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文檔簡介
河南省新鄉(xiāng)一中等四校2025屆高考考前提分生物仿真卷注意事項1.考生要認真填寫考場號和座位序號。2.試題所有答案必須填涂或書寫在答題卡上,在試卷上作答無效。第一部分必須用2B鉛筆作答;第二部分必須用黑色字跡的簽字筆作答。3.考試結(jié)束后,考生須將試卷和答題卡放在桌面上,待監(jiān)考員收回。一、選擇題:(共6小題,每小題6分,共36分。每小題只有一個選項符合題目要求)1.下列有關(guān)生物進化的敘述,錯誤的是()A.長期的地理隔離可能產(chǎn)生生殖隔離,從而形成新物種B.細菌在接觸青霉素后才產(chǎn)生抗藥性突變個體C.狼和兔子通過相互選擇,達到共同進化D.外來物種入侵可改變生物進化的速度和方向2.下列有關(guān)動物種群特征的敘述,正確的是A.性比率通過影響出生率間接地影響種群密度B.保持替補出生率的人類種群的年齡結(jié)構(gòu)為穩(wěn)定型C.自然增長率主要由性成熟的早晚、每次產(chǎn)仔數(shù)和每年生殖次數(shù)決定D.各種種群的年齡金字塔都有生殖前期、生殖期和生殖后期三個年齡組3.當(dāng)人感到極度危險時,不會發(fā)生的是()A.胰島素分泌增加,血糖利用減慢B.呼吸中樞活動加強,呼吸急促C.腎上腺素分泌增加,心跳加快D.甲狀腺激素分泌增多,神經(jīng)系統(tǒng)興奮性增強4.細胞自噬就是細胞組成成分降解與再利用的基本過程。下列有關(guān)細胞自噬的敘述,錯誤的是()A.細胞自噬過程能為細胞提供自我更新所需的材料B.受基因控制的細胞自噬過程有利于胚胎發(fā)育C.衰老的線粒體被溶酶體分解清除不屬于細胞自噬D.細胞自噬有利于消滅侵入細胞內(nèi)的活菌和病毒5.新型冠狀病毒引起的肺炎疫情引起了世界的關(guān)注,國際病毒分類委員會將這種病毒正式命名為“SARS-CoV-2”,并認定這種病毒是SARS冠狀病毒的姊妹病毒。下列對該病毒的描述中,不正確的是()A.該病毒只含有一種核酸B.該病毒只有核糖體一種細胞器C.該病毒作為抗原能引起特異性免疫反應(yīng)D.切斷傳播途徑可以有效防止疫情的擴散6.下列關(guān)于細胞分化、衰老、凋亡和癌變的相關(guān)敘述中正確的是()A.細胞分化使細胞趨于專門化,從而提高各種細胞生理功能的效率B.細胞凋亡與細胞壞死都是細胞的編程性死亡C.輻射以及有害物質(zhì)入侵會刺激細胞端粒DNA序列縮短一截,引起細胞衰老D.癌細胞的特征之一是細胞膜表面的各種蛋白質(zhì)減少,導(dǎo)致細胞黏著性降低,易擴散和轉(zhuǎn)移二、綜合題:本大題共4小題7.(9分)菌根是真菌與植物根系的聯(lián)合體。真菌從土壤中吸取養(yǎng)分和水分供給植物,植物為真菌提供糖類等有機物。下表為不同溫度下菌根對玉米幼苗光合特性影響的實驗結(jié)果。組別光合作用速率(μmolCO2·m22·s-1)氣孔導(dǎo)度·(mmol·m-2·s-1)葉綠素相對含量25℃有菌根8.86239無菌根6.5623315℃有菌根6.45831無菌根3.842285℃有菌根4.04426無菌根1.41723氣孔導(dǎo)度是描述氣孔開放程度的量請回答下列問題:(1)本實驗的自變量是_______________________________。(2)在光合作用中,CO2還原為糖的一系列反應(yīng)稱為__________循環(huán),CO2進入該循環(huán)時首先與____________(寫中文名稱)結(jié)合,CO2進入該循環(huán)后形成的第一個糖是____________。(3)15℃條件下,與無菌根玉米相比,有菌根玉米光合作用速率高,據(jù)表分析,其原因有①__________________________,促進了光反應(yīng);②_________________________,促進了碳反應(yīng)。(4)實驗結(jié)果表明:菌根能提高玉米的光合作用速率,在_______________條件下提高比例最大。8.(10分)流感病毒可引起人、禽、豬、蝙蝠等多種動物感染和發(fā)病,其遺傳物質(zhì)是單股負鏈RNA。請回答下列相關(guān)問題:(1)流感病毒具有包膜,包膜是病毒從宿主細胞的細胞膜中獲得的,其基本骨架是____。(2)心血管疾病患者感染流感病毒后容易引發(fā)嚴重后果,因此醫(yī)生建議他們注射疫苗,這屬于____(填“免疫治療”或“免疫預(yù)防”)。在流行季節(jié)前接種一次,免疫力可持續(xù)一年,這是由于接種后機體產(chǎn)生了____。(3)接種流感疫苗的人,仍會患普通感冒,這是由于疫苗的作用具有____性。即使曾經(jīng)得過流感并痊愈的人,也較容易再次患病,從流感病毒的結(jié)構(gòu)分析,原因是____。(4)全病毒滅活疫苗是指將病毒培養(yǎng)在雞胚中然后進行滅活處理得到的病原體,屬于傳統(tǒng)疫苗,使用中偶見局部疼痛、紅腫等副作用。倫敦國王學(xué)院的免疫學(xué)家發(fā)現(xiàn)副作用易發(fā)人群體內(nèi)的抗體較易攻擊自身正常組織細胞,因而有更多可能罹患____病。9.(10分)新型冠狀病毒是一種RNA病毒,會導(dǎo)致人患嚴重的肺炎。2019年末新型冠狀病毒肆虐,全國上下齊心協(xié)力一致抗疫。2020年2月15日,官方宣布新型冠狀病毒疫苗的研發(fā)取得了新進展,已完成了基因序列合成,正在進行重組質(zhì)粒構(gòu)建和工程菌篩選工作。請聯(lián)系基因工程的相關(guān)知識,回答下列問題:(1)基因工程的四個基本操作步驟是獲取目的基因、基因表達載體的構(gòu)建、將目的基因?qū)胧荏w細胞和______________________。(2)新型冠狀病毒通過其表面的S一蛋白與宿主表面ACE2蛋白結(jié)合完成感染,在研制疫苗時需要獲取病毒的目的基因是______________________,方法是____________________,然后利用___________技術(shù)擴增。(3)腺病毒是一種DNA病毒,編碼數(shù)十個腺病毒的結(jié)構(gòu)和功能蛋白,其中E1區(qū)蛋白與腺病毒的復(fù)制有關(guān)而且對宿主細胞的毒性很強。研究中將E1基因缺失的腺病毒作為運載目的基因的載體,改造后的腺病毒應(yīng)該具備的特點有:______________________(至少答出兩點)。目的基因與腺病毒構(gòu)建重組腺病毒載體必須包括:新型冠狀病毒基因、______________________(至少答出兩點)等。(4)重組腺病毒載體侵染宿主細胞后,利用宿主細胞翻譯出____________________,引發(fā)機體免疫反應(yīng),產(chǎn)生可用于治療的抗體。在轉(zhuǎn)錄過程中,識別其啟動子的酶是___________。A.病毒的DNA聚合酶B.宿主的DNA聚合酶C.病毒的RNA聚合酶D.宿主的RNA聚合酶10.(10分)甲醇酵母菌是基因工程中常用的受體菌,研究人員將人的膠原蛋白基因?qū)爰状冀湍妇胁⒊晒Ρ磉_?;卮鹣铝袉栴}。(1)獲取目的基因是實施基因工程的第一步,獲取目的基因的方法有_____、__________(答出兩種)。(2)要使膠原蛋白基因在甲醇酵母菌中表達,需要先構(gòu)建基因表達載體而不是直接將基因?qū)胧荏w細胞,原因是_________________和_________________。(3)甲醇酵母菌可高效表達外源蛋白質(zhì)并分泌到細胞外,但自身蛋白質(zhì)分泌到培養(yǎng)基中的很少,這一特點的優(yōu)點在于_____________,甲醇酵母菌分泌的膠原蛋白的結(jié)構(gòu)與人的幾乎完全相同,從細胞結(jié)構(gòu)的角度分析,其原因可能是_______。(4)在構(gòu)建基因表達載體時,用兩種不同的限制酶分別切割目的基因的兩端和質(zhì)粒,使目的基因和質(zhì)粒獲得不同的黏性末端,其目的是______________。11.(15分)某種自花傳粉植物的紅花對白花為顯性,該相對性狀受兩對等位基因(Y、y和R、r)控制?,F(xiàn)讓純合紅花和純合白花植株作親本進行雜交,所得F1全為紅花植株,F(xiàn)1自交得F2,F(xiàn)2中紅花:白花=9:1.請回答下列問題:(1)該植物花色性狀的遺傳遵循__________定律。親本的基因型為__________。(2)理論上,在F2白花植株中,純合子占__________。假若親本白花植株與F1雜交理論上,子代花色的表現(xiàn)型及比例是__________。(3)現(xiàn)讓F2中紅花植株與隱性純合白花植株雜交,__________(填“能”或“不能”)通過次雜交實驗將F2中紅花植株的基因型全部區(qū)分開來,判斷的依據(jù)是__________。(4)若另選兩種基因型的植株作親本雜交,F(xiàn)1和F2的表現(xiàn)型及比例與題干結(jié)果完全相同,可推斷這兩株親本植株的基因型為____________________。
參考答案一、選擇題:(共6小題,每小題6分,共36分。每小題只有一個選項符合題目要求)1、B【解析】
本題考查現(xiàn)代生物進化理論,考查對現(xiàn)代生物進化理論的理解。明確生物變異方向和進化方向的關(guān)系是解答本題的關(guān)鍵。【詳解】長期的地理隔離可能使不同種群向不同方向進化,產(chǎn)生生殖隔離,從而形成新物種,A項正確;細菌在接觸青霉素之前個體之間就存在抗藥性的差異,青霉素的作用只是消滅不抗藥的個體,使抗藥的個體保留下來,B項錯誤;狼和兔子通過相互選擇,共同進化,各自發(fā)展自己的特征,C項正確;外來物種入侵會擠壓本地物種的生存空間,使本地生物多樣性減低,改變生物進化的速度和方向,D項正確。2、A【解析】性比率通過影響出生率間接地影響種群密度,A正確;教材中指出“穩(wěn)定型預(yù)示著只要保持替補出生率(一個家庭生兩個孩子)人口就會保持零增長”,但保持替補出生率的種群不一定是穩(wěn)定型,如需考慮到一代人所生孩子成長為做父母之前將有部分死亡的可能,而這種可能又隨著社會經(jīng)濟條件的變化而變化,B錯誤;種群的自然增長率等于出生率減去死亡率,故自然增長率主要由出生率和死亡率決定,而不同動物的出生率主要受到性成熟的早晚、每次產(chǎn)仔數(shù)和每年生殖次數(shù)決定,C錯誤;種群常分為三個年齡組,即生殖前期、生殖期和生殖后期,有些昆蟲,生殖前期特別長,生殖期特別短,生殖后期為零,D錯誤?!军c睛】本題考查有關(guān)動物種群的基本特征,意在考察考生能運用所學(xué)知識與觀點,通過比較、分析和綜合等方法,對某些生物學(xué)問題進行解釋、推理,做出合理判斷的能力。3、A【解析】
甲狀腺激素的分級調(diào)節(jié)過程:下丘腦分泌促甲狀腺激素釋放激素促進垂體分泌促甲狀腺激素,促進甲狀腺分泌甲狀腺激素,甲狀腺激素促進代謝增加產(chǎn)熱。當(dāng)甲狀腺激素含量過多時,會反過來抑制下丘腦和垂體的分泌活動,這叫做負反饋調(diào)節(jié)?!驹斀狻慨?dāng)人感到極度危險時,胰島素分泌增加,血糖利用加快,A符合題意;當(dāng)人感到極度危險時,人在面臨緊急情況時,通過神經(jīng)-體液調(diào)節(jié),促使腎上腺素的分泌量急劇增加,B不符合題意;當(dāng)人感到極度危險時,腎上腺素增加后會刺激人的交感神經(jīng)異常興奮,心跳與呼吸頻率加快,C不符合題意;當(dāng)人感到極度危險時,甲狀腺激素可以促進新陳代謝和生長發(fā)育,提高神經(jīng)系統(tǒng)的興奮性,D不符合題意。故選A。4、C【解析】
自噬是細胞中高度保守的物質(zhì)降解過程,細胞內(nèi)大分子物質(zhì)和細胞器等經(jīng)雙層膜包裹運送至溶酶體,被溶酶體酶降解產(chǎn)生小分子物質(zhì),實現(xiàn)細胞內(nèi)物質(zhì)再循環(huán)的過程,是由自噬基因控制的。在動物、真菌和某些植物的細胞中,含有一些由單位膜包裹的小泡稱為溶酶體,是高爾基體斷裂后形成的,溶酶體的功能是消化細胞從外界吞入的顆粒和細胞自身產(chǎn)生的碎渣,細胞從外界吞入物質(zhì)后,形成吞噬泡,吞噬泡與溶酶體融合,于是溶酶體中的水解酶便將吞噬泡中的物質(zhì)降解?!驹斀狻緼、細胞自噬的產(chǎn)物有些可以被細胞重新利用,為細胞提供自我更新所需的材料,A正確;B、受基因控制的細胞自噬過程有利于胚胎發(fā)育,如有利于早期胚胎發(fā)育過程中早期心管的形成,參與調(diào)節(jié)胚胎干細胞的分化等,B正確;C、衰老的線粒體被溶酶體分解清除屬于細胞自噬,C錯誤;D、細胞自噬有利于消滅侵入細胞內(nèi)的活菌和病毒,D正確。故選C。5、B【解析】
病毒沒有細胞結(jié)構(gòu),主要由蛋白質(zhì)外殼和內(nèi)部的遺傳物質(zhì)組成。病毒是寄生在其它生物體的活細胞內(nèi),依靠吸取活細胞內(nèi)的營養(yǎng)物質(zhì)而生活的。一旦離開了這種活細胞,病毒就無法生存。傳染病是指由病原體引起的,能夠在人與人之間、人與動物之間傳播的疾病,具有傳染性和流行性的特點?!驹斀狻緼C、該病毒由蛋白質(zhì)和RNA構(gòu)成,只含有RNA一種核酸,其中某些蛋白質(zhì)可作為抗原能引起特異性免疫反應(yīng),AC正確;B、該病毒無細胞結(jié)構(gòu),也不含核糖體這種細胞器,B錯誤;D、預(yù)防傳染病的一般措施有控制傳染源、切斷傳播途徑、保護易感人群,切斷傳播途徑可以有效防止疫情的擴散,D正確。故選B。6、A【解析】
1、衰老細胞的特征:(1)細胞內(nèi)水分減少,細胞萎縮,體積變小,但細胞核體積增大,染色質(zhì)固縮,染色加深;(2)細胞膜通透性功能改變,物質(zhì)運輸功能降低;(3)細胞色素隨著細胞衰老逐漸累積;(4)有些酶的活性降低;(5)呼吸速度減慢,新陳代謝減慢。2、細胞凋亡是由基因決定的細胞自動結(jié)束生命的過程.在成熟的生物體內(nèi),細胞的自然更新、被病原體感染的細胞的清除,是通過細胞凋亡完成的。3、細胞癌變的根本原因是原癌基因和抑癌基因發(fā)生基因突變,其中原癌基因負責(zé)調(diào)節(jié)細胞周期,控制細胞生長和分裂的過程,抑癌基因主要是阻止細胞不正常的增殖?!驹斀狻緼、細胞分化的實質(zhì)是基因選擇性表達,從而使生物體中細胞趨向?qū)iT化,A正確;B、細胞凋亡是細胞的編程性死亡,細胞壞死不是,B錯誤;C、輻射以及有害物質(zhì)入侵會引起細胞壞死,C錯誤;D、癌細胞膜上糖蛋白減少導(dǎo)致細胞黏著性降低,易擴散和轉(zhuǎn)移,D錯誤。故選A。二、綜合題:本大題共4小題7、有無菌根和溫度卡爾文核酮糖二磷酸三碳糖葉綠素相對含量高氣孔導(dǎo)度大,有利于CO2的吸收5℃(或低溫)【解析】
1.影響光合作用的環(huán)境因素有:光照強度、溫度、二氧化碳濃度等,其中光照強度主要影響光反應(yīng),二氧化碳濃度主要影響暗反應(yīng);影響光合作用的內(nèi)在因素有:色素的含量、酶的數(shù)量、五碳化合物的含量等。2.分析表格可知,在不同溫度條件下,有菌根玉米的光合速率均高于無菌根玉米,并且溫度越低,提高比例越大;在相同溫度條件下,有菌根玉米的氣孔導(dǎo)度、葉綠素含量均高于無菌根玉米,而細胞間CO2濃度低。【詳解】(1)根據(jù)題意和分析表格可知,該實驗探究了不同溫度下菌根對玉米幼苗光合特性的影響,因此實驗的自變量為溫度的不同和有無菌根處理。(2)CO2還原為糖的一系列反應(yīng)稱為卡爾文循環(huán)。CO2進入該循環(huán)首先與RuBP(核酮糖二磷酸)形成三碳糖,故CO2進入該循環(huán)時首先形成的糖是三碳糖。(3)表格中看出,15℃條件下,與無菌根玉米相比,有菌根玉米的氣孔導(dǎo)度和葉綠素含量均高;葉綠素有利于光反應(yīng)中吸收光能;氣孔導(dǎo)度大,二氧化碳供給充分,暗反應(yīng)充分,因此有菌根玉米的光合作用速率高。(4)表格中看出,菌根能提高玉米的光合作用速率,在5℃(或低溫)條件下提高比例最大?!军c睛】本題考查光合作用的過程和影響因素的知識點,要求學(xué)生掌握光合作用的過程,特別是掌握暗反應(yīng)的過程及其物質(zhì)變化,理解影響光合作用的因素。能夠正確分析表格中的數(shù)據(jù),通過實驗結(jié)果判斷溫度和菌根對植物光合速率的影響情況,這是突破該題的關(guān)鍵。8、磷脂雙分子層免疫預(yù)防記憶細胞特異遺傳物質(zhì)是單鏈RNA,結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定,容易發(fā)生變異自身免疫【解析】
1.流感病毒在脫離宿主細胞時將部分細胞膜包裹于自身形成包膜,包膜含有蛋白質(zhì)和磷脂,排列方式雙層。2.記憶細胞具有很長時間記憶該抗原特點的功能,當(dāng)抗原再次侵入機體后,會刺激記憶細胞增殖分化成漿細胞,產(chǎn)生大量抗體消滅抗原。【詳解】(1)包膜是病毒從宿主細胞的細胞膜中獲得的,則包膜的基本骨架是磷脂雙分子層。(2)注射疫苗屬于免疫預(yù)防,在流行季節(jié)前接種一次,免疫力可持續(xù)一年,這是由于接種后機體產(chǎn)生了記憶細胞,當(dāng)流感病毒在接種成功后再入侵,機體更快產(chǎn)生大量抗體、效應(yīng)T細胞(和記憶細胞),因而可以有效清除病毒。(3)接種流感疫苗的人,仍然有可能得普通感冒,這是由于疫苗的作用具有特異性,只能針對流感病毒起作用。由于流感病毒的遺傳物質(zhì)是單股負鏈RNA,結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定,容易發(fā)生基因變異,則即使曾經(jīng)得過流感并痊愈的人,也較容易再次感染。(4)使用傳統(tǒng)疫苗后偶見局部疼痛、紅腫等副作用,研究發(fā)現(xiàn)副作用易發(fā)人群體內(nèi)的抗體較易攻擊自身正常組織細胞,這屬于自身免疫病?!军c睛】本題以病毒為背景考查病毒的結(jié)構(gòu)和免疫的知識點,要求學(xué)生掌握病毒的一般結(jié)構(gòu)組成,能夠根據(jù)題意推導(dǎo)包膜的基本骨架,把握免疫學(xué)的應(yīng)用,特別是免疫預(yù)防的應(yīng)用,理解注射疫苗的作用,能夠根據(jù)RNA病毒的特點分析注射疫苗或者患病痊愈的人仍然再次患病的原因,識記免疫失調(diào)的種類和實例。9、目的基因的檢測與鑒定指導(dǎo)S—蛋白合成的基因以病毒的RNA為模板,通過逆轉(zhuǎn)錄合成相應(yīng)的基因(或化學(xué)合成法)PCR能夠侵染宿主細胞,具有多個限制酶切位點,不能復(fù)制,不易引起機體的免疫反應(yīng)啟動子、終止子、標(biāo)記基因病毒的蛋白(或“S一蛋白”或“病毒的S—蛋白”)D【解析】
基因工程技術(shù)的基本步驟:(1)目的基因的獲取:方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成.(2)基因表達載體的構(gòu)建:是基因工程的核心步驟,基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等.(3)將目的基因?qū)胧荏w細胞:根據(jù)受體細胞不同,導(dǎo)入的方法也不一樣.將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法;將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法;將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法.(4)目的基因的檢測與鑒定:分子水平上的檢測:①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù);②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù);③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個體水平上的鑒定:抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?!驹斀狻浚?)基因工程的四個基本操作步驟是獲取目的基因、基因表達載體的構(gòu)建、將目的基因?qū)胧荏w細胞和目的基因的檢測和鑒定。(2)疫苗是通過主動免疫的方式刺激機體產(chǎn)生抗體,因為新型冠狀病毒是通過其表面的S一蛋白與宿主表面ACE2蛋白結(jié)合完成感染,因此S一蛋白是病毒的特異性結(jié)構(gòu),在研制基因工程疫苗時應(yīng)該要獲取的目的基因是指導(dǎo)S一蛋白合成的基因。由于新型冠狀病毒是RNA病毒,RNA結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定,需要合成DNA,因此可以采用的方法是以病毒的RNA為模板逆轉(zhuǎn)錄合成相應(yīng)的基因,或者根據(jù)病毒的基因測序化學(xué)合成相應(yīng)的DNA。體外擴增DNA的技術(shù)是PCR技術(shù)。(3)根據(jù)題干信息中對于腺病毒的分析,E1基因缺失的腺病毒是不能復(fù)制的,同時對宿主細胞的毒性較弱,不易引起機體的免疫反應(yīng),同時又要具備運載體的特點,所以需要有能夠插入目的基因的限制性酶切位點,以及侵染宿主細胞的特性。重組腺病毒載體應(yīng)該要滿足的特點是要保證目的基因要能夠表達,因此至少受包括新型冠狀病毒目的基因、啟動子、終止子、標(biāo)記基因等。(4)重組腺病毒載體侵染宿主細胞后,利用宿主細胞翻譯出病毒的S-蛋白,引發(fā)機體免疫反應(yīng),產(chǎn)生可用于治療的抗體。在轉(zhuǎn)錄過程中,識別其啟動子的酶是用于轉(zhuǎn)錄的酶,所以是RNA聚合酶,這個酶是由宿主細胞提供的?!军c睛】本題考查基因工程的相關(guān)知識,要求考生識記基因工程的操作步驟及各操作步驟中的相關(guān)細節(jié),能結(jié)合所學(xué)的知識準確答題。10、從基因文庫中獲取人工合成目的基因無表達所需的啟動子目的基因無復(fù)制原點(目的基因不能在受體細胞中穩(wěn)定存在)便于目的蛋白的分離和純化甲醇酵母菌有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體防止目的基因和質(zhì)粒的自身環(huán)化、防止目的基因與質(zhì)粒反向連接【解析】
基因工程是狹義的遺傳工程,基因工程的基本原理是讓人們感興趣的基因(即目的基因)在宿主細胞中穩(wěn)定高效地表達。為了實現(xiàn)基因工程的目標(biāo),通常要有多種工具酶、目的基因、載體和宿主細胞等基本要素,并按照一定的程序進行操作,它包括目的基因的獲得、重組DNA的形成,重組DNA導(dǎo)入受體細胞也稱(宿主)細胞、篩選含有目的基因的受體細胞和目的基因的表達等幾個方面。基因表達載體的構(gòu)建(即目的基因與運載體結(jié)合)是實施基因工程的第二步,也是基因工程的核心。其構(gòu)建目的是使目的基因能在受體細胞中穩(wěn)定存在,并且可以遺傳給下一代,同時,使目的基因能夠表達和發(fā)揮作用?!驹斀狻浚?)獲取目的基因是實施基因工程的第一步,獲取目的基因的方法有從基因文庫中獲?。康幕蛐蛄形粗?、人工合成(目的基因序列已知)。(2)單獨的目的基因容易丟失,且目的基因的表達需要啟動子和終止子,目的基因的復(fù)制需要復(fù)制原點,因此要使膠原蛋白基因在甲醇薛母菌中表達,需要先構(gòu)建基因表達載體而不是直接將基因?qū)胧荏w細胞。(3)甲醇酵母菌可高效表達外源蛋白質(zhì)并分泌到細胞外,但自身蛋白質(zhì)分泌到培養(yǎng)基中的很少,這樣分泌到細胞外的蛋白主要是我們需要的目的蛋白,這一特點的優(yōu)點在于便于目的蛋白的分離和純化。甲醇酵母菌分泌的膠原蛋白的結(jié)構(gòu)與人的幾乎完全相同,從細胞結(jié)構(gòu)的角度分析,其原因可能是甲醇酵母菌有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體,可以對表達出的蛋白質(zhì)進行進一步的加工、運輸。(4)用一種
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