GB/T 40899-2021 化妝品中禁用物質(zhì)溴米索伐、卡溴脲和卡立普多的測定 高效液相色譜法（正式版）

ICS71.100.70GB/T40899—2021卡立普多的測定高效液相色譜法國家市場監(jiān)督管理總局國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會IGB/T40899—2021本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機構(gòu)不承擔(dān)識別專利的責(zé)任。本文件由中國輕工業(yè)聯(lián)合會提出。本文件由全國香料香精化妝品標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(SAC/TC257)歸口。ⅡGB/T40899—2021本文件的被測物質(zhì)是我國《化妝品安全技術(shù)規(guī)范(2015年版)》規(guī)定的禁用原料禁用原料是指不得作為化妝品原料使用的物質(zhì)?！痘瘖y品安全技術(shù)規(guī)范(2015年版)》規(guī)定：若技術(shù)上無法避免禁用物質(zhì)作為雜質(zhì)帶入化妝品時，國家有限量規(guī)定的應(yīng)符合其規(guī)定；未規(guī)定限量的，應(yīng)進行安全性風(fēng)險評估，確保在正常、合理及可預(yù)見的使用條件下不得對人體健康產(chǎn)生危害。目前我國尚未規(guī)定這些物質(zhì)的限量值。本文件的制定，僅對化妝品中測定這些物質(zhì)提供檢測方法。GB/T40899—2021卡立普多的測定高效液相色譜法警示——使用本文件的人員應(yīng)有正規(guī)實驗室工作的實踐經(jīng)驗。本文件并未指出所有可能的安全問——溴米索伐與卡溴脲：方法檢出限均為1mg/kg,定量限均為5mg/kg;下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文GB/T6682分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法本文件沒有需要界定的術(shù)語和定義。4原理測溴米索伐、卡溴脲)和蒸發(fā)光散射檢測器(用于檢測卡立普多)的高效液相色譜儀進行測定，根據(jù)保留5試劑和材料12于4℃避光保存，有效期2個月。4℃避光保存，有效期2個月。于4℃避光保存，有效期2個月。37.2測定條件高效液相色譜測定的參考條件如下：a)色譜柱：C?g固定相(4.6mm×250mmi.d.,5μm),或相當(dāng)者；b)流動相：乙腈十水=40+60(體積比),等度洗脫；c)柱溫：30℃;f)二極管陣列檢測器檢測條件：檢測波長210nm;g)蒸發(fā)光散射檢測器檢測條件：霧化器冷卻模式；漂移管溫度50℃;載氣為氮氣，壓力為276kPa(40psi);放大系數(shù)為500。7.3標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制7.3.1溴米索伐和卡溴脲標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制使用吸量管分別移取0.5mL、1mL、5mL、10mL、25mL溴米索伐標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液(5.7)和卡溴脲標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液(5.8)于50mL容量瓶中，使用流動相定容至刻度，得到質(zhì)量濃度為10mg/L、20mg/L、100mg/L、200mg/L和500mg/L的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，按7.2給出的測定條件以濃度由低到高順序進樣，使用二極管陣列檢測器進行檢測，以質(zhì)量濃度為自變量，以峰面積為因變量進行線性回歸，得到標(biāo)準(zhǔn)曲線。7.3.2卡立普多標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制使用吸量管分別移取2.5mL、5mL、10mL、15mL、25mL卡立普多標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液(5.9)于50mL容量瓶中，使用流動相定容至刻度，得到質(zhì)量濃度為50mg/L、100mg/L、200mg/L、300mg/L和500mg/L的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，按7.2給出的測定條件以濃度由低到高順序進樣，使用蒸發(fā)光散射檢測器進行檢測，以質(zhì)量濃度的常用對數(shù)值為自變量，以色譜峰面積的常用對數(shù)值為因變量進行線性回歸，得到標(biāo)準(zhǔn)曲線。三種待測物標(biāo)準(zhǔn)溶液的高效液相色譜圖見附錄B中圖B.1。按7.2測定條件對樣品溶液進行測定，根據(jù)保留時間初步定性，外標(biāo)法定量。待測物含量應(yīng)在標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性范圍之內(nèi)，超出線性范圍則應(yīng)稀釋后再進行分析。7.5空白試驗除不稱取樣品外，按7.1～7.4步驟與測試平行進行測定。8結(jié)果計算樣品中待測物的含量按式(1)計算： (1)式中：w;——樣品中待測物的含量，單位為毫克每千克(mg/kg);4GB/T40899—2021p;——從標(biāo)準(zhǔn)曲線得到的樣品溶液中待測物的質(zhì)量濃度，單位為毫克每升(mg/L);po——從標(biāo)準(zhǔn)曲線得到的空白溶液中待測物的質(zhì)量濃度，單位為毫克每升(mg/L);V——樣品溶液最終定容體積，單位為毫升(mL);計算結(jié)果表示到小數(shù)點后兩位。在添加濃度5mg/kg～50mg/kg范圍內(nèi)，溴米索伐的回收率為87.2%～105.3%,卡溴脲的回收率為90.1%～103.9%;在添加濃度20mg/kg～200mg/kg范圍內(nèi)，卡立普多的回收率為90.1%~在重復(fù)性條件下獲得兩次獨立測定結(jié)果的絕對差值不應(yīng)超過算術(shù)平均值的10%。5(資料性)序號中文名稱英文名稱分子式相對分子質(zhì)量結(jié)構(gòu)式1溴米索伐Bromisoval496-67-3C?HBrN?O?223.070=人0=人Br2卡溴脲Carbromal77-65-6C?H??BrN?O?237.09BrNH?3卡立普多Carisoprodol78-44-4C12H?N?O260.33H?N08OH6All;mALSUJ/imVAll;mALSUJ/imV5.0×104時問/min(資料性)溴米索伐、卡溴脲和卡立普多標(biāo)準(zhǔn)溶液的高效液相色譜圖溴米索伐、卡溴脲和卡立普多標(biāo)準(zhǔn)溶液的高效液相色譜圖見圖B.1。4×10°2×1002a)溴米索伐和卡溴脲的高效液相色譜圖b)卡立普多的高效液相色譜圖注：三種待測物質(zhì)量濃度均為100mg/L;溴米索伐的保留時間為5.34min,卡溴脲為8.36min,卡立普多為圖B.1溴米索伐、卡溴脲和卡立普多標(biāo)準(zhǔn)溶液的高效液相色譜圖確證試驗C.1液相色譜參考條件液相色譜參考條件如下：b)流動相：乙腈(5.3)-0.1%甲酸水溶液(50+50,體積比),等度洗脫；C.2質(zhì)譜參考條件質(zhì)譜參考條件如下：g)數(shù)據(jù)采集方式：多反應(yīng)監(jiān)測(MRM)。C.3定性測定按液相色譜-質(zhì)譜條件測定樣液和標(biāo)準(zhǔn)工作溶液。樣品溶液中待測物的響應(yīng)值需在標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性范圍內(nèi)，如超過線性范圍則稀釋后再進樣測定。如果所選擇的離子均出現(xiàn)，而且所選擇的離子比與標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的相對豐度一致，允許相對偏差不超過表C.1規(guī)定的范圍，則可判斷樣品中含有溴米索伐、卡溴脲或卡立普多。三種待測物的選擇離子質(zhì)量色譜圖見圖C.1。表C.1溴米索伐、卡溴脲和卡立普多的質(zhì)譜分析參數(shù)待測物保留時間定性離子對m/z錐孔電壓V碰撞能量相對離子豐度%允許相對偏差%溴米索伐223.1/179.9,223.1/57.1卡溴脲237.1/194.1,237.1/114.2卡立普多261.1/176.1,261.1/62.0和對上度/%相對豐度/%GB/T40899—2021時間/min卡溴脲，237.1>194.17525-0.00.51.01.52.02.53.0時間/m