27、無(wú)論用哪種轉(zhuǎn)化方法均可用PBR322作載體（×）28、進(jìn)入細(xì)菌的外來(lái)DNA之所以被降解，是由于細(xì)菌只修飾自身DNA，不修飾外來(lái)DNA（×）29、只有粘粒端才可以被連接起來(lái)（×）30、用自身作引物合成的cDNA鏈，往往cDNA并不完整（×）31、所謂半保存復(fù)制就是以DNA親本鏈作為合成新子鏈DNA的模板，這樣產(chǎn)生的雙鏈DNA分子由一條舊鏈和一條新鏈組成。（√）32、任何細(xì)胞都可用作受體細(xì)胞。（×）33、克隆子就是重組子。（×）34、原核生物細(xì)胞是最抱負(fù)的受體細(xì)胞。（√）35、目的基因來(lái)源于各種生物，其中真核生物染色體基因組是獲得目的基因的重要來(lái)源。（√）36、E.coliDNA連接酶只能催化雙鏈DNA片斷互補(bǔ)黏性末端之間的連接。（√）37、酶是具有生物催化特性的特殊蛋白質(zhì)。（╳）38、酶的分類與命名的基礎(chǔ)是酶的專一性。（√）39、酶活力指在一定條件下酶所催化的反映速度，反映速度越大，意味著酶活力越高。（√）40、液體深層發(fā)酵是目前酶發(fā)酵生產(chǎn)的重要方式。（√）41、培養(yǎng)基中的碳源，其唯一作用是可以向細(xì)胞提供碳素化合物的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。（╳）42、膜分離過(guò)程中，膜的作用是選擇性地讓小于其孔徑的物質(zhì)顆粒成分或分子通過(guò)，而把大于其孔徑的顆粒截留。（√）43、在酶與底物、酶與競(jìng)爭(zhēng)性克制劑、酶與輔酶之間都是互配的分子對(duì)，在酶的親和層析分離中，可把分子對(duì)中的任何一方作為固定相。（√）44、角叉菜膠也是一種凝膠，在酶工程中常用于凝膠層析分離純化酶。（╳）45、α－淀粉酶在一定條件下可使淀粉液化，但不稱為糊精化酶。（╳）46、酶法產(chǎn)生飴糖使用α－淀粉酶和葡萄糖異構(gòu)酶協(xié)同作用。（╳）48、重組質(zhì)粒載體可以通過(guò)細(xì)胞轉(zhuǎn)化方法將重組DNA轉(zhuǎn)入受體細(xì)胞(√)49、通過(guò)DNA重拍技術(shù)進(jìn)行酶基因的體外隨機(jī)突變，可以獲得大量的正突變基因。（╳）50、基因家族重排技術(shù)需要通過(guò)不加引物的多次PCR循環(huán)，使DNA的堿基序列重新排布而引起基因突變。(√)52、包埋法可以用于酶、細(xì)胞和原生質(zhì)體的固定化。（√）53、固定化原生質(zhì)體由于細(xì)胞內(nèi)的結(jié)構(gòu)完整，可以保持細(xì)胞原有的生命活動(dòng)能力。（╳）54、采用共價(jià)結(jié)合法制備得到的固定化細(xì)胞具有很好的穩(wěn)定性。（√）四、填空題基因工程技術(shù)是生物技術(shù)的核心技術(shù)。PCR涉及三個(gè)環(huán)節(jié)_變性，退火，延伸。基因工程的實(shí)行涉及四個(gè)必要條件：工具酶、基因、載體和受體細(xì)胞。限制性內(nèi)切酶酶切DNA片斷后通常有兩類末端：平末端、黏性末端?；蚪M文庫(kù)中涉及有內(nèi)含子和外顯子，而cDNA文庫(kù)中則不含內(nèi)含子生物技術(shù)重要是指基因工程、細(xì)胞工程、酶工程、發(fā)酵工程、蛋白質(zhì)工程?，F(xiàn)代生物技術(shù)是以20世紀(jì)70年代DNA重組技術(shù)的建立為標(biāo)志。細(xì)胞工程涉及植物細(xì)胞的體外培養(yǎng)技術(shù)、細(xì)胞融合技術(shù)、細(xì)胞器移植技術(shù)、克隆技術(shù)、干細(xì)胞技術(shù)。酶工程涉及酶的固定化技術(shù)、細(xì)胞的固定化技術(shù)、酶的修飾改造技術(shù)、酶反映器的設(shè)計(jì)等技術(shù)。基因工程操作流程重要涉及目的基因分離、與克隆載體重組、轉(zhuǎn)入受體細(xì)胞、篩選和鑒定克隆子?；蚬こ滩僮髁鞒讨匾婕澳康幕蚍蛛x、與克隆載體重組、轉(zhuǎn)入受體細(xì)胞、篩選和鑒定克隆子。重組DNA導(dǎo)入植物細(xì)胞常采用農(nóng)桿菌介導(dǎo)的Ti質(zhì)粒載體轉(zhuǎn)化法、電穿孔法、微彈轟擊法、花粉管通道法。導(dǎo)入動(dòng)物細(xì)胞常用的方法有病毒顆粒介導(dǎo)的病毒載體轉(zhuǎn)導(dǎo)法、磷酸鈣轉(zhuǎn)染法、顯微注射法等。酶的生產(chǎn)方法有提取法，發(fā)酵法和化學(xué)合成法。酶分子修飾的重要目的是改善酶的性能，即提高酶的活力、減少抗原性，增長(zhǎng)穩(wěn)定性。根據(jù)分子中起催化作用的重要組分的不同，酶可以分為蛋白酶和核酶兩大類。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)方法重要有懸浮培養(yǎng)，貼壁培養(yǎng)、固定化細(xì)胞培養(yǎng)。定點(diǎn)突變是在DNA序列的某一特定位點(diǎn)上，進(jìn)行堿基的改變，從而獲得突變基因的操作技術(shù)。細(xì)胞工程涉及植物細(xì)胞的體外培養(yǎng)技術(shù)、細(xì)胞融合技術(shù)、細(xì)胞器移植技術(shù)、克隆技術(shù)、干細(xì)胞技術(shù)。酶工程涉及酶的固定化技術(shù)、細(xì)胞的固定化技術(shù)、酶的修飾改造技術(shù)、酶反映器的設(shè)計(jì)等技術(shù)?；蚬こ虖难芯?jī)?nèi)容上重要涉及（在供體細(xì)胞中用限制性內(nèi)切酶切割基因）、（把獲得的目的基因與制備好的運(yùn)載體用DNA連接）、（把重組體進(jìn)入宿主細(xì)胞）和（篩選出能表達(dá)目的基因的受體細(xì)胞）等4方面。cosmidvector的特點(diǎn)重要涉及（具有l(wèi)噬菌體的特性）、（具有質(zhì)粒載體的特性）、（方便的選擇）、（高容量的克隆能力）。細(xì)胞融合技術(shù)的重要過(guò)程重要涉及（制備原生質(zhì)體）、（誘導(dǎo)細(xì)胞融合）、（篩選雜合細(xì)胞）三個(gè)環(huán)節(jié)。植物組織培養(yǎng)過(guò)程中生長(zhǎng)素對(duì)細(xì)胞分裂素的比值（低）高/低有助于促進(jìn)胚芽及胚根的誘導(dǎo)分化。細(xì)胞融合技術(shù)中雜合體的鑒別與篩選技術(shù)重要涉及（顯微鏡鑒別）、（互補(bǔ)法）、（細(xì)胞與分子生物學(xué)的方法）、（再生體植株表型）等手段。按分化潛能的大小，干細(xì)胞基本上可以分為（全能干細(xì)胞）、（多能性干細(xì)胞）、（專一性干細(xì)胞）三種類型。液體深層發(fā)酵是近年來(lái)發(fā)展起來(lái)的先進(jìn)發(fā)酵技術(shù)，與其它發(fā)酵方法相比，它的優(yōu)點(diǎn)重要涉及（液體懸浮狀態(tài)有利微生物生長(zhǎng)）、（在液體中菌體及營(yíng)養(yǎng)物、產(chǎn)物易于擴(kuò)散，使發(fā)酵可在均質(zhì)條件下進(jìn)行，便于控制易進(jìn)行自動(dòng)化控制）、（液體輸送方便，易于機(jī)械化操作）、（占地小，易進(jìn)行自動(dòng)化控制）、（產(chǎn)品易于提取、精制）等5個(gè)方面。溫度對(duì)發(fā)酵過(guò)程的影響重要體現(xiàn)在（影響酶促反映速率）、（改變菌體代謝物的合成方向）、（影響代謝調(diào)控機(jī)制）、（影響發(fā)酵液理化性質(zhì)）等4個(gè)方面。優(yōu)良產(chǎn)酶菌株的篩選條件重要涉及（繁殖快，產(chǎn)酶高）、（能在較經(jīng)濟(jì)的底物上生長(zhǎng)良好）、（產(chǎn)酶性能穩(wěn)定、菌株不易退化，不易受污染）、（產(chǎn)的酶易分離純化，不是致病菌）4個(gè)方面。酶分子修飾重要有（金屬離子置換）、（大分子結(jié)合修飾）、（側(cè)鏈基團(tuán)修飾）、（主鏈的有限水解修飾）、（氨基酸置換修飾）、（物理修飾）等6種方法。固定化酶的重要缺陷是（酶易失活）。植物細(xì)胞融合技術(shù)的重要過(guò)程重要涉及（制備原生質(zhì)體）、（誘導(dǎo)細(xì)胞融合）、（篩選雜合細(xì)胞）三個(gè)環(huán)節(jié)。作為基因操作的載體，應(yīng)具有的基本條件重要有（具有對(duì)受體細(xì)胞的可轉(zhuǎn)移性，并在宿主細(xì)胞內(nèi)能獨(dú)立復(fù)制）、（有選擇性標(biāo)記，便于重組DNA分子的檢測(cè)）、（有一段多克隆位點(diǎn)）、（分子量小，拷貝數(shù)多）、（容易從宿主細(xì)胞中分離純化）。分批培養(yǎng)條件下的微生物生長(zhǎng)曲線可以分為（延滯期）、（加速生長(zhǎng)期）、（指數(shù)生長(zhǎng)期）、（減速期）、（穩(wěn)定期）和（衰亡期）等六個(gè)時(shí)期。工業(yè)發(fā)酵按微生物對(duì)氧的不同需求可分為按培養(yǎng)基的物理性狀可分為（固體發(fā)酵）、（液體發(fā)酵）；按發(fā)酵菌的種類可分為（好氧發(fā)酵）及（厭氧發(fā)酵）兩種發(fā)酵形式。植物組織培養(yǎng)重要涉及預(yù)備階段、(誘導(dǎo)去分化)、（繼代增殖）、（生根發(fā)芽）、（移栽成活）等環(huán)節(jié)。細(xì)胞融合技術(shù)中雜合體的鑒別與篩選技術(shù)重要涉及（顯微鏡觀測(cè)）、（互補(bǔ)法）、（細(xì)胞與分子生物學(xué)方法）、（再生植株表型觀測(cè)）等手段。植物脫病毒的途徑重要有（物理學(xué)方法）、（化學(xué)方法）、（生物學(xué)方法）、（綜合脫毒法）等四種。干細(xì)胞的研究重要涉及（獲得干細(xì)胞系）、（建立誘導(dǎo)分化模型）、（植入受體器官）三個(gè)階段，應(yīng)用干細(xì)胞治療疾病與傳統(tǒng)治療方法相比具有（低毒性）、（不需要了解發(fā)病機(jī)制）、（可避免免疫排斥）三方面的優(yōu)點(diǎn)。微生物產(chǎn)酶過(guò)程中，提高酶產(chǎn)量可以通過(guò)（添加誘導(dǎo)物）、（控制阻遏物濃度）、（表面活性劑）、（添加產(chǎn)酶促進(jìn)劑）等措施實(shí)現(xiàn)。運(yùn)用載體結(jié)合法進(jìn)行酶的固定化的途徑重要有（物理吸附）、（離子吸附）、（43共價(jià)結(jié)合）、（螯合法）。

五、簡(jiǎn)答題1、基因工程操作過(guò)程的重要環(huán)節(jié)有哪些？①分離或合成基因；②通過(guò)體外重組將基因插入載體；③將重組DNA導(dǎo)入細(xì)胞；④擴(kuò)增克隆的基因；⑤篩選重組體克?。虎迣?duì)克隆的基因進(jìn)行鑒定或測(cè)序；⑦控制外源基因的表達(dá)；⑧得到基因產(chǎn)物或轉(zhuǎn)基因動(dòng)物、轉(zhuǎn)基因植物2、一種抱負(fù)的用作克隆載體的質(zhì)粒必須滿足的條件是什么？（1）具有轉(zhuǎn)錄復(fù)制起始點(diǎn)。（2）具有抗菌素抗性基因。（3）具有若干限制酶切單一辨認(rèn)位點(diǎn)。（4）具有較小的分子量和較高的拷貝數(shù)。3、重組子篩選所用的核酸分析法的內(nèi)容是什么？1）核酸雜交法①菌落印跡原位雜交；②斑點(diǎn)印跡雜交；③Southern印跡雜交2）聚合酶鏈?zhǔn)椒从撤?）DNA測(cè)序法4、基因工程研究的理論依據(jù)是什么？（1）不同基因具有相同的物質(zhì)基礎(chǔ)。（2）基因是可切割的（3）基因是可以轉(zhuǎn)移的（4）多肽與基因之間存在相應(yīng)關(guān)系（5）遺傳密碼是通用的（6）基因可以通過(guò)復(fù)制把遺傳信息傳遞給下一代5、分離目的基因的途徑有哪些？（1）酶切法（2）PCR法（3）化學(xué)合成法（4）基因組或cDNA文庫(kù)法6、談?wù)勀銓?duì)轉(zhuǎn)基因食品的見解。轉(zhuǎn)基因食品的優(yōu)點(diǎn)：（1）可延長(zhǎng)蔬菜的貨架期及感官特性。（2）提高食品的品質(zhì)。（3）提高食品的營(yíng)養(yǎng)。（4）提高肉、奶和畜類產(chǎn)品的數(shù)量和質(zhì)量。（5）增長(zhǎng)農(nóng)作物抗逆能力，增長(zhǎng)農(nóng)業(yè)產(chǎn)量。（6）生產(chǎn)可食性疫苗或藥物（7）生物功能性食品轉(zhuǎn)基因食品的安全性（1）目前有一些證據(jù)指出轉(zhuǎn)基因食品具有潛在的危險(xiǎn)。（2）但更多科學(xué)家的實(shí)驗(yàn)表白轉(zhuǎn)基因食品是安全的任何一種轉(zhuǎn)基因食品在上市之前都進(jìn)行了大量的科學(xué)實(shí)驗(yàn)，國(guó)家和政府有相關(guān)的法律法規(guī)進(jìn)行約束，而科學(xué)家們也都抱有很嚴(yán)謹(jǐn)?shù)闹螌W(xué)態(tài)度。一種食品會(huì)不會(huì)導(dǎo)致中毒重要是看它在人體內(nèi)有沒有受體和能不能被代謝掉，轉(zhuǎn)化的基因是通過(guò)篩選的、作用明確的，所以轉(zhuǎn)基因成分不會(huì)在人體內(nèi)積累，也就不會(huì)有害。7、目的基因克隆的基本方法有哪些？（1）直接從染色體DNA中分離：僅合用于原核生物、葉綠體和線粒體基因的分離，較少采用。（2）人工合成：根據(jù)已知多肽鏈的氨基酸順序，運(yùn)用遺傳密碼表推定其核苷酸順序再進(jìn)行人工合成。適應(yīng)于編碼小分子多肽的基因。（3）從mRNA合成cDNA：采用一定的方法釣取特定基因的mRNA，再通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄酶催化合成其互補(bǔ)DNA（cDNA），除去RNA鏈后，再用DNA聚合酶合成其互補(bǔ)DNA鏈，從而得到雙鏈DNA。這一方法通?？傻玫娇杀磉_(dá)的完整基因。（4）運(yùn)用PCR合成：如已知目的基因兩端的序列，則可采用聚合酶鏈反映(polymerasechainreaction,PCR)技術(shù)，在體外合成目的基因。（5）從基因文庫(kù)中篩選：一方面建立基因組或cDNA文庫(kù)，運(yùn)用探針從文庫(kù)中篩選目的克隆。8、cDNA文庫(kù)和基因組文庫(kù)的重要差別有哪些？（1）基因組文庫(kù)克隆的是任何基因，涉及未知功能的DNA序列；cDNA文庫(kù)克隆的是具有蛋白質(zhì)產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)基因，涉及調(diào)節(jié)基因。（2）基因組文庫(kù)克隆的是所有遺傳信息，不受時(shí)空影響；cDNA文庫(kù)克隆的是不完全的編碼DNA序列，因它受發(fā)育和調(diào)控因子的影響。（3）基因組文庫(kù)中的編碼基因是真實(shí)基因，具有內(nèi)含子和外顯子，而cDNA文庫(kù)克隆的是不含內(nèi)含子的功能基因。9、簡(jiǎn)述一項(xiàng)可以授予專利的生物技術(shù)發(fā)明必須滿足的條件。（1）具有新奇性（2）具有發(fā)明性（3）具有應(yīng)用價(jià)值（4）在申請(qǐng)專利說(shuō)明書對(duì)發(fā)明做詳盡的描述，使在同一領(lǐng)域的其別人可以了解執(zhí)行。10、重組DNA導(dǎo)入受體細(xì)胞方法（1）化合物誘導(dǎo)法（2）電穿孔法（3）農(nóng)桿菌介導(dǎo)基因轉(zhuǎn)化法（葉盤法）（4）微彈轟擊法（5）超聲波解決法（6）脂質(zhì)體介導(dǎo)法（7）體內(nèi)注射轉(zhuǎn)化法（8）精子介導(dǎo)法11、簡(jiǎn)述現(xiàn)代生物技術(shù)在人類生產(chǎn)生活中的作用（1）改善農(nóng)業(yè)生產(chǎn)、解決食品短缺①提高農(nóng)作物產(chǎn)量及其品質(zhì)（哺育抗逆的作物優(yōu)良品系、植物種苗的工廠化生產(chǎn)、提高糧食品質(zhì)、生物固氮，減少化肥使用量、生物農(nóng)藥，生產(chǎn)綠色食品）②發(fā)展畜牧業(yè)生產(chǎn)（動(dòng)物的大量快速無(wú)性繁殖、哺育動(dòng)物的優(yōu)良品系）（2）食品生產(chǎn)、食品加工、食品檢測(cè)（3）提高生命質(zhì)量、延長(zhǎng)人類壽命（開發(fā)制造奇特而又貴重的新型藥品、疾病的防止和診斷、基因治療）（4）解決能源危機(jī)、治理環(huán)境污染（解決能源危機(jī)、環(huán)境保護(hù)）（5）制造工業(yè)原料、生產(chǎn)貴重金屬（制造工業(yè)原料、生產(chǎn)貴重金屬）12、科學(xué)家將分離得到的成熟的胡蘿卜根的韌皮部細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，由單個(gè)細(xì)胞發(fā)育成了完整的新植株。過(guò)程圖解如下，請(qǐng)回答與之有關(guān)的問(wèn)題：（1）科學(xué)家所用的這種生物技術(shù)叫做植物組織培養(yǎng)，這個(gè)實(shí)驗(yàn)表白高度分化的植物細(xì)拔仍然具有發(fā)育成完整植物的能力。（2）通過(guò)B過(guò)程產(chǎn)生的愈傷組織的細(xì)胞與根的韌皮部細(xì)胞在染色體的數(shù)目上是否相同？相同；染色體上所含的遺傳信息是否相同？相同；細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)是否相同？不同。13、工業(yè)化菌種的規(guī)定？(1)原料便宜、生長(zhǎng)迅速、繁殖能力強(qiáng)、目的產(chǎn)物產(chǎn)量高。

(2)發(fā)酵中產(chǎn)生的泡沫少，易于控制培養(yǎng)條件，酶活性高，發(fā)酵周期短。

(3)抗雜菌和噬菌體的能力強(qiáng)。

(4)不產(chǎn)生或少產(chǎn)生與目的產(chǎn)物相近的幅產(chǎn)物。

(5)

菌種遺傳性穩(wěn)定，不易變異和退化

(6)不產(chǎn)生任何有害的生物活性物質(zhì)和毒素，保證安全生產(chǎn)。14、什么是產(chǎn)物促進(jìn)劑？產(chǎn)物促進(jìn)劑舉例？是指那些非細(xì)胞生長(zhǎng)所必須的營(yíng)養(yǎng)物，又非前體，但加入后卻能提高產(chǎn)量的添加劑。如：鏈霉素生產(chǎn)加巴比妥，賴氨酸生產(chǎn)加紅霉素等。如加入微量的“九二O”可以促進(jìn)某些放線菌的生長(zhǎng)，縮短發(fā)酵周期，提高抗生素的產(chǎn)量，因此起到生長(zhǎng)因素的作用。尚有在四環(huán)素發(fā)酵中加入硫氰化芐，菌體呼吸強(qiáng)，糖代謝快，而抗生素合成受阻，所以減少菌體呼吸，產(chǎn)量就會(huì)提高。15、為什么屬于滯后合成型的酶要在細(xì)胞生長(zhǎng)一段時(shí)間甚至進(jìn)入平衡期以后才開始合成？答：屬于滯后合成型的酶，之所以要在細(xì)胞生長(zhǎng)一段時(shí)間甚至進(jìn)入平衡期后才開始合成，重要有兩個(gè)因素：一是由于酶的生物合成受到培養(yǎng)基中阻遏作用，只有隨著細(xì)胞的生長(zhǎng)，阻遏物幾乎被細(xì)胞用完而解除阻遏以后，酶才開始大量合成；二是由于該類型酶對(duì)所相應(yīng)的mRNA穩(wěn)定性好，可以在細(xì)胞生長(zhǎng)進(jìn)入平衡期后的相稱長(zhǎng)的一段時(shí)間內(nèi)，繼續(xù)進(jìn)行酶的生物合成。16、簡(jiǎn)述定點(diǎn)突變技術(shù)的重要技術(shù)過(guò)程及其在酶分子修飾中的應(yīng)用答：定點(diǎn)突變是在DNA序列中的某一特定位點(diǎn)上進(jìn)行堿基的改變從而獲得突變基因的操作技術(shù)。定位突變技術(shù)用于酶分子修飾的重要過(guò)程如下：、新的酶分子結(jié)構(gòu)的設(shè)計(jì)根據(jù)已知的酶RNA或酶蛋白的化學(xué)結(jié)構(gòu)和空間結(jié)構(gòu)及其特性，特別是根據(jù)酶在催化活性、穩(wěn)定性、抗原性和底物專一性等方面存在的問(wèn)題，合理設(shè)計(jì)新的酶RNA的核苷酸排列順序或酶蛋白的氨基酸排列順序，擬定欲置換的核苷酸或氨基酸及其位置。、突變基因堿基序列的擬定對(duì)于核酸類酶，根據(jù)欲獲得的酶RNA的核苷酸排列順序，依照互補(bǔ)原則，擬定其相應(yīng)的突變基因上的堿基序列，擬定需要置換的堿基及其位置。對(duì)于蛋白類酶，一方面根據(jù)欲獲得的酶蛋白的氨基酸排列順序，對(duì)照遺傳密碼，擬定其相應(yīng)的mRAN上的核苷酸序列，再依據(jù)堿基互補(bǔ)原則，擬定突變基因上的堿基序列，并擬定需要置換的堿基及其位置。、突變基因的獲得根據(jù)欲獲得的突變基因的堿基序列及其需要置換的堿基位置，一方面用DNA合成儀合成具有被置換了堿基的寡核苷酶，再用此寡核苷酶為引物通過(guò)聚合酶鏈反映（PCR）等技術(shù)獲得所需的大量突變基因。、新酶的獲得將上述定位突變獲得的突變基因進(jìn)行體外重組，插入到適宜的基因載體中，然后通過(guò)轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)導(dǎo)、介導(dǎo)、基因槍、顯微注射等技術(shù)，轉(zhuǎn)入到適宜的宿主細(xì)胞，再在適宜的條件下進(jìn)行表達(dá)，就可獲得通過(guò)修飾的新酶。定點(diǎn)突變技術(shù)在酶分子修飾中試一種行之有效的常用方法，定點(diǎn)突變技術(shù)為氨基酸置換修飾和核苷酸置換修飾提供了先進(jìn)、可靠的手段。17、何謂固定化酶？固定化酶的特性與游離酶的比較有哪些改變？答：固定化酶是指固定在一定載體上并在一定的空間范圍內(nèi)進(jìn)行催化反映的酶。固定化酶既保持了酶的催化功能，又克服了游離酶的局限性之處，具有提高酶的催化效率，增強(qiáng)穩(wěn)定性，可反復(fù)或連續(xù)使用以及易于和反映產(chǎn)物分開等顯著優(yōu)點(diǎn)。固定化酶與游離酶比較，其催化特性重要有下列變化：固定化酶的穩(wěn)定性一般比游離酶的穩(wěn)定性好，重要表現(xiàn)在：對(duì)熱穩(wěn)定性提高，可以耐受較高的溫度；保存穩(wěn)定性好，可以在一定條件下保存較長(zhǎng)時(shí)間；對(duì)蛋白酶的抵抗性增強(qiáng)，不易被蛋白酶水解；對(duì)變性劑耐受性提高，在尿素、有機(jī)溶劑和鹽酸胍等蛋白質(zhì)變性劑的作用下，仍可保存較高的酶活力等。固定化酶的最適作用溫度一般與游離酶差不多，活化能也變化不大，但也有些固定化酶的最適溫度與游離酶比較會(huì)有較明顯的變化。酶通過(guò)固定化后，其作用的最適pH往往會(huì)發(fā)生一些變化。固定化酶的底物特異性與游離酶比較也許有些不同，其變化與底物相對(duì)分子質(zhì)量的大小有一定關(guān)系。對(duì)于那些作用于低分子底物的酶，固定化前后的底物特異性沒有明顯改變。而對(duì)于那些可作用于大分子底物，又可作用于小分子底物的酶而言，固定化酶的底物特異性往往會(huì)發(fā)生變化。18、選擇酶反映器的重要依據(jù)有哪些？答：酶反映器的選擇是在了解酶反映器的各種類型和特點(diǎn)的基礎(chǔ)上，重要依據(jù)酶的應(yīng)個(gè)形式、酶的反映動(dòng)力學(xué)性質(zhì)、底物和產(chǎn)物的理化性質(zhì)等幾個(gè)方面進(jìn)行。（1）依據(jù)酶的應(yīng)用形式選擇反映器：酶的應(yīng)用形式重要有游離酶和固定化酶，酶的應(yīng)用形式不同，其所使用的反映器亦有所不同。在應(yīng)用游離酶進(jìn)行催化反映時(shí)，酶與底物均溶解在反映溶液中，通過(guò)互相作用，進(jìn)行催化反映，可以選用攪拌罐式反映器、鼓泡式反映器、噴射式反映器、膜反映器等。固定化酶具有穩(wěn)定性較好，可以反復(fù)或連續(xù)使用的特點(diǎn)，應(yīng)用固定化酶進(jìn)行催化反映，可以選擇填充床式反映器、流化床式反映器、鼓泡式反映器、膜反映器、攪拌器式反映器等。（2）依據(jù)酶反映動(dòng)力學(xué)性質(zhì)選擇反映器：在考慮酶反映動(dòng)力學(xué)性質(zhì)對(duì)反映器選擇的影響方面，重要因素有酶與底物的混合限度、底物濃度對(duì)酶反映速度的影響、反映產(chǎn)物對(duì)酶的反饋克制作用以及酶催化作用的溫度條件等。（3）依據(jù)底物或產(chǎn)物的理化性質(zhì)選擇反映器：酶的催化反映是在酶的催化作用下，將底物轉(zhuǎn)化為產(chǎn)物的過(guò)程。在催化過(guò)程中，底物和產(chǎn)物的理化性質(zhì)直接影響酶催化反映的速率，底物或產(chǎn)物的相對(duì)分子質(zhì)量、溶解性、黏度等性質(zhì)也對(duì)反映器的選擇有重要影響。19、簡(jiǎn)述現(xiàn)代生物技術(shù)在人類生產(chǎn)生活中的作用（1）改善農(nóng)業(yè)生產(chǎn)、解決食品短缺①提高農(nóng)作物產(chǎn)量及其品質(zhì)（哺育抗逆的作物優(yōu)良品系、植物種苗的工廠化生產(chǎn)、提高糧食品質(zhì)、生物固氮，減少化肥使用量、生物農(nóng)藥，生產(chǎn)綠色食品）②發(fā)展畜牧業(yè)生產(chǎn)（動(dòng)物的大量快速無(wú)性繁殖、哺育動(dòng)物的優(yōu)良品系）（2）食品生產(chǎn)、食品加工、食品檢測(cè)（3）提高生命質(zhì)量、延長(zhǎng)人類壽命（開發(fā)制造奇特而又貴重的新型藥品、疾病的防止和診斷、基因治療）（4）解決能源危機(jī)、治理環(huán)境污染（解決能源危機(jī)、環(huán)境保護(hù)）（5）制造工業(yè)原料、生產(chǎn)貴重金屬（制造工業(yè)原料、生產(chǎn)貴重金屬）PCR的基本環(huán)節(jié)及特點(diǎn)分別是什么？標(biāo)準(zhǔn)的PCR過(guò)程分為三步：1.DNA變性（90℃-96℃）：雙鏈DNA模板在熱作用下，氫鍵斷裂，形成單鏈DNA2.退火（25℃-65℃）：系統(tǒng)溫度減少，引物與DNA模板結(jié)合，形成局部雙鏈。3.延伸（70℃-75℃）：在TaqDNA聚合酶（在72℃左右最佳的活性）的作用下，以dNTP為原料，從引物的5′端→3′端延伸，合成與模板互補(bǔ)的DNA鏈。PCR的特點(diǎn)：（1）特異性強(qiáng)（2）敏感性高（3）快速（4）簡(jiǎn)便（5）可以擴(kuò)增mRNA微生物發(fā)酵生產(chǎn)中下游加工的重要工藝流程是什么？發(fā)酵液—>預(yù)解決（加熱、調(diào)pH、絮凝）—>細(xì)胞分離