液相色譜儀漏液原因分析 液相色譜解決方案

第第頁液相色譜儀漏液原因分析液相色譜解決方案聚四氟乙烯膜(一般用于有機(jī)相)幾乎可以和所有的溶劑、酸和堿相容。尼龍66膜(一般用于有機(jī)相)可以和大多數(shù)溶劑、有機(jī)物和水相容，建議不要用于強(qiáng)酸、二氯甲烷和DMF。纖維素硝酸酯(一般用于水相)主要用于過濾器,可以和多數(shù)水性和非水性溶劑相溶,但不是所有的水性和非水性溶劑。再生纖維素膜一般用于HPLC生物樣品和有機(jī)溶劑的制備和過濾,是通用型HPLC過濾器,具有廣泛的溶劑相溶性,與蛋白質(zhì)鍵合作用低,非常低的可萃取性.在樣品溶液中有顆粒存在會造成故障時(shí)要用膜進(jìn)行過濾?！奥狈謨煞N：漏液和漏氣。漏液：液相色譜儀從流動(dòng)相瓶到廢液瓶之間的流路是一個(gè)全封閉體系，內(nèi)部壓力很高，但外部卻能保證一滴不漏。如果某個(gè)部件發(fā)生漏液，那就是故障所在。漏液的原因分兩種：接觸硬件不當(dāng)：在更換零件如流路管或換柱時(shí)，換的接頭接口不匹配，造成漏液。要注意不同公司的柱子接頭很多是不同的，甚至同一家公司在不同時(shí)期生產(chǎn)的液相柱接頭也有很大區(qū)別。當(dāng)然選項(xiàng)用PEEK接頭是一較好是一個(gè)較好的解決方法，不僅通用性好，而且靠手?jǐn)Q就能保證不漏液。即使是接口本身是匹配的，但是如果操作不當(dāng)也會漏液，一種不當(dāng)就是力度把握不好，擰得太緊或太松；另一種不當(dāng)就是致命的錯(cuò)誤：滑絲，這往往是動(dòng)手能力不太強(qiáng)，螺絲釘很少擰的工犯的錯(cuò)誤，滑絲的后果不僅是漏液那么簡單，常造成重要部件的報(bào)廢。解決這個(gè)問題只能靠惡補(bǔ)基本功來實(shí)驗(yàn)，那就是擰螺絲。使用儀器不當(dāng)：只要互相有10%比例就不會出現(xiàn)這個(gè)問題。另一原因是在用緩沖液鹽溶液(不論甲醇含量有多少)作流動(dòng)相時(shí)，實(shí)驗(yàn)結(jié)束后沒有換甲醇水沖洗，使得微滲的流動(dòng)相干燥形成晶體造成。不過，輸送泵漏液并不是非得馬上修不可，沖洗干凈并在以后的使用中多加小心一般都可以正常使用。檢測器漏液是個(gè)很麻煩的事，一般都是吸收池的問題，更換的費(fèi)用相當(dāng)高。但是并不是說一定要馬上更換，還可以從實(shí)際實(shí)驗(yàn)效果看能否湊合使用。漏氣：漏液是從內(nèi)部向外漏，而漏氣則是外部了的氣體進(jìn)入液相色譜儀的流路內(nèi)部形成氣泡。下面按流路的方向逐個(gè)部件分析產(chǎn)生氣泡的原因和相應(yīng)解決方法。2.1過濾頭：油液時(shí)，在流路管中有不規(guī)則但持續(xù)的小氣泡產(chǎn)生，這時(shí)考慮的是流動(dòng)相有沒有脫氣(需要特別提醒即使是有了真空脫氣機(jī)也是要先超聲脫氣的，起碼可以減少脫氣機(jī)的工作壓力并提高工作效率)，如果已經(jīng)脫砂壓力了氣，則要注意過濾頭的污染也會造成這種現(xiàn)象。處理方法比較簡單，擰下過濾頭在稀硝酸中浸泡，超聲半小時(shí)，洗凈后裝回去即可。2.2透明流路管：指的是在過濾頭和輸送泵之間的那一段管路。這一個(gè)部分往往不是有點(diǎn)氣泡，而經(jīng)常是整個(gè)管中全是空氣而操作人員卻渾然不知，以致輸送泵工作了半天才發(fā)現(xiàn)流動(dòng)相瓶里的液體一點(diǎn)也沒少。這也是我們常說的液相色譜儀至少一周要開機(jī)一次的原因(我們做液相一定要有“微滲”的概論)。如果長時(shí)間不用，這一段管路的液體會徹底干掉，而充滿空氣的管路和充滿液體的管路不仔細(xì)看是分辨不出來的。這種情況對于輸送泵很危險(xiǎn)，因?yàn)楸脧脑O(shè)計(jì)來說是輸送液體而不是輸送氣體，內(nèi)部的液體對于活塞來說起到了機(jī)油的作用，如果活塞桿還殘存了一些緩沖鹽，則極易拉傷，造成不可逆轉(zhuǎn)的影響。對于這種情況，要突出“預(yù)防為主”如：液相色譜使用人員要相對固定和穩(wěn)定，工作中合理搭配資源，每臺機(jī)一周至少一次實(shí)驗(yàn)，如長期不用起碼每周要沖流動(dòng)相2小時(shí)。養(yǎng)成良好的工作習(xí)慣很重要。如果流路管中真漏氣了怎么辦？我的建議是用外力使管路中充滿液體。具體如下：1、找到流路管進(jìn)入輸送泵的接頭。2、擰下來。3、用一干凈洗耳球的尖端對準(zhǔn)管路的平整切口。4、吸液體，看液面從流動(dòng)相瓶里上升，至離洗耳球5cm左右時(shí)停止該動(dòng)作。5、快速把接頭擰回輸送泵上(這個(gè)過程可能會有少許流動(dòng)相外泄，這是正常現(xiàn)象)。6、開機(jī)，打開排液閥門，啟動(dòng)輸送泵。7、等排液管中流出的溶液沒有氣泡時(shí)，再關(guān)閉排液閥，儀器正常工作。2.3輸送泵和柱子：這些部分進(jìn)了氣泡一般不怕，沖掉就行。2.4檢測器：應(yīng)該說整個(gè)流路中只要有一個(gè)氣泡都會在檢測器上得到強(qiáng)烈的信號反映，檢測器內(nèi)部的氣泡一般都能被沖走，但也有很難沖掉的殘留氣泡的情況。如果檢測器內(nèi)有殘留氣泡，會有特別明顯的表現(xiàn)形式，就是在走基線時(shí)會時(shí)不時(shí)間隔出現(xiàn)直上直下信號很大的信號峰。這時(shí)先看普通流量能否沖走，如果沖不走，那唯①的辦法就是拆柱，把檢測器直接連接到輸送泵的出口，加大幾部流量沖洗，則肯定能沖走氣泡。責(zé)任編輯：瑞利祥合--分析儀器采購顧問版權(quán)所有(瑞利祥合)轉(zhuǎn)載請注明出處關(guān)于液相色譜的定性分析

1、一般定性

用已知物和直接對照法定性，這是一種相對可靠的方法，主要可以分為以下四種：

1）保留時(shí)間和保留體積

2）相對保留值

3）已知物增加峰高法

4）雙柱貨雙體系

實(shí)驗(yàn)表明，各類同系物在兩根不同柱上的Vg值有如下關(guān)系：式中：VgI表示在柱I上的比保留體積；VGII表示在柱II上的比保留體積；A1與C1為常數(shù)。

從上式可以看出，同系物在兩個(gè)性質(zhì)不同的色譜柱上，比保留體積Vg的對數(shù)有線性關(guān)系，下圖就是根據(jù)某些化合物和領(lǐng)苯二甲酸二異葵酯柱上的比保留體積的對數(shù)制作出的。

經(jīng)過領(lǐng)苯二甲酸二異葵酯柱分離后，在lgvgII為1.8的位置上有一個(gè)未知峰，由圖可看出有兩種可能性，即酮與伯醇；此時(shí)，將樣品在柱上I上進(jìn)行分離，得到lgVgII為1.62的色譜峰，從而可確定該峰是酮而不是醇。

在液相色譜中，可用雙體系定性，通過改變流動(dòng)相和固定相，從而改善分離的選擇性，通常改用與原色譜體系有較大差別的其他色譜體系來實(shí)現(xiàn)分離。

2、保留值分隨份子結(jié)構(gòu)或性質(zhì)變化的規(guī)律

1）GC中的碳數(shù)規(guī)律：同系物間，在一定溫度下，保留值變化遵循如下規(guī)律：2）GC中的沸點(diǎn)規(guī)律：同族具有相同碳原子數(shù)目的同分異構(gòu)體間存在如下關(guān)系：3)LC中的保留值規(guī)則：對于份子中存在不同數(shù)目的重復(fù)官能團(tuán)的化合物，有如下的經(jīng)驗(yàn)公式：3、反向液譜的定性

在氣譜中廣泛使用的Kovats指數(shù)定性，在夜譜中，由于組分的保留行為不僅與固定相有關(guān)，還與流動(dòng)相的種類及濃度有關(guān)，所以不能直接用同系物間，在一定溫度下，保留值變化遵循如下規(guī)律指數(shù)定性。

4、計(jì)算機(jī)檢索

計(jì)算機(jī)不