藥物的雜質(zhì)檢查

第三章

藥物的雜質(zhì)檢查

Contents藥物的雜質(zhì)與限量1雜質(zhì)的檢查方法2一般雜質(zhì)的檢查方法3特殊雜質(zhì)的檢查方法

4

一、藥物的雜質(zhì)與純度第一節(jié)藥物的雜質(zhì)與限量雜質(zhì)任何影響藥品純度的物質(zhì)均稱為雜質(zhì)。雜質(zhì)無治療作用、或影響藥物的穩(wěn)定性和療效、甚至對(duì)人體健康有害。

藥品純度指藥物的純潔程度，是反映藥品質(zhì)量的一項(xiàng)重要指標(biāo)。主要由藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中的“檢查”項(xiàng)下的雜質(zhì)檢查來控制。

注意藥物純度與化學(xué)純度的區(qū)別藥物純度的評(píng)價(jià)應(yīng)把藥物的性狀、理化常數(shù)、雜質(zhì)檢查、含量測(cè)定等作為一個(gè)有聯(lián)系的整體來評(píng)價(jià)藥物的純度。

生產(chǎn)過程中引入藥物在合成過程中未反應(yīng)的原料、中間體和副產(chǎn)物、所用的試劑、溶劑、還原劑、金屬器皿、裝置等。

貯藏過程中引入外界條件的變化或微生物的作用可能發(fā)生的水解、氧化、異構(gòu)化、晶型轉(zhuǎn)化、聚合等變化而產(chǎn)生的有關(guān)雜質(zhì)。二、雜質(zhì)的來源

示例：雙氯非那胺的生產(chǎn)原料殘留：鄰二氯苯中間體分解：氯化銨分解NH4Cl原料藥生產(chǎn)中引入的雜質(zhì)

示例腎上腺素注射液抗氧劑——焦亞硫酸鈉穩(wěn)定劑——EDTA-2Na腎上腺素磺酸制劑生產(chǎn)中引入的雜質(zhì)腎上腺素

光學(xué)異構(gòu)體例.腎上腺素左旋體的升壓作用是右旋體的12倍鹽酸普萘洛爾左旋異構(gòu)體的

-受體阻斷作用比右旋體大60倍。無效、低效異構(gòu)體或晶型幾何異構(gòu)體（順式體，反式體）例.維生素A全反式的生物活性最高

多晶型晶型不同，理化常數(shù)、溶解度、穩(wěn)定性、體內(nèi)吸收和療效也不同。例.無味氯霉素有多晶現(xiàn)象，B晶型易被酯酶水解而吸收，為有效晶型，而A晶型則不易被酯酶水解，活性很低。

藥物貯藏中引入的雜質(zhì)水解反應(yīng)：吲哚美辛——酰胺鍵易發(fā)生水解反應(yīng)的結(jié)構(gòu)：酯、內(nèi)酯、酰胺、鹵代烴、苷類等易發(fā)生氧化反應(yīng)的結(jié)構(gòu)：醚、醛、酚羥基、巰基、亞硝基、雙鍵等氧化反應(yīng)：利血平——氧化產(chǎn)物無降壓作用

例卡比馬唑中甲巰咪唑的引入卡比馬唑的合成過程：甲巰咪唑即是卡比馬唑合成中的中間體，也是貯存過程中的分解產(chǎn)物。

嚴(yán)格控制藥品的貯藏條件，是保證臨床用藥安全、有效的一個(gè)重要方面。

三、雜質(zhì)的種類與分類按來源分一般雜質(zhì)在自然界中分布較廣泛，在多種藥物的生產(chǎn)和貯藏過程中容易引入的雜質(zhì)。如酸、堿、水分、氯化物、硫酸鹽、重金屬、砷鹽等特殊雜質(zhì)在個(gè)別藥物的生產(chǎn)和貯藏過程中引入的雜質(zhì)。如阿司匹林中的游離水楊酸、甲硝唑中的2-甲基-5-硝基咪唑等。

按毒性分信號(hào)雜質(zhì)本身一般無害，但其含量的多少可以反映出藥物的純度水平，稱其為“信號(hào)”雜質(zhì)。如氯化物、硫酸鹽等屬于信號(hào)雜質(zhì)。毒性雜質(zhì)對(duì)人體有毒害的雜質(zhì)。如重金屬、砷鹽、氰化物等應(yīng)嚴(yán)格加以控制，以保證用藥安全。

有機(jī)雜質(zhì)殘留溶劑

無機(jī)雜質(zhì)

按化學(xué)類別和特性分類合成中未反應(yīng)完全的原料、中間體、副產(chǎn)物、降解產(chǎn)物等生產(chǎn)中使用的有機(jī)溶劑來源于生產(chǎn)過程，一般是已知的和確定的，直接影響藥物的穩(wěn)定性，反映生產(chǎn)工藝情況

四、雜質(zhì)的限量定義藥物中所含雜質(zhì)的最大允許量。計(jì)算百分之幾或百萬分之幾（ppm）表示

檢查方法限度檢查法定量測(cè)定對(duì)照法比較法靈敏度法

樣品管標(biāo)準(zhǔn)管注意事項(xiàng)：平行操作原則。對(duì)照法

在供試品溶液中加入一定量的試劑，在一定反應(yīng)條件下不得有正反應(yīng)出現(xiàn)，從而判斷供試品中所含雜質(zhì)是否符合限量規(guī)定靈敏度法取一定量供試品依法檢查，測(cè)定特定待檢雜質(zhì)的參數(shù)與規(guī)定的限量比較，不得更大。比較法

示例3-1茶苯海明中氯化物的檢查已知：求：L＝？解：

示例3-2谷氨酸鈉中重金屬的檢查已知：S＝1.0gC＝10μg/mlL＝10×10－6求：V＝？解：

示例3-3

腎上腺素中酮體的檢查解：已知：=435A=0.05求：L＝？

示例3-4卡比馬唑片中甲巰咪唑的檢查計(jì)算注意①單位一致②稀釋體積③ppm的表示方法TLC法——

雜質(zhì)對(duì)照品法解：卡比馬唑片規(guī)格：5mg

第二節(jié)雜質(zhì)的檢查方法一、雜質(zhì)的研究規(guī)范（一）有機(jī)雜質(zhì)在藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中的項(xiàng)目名項(xiàng)目名稱

雜質(zhì)的化學(xué)名以某類雜質(zhì)名根據(jù)檢測(cè)方法選用腎上腺素中的“酮體”利巴韋林中的“有關(guān)物質(zhì)”“雜質(zhì)吸光度”

（二）雜質(zhì)檢查項(xiàng)目的確定確定原則：針對(duì)性原料藥和制劑中的雜質(zhì)根據(jù)其生產(chǎn)工藝、起始原料情況確定檢查項(xiàng)目規(guī)定降解產(chǎn)物和毒性雜質(zhì)的檢查項(xiàng)目新藥經(jīng)研究和穩(wěn)定性考察檢出的，并在批量生產(chǎn)中出現(xiàn)的雜質(zhì)和降解產(chǎn)物。對(duì)在合成、純化和貯存中實(shí)際存在的雜質(zhì)和潛在的雜質(zhì)進(jìn)行研究，包括無機(jī)雜質(zhì)、有機(jī)雜質(zhì)及殘留溶劑。

單一對(duì)映體藥物其可能共存的其他對(duì)映體應(yīng)作為雜質(zhì)檢查消旋體藥物當(dāng)已有其單一對(duì)映體藥物的法定質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)時(shí)，應(yīng)在該消旋體藥物的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中設(shè)旋光度檢查項(xiàng)目。

（三）雜質(zhì)限度的確定確定原則：合理性在確保用藥安全有效的前提下，應(yīng)考慮：生產(chǎn)的可行性及批與批之間的正常波動(dòng)藥品本身的穩(wěn)定性根據(jù)每日劑量來制訂質(zhì)控限度有機(jī)雜質(zhì)的限度規(guī)定應(yīng)包括：每一個(gè)已知雜質(zhì)、未知雜質(zhì)及總雜質(zhì)。仿制藥品的雜質(zhì)限度，應(yīng)與已上市產(chǎn)品進(jìn)行質(zhì)量對(duì)比研究。

藥物最大日劑量報(bào)告限度a鑒定限度b質(zhì)控限度c原料藥≤2g＞2g0.05%0.03%0.10%或1.0mg0.05%0.15%或1.0mg0.05%制劑≤1g＞1g＜1mg1~10mg＞10mg-2g＞2g＜10mg10mg-100mg＞100mg-2g＞2g0.1%0.05%1.0%或5μg0.5%或20μg

0.2%或2mg0.10%

1.0%或50μg

0.5%或200μg

0.2%或3mg0.15%原料藥與制劑的雜質(zhì)限度

報(bào)告限度（reportingthreshold）：超出此限度的雜質(zhì)均應(yīng)在檢測(cè)報(bào)告中報(bào)告，并應(yīng)報(bào)告具體的檢測(cè)數(shù)據(jù)。b.鑒定限度（identificationthreshold）：超出此限度的雜質(zhì)均應(yīng)進(jìn)行定性分析，確定其化學(xué)結(jié)構(gòu)。c.質(zhì)控限度（qualificationthreshold）：質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中一般允許的雜質(zhì)限度，如制訂的限度高于此限度，則應(yīng)有充分的依據(jù)。

（四）雜質(zhì)檢查方法的選擇與驗(yàn)證用于雜質(zhì)檢查的分析方法要求專屬、靈敏。專屬性：根據(jù)原料藥或制劑的生產(chǎn)工藝及儲(chǔ)存條件，以中間體、立體異構(gòu)體、粗品、重結(jié)晶母液、經(jīng)加速破壞性試驗(yàn)后的樣品作為測(cè)試品進(jìn)行系統(tǒng)適用性研究，考察產(chǎn)品中各雜質(zhì)峰及主成分峰相互間的分離度是否符合要求。

采用HPLC法檢查有機(jī)雜質(zhì)時(shí)，常采用梯度洗脫。

檢測(cè)限：要符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)雜質(zhì)限度的要求，最低檢測(cè)限不得大于該雜質(zhì)的報(bào)告限度。

二、雜質(zhì)的常用檢查方法物理性質(zhì)外觀性狀分配或吸附

化學(xué)性質(zhì)性質(zhì)差異酸堿性

氧化還原性質(zhì)

對(duì)光的吸收化學(xué)反應(yīng)

常用方法化學(xué)方法色譜方法光譜方法物理方法

與試劑產(chǎn)生顏色與試劑產(chǎn)生沉淀與試劑產(chǎn)生氣體雜質(zhì)（一）化學(xué)方法

顯色反應(yīng)檢查法雜質(zhì)與試劑產(chǎn)生顏色比色法示例3-5氯硝柳胺中5-氯水楊酸和2-氯-4-硝基苯胺的檢查氯硝柳胺5-氯水楊酸2-氯-4-硝基苯胺5-氯水楊酸的檢查檢查原理

2-氯-4-硝基苯胺的檢查氨基磺酸銨的作用：將剩余的亞硝酸分解除去

要求：1min內(nèi)不得出現(xiàn)渾濁。2.沉淀反應(yīng)檢查法雜質(zhì)與試劑產(chǎn)生沉淀比濁重量法測(cè)定雜質(zhì)的量

示例3-6鹽酸肼屈嗪中游離肼的檢查檢查原理

4.滴定法滴定劑只與雜質(zhì)反應(yīng)，以一定濃度的滴定溶液滴定藥物的雜質(zhì)，可以定量地測(cè)定雜質(zhì)的含量。檢查原理示例3-7硫酸亞鐵中高鐵鹽的檢查

1.TLC法（1）雜質(zhì)對(duì)照品法（二）色譜方法方法適用于已知雜質(zhì)并能制備雜質(zhì)對(duì)照品的情況樣品對(duì)照品

示例3-8枸櫞酸乙胺嗪中N-甲基哌嗪的檢查判斷結(jié)果供試品溶液如顯與對(duì)照品相應(yīng)的雜質(zhì)斑點(diǎn)，其顏色與對(duì)照溶液品溶液主斑點(diǎn)比較，不得更深。供試品溶液：枸櫞酸乙胺嗪（50mg/ml）對(duì)照品溶液：N-甲基哌嗪對(duì)照品(50μg/ml)點(diǎn)樣→展開→晾干薄層板→檢視斑點(diǎn)

（2）供試品溶液自身稀釋對(duì)照法適用于雜質(zhì)的結(jié)構(gòu)不能確定，或無雜質(zhì)對(duì)照品的情況。限于雜質(zhì)斑點(diǎn)的顏色與主成分斑點(diǎn)顏色相同或相近的情況下使用。樣品對(duì)照品結(jié)果判斷供試品溶液所顯雜質(zhì)斑點(diǎn)與自身稀釋對(duì)照溶液或系列自身稀釋對(duì)照溶液所顯主斑點(diǎn)比較，不得更深。

示例3-11吡羅昔康中有關(guān)物質(zhì)的檢查供試品溶液：20mg/ml對(duì)照溶液：0.2mg/ml結(jié)果判斷：供試品溶液如顯雜質(zhì)斑點(diǎn)，與對(duì)照溶液所顯的主斑點(diǎn)比較，不得更深。稀釋

（3）雜質(zhì)對(duì)照品法與供試品溶液自身稀釋對(duì)照法并用當(dāng)藥物中存在多個(gè)雜質(zhì)時(shí)，其中已知雜質(zhì)有對(duì)照品時(shí)，采用雜質(zhì)對(duì)照品法檢查；共存的未知雜質(zhì)或沒有對(duì)照品的雜質(zhì)，可采用供試品溶液自身稀釋對(duì)照法檢查。樣品對(duì)照品對(duì)照

判斷：

供試品溶液如顯雜質(zhì)斑點(diǎn)不得多于2個(gè)，其中在與對(duì)照品溶液相同的位置上所顯雜質(zhì)斑點(diǎn)的顏色與對(duì)照品溶液主斑點(diǎn)比較，不得更深，另一雜質(zhì)雜質(zhì)的顏色與對(duì)照溶液主斑點(diǎn)比較，不得更深。示例3-13鹽酸黃酮哌酯中有關(guān)物質(zhì)的檢查供試品溶液：20mg/ml對(duì)照溶液：0.10mg/ml對(duì)照品溶液：3-甲基黃酮-8-羧酸0.10mg/ml稀釋

（4）對(duì)照藥物法當(dāng)無合適的雜質(zhì)對(duì)照品，或者是供試品顯示的雜質(zhì)斑點(diǎn)顏色與主成分斑點(diǎn)顏色有差異，難以判斷限量時(shí)，可用與供試品相同的藥物作為對(duì)照品，此對(duì)照藥物中所含待檢雜質(zhì)需符合限量要求，且穩(wěn)定性好。

判斷結(jié)果：供試品溶液①主斑點(diǎn)的位置與顏色應(yīng)與對(duì)照品溶液的主斑點(diǎn)一致，如顯雜質(zhì)斑點(diǎn)，其顏色不得深于對(duì)照品溶液對(duì)應(yīng)的雜質(zhì)斑點(diǎn)，并不得有對(duì)照品溶液以外的雜質(zhì)斑點(diǎn)；供試品溶液②除主斑點(diǎn)外，不得顯任何雜質(zhì)斑點(diǎn)。示例3-14馬來酸麥角新堿中有關(guān)物質(zhì)的檢查供試品溶液①：5mg/ml供試品溶液②：0.2mg/ml對(duì)照品溶液：馬來酸麥角新堿對(duì)照品，5mg/ml

系統(tǒng)適用性試驗(yàn)TLC檢測(cè)靈敏度分離效能比移值（Rf）限量要求：規(guī)定雜質(zhì)斑點(diǎn)數(shù)和單一雜質(zhì)量、雜質(zhì)總量

2.HPLC法（1）外標(biāo)法測(cè)定供試品中某個(gè)雜質(zhì)的含量供試品溶液雜質(zhì)對(duì)照品溶液供試品溶液對(duì)照品溶液

進(jìn)樣AX和AR記錄色譜圖計(jì)算

示例3-15卡托普利及其片劑中卡托普利二硫化物的檢查

供試品溶液：0.5mg/ml對(duì)照品溶液：卡托普利二硫化物對(duì)照品，5μg/ml混合溶液：卡托普利和卡托普利二硫化物對(duì)照品0.1mg/ml和15μg/ml適用性試驗(yàn)：用混合溶液

R卡托普利和卡托普利二硫化物大于4.0

以峰面積計(jì)算其含量，原料藥中的二硫化物不得超過1.0%，片劑中的不得超過卡托普利標(biāo)示量的3.0%

（2）加校正因子的主成分自身對(duì)照法消除雜質(zhì)與主成分的響應(yīng)因子可能不同所引起的測(cè)定誤差適用于已知雜質(zhì)的控制。用雜質(zhì)對(duì)照品測(cè)定f雜質(zhì)，f雜質(zhì)和相對(duì)保留時(shí)間直接載入各品種質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中，在常規(guī)檢驗(yàn)時(shí)用相對(duì)保留時(shí)間定位，以f雜質(zhì)校正該雜質(zhì)的實(shí)測(cè)峰面積。藥物對(duì)照品的峰面積雜質(zhì)對(duì)照品的峰面積

方法調(diào)節(jié)檢測(cè)靈敏度：用對(duì)照溶液主成分色譜峰的峰高約為滿量程的10％~25％供試品溶液的制備對(duì)照溶液的制備進(jìn)樣：供試品溶液對(duì)照溶液分析時(shí)間：主成分色譜峰保留時(shí)間的2倍判斷：供試品溶液中各雜質(zhì)的峰面積分別乘以相應(yīng)的校正因子后，與對(duì)照溶液中主成分的峰面積比較。

示例3-16紅霉素A中紅霉素B、C組分及有關(guān)物質(zhì)的檢查供試品溶液：4mg/ml對(duì)照溶液：0.2mg/ml調(diào)節(jié)檢測(cè)靈敏度：用對(duì)照溶液主成分色譜峰的峰高約為滿量程的20％進(jìn)樣：供試品溶液對(duì)照溶液分析時(shí)間：供試品溶液主成分色譜峰保留時(shí)間的4倍稀釋

結(jié)果判斷：

A紅霉素B校正、A紅霉素C校正<A紅霉素A對(duì)照液A紅霉素烯醇醚校正≤3/5A紅霉素A對(duì)照液校正峰面積：紅霉素Af=1.0

紅霉素B0.7紅霉素C1.0

紅霉素烯醇醚0.09其他單個(gè)雜質(zhì)峰面積的和不得大于對(duì)照溶液主峰面積

（3）不加校正因子的主成分自身對(duì)照法適用于沒有雜質(zhì)對(duì)照品的情況對(duì)照溶液：供試品的稀釋液調(diào)節(jié)檢測(cè)靈敏度進(jìn)樣：供試品溶液對(duì)照溶液分析時(shí)間：供試品溶液主成分色譜峰保留時(shí)間的2倍供試品溶液中各雜質(zhì)的峰面積與對(duì)照溶液主成分的峰面積比較.

自身對(duì)照液供試品溶液A雜總=A1＋A2＋A3

供試品溶液：0.4mg/ml對(duì)照溶液：(0.4μg/ml)調(diào)靈敏度：對(duì)照溶液

使主成分色譜峰的峰高約為滿量程的25%進(jìn)樣：供試品溶液對(duì)照溶液分析時(shí)間：供試品溶液主成分色譜峰保留時(shí)間的2倍判斷：?jiǎn)蝹€(gè)雜質(zhì)的峰面積不得大于對(duì)照溶液主峰面積的0.25倍（0.25%），各雜質(zhì)峰面積的和不得大于對(duì)照溶液的主峰面積。

示例3-18利巴韋林中有關(guān)物質(zhì)的檢查稀釋

（4）面積歸一化法適用于粗略測(cè)量供試品中雜質(zhì)的含量。供試品溶液進(jìn)樣各組分峰面積記錄色譜圖計(jì)算計(jì)算各雜質(zhì)峰面積及其總和占總峰面積（含藥物的峰面積，而不含溶劑峰面積）的百分率。該法一般不宜用于微量雜質(zhì)的檢查。

雜1雜2主成分

3.GC法主要用于藥物中揮發(fā)性雜質(zhì)的檢查。方法：方法同HPLC標(biāo)準(zhǔn)溶液加入法標(biāo)準(zhǔn)溶液加入法雜質(zhì)對(duì)照液+供試液外標(biāo)法或內(nèi)標(biāo)法測(cè)定總量總量-加入的雜質(zhì)對(duì)照品的量=雜質(zhì)的量

采用下列公式計(jì)算：Cx供試品中組分X的濃度；Ax供試品中組分X的色譜峰面積；ΔCx加入的已知濃度的待測(cè)組分對(duì)照品的濃度；Ais

加入對(duì)照品后組分X的色譜峰面積L=Cx/C樣×100%

示例3-19樟腦中有關(guān)物質(zhì)的檢查供試品溶液：100mg/ml

對(duì)照溶液：1mg/ml

混合溶液：3,7-二甲基-1,6-辛二烯-3-醇與乙酸龍腦酯系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：混合溶液分離度應(yīng)大于2.0調(diào)節(jié)檢測(cè)靈敏度：對(duì)照溶液使主成分色譜峰的峰高約為滿量程的20％稀釋

進(jìn)樣：供試品溶液對(duì)照溶液分析時(shí)間：供試品溶液主成分色譜峰保留時(shí)間的2倍判斷：供試品溶液如有雜質(zhì)峰，單個(gè)雜質(zhì)的峰面積不得大于對(duì)照溶液主峰面積的2倍（2.0%），各雜質(zhì)峰面積的和不得大于對(duì)照溶液的主峰面積的4倍（4.0%）。

毛細(xì)管電泳法可以用于酶類藥物中酶類雜質(zhì)的檢查。檢查方法與高效液相色譜法相同。4．毛細(xì)管電泳法示例3-20抑肽酶中去丙氨酸-去甘氨酸-抑肽酶和去丙氨酸-抑肽酶的檢查電泳條件：熔融石英毛細(xì)管柱（75μm×60cm，有效長(zhǎng)度50cm），電極液為120mmol/L磷酸二氫鉀緩沖液（pH2.5），檢測(cè)波長(zhǎng)214nm，毛細(xì)管溫度為30℃，分離電壓12kv，1.5Pa壓力進(jìn)樣，進(jìn)樣時(shí)間3s。

系統(tǒng)適用性試驗(yàn)去丙氨酸-去甘氨酸-抑肽酶的相對(duì)保留時(shí)間為0.98去丙氨酸-抑肽酶的保留時(shí)間為0.99兩個(gè)雜質(zhì)之間的分離度應(yīng)大于0.5抑肽酶峰的拖尾因子不得大于3。以抑肽酶為參照供試品溶液：5U/ml對(duì)照品溶液：抑肽酶對(duì)照品，5U/ml

測(cè)定：供試品溶液、對(duì)照品溶液計(jì)算：ri：去丙氨酸-去甘氨酸-抑肽酶或去丙氨酸-抑肽酶的校正峰面積rs：去丙氨酸-去甘氨酸-抑肽酶、去丙氨酸-抑肽酶和抑肽酶的校正峰面積總和要求：去丙氨酸-去甘氨酸-抑肽酶的量不得大于8.0%，去丙氨酸-抑肽酶的量不得大于7.5%。

1．可見-紫外分光光度法在某一波長(zhǎng)處雜質(zhì)有最大吸收，藥物無吸收。二羥基蒽醌地蒽酚（三）光譜方法依據(jù)藥物和雜質(zhì)對(duì)光選擇吸收性質(zhì)差異進(jìn)行檢查。示例3-21地蒽酚中二羥基蒽醌的檢查均有紫外吸收

432nm

地蒽酚無吸收二羥基蒽醌有最大吸收規(guī)定0.01%地蒽酚氯仿溶液A432nm<0.12二羥基蒽醌地蒽酚

示例3-22兩性霉素B中兩性霉素A的檢查在305nm處兩性霉素A的吸收最強(qiáng)，而兩性霉素B的吸收很小，ChP通過測(cè)定兩性霉素B供試品溶液在305nm處的吸光度來控制兩性霉素A的限量。兩性霉素A兩性霉素B

檢查藥物中無效或低效晶型。例：甲苯咪唑中A晶型的檢查（C晶型有效晶型，A無效）樣品25mg對(duì)照品25mg：含10%A晶型同法制樣，記錄IR圖譜。2.紅外分光光度法

662cm-1640cm-1803cm-1620cm-1基線：消除背景吸收D1D2

對(duì)照品＋10％A晶型

662cm-1640cm-1D2D1供試品D2’D1’>結(jié)果判斷A晶型C晶型640cm-1有強(qiáng)吸收吸收很弱662cm-1吸收很弱有強(qiáng)吸收

3.原子吸收分光光度法通過測(cè)定藥物中所含待測(cè)元素原子蒸氣，吸收發(fā)自光源的該元素特定波長(zhǎng)的程度，以求出藥物中待測(cè)元素的含量。限量檢查對(duì)照品液：供試品＋對(duì)照品a供試品液bb<(a-b)符合規(guī)定b>(a-b)不合格吸光度

1.熱分析法(thermoanalysis)（1）熱重分析法(thermogravimetricanalysis,TGA)在程序升溫下，測(cè)量物質(zhì)的質(zhì)量與溫度的關(guān)系，研究物質(zhì)在加熱同時(shí)失重的情況下，所發(fā)生的質(zhì)的變化。應(yīng)用：藥物穩(wěn)定性的研究；貴重和易氧化藥物的干燥失重測(cè)定；藥物結(jié)晶水和吸附水的區(qū)別以及結(jié)晶水含量的測(cè)定。（四）其他方法

TABCTiTfW1W2W反應(yīng)區(qū)間=Tf–Ti減失重量=W1-W2方法：將樣品置熱天平中，按一定速度升溫，記錄樣品重量隨溫度的變化，即熱重曲線。物質(zhì)在相變（失去結(jié)晶水，熱分解等）時(shí)保持溫度不變，熱重曲線呈臺(tái)階狀吸附水失去為漸進(jìn)過程；結(jié)晶水失去在特定溫度發(fā)生突躍，可以區(qū)分。

40～80℃：CuSO4·5H2O→CuSO4·3H2O+2H2O80～120℃：CuSO4·3H2O→CuSO4·H2O+2H2O200～250℃：CuSO4·H2O→CuSO4+H2O40℃80℃120℃200℃250℃（失重14.4％）

（失重28.8％）

（失重36％）

2.差示熱分析（differentialthermalanalysis,DTA）是在程序升溫下，測(cè)量被測(cè)物質(zhì)和參比物之間的溫差與溫度關(guān)系的一種技術(shù)。參比物是一種惰性物質(zhì)，在加熱過程中不發(fā)生相變和化學(xué)變化。因此溫差(△T)只與被測(cè)物質(zhì)的質(zhì)量變化有關(guān)。△T=0被測(cè)物未發(fā)生吸熱或放熱反應(yīng)；△T=-為吸熱峰(負(fù)峰)

；△T=+

為放熱峰(正峰)。

T△T+－放熱峰吸熱峰峰寬峰高外推起始點(diǎn)（與熔點(diǎn)相當(dāng)）典型的差熱曲線

DTA在藥物分析中的應(yīng)用測(cè)定藥物的熔點(diǎn)藥物的定性分析尖峰為物理變化寬峰為化學(xué)變化估測(cè)藥物的純度

134~226℃CaC2O4·H2O→CaC2O4+H2O398~478℃CaC2O4→CaCO3+CO↑635~838℃CaCO3→CaO+CO2↑

3.差示掃描量熱法（differentialscanningcalorimetry,DSC）在程序升溫下，測(cè)量維持樣品和參比物的溫度相同，測(cè)量輸給待測(cè)物質(zhì)和參比物的能量差與溫度(或時(shí)間)關(guān)系。DSC與DTA的區(qū)別：記錄方式不同，DSC記錄系統(tǒng)供給的能量，吸熱供給能量；放熱減少供給的能量。DSC-TG常聯(lián)合用。

應(yīng)用熔點(diǎn)測(cè)定：用于鑒別藥物真?zhèn)卫鼶SC掃描阿司匹林和撲熱息痛

不同晶型的物質(zhì)，其熔點(diǎn)不同，熔化吸熱峰的位置也就不同。DSC也可用于藥物中無效或低效晶型的檢查。無味氯霉素的DSC曲線85℃是B型吸熱特征峰90℃是A型吸熱特征峰多晶型及其轉(zhuǎn)變的表征例無味氯霉素有A型和B型

純度檢查條件：①樣品純度在98.0%以上②雜質(zhì)不與主成分反應(yīng)③雜質(zhì)不與主成分形成共晶或固熔體④雜質(zhì)與熔融試樣有化學(xué)相似性⑤藥物在熔融過程中化學(xué)性穩(wěn)定⑥藥物如存在多晶現(xiàn)象則必須全部轉(zhuǎn)變成某一晶型。

酸堿滴定法pH法指示劑法酸堿性的差異2.酸堿度檢查法

（1）酸堿滴定法例：己酸羥孕酮中正己酐、對(duì)甲苯磺酸的檢查要求：V<0.50ml規(guī)定消耗滴定液的體積本品0.20g(NaOH0.02mol/L)顯微藍(lán)色中性乙醇溴麝香草酚藍(lán)Vml

（3）pH值測(cè)定法（2）指示劑法將一定量指示液的變色pH值范圍作為供試液中酸堿性雜質(zhì)的限度指標(biāo)。用電位法測(cè)定供試品溶液的pH值，衡量其酸堿性雜質(zhì)是否符合限量規(guī)定。例地蒽酚的酸度檢查取本品1.0g，加水25ml，搖勻，濾過；取續(xù)濾液10ml，加甲基紅指示劑2滴，不得顯紅色。

3．物理性狀檢查法根據(jù)藥物與雜質(zhì)在性狀上的不同，如臭味和揮發(fā)性的差異、顏色的差異、溶解行為的差異和旋光性等的差異進(jìn)行檢查。例乙醇中雜醇油的檢查取本品10ml，加水5ml與甘油1ml，搖勻后，分次滴加在無臭濾紙上，使乙醇自然揮散，始終不得發(fā)生異臭。

例樟腦（合成）中不揮發(fā)物的檢查在100℃，使樟腦完全揮發(fā)，殘?jiān)稍镏梁阒睾?，稱其重量來控制不揮發(fā)性雜質(zhì)。例鹽酸胺碘酮中游離碘的檢查取本品0.5g，加水10ml，振搖30秒，放置5分鐘，濾過，濾液加稀硫酸1ml與氯仿2ml，振搖，氯仿層不得顯色。

例高三尖杉酯堿溶液澄清度的檢查取本品10mg加0.1%酒石酸溶液10ml溶解后，溶液應(yīng)澄清。例比旋度差異化合物濃度(%)溫度(℃)[а]D黃體酮1～1.420～25+193°4°醋酸雙烯醇酮0.920-31°±2°醋酸妊娠烯醇酮～1常溫+20°±2°妊娠烯醇酮117～20+28°±2°黃體酮及其中間體的比旋度(溶劑：乙醇)

一、氯化物的檢查法1.原理比較濁度Cl-

＋Ag+AgCl（白色渾濁）稀硝酸第三節(jié)一般雜質(zhì)的檢查方法2.方法標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液：以50ml中含50~80μg的Cl為宜酸度以50ml供試溶液中含稀硝酸10ml為宜SRS：供試品溶液R：標(biāo)準(zhǔn)溶液

3.干擾的排除（1）供試品有色采用內(nèi)消色法，按ChP附錄規(guī)定的方法處理。供試品溶液供試品溶液AgNO3放置10min反復(fù)過濾澄清溶液AgNO3水標(biāo)準(zhǔn)NaCl溶液水對(duì)照溶液暗處放置5min后比濁

二、硫酸鹽檢查法SO42-

＋Ba2+BaSO4（白色渾濁）HCl1.原理比較濁度2.方法[SO42-]0.1mg~0.5mg/50ml,即相當(dāng)于標(biāo)準(zhǔn)硫酸鉀溶液1~5ml酸度稀鹽酸2ml/50ml3.干擾的排除有色供試品采用內(nèi)消色法排除干擾。SR

三、鐵鹽檢查法1.原理Fe3+＋6SCN-[Fe(SCN)6]3-(紅色)標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液:以硫酸鐵銨配制。加入硫酸，防止鉄鹽水解。50ml溶液中含F(xiàn)e3＋為5~90μg時(shí)，溶液的吸收度與濃度呈良好線性關(guān)系。

2.方法HCl鹽酸酸性:防止Fe3＋的水解

3.干擾的排除（1）當(dāng)有Fe2+存在時(shí)，加氧化劑過硫酸銨將Fe2＋

氧化成Fe3＋用硝酸氧化時(shí)，需加熱（紅色）（2）當(dāng)供試溶液管與標(biāo)準(zhǔn)溶液管色調(diào)不一致時(shí)，或所呈硫氰酸鐵顏色較淺不便比較時(shí),可分別移入分液漏斗，各加正丁醇或異戊醇提取，分別取提取液比色。

四、重金屬檢查法重金屬在規(guī)定實(shí)驗(yàn)條件下能與硫代乙酰胺或硫化鈉作用顯色的金屬雜質(zhì)，如銀、鉛、汞、銅、鎘、錫、銻、鉍等。在藥品生產(chǎn)過程中遇到鉛的機(jī)會(huì)較多，鉛在體內(nèi)又易積蓄中毒，故檢查時(shí)以鉛為代表。ChP2010收載三種檢查方法第一法硫代乙酰胺法第二法熾灼后的硫代乙酰胺法第三法硫化鈉法

1.原理CH3CSNH2+H2OCH3CONH2+H2SH2S+Pb2+pH3.5PbS+2H+適用于溶于水、稀酸和乙醇的藥物，是最常用的方法。第一法硫代乙酰胺法2.方法[Pb2＋]

10μg~20μg/25ml，相當(dāng)于標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液1~2ml。酸度pH3.0~3.5

SRS+R醋酸鹽緩沖液（1）供試品有色：可采用外消色法消除干擾。標(biāo)準(zhǔn)溶液稀焦糖溶液＋標(biāo)準(zhǔn)溶液調(diào)色后的樣品溶液檢查3.干擾的排除

（2）供試品中有微量Fe3+H2SFe3+弱酸性S混濁對(duì)比色有影響排除Fe3+Fe2+

Vc或鹽酸羥胺干擾

適用于含芳環(huán)、雜環(huán)以及難溶于水、稀酸及乙醇的有機(jī)藥物。第二法熾灼后的硫代乙酰胺法原理重金屬可能會(huì)與芳環(huán)、雜環(huán)形成較牢固的價(jià)鍵，需先將供試品熾灼（500~600℃

）破壞，殘?jiān)酉跛徇M(jìn)一步破壞，蒸干。加鹽酸轉(zhuǎn)化為易溶于水的氯化物，再按第一法進(jìn)行檢查。

熾灼溫度應(yīng)在500~600℃。溫度過高，重金屬損失。加硝酸加熱處理后，必須蒸干，除盡氧化氮，否則亞硝酸可氧化硫化氫析出硫，影響比色。消除鹽酸或其他試劑中可能夾雜重金屬的影響。對(duì)于含鈉鹽或氟的有機(jī)藥物，應(yīng)用鉑坩堝或硬質(zhì)玻璃蒸發(fā)皿。2.注意事項(xiàng)

原理在堿性條件下用硫化鈉作顯色劑。Pb2＋＋S2-

→PbS↓第三法硫化鈉法適用于溶于堿性水溶液而難溶于稀酸或在稀酸中即生成沉淀的藥物。硫化鈉試液應(yīng)臨用新制。

五、砷鹽檢查法砷鹽是劇毒物質(zhì)，多由藥物生產(chǎn)過程中所使用的無機(jī)溶劑引入。ChPJPUSPBP古蔡氏法

Ag-DDC法

次磷酸法

各國藥典砷鹽檢查法比較

1.原理As3+＋3Zn＋3H+3Zn2+＋AsH3AsO33-＋3Zn＋9H＋3Zn2+＋3H2O＋AsH3AsH3＋3HgBr23HBr＋As(HgBr)3(黃色)2As(HgBr)3＋AsH33AsH(HgBr)2(棕色)As(HgBr)3＋AsH33HBr＋As2Hg3(黑色)AsO43-＋4Zn＋11H+4Zn2+＋4H2O＋AsH3五、砷鹽檢查法（一）古蔡(Gutzeit)氏法

2.裝置與試劑作用（1）驗(yàn)砷儀樣品對(duì)照

①KI-SnCl2試液AsO43-＋2I-＋2H+AsO33-＋I(xiàn)2＋H2OAsO43-＋Sn2+＋2H+AsO33-＋Sn4+＋H2OI2＋Sn2+2I-＋Sn4+4I-＋Zn2+[ZnI4]2-有利于H3As的形成

Zn粒與氯化亞錫在鋅粒表面形成Zn-Sn齊，起去極化的作用，有利于H2均勻連續(xù)發(fā)生。

②Pb(Ac)2棉S2-+2H+H2SH2S+HgBr22HBr+HgSH2S+Pb(Ac)22HAc+PbS

除去硫化氫干擾3.干擾的排除(1)供試品為S2-、SO32-、S2O32-S2-、SO32-、S2O32-H2SSO42-H+HNO3干擾砷斑檢查解決辦法HgBr2試紙HgS,Hg（黑色斑點(diǎn)）氧化例:解毒藥硫代硫酸鈉中砷鹽的檢查

(2)供試品為鐵鹽（Fe3+）干擾原因：消耗KI、SnCl2，氧化AsH3解決辦法：可以先加足量的KI或先加入酸性氯化亞錫試液，將Fe3+還原為Fe2+。例：枸櫞酸鐵銨中砷鹽檢查

（3）含銻藥物例如：葡萄糖酸銻鈉SbH3+HgBr2SbH2(HgBr)+HBr（灰色的銻斑）改用白田道夫(Betterdorff)法。干擾原因：解決辦法:白田道夫法

2As＋+3SnCl2+6HCl→2As↓+3SnCl4+6H＋

(棕褐色的膠態(tài)砷)與一定量標(biāo)準(zhǔn)砷溶液用同法處理后的顏色比較干擾砷斑檢查

環(huán)狀藥物須進(jìn)行有機(jī)破壞，方法有：堿破壞法樣品加Ca(OH)2小火灼燒，再于500℃～600℃熾灼至完全灰化。例：酚磺酞、呋塞米檢查中砷鹽檢查

堿融破壞法適用于環(huán)狀結(jié)構(gòu)的有機(jī)酸堿金屬鹽用石灰法不能破壞完全的情況。以無水Na2CO3無水碳酸鈉進(jìn)行堿融破壞例：苯甲酸鈉中砷鹽檢查

環(huán)狀藥物

（二）二乙基二硫代氨基甲酸銀法（Ag-DDC法）1.原理利用砷化氫與Ag-DDC吡啶溶液作用，使Ag-DDC中的銀還原為紅色膠態(tài)銀，以Ag-DDC溶液為空白，于510nm的波長(zhǎng)處，測(cè)定吸收度，供試品溶液的吸收度不得大于標(biāo)準(zhǔn)砷溶液的吸收度。二乙基二硫代氨基甲酸銀結(jié)構(gòu)：（紅色）

試劑的作用：同古蔡法2.裝置與試劑作用有機(jī)堿：吡啶（USP法）三乙胺-氯仿溶液（ChP法）三乙醇胺、麻黃堿等本反應(yīng)可逆，加入有機(jī)堿使與HDDC結(jié)合，有利于反應(yīng)向右定量進(jìn)行完全。

古蔡法Hg(Br)2試紙Pb(Ac)2棉花反應(yīng)液（相同）Ag(DDC)Ag(DDC)法標(biāo)準(zhǔn)磨口錐形瓶導(dǎo)氣管古蔡氏法與Ag(DDC)法的比較

六、干燥失重檢查法主要檢查藥物中的水分和其它揮發(fā)性物質(zhì)。常用的方法常壓恒溫干燥法減壓干燥法與恒溫減壓干燥法干燥劑干燥法

（一）常壓恒溫干燥法適用于受熱較穩(wěn)定的藥物。1.方法將樣品置于相同條件下已干燥至恒重的扁形稱量瓶中，除另有規(guī)定外，在105℃干燥至恒重，按下式計(jì)算：干燥至恒重的第二次及以后各次稱重均應(yīng)在規(guī)定的條件下繼續(xù)干燥1h后進(jìn)行。

2.注意事項(xiàng)供試品應(yīng)平鋪于扁形稱量瓶中，其厚度不超5mm；如為疏松物質(zhì)，厚度不超過10mm。含有較多結(jié)晶水的藥物，在105℃不易除去結(jié)晶水，可提高干燥溫度。某些藥物中含有較大量的水分，熔點(diǎn)又較低，如直接在105℃干燥，供試品易融化，表面結(jié)成一層薄膜，使水分不易繼續(xù)揮發(fā)。先于40℃～50℃加熱，使結(jié)晶水緩緩釋去；然后逐漸升高溫度，在105℃干燥至恒重的方式。

適用于熔點(diǎn)低或受熱分解的供試品。設(shè)備：減壓干燥器或恒溫減壓干燥器條件：壓力應(yīng)在2.67kPa（20mmHg）以下，溫度為60℃。干燥劑：減壓干燥器中：無水氯化鈣、硅膠和五氧化二磷恒溫減壓干燥器中：五氧化二磷。（二）減壓干燥法與恒溫減壓干燥法

示例藥物熔點(diǎn)(℃)干燥劑減壓干燥時(shí)間（h)木糖醇91.0~94.5五氧化二磷24卡托普利104~110五氧化二磷至恒重奮乃靜94~100五氧化二磷至恒重泛昔洛韋101~10580℃至恒重

（三）干燥劑干燥法適用于受熱分解或易升華的供試品。常用的干燥劑：硅膠、硫酸、五氧化二磷等設(shè)備：干燥器硅膠的吸水力次于五氧化二磷例馬來酸麥角新堿干燥失重檢查將本品置于五氧化二磷燥器中至恒重，減失重量不得超過2.0%馬來酸麥角新堿分子中具有酰胺結(jié)構(gòu)，在較高的溫度下會(huì)水解，干燥失重檢查采用該法。

注意事項(xiàng)使用PO5時(shí)需將干燥劑鋪于培養(yǎng)皿中，置于干燥器內(nèi)。若發(fā)現(xiàn)干燥劑表層結(jié)塊、出現(xiàn)液滴，應(yīng)將表層刮去，另加新的PO5再使用；棄去的PO5不可倒入下水道，應(yīng)埋入土中。PO5不能反復(fù)使用。使用H2SO4時(shí)，應(yīng)將H2SO4盛于培養(yǎng)皿或燒杯中，不能直接傾入干燥器；搬動(dòng)干燥器時(shí)，應(yīng)注意勿使H2SO4

濺出；用過的H2SO4經(jīng)加熱除水后可再用。除水的方法是：將含水硫酸置燒杯中加熱至冒白煙、保持在110℃左右約30分鐘。

費(fèi)休氏法甲苯法LOGO結(jié)合水LOGO吸附水ChP、USP和BP收載的方法七、水分測(cè)定法

原理:碘氧化二氧化硫?yàn)槿趸驎r(shí)，需要定量的

水分參與反應(yīng)：

I2+SO2+H2O?2HI+SO2

無水吡啶：定量吸收反應(yīng)產(chǎn)物HI和SO2形成氫碘酸吡啶和硫酸酐吡啶。

費(fèi)休氏法A:供試品所消耗費(fèi)休氏試液的體積B：空白所消耗的費(fèi)休氏試液的體積F：每1ml費(fèi)休氏試液相當(dāng)于水的重量W：供試品的重量硫酸酐吡啶不穩(wěn)定，可于水發(fā)生副反應(yīng)，加入無水甲醇可形成穩(wěn)定的甲基硫酸氫吡啶：滴定的總反應(yīng)為：

稱取碘（置硫酸干燥器內(nèi)48h以上）110g，置干燥的具塞錐形瓶中，加無水吡啶160ml，注意冷卻，振搖至碘全部溶解，加無水甲醇300ml，稱定重量，將錐形瓶置冰浴中冷卻，在避免空氣中水分侵入的條件下，通入干燥的二氧化硫至重量增加72g，再加無水甲醇使成1000ml，密塞，搖勻，于暗處放置24h后進(jìn)行標(biāo)定。費(fèi)休氏試液的配制

測(cè)定方法終點(diǎn)指示自身指示永停法美羅培南氨芐西林鈉分子中具有β-內(nèi)酰胺和酰胺結(jié)構(gòu)，對(duì)水不穩(wěn)定鹽酸伐昔洛韋具有引濕性供試品空白

八、熾灼殘?jiān)鼨z查法BP稱為硫酸灰分控制有機(jī)藥物經(jīng)炭化或揮發(fā)性無機(jī)藥物中非揮發(fā)性無機(jī)雜質(zhì)。常采用重量方法進(jìn)行檢查。

注意

遺留的熾灼殘?jiān)枇糇髦亟饘贆z查時(shí)，熾灼溫度應(yīng)控制在500~600℃熾灼至恒重的第二次稱重應(yīng)在規(guī)定溫度繼續(xù)熾灼30分鐘后進(jìn)行。含氟藥物對(duì)磁坩堝有腐蝕，應(yīng)采用鉑坩堝。恒重：系指供試品連續(xù)兩次干燥或熾灼后稱重的差異在0.3mg以下的重量。

九、易炭化物檢查法本法是檢查藥物中遇硫酸易炭化或易氧化而呈色的微量有機(jī)雜質(zhì)。這類雜質(zhì)多數(shù)結(jié)構(gòu)未知，常采用目視比色法。對(duì)照液：①“溶液顏色檢查”項(xiàng)下的不同色調(diào)色號(hào)的標(biāo)準(zhǔn)比色液；②由比色用氯化鈷液、比色用重鉻酸鉀液和比色用硫酸銅液按規(guī)定方法配制成的對(duì)照液；③高錳酸鉀液。

十、殘留溶劑測(cè)定法主要檢查在合成原料藥，輔料或制劑生產(chǎn)的過程中使用的，但在工藝中未能完全除去有機(jī)溶劑。第一類：應(yīng)該避免使用第二類：應(yīng)該限制使用第三類：GMP或其他質(zhì)控要求限制使用第四類：尚無足夠毒理學(xué)資料

ChP規(guī)定采用GC法第一法：毛細(xì)管柱頂空進(jìn)樣等溫法適用于所需要檢查的有機(jī)溶劑數(shù)量不多，并且極性差異較小的情況。第二法：毛細(xì)管柱頂空進(jìn)樣程序升溫法適用于所需要檢查的有機(jī)溶劑數(shù)量較多并且極性差異較大時(shí)的情況。第三法：溶液直接進(jìn)樣法采用填充柱，亦可采用適宜極性的毛細(xì)管柱。（一）測(cè)定方法

色譜柱類型固定液/固定相毛細(xì)管柱非極性100％的二甲基聚硅氧烷極性聚乙二醇（PEG-20M）中極性(35%）二苯基-（65%）甲基聚氧硅烷，（50%）二苯基-（50%）二甲基聚氧硅烷，（35%）二苯基-（65%）二甲基亞芳基聚氧硅烷，（14%）氰丙基苯基-（86%）二甲基聚氧硅烷（6%）氰丙基苯基-（94%）二甲基聚氧硅烷弱極性（5%）苯基-（95%）甲基聚氧硅烷，（5%）二苯基-（95%）二甲基亞芳基硅氧烷共聚物填充柱乙二烯苯-乙基乙烯苯型高分子多孔小球或其他適宜的填料

（1）用待測(cè)物的色譜峰計(jì)算，毛細(xì)管色譜柱的N>5000，填充柱的N>1000。（2）色譜圖中，待測(cè)物色譜峰與其相鄰色譜峰的分離度(R)應(yīng)大于1.5。（3）以內(nèi)標(biāo)法測(cè)定時(shí)，對(duì)照品溶液連續(xù)進(jìn)樣5次，所得待測(cè)物與內(nèi)標(biāo)物峰面積之比的RSD<5%；以外標(biāo)法測(cè)定，所得待測(cè)物峰面積的RSD<10%。（二）系統(tǒng)適用性試驗(yàn)

頂空條件的選擇時(shí)間：一般平衡30min~45min溫度：對(duì)沸點(diǎn)較高的殘留溶劑，通常選擇較高的頂空平衡溫度；但應(yīng)兼顧試品的熱分解特性。

內(nèi)標(biāo)法外標(biāo)法

限度檢查被測(cè)溶劑峰面積與內(nèi)標(biāo)峰面積之比不得大于對(duì)照品溶液的相應(yīng)比值被測(cè)溶劑峰面積不得大于對(duì)照品溶液的相應(yīng)峰面積（三）計(jì)算法內(nèi)標(biāo)法外標(biāo)法

定量測(cè)定

十一、溶液顏色檢查法藥物溶液的顏色及其與規(guī)定顏色的差異能在一定程度上反映藥物的純度。對(duì)溶液顏色進(jìn)行檢查，可以控制藥物中有色雜質(zhì)的含量。本法系將藥物溶液的顏色與規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)比色液相比較，或在規(guī)定的波長(zhǎng)處測(cè)定其吸收度，以檢查其顏色。

1.目視比色法：標(biāo)準(zhǔn)比色液進(jìn)行比較的方法比色用K2Cr2O7液比色用CoCl2液比色用CuSO4液標(biāo)準(zhǔn)比色液貯備液（黃綠、黃、橙黃、橙紅、棕紅）加水10個(gè)色號(hào)

2.分光光度法于規(guī)定波長(zhǎng)處：A測(cè)得﹤A規(guī)定3.色差計(jì)法通過測(cè)定供試品與標(biāo)準(zhǔn)比色液或水之間的色差值來比較供試品與標(biāo)準(zhǔn)比色液之間的顏色差異。

十二、溶液澄清度檢查法

檢查藥物中微量的不溶性雜質(zhì)。原理：藥物溶液中存在分散的細(xì)微顆粒，當(dāng)直線光通過溶液時(shí)，細(xì)微顆?？梢鸸獾纳⑸?，測(cè)量光的散射就可以測(cè)量溶液的濁度。比較供試品溶液和濁度標(biāo)準(zhǔn)液的濁度，來判斷供試品溶液的澄清度是否符合規(guī)定。

濁度標(biāo)準(zhǔn)原液（ml）2.55.010.030.050.0水（ml）97.595.090.070.050.0

級(jí)號(hào)0.51234不同級(jí)號(hào)濁度標(biāo)準(zhǔn)液濁度標(biāo)準(zhǔn)液的制備甲醛腙：白色

第四節(jié)特殊雜質(zhì)的檢查與鑒定一、特殊雜質(zhì)的研究規(guī)范定性研究的意義：獲得有關(guān)物質(zhì)的結(jié)構(gòu)信息，分析其形成過程，合成時(shí)可設(shè)法避免該雜質(zhì)的形成，或經(jīng)純化使之降至可接受的水平，貯藏過程中控制好條件。

定性或確證結(jié)構(gòu)的雜質(zhì)表觀含量在0.1%及其以上（或者等于或高于鑒定限度）的雜質(zhì)表觀含量在0.1%以下的具強(qiáng)烈生物作用的雜質(zhì)或毒性雜質(zhì)光學(xué)異構(gòu)體檢查在原料藥制備工藝研究時(shí)，應(yīng)嚴(yán)格控制手性原料與每步反應(yīng)產(chǎn)物的光學(xué)純度在質(zhì)量研究中，應(yīng)結(jié)合工