浙江省湖州市安吉縣上墅私立高級(jí)中學(xué)新高考適應(yīng)性考試生物試卷及答案解析

浙江省湖州市安吉縣上墅私立高級(jí)中學(xué)新高考適應(yīng)性考試生物試卷注意事項(xiàng)1．考生要認(rèn)真填寫(xiě)考場(chǎng)號(hào)和座位序號(hào)。2．試題所有答案必須填涂或書(shū)寫(xiě)在答題卡上，在試卷上作答無(wú)效。第一部分必須用2B鉛筆作答；第二部分必須用黑色字跡的簽字筆作答。3．考試結(jié)束后，考生須將試卷和答題卡放在桌面上，待監(jiān)考員收回。一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個(gè)選項(xiàng)符合題目要求）1．下圖示一生態(tài)系統(tǒng)中的三種生物及其標(biāo)號(hào)，下列敘述中正確的是A．①、③、⑥的差異屬于遺傳多樣性B．①～⑩的全部基因構(gòu)成了種群基因庫(kù)C．⑥～⑩某時(shí)期內(nèi)無(wú)新基因產(chǎn)生，但該種群基因頻率卻可能發(fā)生變化D．該生態(tài)系統(tǒng)中的所有生物和非生物因素之和稱(chēng)為生態(tài)系統(tǒng)的多樣性2．如圖表示對(duì)孟德?tīng)栆粚?duì)相對(duì)性狀雜交實(shí)驗(yàn)的模擬裝置。下列敘述錯(cuò)誤的是A．甲、乙容器內(nèi)兩種不同顏色小球的大小、重量及數(shù)量必須相等B．從甲或乙容器隨機(jī)取出一個(gè)小球可模擬等位基因分離的過(guò)程C．從甲、乙容器各隨機(jī)取出一個(gè)小球并組合模擬F1自交產(chǎn)生F2的過(guò)程D．該實(shí)驗(yàn)要做到多次重復(fù)并統(tǒng)計(jì)，每次取出后要及時(shí)放回小球并搖勻3．植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑廣泛應(yīng)用到農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上，并產(chǎn)生了一些人們?cè)瓉?lái)沒(méi)有預(yù)料到的影響，下列相關(guān)敘述，正確的是（）A．天然狀態(tài)下的鳳梨開(kāi)花結(jié)果時(shí)期參差不齊，可利用乙烯利促進(jìn)其果實(shí)的發(fā)育，做到有計(jì)劃上市B．利用高濃度的2，4-D作除草劑，可抑制麥田中的雙子葉雜草C．利用生長(zhǎng)素類(lèi)似物培育成的無(wú)子西瓜與多倍體育種培育成的無(wú)子西瓜都屬于不可遺傳的變異D．赤霉素能促進(jìn)細(xì)胞分裂、種子萌發(fā)等，可利用赤霉素溶液處理大麥?zhǔn)怪a(chǎn)生更多的α-淀粉酶4．新冠肺炎的病原體是一種冠狀病毒，冠狀病毒在自然界廣泛存在，其遺傳物質(zhì)是一條單鏈RNA。2019年底，“新型冠狀病毒”（COVID-19）的出現(xiàn)，在全球引發(fā)肺炎疫情。我國(guó)在黨中央直接領(lǐng)導(dǎo)下疫情得以控制，病人得到救治。下列有關(guān)“冠狀病毒”的說(shuō)法，正確的是（）A．COVID-19的遺傳物質(zhì)RNA位于蛋白質(zhì)殼外面的囊膜上B．COVID-19蛋白質(zhì)的合成需要人體細(xì)胞的細(xì)胞呼吸提供能量C．病毒大量繁殖導(dǎo)致宿主細(xì)胞膜破裂而發(fā)生細(xì)胞凋亡D．人體對(duì)COVID-19的免疫機(jī)理與體液中殺菌物質(zhì)滅菌的機(jī)理相同5．科羅拉多大峽谷中的松鼠被一條河流分隔成兩個(gè)種群，經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期演化已經(jīng)形成兩個(gè)物種，演化過(guò)程如圖，相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A．a(chǎn)表示地理隔離，b表示自然選擇使種群的基因頻率定向改變，c表示生殖隔離B．自然界中物種的形成只能通過(guò)a到達(dá)cC．①～⑥的存在說(shuō)明變異是不定向的D．物種1和物種2的基因庫(kù)不同6．下列關(guān)于種群密度、群落豐富度調(diào)查實(shí)驗(yàn)的敘述，正確的是（）A．調(diào)查某有翅、趨光性強(qiáng)的昆蟲(chóng)種群密度可用樣方法B．調(diào)查土壤小動(dòng)物豐富度時(shí)，記名計(jì)算法常用于個(gè)體較小、種群數(shù)量較多的群落C．取樣器取樣法可調(diào)查土壤小動(dòng)物類(lèi)群豐富度，也可調(diào)查某種土壤小動(dòng)物的種群密度D．用取樣器取樣法調(diào)查土壤小動(dòng)物豐富度的原因是土壤小動(dòng)物的活動(dòng)能力弱二、綜合題：本大題共4小題7．（9分）埃博拉出血熱是由埃博拉病毒（EBV）引起的病毒性出血熱。EBV與宿主細(xì)胞結(jié)合后，將核酸-蛋白復(fù)合體（-RNA）釋放至細(xì)胞質(zhì)，通過(guò)以下途徑進(jìn)行增殖。請(qǐng)回答下列有關(guān)問(wèn)題：（1）過(guò)程②和③分別叫________________、________________。（2）請(qǐng)利用箭頭和文字寫(xiě)出埃博拉病毒在宿主巨噬細(xì)胞中遺傳信息的流動(dòng)方向。RNA蛋白質(zhì)（3）EBV病毒感染機(jī)體后，引發(fā)的特異性免疫有___________。現(xiàn)在發(fā)現(xiàn)了5種埃博拉病毒，從該病毒遺傳物質(zhì)結(jié)構(gòu)特點(diǎn)分析其易發(fā)生變異的原因是_______________________。（4）已研制出針對(duì)埃博拉病毒的DNA疫苗，其流程是將埃博拉病毒基因經(jīng)過(guò)逆轉(zhuǎn)錄后整合到質(zhì)粒上，構(gòu)建基因表達(dá)載體，導(dǎo)入人體皮膚。這種DNA疫苗相對(duì)普通疫苗具有_____________等優(yōu)點(diǎn)；但若注射劑量高，可能會(huì)整合到宿主基因組內(nèi)而引起____________安全性問(wèn)題。（5）若制備埃博拉病毒的單克隆抗體，必須借助動(dòng)物細(xì)胞工程中的_____________技術(shù)。8．（10分）嗜吡啶紅球菌可以將硝酸鹽還原成亞硝酸，還能使榨菜在腌制過(guò)程中變紅；該菌的菌落呈紅色、奶酪狀、圓形、隆起。研究人員為了初步鑒定變紅的榨菜中是否含有嗜吡啶紅球菌，進(jìn)行了相關(guān)實(shí)驗(yàn)，請(qǐng)回答下列問(wèn)題：（1）培養(yǎng)嗜吡啶紅球菌的培養(yǎng)基的pH應(yīng)調(diào)至_____________，該步驟應(yīng)在_____________之前完成。（2）初步鑒定嗜吡啶紅球菌時(shí)，先要純化榨菜中的菌種，純化時(shí)先將榨菜樣液用濾膜過(guò)濾，濾膜的孔徑應(yīng)_____________（填“大于”或“小于”）菌種的體積。挑取濾膜上的菌種，接種在平板上培養(yǎng)，常用的接種方法有______。培養(yǎng)微生物時(shí)，常培養(yǎng)一個(gè)未接種的培養(yǎng)基，目的是_____________。一段時(shí)間后觀察平板上的菌落特征，若觀察到_____________，則可初步確定變紅榨菜中含有嗜吡啶紅球菌。（3）為了進(jìn)一步確定變紅榨菜中含有嗜吡啶紅球菌，可挑取上述平板菌落中的菌種接種在含有_____________的液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)，一段時(shí)間后用_____________法檢測(cè)亞硝酸鹽的含量。9．（10分）甜味蛋白Brazzein是從一種西非熱帶植物的果實(shí)中分離得到的一種相對(duì)分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)，它含有54個(gè)氨基酸，是目前最好的糖類(lèi)替代品。迄今為止，已己發(fā)現(xiàn)Brazzein基因在數(shù)種細(xì)菌、真菌和高等植物、動(dòng)物細(xì)胞中都能表達(dá)。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：（1）Brazzein基因除了可從原產(chǎn)植物中分離得到外，還可以通過(guò)__________的方法獲得，此方法在基因比較小，且__________已知的情況下較為適用。（2）將Brazzein基因?qū)爰?xì)菌、真菌和高等植物細(xì)胞時(shí)都可使用的常用載體是__________，構(gòu)建基因表達(dá)載體是基因工程的核心步驟，其目的是__________________________________________________，同時(shí)，使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用。基因表達(dá)載體中，除了目的基因外，還必須有____________________、復(fù)制原點(diǎn)等。（3）若受體胞是大腸桿菌，可先用Ca2+處理細(xì)胞使其______________，再將重組表達(dá)載體DNA分子溶于緩沖液中與大腸桿菌混合；若受體是雙子葉植物，則常采用的方法是_____________。若受體是哺乳動(dòng)物，則可將Brazzein基因與________的啟動(dòng)子等調(diào)控組件重組在一起，以便從乳汁中獲得大量的Brazzein蛋白。10．（10分）為增加油菜種子的含油量，研究人員嘗試將酶D基因與位于葉綠體膜上的轉(zhuǎn)運(yùn)肽基因相連，導(dǎo)入油菜細(xì)胞并獲得了轉(zhuǎn)基因油菜品種。（1）研究人員依據(jù)基因的已知序列設(shè)計(jì)引物，采用__________技術(shù)從陸地棉基因文庫(kù)中獲取酶D基因，從擬南芥基因文庫(kù)中獲取轉(zhuǎn)運(yùn)肽基因。在上述引物設(shè)計(jì)時(shí)，分別在引物中加入上圖所示酶的識(shí)別序列，這樣可以用____________________酶處理兩個(gè)基因后，得到____________端（填圖中字母）相連的融合基因。（2）將上述融合基因插入右圖所示Ti質(zhì)粒的T－DNA中，構(gòu)建_______________并導(dǎo)入農(nóng)桿菌中。將獲得的農(nóng)桿菌接種在含______________的固體平板上培養(yǎng)得到單菌落，再利用液體培養(yǎng)基震蕩培養(yǎng)，可以得到用于轉(zhuǎn)化的浸染液。（3）剪取油菜的葉片放入侵染液中一段時(shí)間，此過(guò)程的目的是_________________________，進(jìn)一步篩選后培養(yǎng)獲得轉(zhuǎn)基因油菜。（4）提取上述轉(zhuǎn)基因油菜的mRNA，在____________酶的作用下獲得cDNA，再依據(jù)融合基因的DNA片段設(shè)計(jì)引物進(jìn)行擴(kuò)增，對(duì)擴(kuò)增結(jié)果進(jìn)行檢測(cè)，可判斷融合基因是否________。11．（15分）玉米（2N=20）是重要的糧食作物之一．請(qǐng)分析回答下列有關(guān)遺傳學(xué)問(wèn)題：（1）某玉米品種2號(hào)染色體上的基因S、s控制一對(duì)相對(duì)性狀，基因S在編碼蛋白質(zhì)時(shí)，控制最前端幾個(gè)氨基酸的DNA序列如圖1所示．已知起始密碼子為AUG或GUG。①如果進(jìn)行玉米的基因組測(cè)序，需要檢測(cè)__________條染色體的DNA序列。②基因S發(fā)生轉(zhuǎn)錄時(shí)，作為模板鏈的是圖1中的__________鏈．若基因S的b鏈中箭頭所指堿基對(duì)G/C缺失，則該處對(duì)應(yīng)的密碼子將改變?yōu)開(kāi)__________。（2）玉米的高桿易倒伏（H）對(duì)矮稈抗倒伏（h）為顯性，抗?。≧）對(duì)易感?。╮）為顯性，兩對(duì)基因分別位于兩對(duì)同源染色體上．上圖2表示利用品種甲（HHRR）和乙（hhrr）通過(guò)三種育種方法（Ⅰ～Ⅲ）培育優(yōu)良品種（hhRR）的過(guò)程。①利用方法Ⅰ培育優(yōu)良品種時(shí)，獲得hR植株常用的方法為_(kāi)_________，這種植株由于__________，須經(jīng)誘導(dǎo)染色體加倍后才能用于生產(chǎn)實(shí)踐．圖2所示的三種方法（Ⅰ～Ⅲ）中，最難獲得優(yōu)良品種（hhRR）的是方法__________，其原因是______________________________。②用方法Ⅱ培育優(yōu)良品種時(shí)，先將基因型為HhRr的植株自交獲得子代（F2），F(xiàn)2代植株中自交會(huì)發(fā)生性狀分離的基因型共有_____種，這些植株在全部

F2代中的比例為_(kāi)__________________．若將F2代的全部高稈抗病植株去除雄蕊，用F2代矮稈抗病植株的花粉隨機(jī)授粉，則雜交所得子代中的純合矮稈抗病植株占_________。

參考答案一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個(gè)選項(xiàng)符合題目要求）1、C【解析】

A、①、③、⑥是不同物種，不同物種的差異屬于物種多樣性，A錯(cuò)誤；B、同一種群所有個(gè)體所含的全部基因稱(chēng)為基因庫(kù)，而①～⑩包含不同物種，所包含的全部基因不能稱(chēng)為基因庫(kù)，B錯(cuò)誤；C、⑥～⑩在一段時(shí)期內(nèi)沒(méi)有產(chǎn)生新的基因，但染色體變異和自然選擇等因素也會(huì)導(dǎo)致種群基因頻率發(fā)生改變，C正確；D、該生態(tài)系統(tǒng)中的所有生物和非生物因子之和稱(chēng)為生態(tài)系統(tǒng)，但不能稱(chēng)為生態(tài)系統(tǒng)的多樣性，D錯(cuò)誤。故選C。2、A【解析】

生物形成生殖細(xì)胞（配子）時(shí)成對(duì)的基因分離，分別進(jìn)入不同的配子中；當(dāng)雜合子自交時(shí)，雌雄配子隨機(jī)結(jié)合，后代出現(xiàn)性狀分離，性狀分離比為顯性：隱性=3：1。據(jù)圖分析，用兩個(gè)小桶分別代表雌雄生殖器官，兩小桶內(nèi)的彩球分別代表雌雄配子，用不同彩球的隨機(jī)結(jié)合，模擬生物在生殖過(guò)程中，雌雄配子的隨機(jī)組合。【詳解】每個(gè)容器內(nèi)兩種顏色的小球的大小、重量及數(shù)量必須相等，但是兩個(gè)容器中的小球數(shù)量不一定相等，A錯(cuò)誤；甲、乙分別代表雌雄生殖器官，從甲或乙容器隨機(jī)取出一個(gè)小球可模擬等位基因分離的過(guò)程，B正確；從甲、乙容器各隨機(jī)取出一個(gè)小球分別代表雌雄配子，則兩個(gè)小球組合可以模擬F1自交產(chǎn)生F2的過(guò)程，C正確；該實(shí)驗(yàn)要做到多次重復(fù)并統(tǒng)計(jì)，次數(shù)越多越接近于理論值，且每一次取出后要及時(shí)放回小球并搖勻，以保證每次抓取小球時(shí)，兩種顏色的小球數(shù)目相等，D正確。3、B【解析】

植物激素包括生長(zhǎng)素、赤霉素、細(xì)胞分裂素、乙烯、脫落酸等，生長(zhǎng)素具有促進(jìn)植物生長(zhǎng)、促進(jìn)插條生根和促進(jìn)子房發(fā)育成果實(shí)等作用；赤霉素具有促進(jìn)植物生長(zhǎng)、抑制種子休眠、促進(jìn)種子萌發(fā)的作用；細(xì)胞分裂素的作用是促進(jìn)細(xì)胞分裂；乙烯的作用是促進(jìn)果實(shí)成熟；脫落酸的作用是促進(jìn)果實(shí)、葉片等器官的衰老和脫落?！驹斀狻緼、乙烯促進(jìn)果實(shí)成熟而不是發(fā)育，A錯(cuò)誤；B、利用高濃度的2，4-D作除草劑，可抑制麥田中的雙子葉雜草，B正確；C、利用生長(zhǎng)素類(lèi)似物培育成的無(wú)子西瓜屬于不可遺傳變異，而多倍體育種培育成的無(wú)子西瓜的原理是染色體變異，屬于可遺傳變異，C錯(cuò)誤；D、赤霉素能促進(jìn)解除種子休眠，促進(jìn)種子萌發(fā)，但是不能促進(jìn)細(xì)胞分裂，D錯(cuò)誤。故選B。4、B【解析】

病毒是非細(xì)胞生物，專(zhuān)性寄生在活細(xì)胞內(nèi)。病毒依據(jù)宿主細(xì)胞的種類(lèi)可分為植物病毒、動(dòng)物病毒和噬菌體；根據(jù)遺傳物質(zhì)來(lái)分，分為DNA病毒和RNA病毒；病毒由核酸和蛋白質(zhì)組成。【詳解】A、C0VID—19結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，其表面有蛋白質(zhì)的外殼，其內(nèi)有遺傳物質(zhì)RNA，A錯(cuò)誤；B、病毒營(yíng)寄生生活，侵染宿主細(xì)胞并在宿主細(xì)胞內(nèi)大量增殖，這個(gè)過(guò)程需要消耗宿主細(xì)胞的物質(zhì)及能量，B正確；C、病毒導(dǎo)致宿主細(xì)胞破裂有兩種情況，一是效應(yīng)T細(xì)胞作用下主動(dòng)死亡，即細(xì)胞凋亡，二是病毒大量繁殖導(dǎo)致宿主細(xì)胞破裂死亡，即細(xì)胞壞死，C錯(cuò)誤；D、人體對(duì)該病毒的免疫機(jī)理屬于特異性免疫（體液免疫和細(xì)胞免疫），與體液中殺菌物質(zhì)（如溶菌酶）滅菌原理（非特異性免疫）不同，D錯(cuò)誤。故選B。5、B【解析】

分析題圖可知，a表示地理隔離，阻斷種群間的基因交流，b表示自然選擇，c表示生殖隔離，生殖隔離是新物種產(chǎn)生的標(biāo)志；①~⑥表示物種形成的過(guò)程中產(chǎn)生的不定向變異?！驹斀狻緼、根據(jù)題圖可知，a表示地理隔離，b表示自然選擇，c表示生殖隔離，A正確；B、自然界中物種的形成大部分是通過(guò)地理隔離再形成生殖隔離，但也存在例如環(huán)境變化導(dǎo)致產(chǎn)生的多倍體，則沒(méi)有經(jīng)過(guò)地理隔離而產(chǎn)生了生殖隔離，B錯(cuò)誤；C、①~⑥的變異主要來(lái)源于基因突變、染色體變異和基因重組，是不定向的，C正確；D、物種1和物種2是原物種因地理隔離最終導(dǎo)致生殖隔離形成的，基因庫(kù)不同，D正確；故選B。6、C【解析】

1、種群密度的調(diào)查：一般植物和個(gè)體小、活動(dòng)能力小的動(dòng)物常用的是樣方法；活動(dòng)能力大的動(dòng)物常用標(biāo)志重捕法。

2、調(diào)查土壤中小動(dòng)物的豐富度采用取樣器取樣法，因?yàn)榛顒?dòng)能力強(qiáng)（不適合樣方法）、身體微?。ú贿m合標(biāo)志重捕法）；計(jì)算方法：①記名計(jì)算法—直接數(shù)個(gè)體數(shù)；②目測(cè)估計(jì)法—分等級(jí)估測(cè)，如非常多、多、較多、較少、少、很少等?！驹斀狻緼、調(diào)查某有翅、趨光性強(qiáng)的昆蟲(chóng)種群密度可用黑光燈誘捕法，A錯(cuò)誤；

B、調(diào)查土壤小動(dòng)物豐富度時(shí)，記名計(jì)算法常用于個(gè)體較大、種群數(shù)量較少的群落，B錯(cuò)誤；

C、對(duì)于土壤小動(dòng)物而言，取樣器取樣法可調(diào)查群落豐富度和某個(gè)種群的密度，C正確；

D、用取樣器取樣法調(diào)查土壤小動(dòng)物豐富度的原因是土壤小動(dòng)物的活動(dòng)能力強(qiáng)，身體微小，D正確。

故選C。【點(diǎn)睛】本題綜合考查估算種群密度的方法和土壤中動(dòng)物類(lèi)群豐富度的研究。二、綜合題：本大題共4小題7、翻譯RNA復(fù)制細(xì)胞免疫和體液免疫EBV的遺傳物質(zhì)RNA是單鏈，結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定，容易突變DNA分子結(jié)構(gòu)穩(wěn)定，便于運(yùn)輸和保存（不會(huì)誘發(fā)針對(duì)載體自身免疫反應(yīng)等）破壞正常細(xì)胞功能等動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞融合【解析】試題分析：本題以圖文結(jié)合的形式，綜合考查學(xué)生對(duì)中心法則的、特異性免疫及其應(yīng)用、生產(chǎn)單克隆抗體等知識(shí)的理解和掌握情況。解答此類(lèi)問(wèn)題需熟記并理解相關(guān)的基礎(chǔ)知識(shí)、形成知識(shí)網(wǎng)絡(luò)。在此基礎(chǔ)上，依據(jù)題圖中呈現(xiàn)的信息，準(zhǔn)確識(shí)別圖中數(shù)字所示生理過(guò)程，進(jìn)而進(jìn)行相關(guān)問(wèn)題的解答。(1)分析圖示可知，過(guò)程②為以mRNA為模板合成蛋白質(zhì)的翻譯過(guò)程；③為以mRNA為模板合成-RNA的RNA復(fù)制過(guò)程。(2)結(jié)合對(duì)(1)分析可知：埃博拉病毒在宿主巨噬細(xì)胞中遺傳信息的流動(dòng)方向?yàn)椤?3)EBV病毒為寄生生物，感染機(jī)體后可引發(fā)細(xì)胞免疫和體液免疫。埃博拉病毒（EBV）的遺傳物質(zhì)RNA是單鏈，結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定，容易突變。(4)與普通疫苗相比，利用基因工程研制的DNA疫苗具有DNA分子結(jié)構(gòu)穩(wěn)定、便于運(yùn)輸和保存等優(yōu)點(diǎn)；但若注射劑量高，可能會(huì)整合到宿主基因組內(nèi)而引起破壞正常細(xì)胞功能等(5)若制備埃博拉病毒的單克隆抗體，必須借助動(dòng)物細(xì)胞工程中的動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)。8、中性或微堿性滅菌小于平板劃線法和稀釋涂布平板法檢測(cè)培養(yǎng)基滅菌是否合格平板上的菌落呈紅色、奶酪狀、圓形、隆起硝酸鹽比色【解析】

1、培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)構(gòu)成：各種培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽，此外還要滿足微生物生長(zhǎng)對(duì)pH、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求。例如，培養(yǎng)乳酸桿菌時(shí)需要在培養(yǎng)基中添加維生素，培養(yǎng)霉菌時(shí)需將培養(yǎng)基的pH調(diào)至酸性，培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)需將pH調(diào)至中性或微堿性，培養(yǎng)厭氧微生物時(shí)則需要提供無(wú)氧的條件。

2、微生物常見(jiàn)的接種的方法

①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開(kāi)始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落。

②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過(guò)大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落?！驹斀狻浚?）嗜吡啶紅球菌為細(xì)菌的一種，培養(yǎng)細(xì)菌的培養(yǎng)基的pH應(yīng)調(diào)至中性或微堿性，該步驟應(yīng)在滅菌之前完成。（2）濾膜的孔徑應(yīng)小于菌種的體積，才能保證過(guò)濾后在濾膜上得到菌種。挑取濾膜上的菌種，接種在平板上培養(yǎng)，常用的接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法。為檢測(cè)培養(yǎng)基滅菌是否合格，常培養(yǎng)一個(gè)未接種的培養(yǎng)基，看其上面是否有菌落出現(xiàn)。根據(jù)題意可知，嗜吡啶紅球菌的菌落呈紅色、奶酪狀、圓形、隆起等，所以可根據(jù)上述菌落特征判斷培養(yǎng)基上是否有嗜吡啶紅球菌。即一段時(shí)間后，若觀察到平板上的菌落呈紅色、奶酪狀、圓形、隆起，則可初步確定變紅榨菜中含有嗜吡啶紅球菌。（3）嗜吡啶紅球菌可以將硝酸鹽還原成亞硝酸，所以為了進(jìn)一步確定變紅榨菜中含有嗜吡啶紅球菌，可挑取上述平板菌落中的菌種接種在含有硝酸鹽的液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)，一段時(shí)間后用比色法檢測(cè)亞硝酸鹽的含量。【點(diǎn)睛】本題考查微生物的分離和培養(yǎng)，要求考生識(shí)記接種微生物常用的兩種方法；識(shí)記培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)構(gòu)成及相關(guān)注意事項(xiàng)，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題。9、人工合成）核苷酸序列質(zhì)粒使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在，并且可以遺傳給下一代啟動(dòng)子、終止子、標(biāo)記基因處于一種能吸收周?chē)h(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)（或成為感受態(tài)細(xì)胞）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法乳腺蛋白基因【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸?kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲(chóng)鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。【詳解】（1）獲取目的基因的方法主要有兩種：一是從供體細(xì)胞（或基因文庫(kù)）中獲取，另一種是人工合成目的基因。人工合成目的基因的方法適合用于基因比較小、核苷酸序列已知的情況。（2）常用的基因載體是質(zhì)粒，構(gòu)建基因表達(dá)載體的目的是使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在，并且可以遺傳給下一代，同時(shí)，使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用?；虮磉_(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子、標(biāo)記基因、復(fù)制原點(diǎn)等。（3）若受體細(xì)胞是大腸桿菌，可先用Ca2+處理細(xì)胞，使細(xì)胞處于一種能吸收周?chē)h(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)；若受體是雙子葉植物，則常采用的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；若受體是哺乳動(dòng)物，通常將目的基因?qū)肴橄偌?xì)胞，可將Brazzein基因與乳腺蛋白基因啟動(dòng)子調(diào)控組件重組在一起，可從取其乳汁中獲得所需物質(zhì)?！军c(diǎn)睛】基因工程步驟：目的基因的獲取、基因表達(dá)載體的構(gòu)建、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞、目的基因的檢測(cè)與鑒定；要求考生識(shí)記基因工程的概念、原理及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)。10、PCRClaⅠ（限制酶）和DNA連接A、D表達(dá)載體（或“重組質(zhì)?！保┧沫h(huán)素利用農(nóng)桿菌將融合基因?qū)胗筒思?xì)胞逆轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)錄【解析】

1、基因文庫(kù)包括cDNA文庫(kù)、基因組文庫(kù)等。某個(gè)群體包含一種生物所有的基因的文庫(kù)叫基因組文庫(kù)，而用某種生物發(fā)育的某個(gè)時(shí)期的mRNA反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的多種互補(bǔ)DNA片段屬于cDNA文庫(kù)。2、限制酶能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開(kāi)，因此具有專(zhuān)一性。同種限制酶切割能夠產(chǎn)生相同的黏性末端，便于質(zhì)粒和目的基因連接?！驹斀狻浚?）擴(kuò)增目的基因常用PCR技術(shù)。切割獲得酶D基因和轉(zhuǎn)基因肽基因時(shí)，應(yīng)該用同種限制酶，以獲得相應(yīng)的黏性末端。因此，可用ClaⅠ限制酶和DNA連接酶處理兩個(gè)基因后，得到A、D端相連的融合基因。

（2）將上述融合基因插入右圖所示Ti質(zhì)粒的T-DNA中，構(gòu)建基因表達(dá)載體即重組質(zhì)粒并導(dǎo)入農(nóng)桿菌中。由于質(zhì)粒上含有四環(huán)素抗性基因作為標(biāo)記基因，所以將獲得的農(nóng)桿菌接種在含四環(huán)素的固體平板上培養(yǎng)得到單菌落。（3）剪取油菜的葉片放入侵染液中一段時(shí)間，此過(guò)程的目的是利用農(nóng)桿菌將融合基因?qū)胗筒思?xì)胞。

（4）提取上述轉(zhuǎn)基因油菜的mRNA，在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下獲得cDNA，再依據(jù)融合基因的DNA片段設(shè)計(jì)引物進(jìn)行擴(kuò)增，對(duì)擴(kuò)增結(jié)果進(jìn)行檢測(cè)，可判斷融合基因是否完成轉(zhuǎn)錄?！军c(diǎn)睛】本題以增加油菜種子的含油量為材料背景，考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生能夠掌握目的基因獲取的方法，能夠結(jié)合圖解中限制酶切