云南省曲靖市陸良縣八中高三沖刺模擬新高考生物試卷及答案解析

云南省曲靖市陸良縣八中高三沖刺模擬新高考生物試卷考生須知：1．全卷分選擇題和非選擇題兩部分，全部在答題紙上作答。選擇題必須用2B鉛筆填涂；非選擇題的答案必須用黑色字跡的鋼筆或答字筆寫在“答題紙”相應(yīng)位置上。2．請(qǐng)用黑色字跡的鋼筆或答字筆在“答題紙”上先填寫姓名和準(zhǔn)考證號(hào)。3．保持卡面清潔，不要折疊，不要弄破、弄皺，在草稿紙、試題卷上答題無效。一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個(gè)選項(xiàng)符合題目要求）1．下列關(guān)于tRNA的敘述，正確的是（）A．tRNA的組成單位是核糖核苷酸，含有C、H、O、N四種元素B．通常情況下，在翻譯過程中，一個(gè)tRNA只能使用一次C．tRNA是單鏈結(jié)構(gòu)，但結(jié)構(gòu)中存在堿基互補(bǔ)配對(duì)D．tRNA上的密碼子可用于識(shí)別氨基酸2．某果蠅兩條染色體上部分基因分布示意圖如下，相關(guān)敘述正確的是（）A．朱紅眼色和暗栗眼色是相對(duì)性狀，基因cn與基因cl為等位基因B．有絲分裂后期，基因cn、cl、v、w會(huì)出現(xiàn)在細(xì)胞的同一極C．辰砂眼基因（v）和白眼基因（w）只會(huì)出現(xiàn)在雌配子中D．減數(shù)第一次分裂后期，非等位基因cn、cl、v、w會(huì)自由組合3．所謂“膜流”是指細(xì)胞中各種生物膜之間的聯(lián)系和轉(zhuǎn)移。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A．質(zhì)壁分離和復(fù)原現(xiàn)象不屬于“膜流”現(xiàn)象B．RNA在核質(zhì)之間的轉(zhuǎn)移過程發(fā)生了“膜流”現(xiàn)象C．神經(jīng)遞質(zhì)的釋放過程發(fā)生了“膜流”現(xiàn)象D．吞噬細(xì)胞吞噬細(xì)菌的過程發(fā)生了“膜流”現(xiàn)象4．圖為生物學(xué)中整體與部分的概念關(guān)系圖。下列敘述錯(cuò)誤的是A．若I為人體內(nèi)環(huán)境，并且有的關(guān)系，則Ⅲ是血漿B．若I為可遺傳變異，Ⅳ是獲得青霉素高產(chǎn)菌株的原理，則Ⅳ是基因重組C．若I為構(gòu)成人體免疫的三道防線，并且Ⅱ和Ⅲ人人生來就有，則Ⅳ是特異性免疫D．若I為生態(tài)系統(tǒng)的生物成分，并且由Ⅱ和Ⅲ構(gòu)成營(yíng)養(yǎng)結(jié)構(gòu)，則IV是分解者5．下列與人類遺傳病有關(guān)的敘述，正確的是（）A．人類遺傳病通常是由遺傳物質(zhì)改變引起的，患者表現(xiàn)出相應(yīng)癥狀與環(huán)境無關(guān)B．理論上單基因遺傳病在男性中的發(fā)病率一定等于該致病基因的基因頻率C．多基因遺傳病在群體中的發(fā)病率較高D．通過調(diào)查某種遺傳病的發(fā)病率可推測(cè)該病致病基因的顯隱性6．某植物的性別決定方式為XY型，其花色受兩對(duì)獨(dú)立遺傳的等位基因控制，A或a基因控制合成藍(lán)色色素，B或b基因控制合成紅色色素，不含色素表現(xiàn)為白花，含有兩種色素表現(xiàn)為紫花?，F(xiàn)有某藍(lán)花雌株和紅花雄株作親本進(jìn)行雜交，F(xiàn)1表現(xiàn)為紫花雌株：藍(lán)花雄株=l：1。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A．藍(lán)色色素和紅色色素都是由顯性基因控制的B．在自然群體中，紅花植株的基因型共有3種C．若F1的雌雄植株雜交，子代白花植株中，雄株占1／2D．若F1的雌雄植株雜交，子代中紫花植株占3/16二、綜合題：本大題共4小題7．（9分）蘋果醋具有營(yíng)養(yǎng)豐富，增強(qiáng)機(jī)體免疫力，護(hù)膚養(yǎng)肝等多種功效。以鮮蘋果汁為原料利用發(fā)酵瓶制作果酒和果醋的過程簡(jiǎn)圖如圖1，請(qǐng)分析回答：（1）過程甲中使用的微生物是______，發(fā)酵溫度控制在18℃～25℃，經(jīng)過10～12天后，樣液中是否產(chǎn)生酒精，可以用______來檢驗(yàn)。（2）利用鮮蘋果制作果酒的原理（寫化學(xué)反應(yīng)方程式）是______。（3）過程乙中使用的醋酸菌可以從食醋中分離純化獲得。圖3操作是分離純化過程中利用______法進(jìn)行接種，在操作過程中應(yīng)注意的事項(xiàng)有下列哪幾項(xiàng)？______（填序號(hào)）。①每次劃線前和結(jié)束時(shí)都需要灼燒接種環(huán)；②灼燒接種環(huán)后，待其冷卻后再劃線；③第二次及以后的劃線，要從上一次劃線的末端劃線；④最后一次劃線不能和首次劃的線相接觸。（4）為了保持菌種的純凈，對(duì)于長(zhǎng)期需要保存的菌種，可以采用______的方法。（5）某同學(xué)嘗試自己利用圖2裝置制果醋。制作過程中進(jìn)氣口應(yīng)______；排氣口要通過一個(gè)長(zhǎng)而彎曲的膠管與瓶身相連，這樣做的原因是______。8．（10分）正常細(xì)胞不能合成干擾素，但含有干擾素基因。我國科學(xué)家釆用基因工程技術(shù)生產(chǎn)干擾素a-2b已實(shí)現(xiàn)量產(chǎn)。具體做法是將產(chǎn)生干擾素的人白細(xì)胞的mRNA分離，反轉(zhuǎn)錄得到干擾素基因。將含有四環(huán)素、氨芐青霉素抗性基因的質(zhì)粒PBR322和干擾素基因進(jìn)行雙酶切，用連接酶連接。將重組載體DNA分子在一定條件下導(dǎo)入大腸桿菌，在培養(yǎng)基中篩選培養(yǎng)，檢測(cè)干擾素的表達(dá)量，選出高效表達(dá)的工程菌。請(qǐng)回答：（1）在分化誘導(dǎo)因子作用下，正常細(xì)胞可以擺脫抑制、合成干擾素，該過程發(fā)生的實(shí)質(zhì)是________________________________（2）據(jù)下圖分析，構(gòu)建重組載體DNA分子時(shí)，可以選用_____兩種限制酶對(duì)質(zhì)粒pBR322和干擾素基因進(jìn)行雙酶切，目的是既能保證目的基因和質(zhì)粒正向連接，又能防止_____________________________(答兩點(diǎn))。（3）將重組質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌中，然后將細(xì)菌涂布到含_____的選擇培養(yǎng)基上培養(yǎng)，就可得到含質(zhì)粒PBR322或重組質(zhì)粒的細(xì)菌單菌落；再從每一個(gè)單菌落中挑取部分細(xì)菌轉(zhuǎn)涂到含有_____的培養(yǎng)基上，不能生長(zhǎng)的絕大部分是含有重組質(zhì)粒的細(xì)菌，原因是_____（4）干擾素在體外保存非常困難，如果將其分子中的一個(gè)半胱氨酸變成絲氨酸，在-70°C條件下可以保存半年。實(shí)現(xiàn)這一轉(zhuǎn)變需要直接對(duì)_____進(jìn)行修飾或改造，這屬于蛋白質(zhì)工程的范疇。9．（10分）人類胰島素基因位于第11號(hào)染色體上，長(zhǎng)度8416bp，包含3個(gè)外顯子和2個(gè)內(nèi)含子，人類胰島素的氨基酸序列已知?；卮鹣嚓P(guān)問題：（1）上圖是利用PCR技術(shù)獲取人胰島素基因的方法，除了此方法外，還可以利用的方法是____________。（2）利用PCR技術(shù)獲取人胰島素基因，在緩沖液中除了要添加模板和引物外，還需要添加的物質(zhì)有_____________________________。（3）經(jīng)過______輪循環(huán)可以得到所需的目的基因，一個(gè)DNA分子經(jīng)過5輪循環(huán)，需要引物A_____個(gè)，從PCR的過程和DNA分子的特點(diǎn)，試著寫出設(shè)計(jì)引物需要注意的問題_____、_____（答出2點(diǎn)即可）。（4）利用SDS-凝膠電泳分離不同DNA分子，遷移速度取決于__________________。（5）利用圖示方法獲取的目的基因，直接構(gòu)建基因表達(dá)載體后導(dǎo)入大腸桿菌，（選能或不能）___________表達(dá)出人胰島素，理由是______________________________。10．（10分）VNN1基因（1542bp）與炎癥相關(guān)性疾病有關(guān)，GFP基因（4735bp）控制綠色熒光蛋白的合成，該蛋白可在相應(yīng)波長(zhǎng)的紫外光激發(fā)下發(fā)出綠色熒光。某研究小組進(jìn)行鼠源GFP-VNNI重組質(zhì)粒的構(gòu)建及其功能研究，回答下列問題：（l）為構(gòu)建重組質(zhì)粒，研究小組從數(shù)據(jù)庫查找到VNNl的DNA序列，并設(shè)計(jì)引物。上游引物：5?-AAGCTTCCGCTGCACCATGACTACTC-3?下劃線為HindⅢ酶切位點(diǎn)），下游引物：5?-GGATCCGCTCGAGCTACCAACTTAATGA-3?（下劃線為BamHI酶切位點(diǎn)），之后進(jìn)行PCR擴(kuò)增，PCR的原理是________。擴(kuò)增后的VNNI基因要與含GFP基因的載體連接，需用________（填具體酶）切割VNNI基因和含GFP基因的載體，再用________酶處理，構(gòu)建重組質(zhì)粒。（2）GFP基因在重組質(zhì)粒中可作為________________，其作用是________。用之前相同的限制酶對(duì)GFP-VNNI重組質(zhì)粒切割后，進(jìn)行電泳鑒定時(shí)得到如圖1所示的部分條帶，結(jié)果表明________。（3）IL-6為體內(nèi)重要的炎癥因子，能與相應(yīng)的受體結(jié)合，激活炎癥反應(yīng)。圖2為GFP-VNNI重組質(zhì)粒對(duì)細(xì)胞分泌IL-6的影響，由此說明________________，同時(shí)發(fā)現(xiàn)與正常組比較，空質(zhì)粒轉(zhuǎn)染組IL-6的表達(dá)有輕微升高，造成這種現(xiàn)象的可能原因是________________________。11．（15分）流感是發(fā)生在呼吸道的具有高度傳染性的急性病毒感染，人類感染的流感病毒主要是甲型流感病毒(FluA)和乙型流感病毒(FluB)。幼小兒童和65歲以上老年人，慢性疾病患者是流感的高危人群。臨床上可用FluA/FluB抗原檢測(cè)試劑對(duì)流感做出快速診斷。請(qǐng)回答：（1）FluA/FluB病毒的根本區(qū)別在于_____不同，臨床上用FluA/FluB抗原檢測(cè)試劑對(duì)流感做出快速診斷是利用了_____原理。（2）FluA/FluB侵入機(jī)體后，T細(xì)胞的細(xì)胞周期變_____(長(zhǎng)/短)，原因是_____。（3）醫(yī)生建議高危人群在流感季節(jié)之前接種流感疫苗，就算得了流感，癥狀也會(huì)比沒接種的人輕得多，原因是_____。（4）甲型流感容易出現(xiàn)重癥病例，體溫可達(dá)到39°C?40°C。體溫升高的原因主要是病毒毒素導(dǎo)致_____的體溫中樞功能改變，_______，體溫升高。

參考答案一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個(gè)選項(xiàng)符合題目要求）1、C【解析】

RNA分為mRNA、tRNA和rRNA，其中mRNA是翻譯的模板，tRNA能識(shí)別密碼子并轉(zhuǎn)運(yùn)相應(yīng)的氨基酸，rRNA是組成核糖體的成分。此外，還有少數(shù)RNA具有催化功能?！驹斀狻緼、tRNA的組成單位是核糖核苷酸，含有C、H、O、N、P五種元素，A錯(cuò)誤；B、通常情況下，在翻譯過程中，tRNA可以反復(fù)使用，B錯(cuò)誤；C、tRNA是單鏈結(jié)構(gòu)，但形成的三葉草結(jié)構(gòu)中存在堿基互補(bǔ)配對(duì)，C正確；D、密碼子存在于mRNA上，tRNA上的是反密碼子，D錯(cuò)誤。故選C。2、B【解析】

分析題圖：圖中所示常染色體上有朱紅眼基因（cn）和暗栗色眼基因（cl）兩種基因；X染色體上有辰砂眼基因（v）和白眼基因（w）兩種基因；等位基因是指位于一對(duì)同源染色體的相同位置的基因，此題中的朱紅眼基因和暗栗色眼基因位于一條染色體上，不屬于等位基因，同理辰砂眼基因和白眼基因也不是等位基因。【詳解】A、等位基因是指位于一對(duì)同源染色體的相同位置的基因，朱紅眼基因cn、暗栗色眼基因cl位于一條常染色體上，屬于非等位基因，A錯(cuò)誤；B、在有絲分裂過程中，基因經(jīng)過復(fù)制后平均分配給兩個(gè)子細(xì)胞，因此在有絲分裂后期，細(xì)胞每一極都含有該生物全部的遺傳物質(zhì)，即有絲分裂后期，基因cn、cl、v、w會(huì)出現(xiàn)在細(xì)胞的同一極，B正確；C、辰砂眼基因（v）和白眼基因（w）存在于X染色體上，X染色體可出現(xiàn)在雌配子中，也可出現(xiàn)在雄配子中，C錯(cuò)誤；D、減數(shù)第一次分裂后期，位于非同源染色體上的非等位基因自由組合，而位于同一條染色體上的非等位基因不能自由組合，所以基因cn、cl不能自由組合、基因v、w也不能自由組合，D錯(cuò)誤。故選B。3、B【解析】

真核細(xì)胞內(nèi)存在著豐富的膜結(jié)構(gòu)，他們將細(xì)胞內(nèi)部劃分成相對(duì)獨(dú)立的區(qū)室，保證多種生命活動(dòng)高效有序的進(jìn)行，這些膜結(jié)構(gòu)又可以相互轉(zhuǎn)化，在結(jié)構(gòu)和功能上構(gòu)成一個(gè)統(tǒng)一整體。細(xì)胞膜、核膜及多種細(xì)胞器膜，共同構(gòu)成細(xì)胞的生物膜系統(tǒng)?！驹斀狻緼、質(zhì)壁分離和復(fù)原現(xiàn)象是失水和吸水導(dǎo)致的原生質(zhì)層與細(xì)胞壁的分離和復(fù)原，沒有膜泡運(yùn)輸，沒有體現(xiàn)“膜流”現(xiàn)象，A正確；B、RNA在核質(zhì)之間的轉(zhuǎn)移是通過核孔，沒有發(fā)生“膜流”現(xiàn)象，B錯(cuò)誤；C、神經(jīng)遞質(zhì)的釋放過程屬于胞吐，發(fā)生了“膜流”現(xiàn)象，C正確；D、吞噬細(xì)胞吞噬細(xì)菌的過程屬于胞吞，發(fā)生了“膜流”現(xiàn)象，D正確。故選B。4、B【解析】

人體內(nèi)環(huán)境包括血漿、組織液和淋巴，又叫細(xì)胞外液；可遺傳變異包括基因突變、基因重組和染色體步移；人體免疫系統(tǒng)包括三道防線，其中第一和第二道防線屬于非特異性免疫，第三道防線屬于特異性免疫；生態(tài)系統(tǒng)的生物成分包括生產(chǎn)者、消費(fèi)者和分解者?！驹斀狻咳梭w內(nèi)環(huán)境包括血漿、組織液和淋巴，若Ι人體內(nèi)環(huán)境，并且有的關(guān)系，則Ⅲ是血漿、Ⅱ是組織液、Ⅳ是淋巴，A正確；獲得青霉素高產(chǎn)菌株的方法是誘變育種，原理是基因突變，B錯(cuò)誤；若若I為構(gòu)成人體免疫的三道防線，并且Ⅱ和Ⅲ人人生來就有，說明Ⅱ和Ⅲ是非特異性免疫，則Ⅳ是特異性免疫，C正確；生態(tài)系統(tǒng)的營(yíng)養(yǎng)結(jié)構(gòu)這只有生產(chǎn)者和消費(fèi)者，沒有分解者，因此若I為生態(tài)系統(tǒng)的生物成分，并且由Ⅱ和Ⅲ構(gòu)成營(yíng)養(yǎng)結(jié)構(gòu)，則IV是分解者，D正確。5、C【解析】

由于生殖細(xì)胞或受精卵里的遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變，從而使發(fā)育成的個(gè)體患疾病，這類疾病都稱為遺傳性疾病，簡(jiǎn)稱遺傳病。根據(jù)目前人們對(duì)遺傳物質(zhì)的認(rèn)識(shí)，可以將遺傳病分為單基因遺傳病，多基因遺傳病和染色體病三類。單基因遺傳病是由染色體上單個(gè)基因的異常所引起的疾病，多基因遺傳病是指涉及許多個(gè)基因和許多環(huán)境因素的疾病，染色體異常遺傳病是指由于染色體的數(shù)目形態(tài)或結(jié)構(gòu)異常引起的疾病。【詳解】A、表現(xiàn)型=基因型+環(huán)境，遺傳病患者表現(xiàn)出相應(yīng)癥狀可能與環(huán)境有關(guān)，A錯(cuò)誤；B、理論上伴X遺傳病在男性中的發(fā)病率等于該致病基因的基因頻率，其它單基因遺傳病一般不相等，B錯(cuò)誤；C、多基因遺傳病受多個(gè)基因和環(huán)境影響，在群體中的發(fā)病率較高，C正確；D、通過調(diào)查遺傳病的發(fā)病率不能推測(cè)致病基因的顯隱性，D錯(cuò)誤。故選C。6、D【解析】

由題意分析可知，藍(lán)花（Abb）雌株與一紅花（aaB）雄株作為親本進(jìn)行雜交，F(xiàn)1表現(xiàn)為紫花雌株：藍(lán)花雄株=1：1，一種性別只出現(xiàn)一種性狀，可判斷親本為顯性雄和隱性雌雜交。故B/b位于X染色體上，如果A/a基因位于常染色體上，則親本基因型為AAXbXb×aaXBY，F(xiàn)1基因型為AaXBXb：AaXbY=1：1，表現(xiàn)為紫花雌株：藍(lán)花雄株=1：1。據(jù)此答題?！驹斀狻緼、據(jù)分析可知，藍(lán)色色素和紅色色素分別由A和B基因控制，母本藍(lán)花雌株的基因型為AAXbXb，父本紅花雄株的基因型為aaXBY，A正確；B、在自然群體中，紅花植株的基因型有aaXBXB、aaXBXb和aaXBY共3種，B正確；C、若F1的雌株（AaXBXb）和雄株（AaXbY）雜交，子代白花植株（aaXbXb和aaXbY）中雄株占1/2，C正確；D、若F1的雌雄植株雜交，子代中紫花植株占（3/4）×（1/2）=3/8，D錯(cuò)誤。故選D?！军c(diǎn)睛】本題主要考查自由組合定律和伴性遺傳，考查學(xué)生的理解能力。二、綜合題：本大題共4小題7、酵母菌（酸性）重鉻酸鉀溶液C6H12O62C2H5OH（酒精）+2CO2+少量能量平板劃線①②③④甘油管藏充入空氣防止空氣中微生物的污染【解析】

據(jù)題文的描述和圖示分析可知：該題考查學(xué)生對(duì)果酒和果醋的制作、微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)等相關(guān)知識(shí)的識(shí)記和理解能力，以及識(shí)圖分析能力?！驹斀狻?1)過程甲為果酒發(fā)酵，使用的微生物是酵母菌。橙色的重鉻酸甲溶液在酸性條件下與酒精發(fā)生化學(xué)反應(yīng)變成灰綠色，因此，樣液中是否產(chǎn)生酒精，可以用（酸性）重鉻酸鉀溶液來檢驗(yàn)。(2)果酒發(fā)酵是利用酵母菌進(jìn)行無氧呼吸產(chǎn)生酒精的原理，其化學(xué)反應(yīng)方程式如下：。(3)依圖3呈現(xiàn)的接種環(huán)可知：其接種微生物的操作方法為平板劃線法。在該操作過程中應(yīng)注意：①每次劃線前和結(jié)束時(shí)都需要灼燒接種環(huán)，以殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免污染培養(yǎng)物；②灼燒接種環(huán)后，待其冷卻后再劃線，以避免高溫導(dǎo)致菌種死亡；③第二次及以后的劃線，要從上一次劃線的末端劃線，以保證每次劃線菌種來自上次劃線末端；④最后一次劃線不能和首次劃的線相接觸，以達(dá)到得到單菌落（分離菌種）的目的。(4)對(duì)于需要長(zhǎng)期保存的菌種，可以采用甘油管藏的方法。(5)利用圖2裝置制果醋，因發(fā)揮作用的菌種——醋酸菌是一種好氧菌，所以制作過程中進(jìn)氣口應(yīng)充入空氣。為了防止空氣中微生物的污染，排氣口要通過一個(gè)長(zhǎng)而彎曲的膠管與瓶身相連?！军c(diǎn)睛】解答本題的關(guān)鍵是識(shí)記和理解果酒和果醋的制作原理、流程、注意事項(xiàng)及影響因素等相關(guān)基礎(chǔ)知識(shí)，掌握實(shí)驗(yàn)室中微生物的純化培養(yǎng)的方法及保存等相關(guān)知識(shí)。在此基礎(chǔ)上，結(jié)合問題情境，從題意和圖示中提取有效信息進(jìn)行相關(guān)問題的解答。8、基因的選擇性表達(dá)酶B、酶C質(zhì)粒與目的基因自身環(huán)化；防止同時(shí)破壞質(zhì)粒中的兩個(gè)標(biāo)記基因氨芐青霉素四環(huán)素目的基因的插入破壞了四環(huán)素抗性基因，重組質(zhì)粒上只含有氨芐青霉素抗性基因，而質(zhì)粒上含氨芐青霉素抗性基因和四環(huán)素抗性基因，在含有四環(huán)素的培養(yǎng)基上，導(dǎo)入重組質(zhì)粒的細(xì)菌不能生長(zhǎng)，而只導(dǎo)入質(zhì)粒的細(xì)菌能生長(zhǎng)基因【解析】

1、基因表達(dá)載體的組成：目的基因、啟動(dòng)子、終止子、標(biāo)記基因等。標(biāo)記基因可便于目的基因的鑒定和篩選。2、由于不同限制酶識(shí)別的堿基序列不同，所以在切割質(zhì)粒和目的基因時(shí)常用雙酶切，可防止目的基因反向粘連和質(zhì)粒自行環(huán)化?！驹斀狻浚?）細(xì)胞分化的實(shí)質(zhì)是基因選擇性表達(dá)，故在分化誘導(dǎo)因子作用下，正常細(xì)胞可以擺脫抑制、合成干擾素，該過程發(fā)生的實(shí)質(zhì)是基因的選擇性表達(dá)。（2）標(biāo)記基因可用于鑒定目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞，所以重組質(zhì)粒上至少要保留一個(gè)標(biāo)記基因，由于兩個(gè)標(biāo)記基因上均含有酶A的切點(diǎn)，所以不能用酶A切割，為了防止連接時(shí)目的基因和質(zhì)粒自身環(huán)化，故在構(gòu)建重組載體DNA分子時(shí)，可以選用酶B和酶C兩種限制酶對(duì)質(zhì)粒pBR322和干擾素基因進(jìn)行雙酶切。（3）由于質(zhì)粒和重組質(zhì)粒上都含有氨芐青霉素抗性基因，而未導(dǎo)入質(zhì)粒的細(xì)菌不含有該抗性基因，所以將重組質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌中，然后將細(xì)菌涂布到含氨芐青霉素的選擇培養(yǎng)基上培養(yǎng)，就可得到含質(zhì)粒PBR322或重組質(zhì)粒的細(xì)菌單菌落；由于目的基因的插入破壞了四環(huán)素抗性基因，重組質(zhì)粒上只含有氨芐青霉素抗性基因，而質(zhì)粒上含有氨芐青霉素抗性基因和四環(huán)素抗性基因，因此再從前面培養(yǎng)基上獲得的每一個(gè)單菌落中挑取部分細(xì)菌轉(zhuǎn)涂到含有四環(huán)素的培養(yǎng)基上，不能生長(zhǎng)的絕大部分是含有重組質(zhì)粒的細(xì)菌。（4）蛋白質(zhì)工程是通過基因修飾或基因合成，對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造的一項(xiàng)技術(shù)?！军c(diǎn)睛】本題考查基因工程和蛋白質(zhì)工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的操作工具及操作步驟等，掌握各步驟中的相關(guān)細(xì)節(jié)，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題，屬于考綱理解和應(yīng)用層次的考查。9、從基因文庫獲取或人工合成四種脫氧核苷酸（dNTP）和熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）331引物自身不能有互補(bǔ)序列引物之間不能有互補(bǔ)序列DNA分子的大小不能因?yàn)榇朔椒ǐ@得的目的基因中含有內(nèi)含子，大腸桿菌無法正常識(shí)別內(nèi)含子而對(duì)內(nèi)含子部分轉(zhuǎn)錄的mRNA進(jìn)行翻譯，導(dǎo)致合成的蛋白質(zhì)出現(xiàn)錯(cuò)誤【解析】

根據(jù)題干信息和圖形分析，基因工程的基本步驟包括目的基因的獲取、構(gòu)建基因表達(dá)載體、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞、目的基因的檢測(cè)與表達(dá)；圖示目的基因?yàn)槿祟愐葝u素基因（位于11號(hào)常染色體上），其通過PCR技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增，需要A、B兩種引物；PCR擴(kuò)增目的基因的過程包括變性、退貨、延伸?！驹斀狻浚?）獲取目的基因的方法除了PCR技術(shù)，還有從基因文庫獲取或人工合成。（2）用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因（人胰島素基因）時(shí)，所需的條件有引物、模板(目的基因或人胰島素基因)、原料(4種脫氧核糖核苷酸)和熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）等。（3）根據(jù)PCR過程和DNA分子半保留復(fù)制特點(diǎn)可知，前兩輪循環(huán)產(chǎn)生的四個(gè)DNA分子的兩條鏈均不等長(zhǎng)，第三輪循環(huán)產(chǎn)生的DNA分子存在等長(zhǎng)的兩條核苷酸鏈，即僅含引物之間的序列，因此，經(jīng)過三輪循環(huán)可以得到所需的目的基因；一個(gè)DNA分子經(jīng)過5輪循環(huán)，理論上至少需要26-2=62個(gè)引物，其中A引物31個(gè)。引物設(shè)計(jì)時(shí)需要注意以下幾點(diǎn)：引物自身不能有互補(bǔ)序列；引物之間不能有互補(bǔ)序列；引物長(zhǎng)度適當(dāng)；引物能與目的基因兩側(cè)特異性結(jié)合；避免與擴(kuò)增DNA內(nèi)有過多互補(bǔ)的序列。（4）SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳技術(shù)中分子的遷移速率主要取決于分子的大小，因此利用SDS-凝膠電泳分離不同DNA分子，遷移速度取決于DNA分子的大小。（5）題干信息顯示，圖示獲取的目的基因含有外顯子和內(nèi)含子，因此直接將含有此目的基因的表達(dá)載體導(dǎo)入大腸桿菌并不能表達(dá)出胰島素，原因是大腸桿菌無法正常識(shí)別內(nèi)含子而對(duì)內(nèi)含子部分轉(zhuǎn)錄的mRNA進(jìn)行翻譯，導(dǎo)致合成的蛋白質(zhì)出現(xiàn)錯(cuò)誤?！军c(diǎn)睛】解答本題的關(guān)鍵是掌握基因工程的基本步驟、PCR技術(shù)等相關(guān)知識(shí)點(diǎn)，弄清楚PCR技術(shù)的過程和原理，能夠利用公式計(jì)算PCR技術(shù)過程中需要的引物的數(shù)量，并能夠分析大腸桿菌不能表達(dá)出該目的基因產(chǎn)物的原因。10、DNA雙鏈復(fù)制HindⅢ酶和BamHⅠ酶DNA連接標(biāo)記基因鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含目的基因的細(xì)胞篩選出來VNN1基因已插入到含GFP基因的載體中（合理即可）VNN1基因表達(dá)產(chǎn)物能促進(jìn)細(xì)胞分泌炎癥因子IL-6操作過程中對(duì)細(xì)胞的損傷（或用到的化學(xué)試劑對(duì)細(xì)胞具有一定的毒性作用），可以激活相應(yīng)細(xì)胞分泌炎癥因子IL-6【解析】

基因工程的基本操作程序第一步：目的基因的獲?。涸嘶虿扇≈苯臃蛛x獲得，真核基因是人工合成，人工合成目的基因的常用方法有反轉(zhuǎn)錄法和化學(xué)合成法。第二步：基因表達(dá)載體的構(gòu)建第三步：將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞常用的轉(zhuǎn)化方法：將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞：采用最多的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，其次還有基因槍法和花粉管通道法等。將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞：最常用的方法是顯微注射技術(shù)；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞：先用Ca2+處理細(xì)胞，使其成為感受態(tài)細(xì)胞，再將重組表達(dá)載體DNA分子溶于緩沖液中與感受態(tài)細(xì)胞混合，在一定的溫度下促進(jìn)感受態(tài)細(xì)胞吸收DNA分子，完成轉(zhuǎn)化過程。第四步：目的基因的檢測(cè)和表達(dá)。【詳解】（1）PCR的原理是DNA雙鏈復(fù)制，為防止切割的質(zhì)粒環(huán)化，通常選擇兩種的限制酶進(jìn)行切割，同時(shí)需要用相同的限制酶對(duì)目的基因進(jìn)行處理，所以選擇HindⅢ酶和BamHI切割VNNI基因和含GFP基因的載體，再用DNA連接酶處理形成重組質(zhì)粒。（2）GFP基因（4735bp）控制綠色熒光蛋白的合成，該蛋白可在相應(yīng)