液相色譜儀使用及維護(hù)方法 液相色譜如何做好保養(yǎng)

第第頁(yè)液相色譜儀使用及維護(hù)方法液相色譜如何做好保養(yǎng)液相色譜儀使用時(shí)要特別的注意：

使用卡套柱時(shí)，兩端的卡套應(yīng)時(shí)刻連接在柱芯上。不管您是平衡色譜柱或是清洗，任何時(shí)候都不能將卡套取下來(lái)，否則會(huì)造成填料的流失。液相色譜柱使用注意：A．卡套柱的

液相色譜儀使用時(shí)要特別的注意：

使用卡套柱時(shí)，兩端的卡套應(yīng)時(shí)刻連接在柱芯上。不管您是平衡色譜柱或是清洗，任何時(shí)候都不能將卡套取下來(lái)，否則會(huì)造成填料的流失。

液相色譜柱使用注意：

A．卡套柱的安裝（加預(yù)柱）

1．將卡套架套入柱芯

2．將兩片夾套片嵌入柱芯的凹槽，使夾套高于柱芯

3．將已套到柱芯上的卡套架向上推，直至高過(guò)夾套片

4．將"子彈頭"預(yù)柱放入卡套片內(nèi)

5．將卡套帽和卡套架旋在一起，然后用手?jǐn)Q緊

6．然后依同樣的次序連接好柱子的另一端

B．平衡色譜柱

反相色譜柱在經(jīng)過(guò)出廠測(cè)試后是保存在乙腈/水中的。請(qǐng)確定確保您所使用的流動(dòng)相和乙腈/水互溶。由于色譜柱在儲(chǔ)存或運(yùn)輸過(guò)程中可能會(huì)干掉，因此在用流動(dòng)相分析樣品之前，應(yīng)使用10－20倍柱體積的甲醇或乙腈平衡色譜柱；假如您所使用的流動(dòng)相中含有緩沖鹽，應(yīng)注意用純水"過(guò)渡"。

硅膠柱或極性色譜柱在經(jīng)過(guò)出廠測(cè)試后是保存在正庚烷中的。假如該色譜柱需要使用含水的流動(dòng)相，請(qǐng)?jiān)谑褂昧鲃?dòng)相之前用乙醇或異丙醇平衡

如何平衡色譜柱？

平衡過(guò)程中，將流速緩慢地提高用流動(dòng)相平衡色譜柱直到獲得穩(wěn)定的基線（緩沖鹽或離子對(duì)試劑度假如較低，則需要較長(zhǎng)的時(shí)間來(lái)平衡）

色譜柱的再生

進(jìn)行色譜柱再生時(shí)，應(yīng)使用一個(gè)謙價(jià)的泵，我們建議可以不使用您的高效液相色譜儀上的泵。

注意：

在對(duì)NH2改性的色譜柱進(jìn)行再生時(shí)，由于NH2可能成銨根離子的形式存在，因此應(yīng)當(dāng)在水洗后用0.1M的氨水沖洗，然后再用水沖洗至堿溶液完全流出。假如簡(jiǎn)單的有機(jī)溶劑/水的處理不能夠完全洗去硅膠表面吸附的雜質(zhì)，用0.05M稀硫酸沖洗特別有效。

色譜柱的維護(hù):

1．使用預(yù)柱保護(hù)分析柱（硅膠在極性流動(dòng)相/離子性流動(dòng)相中有確定的溶解度）

2．大多數(shù)反相色譜柱的pH穩(wěn)定范圍是2－7.5，盡量不超過(guò)該色譜柱的pH范圍

3．避開(kāi)流動(dòng)相構(gòu)成及極性的猛烈變化

4．流動(dòng)相使用前必需經(jīng)脫氣和過(guò)濾處理

5．假如使用極性或離子性的緩沖溶液作流動(dòng)相，應(yīng)在試驗(yàn)完畢柱子沖洗干凈，并保存大乙腈中

6．壓力上升是需要更換預(yù)柱的信號(hào)

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相關(guān)熱詞：

等離子清洗機(jī),反應(yīng)釜,旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀,高精度溫濕度計(jì),露點(diǎn)儀,高效液相色譜儀價(jià)格,霉菌試驗(yàn)箱,跌落試驗(yàn)臺(tái),離子色譜儀價(jià)格,噪聲計(jì),高壓滅菌器,集菌儀,接地電阻測(cè)試儀型號(hào),柱溫箱,旋渦混合儀,電熱套,場(chǎng)強(qiáng)儀萬(wàn)能材料試驗(yàn)機(jī)價(jià)格,洗瓶機(jī),勻漿機(jī),耐候試驗(yàn)箱,熔融指數(shù)儀,透射電子顯微鏡。

液相色譜儀分類(lèi)有多種

1、按分別目的可分：試驗(yàn)室液相色譜儀和工業(yè)液相色譜儀。

2、按固定相物理狀態(tài)可分：液液色譜儀和液固色譜儀。

3、按色譜柱形狀可分：填充柱液相色譜儀和平板液相色譜儀。

4、按分別原理可分：吸附液相色譜儀、調(diào)配液相色譜儀、離子交換液相色譜儀和凝膠液相色譜儀。

5、按分別模型可分：線性液相色譜儀和非線性液相色譜儀。

6、按分別動(dòng)力學(xué)過(guò)程可分：迎頭液相色譜儀、頂替液相色譜儀和洗脫液相色譜儀。

7、按操作壓力可分：低壓液相色譜儀、中壓液相色譜儀和高壓液相色譜儀。

8、按結(jié)構(gòu)可分：臺(tái)式液相色譜儀和落地式液相色譜儀。

9、按分別規(guī)?？煞郑何⑿鸵合嗌V儀、小型液相色譜儀和大型液相色譜儀。

10、按功能可分：分析型液相色譜儀和制備型液相色譜儀。

YL9100液相色譜儀

11、按用途可分：生物色譜儀、制藥色譜儀、化工色譜儀、食品色譜儀、醫(yī)用色譜儀、血液色譜儀、血清色譜儀、血漿色譜儀、蛋白色譜儀、蛋白質(zhì)色譜儀、多肽色譜儀、氨基酸色譜儀、酶色譜儀、核酸色譜儀、RNA色譜儀、DNA色譜儀、細(xì)胞色譜儀、菌體色譜儀、抗生素色譜儀、維生素色譜儀、啤酒色譜儀、飲料色譜儀、果汁色譜儀、乳品色譜儀、淀粉色譜儀、發(fā)酵液色譜儀、酵母色譜儀、催化劑色譜儀、試劑色譜儀、植物油色譜儀、動(dòng)物油色譜儀、礦物油色譜儀、石油色譜儀、原油色譜儀、油類(lèi)色譜儀、礦用色譜儀、污水色譜儀、廢水色譜儀、水質(zhì)色譜儀、土壤色譜儀、農(nóng)藥色譜儀、試驗(yàn)色譜儀和專(zhuān)用色譜儀等。

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導(dǎo)讀：液相色譜儀是一種常用的專(zhuān)業(yè)檢驗(yàn)檢測(cè)儀器，在使用過(guò)程中難免會(huì)碰到一些故障，這需要相應(yīng)的方法來(lái)解決。液相色譜的常見(jiàn)故障及解決方法

液相色譜儀的系統(tǒng)由儲(chǔ)液器、泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測(cè)器、記錄儀等幾部分構(gòu)成。儲(chǔ)液器中的流動(dòng)相被高壓泵打入系統(tǒng)，樣品溶液經(jīng)進(jìn)樣器進(jìn)入流動(dòng)相，被流動(dòng)相載入色譜柱（固定相）內(nèi)，由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的調(diào)配系數(shù)，在兩相中做相對(duì)運(yùn)動(dòng)時(shí)，經(jīng)過(guò)反復(fù)多次的吸附—解吸的調(diào)配過(guò)程，各組分在移動(dòng)速度上產(chǎn)生較大的差別，被分別成單個(gè)組分依次從柱內(nèi)流出，通過(guò)檢測(cè)器時(shí)，樣品濃度被轉(zhuǎn)換成電信號(hào)傳送到記錄儀，數(shù)據(jù)以圖譜形式打印出來(lái)。

1、HPLC靈敏度不夠的緊要原因及解決方法是什么？

①樣品量不足，解決方法為加添樣品量

②樣品未從柱子中流出?？梢罁?jù)樣品的化學(xué)性質(zhì)更改流動(dòng)相或柱子

③樣品與檢測(cè)器不匹配。依據(jù)樣品化學(xué)性質(zhì)調(diào)整波長(zhǎng)或改換檢測(cè)器

④檢測(cè)器衰減太多。調(diào)整衰減即可。

⑤檢測(cè)器時(shí)間常數(shù)太大。解決方法為降低時(shí)間參數(shù)

⑥檢測(cè)器池窗污染。解決方法為清洗池窗。

⑦檢測(cè)池中有氣泡。解決方法為排氣。

⑧記錄儀測(cè)壓范圍不當(dāng)。調(diào)整電壓范圍即可。

⑨流動(dòng)相流量不合適。調(diào)整流速即可。

⑩檢測(cè)器與記錄儀超出校正曲線。解決方法為檢查記錄儀與檢測(cè)器，重作校正曲線。

2、液相色譜中峰顯現(xiàn)拖尾或顯現(xiàn)雙峰的原因是什么？

①篩板堵塞或柱失效，解決方法是反向沖洗柱子，替換篩板或更換柱子。

②存在干擾峰，解決方法為使用較長(zhǎng)的柱子，改換流動(dòng)相或更換選擇性好的柱子

③可能柱超載，削減進(jìn)樣量。

3、為何顯現(xiàn)峰展寬？

①樣品體積過(guò)大用流動(dòng)相配樣,總的樣品體積小于*峰的15%

②在進(jìn)樣閥中造成峰擴(kuò)展進(jìn)樣前后排出氣泡以降低擴(kuò)散

③數(shù)據(jù)系統(tǒng)采樣速率太慢設(shè)定速率應(yīng)是每峰大于10點(diǎn)

④檢測(cè)器時(shí)間常數(shù)過(guò)大設(shè)定時(shí)間常數(shù)為感喜好*峰半寬的10%

⑤流動(dòng)相粘度過(guò)高加添柱溫,接受低粘度流動(dòng)相

⑥檢測(cè)池體積過(guò)大用小體積池,卸下熱交換器

⑦保留時(shí)間過(guò)長(zhǎng)等度洗脫時(shí)加添強(qiáng)溶劑含量,也可用梯度洗脫

⑧柱外體積過(guò)大將連接管徑和連接管長(zhǎng)度降至zui小

⑨樣品過(guò)載進(jìn)小濃度小體積樣品

4、如何簡(jiǎn)單判定比例閥是否內(nèi)漏？

設(shè)定泵使用一個(gè)單獨(dú)通路（A），打開(kāi)Purge閥，流速5mL/min，提起其他溶劑瓶?jī)?nèi)的溶劑過(guò)濾頭直至離開(kāi)液面，察看這些通路（B、C、D）內(nèi)的溶劑是否隨著流動(dòng)，正常時(shí)均不應(yīng)流動(dòng)。

5、做HPLC分析時(shí)，柱壓不穩(wěn)定，如何解決？

①泵內(nèi)有空氣，解決的方法是清除泵內(nèi)空氣，對(duì)溶劑進(jìn)行脫氣處理；

②比例閥失效，更換比例閥即可；

③泵密封墊損壞，更換密封墊即可；

④溶劑中的氣泡，解決的方法是對(duì)溶劑脫氣，必要時(shí)更改脫氣方法；

⑤系統(tǒng)檢漏，找出漏點(diǎn)，密封即可；

⑥梯度洗脫，這時(shí)壓力波動(dòng)是正常的。

6、購(gòu)買(mǎi)的HPLC柱驗(yàn)收測(cè)試時(shí)柱壓過(guò)高，請(qǐng)問(wèn)為什么？

柱壓過(guò)高是HPLC柱用戶zui常碰到的問(wèn)題。其原因有多方面，而且常常并不是柱子本身的問(wèn)題，您可按下面步驟檢查問(wèn)題的起因：

①拆去保護(hù)預(yù)柱，看柱壓是否還高，否則是保護(hù)柱的問(wèn)題，若柱壓仍高，再檢查；

②把色譜柱從儀器上取下，看壓力是否下降，否則是管路堵塞，需清洗，若壓力下降，再檢查；

③將柱子的進(jìn)出口反過(guò)來(lái)接在儀器上，用10倍柱體積的流動(dòng)相沖洗柱子，（此時(shí)不要連接檢測(cè)器，以防固體顆粒進(jìn)入流動(dòng)池）。這時(shí)，假如柱壓仍不下降，再檢查；只用于使用過(guò)的柱子。

④更換柱子入口篩板，若柱壓下降，說(shuō)明您的溶劑或樣品含有顆粒雜質(zhì)，正是這些雜質(zhì)將篩板堵塞引起壓力上升。若柱壓還高，請(qǐng)與廠商。一般情況下，在進(jìn)樣器與保護(hù)柱之間接一個(gè)在線過(guò)濾器便可避開(kāi)柱壓過(guò)高的問(wèn)題。

7、色譜柱中的流動(dòng)相見(jiàn)排干嗎？

不少做色譜分別試驗(yàn)的人碰到過(guò)這樣的情形：不慎未適時(shí)補(bǔ)充流動(dòng)相，泵將溶劑瓶中的流動(dòng)相吸干了，HPLC系統(tǒng)由此而停止工作了。如此情況是否會(huì)損壞色譜柱？泵是否已將色譜柱中全部流動(dòng)相都排干了？色譜柱還能使用嗎？事實(shí)上，假如泵將溶劑瓶中的流動(dòng)相吸干，并不會(huì)造成色譜柱的損壞。即使泵中充分了空氣，泵也不會(huì)將空氣排入色譜柱。由于泵只能輸送液體，而不能輸送空氣。

相比之下，另一個(gè)更可能發(fā)生的情況是忘掉蓋上色譜柱兩端的密封蓋或蓋子太松而使色譜柱變干。同樣，整個(gè)色譜柱干枯的情況不太簡(jiǎn)單發(fā)生，多半可能只是色譜柱兩端的幾個(gè)毫米變干了，因揮發(fā)掉全部溶劑是色譜柱變干需要相當(dāng)長(zhǎng)的時(shí)間。即使色譜柱真的變干了，也不愿定就不可救藥了?？梢試L試用一種完全脫氣的、表面張力低的溶劑（如，經(jīng)氦氣脫氣的甲醇）沖洗色譜柱以除去氣體。較低的表面張力有助于浸潤(rùn)填料表面；已脫氣的溶劑應(yīng)當(dāng)能夠溶解并去除滯留在填料中的氣體。色譜柱大約需要（以1mL/min的流速）沖一個(gè)