基因工程超級(jí)題庫(kù)

基因工程題庫(kù)

一、名詞解釋

1、定點(diǎn)誘變：取代、插入或缺失克隆基因或DNA序列中的任何一個(gè)特定的堿基，這種體外

特異性改變某個(gè)堿基的技術(shù)叫作定點(diǎn)誘變。

2、重組DNA分子：由外源的目的基因或目的DNA片段與載體連接形成的DNA。

3、錨定PCR:錨定PCR也被稱為單鏈特異引物PCR,是一種根據(jù)已知目的基因的一小段序列

信息來(lái)快速擴(kuò)增已知序列上游或下游片段的技術(shù)。

4、限制性核酸內(nèi)切酶：可以識(shí)別特定的脫氧核甘酸序列，并在每條鏈中特定部位的兩個(gè)核

昔酸之間的磷酸二酯鍵進(jìn)行切割的一類酶，簡(jiǎn)稱限制性內(nèi)切酶。

5、穿梭載體：是指可以再兩種截然不同的生物細(xì)胞中復(fù)制的載體。

6、Ti質(zhì)粒：存在于能夠引起植物形成冠瘦瘤的土壤農(nóng)桿菌中，稱為誘導(dǎo)腫瘤的質(zhì)粒。

7、基因家族：核甘酸序列或編碼產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)具有一定程度同源性的一組基因

8、基因工程：利用遺傳重組技術(shù)，在體外通過人工剪切和拼接等方法。將包含目的基因、

特殊載體在內(nèi)的各種必需元件的DNA分子經(jīng)過改造和重組后,轉(zhuǎn)入另一受體生物細(xì)胞內(nèi)。

9、TDNA:能導(dǎo)入宿主細(xì)胞并插入其DNA中發(fā)揮作用的Ti質(zhì)粒部分DNA前段。

10、P1噬菌體載體：是含有許多P1噬菌體來(lái)源的順式作用元件，能容納70~100kb大小的

基因組DNA片段。

11、基因:是DNA分子中含有特定遺傳信息的一段核甘酸序列,是遺傳物質(zhì)的最小功能單位。

12、限制：是指細(xì)菌的限制性核酸酶對(duì)入侵DNA的降解作用

13、質(zhì)粒：存在于細(xì)胞質(zhì)中的一類獨(dú)立于染色體的可自主復(fù)制的遺傳成分，絕大多數(shù)為共價(jià)

閉合環(huán)狀DNAo

14、柯斯質(zhì)粒載體:一類人工構(gòu)建的含"DNAcos序列和質(zhì)粒復(fù)制子的特殊類型的載體，也稱

黏粒載體。

15、轉(zhuǎn)基因動(dòng)物：由于外源基因?qū)雱?dòng)物的基因組并能遺傳給后代的一類技術(shù)。

16、假基因：因其堿基順序發(fā)生缺失、倒位或點(diǎn)突變等失去活性，成為無(wú)功能基因，他們或

者不能轉(zhuǎn)錄，或者轉(zhuǎn)錄后可合成無(wú)功能的異常多肽

17、轉(zhuǎn)基因植物：利用DNA重組技術(shù)，在離體條件下對(duì)不同生物的DNA進(jìn)行加工，并按照人

們的意愿和適當(dāng)?shù)妮d體重新組合，再將重組DNA轉(zhuǎn)入生物體或細(xì)胞內(nèi)，并使其在生物內(nèi)

或細(xì)胞中表達(dá)的植物

18、限制與修飾系統(tǒng)：限制酶的生物學(xué)功能一般被認(rèn)為是用來(lái)保護(hù)宿主細(xì)胞不受外源DNA

的感染，可講解外來(lái)DNA,從而阻止其復(fù)制和整合到細(xì)胞中。一般來(lái)說，與限制酶相伴而

生的修飾酶是甲基轉(zhuǎn)移酶，或者說是甲基化酶，能保護(hù)自身的DNA不被講解。限制酶和

甲基轉(zhuǎn)移酶組成限制與修飾系統(tǒng)。

19、受體Ti質(zhì)粒：帶有重組T-DNA的大腸桿菌質(zhì)粒衍生載體稱為“中間載體”，而接受中

間載體的Ti質(zhì)粒稱為受體Ti質(zhì)粒

20、雙元載體系統(tǒng)：指由兩個(gè)分別含有T-DNA和vir區(qū)的相容性突變Ti質(zhì)粒構(gòu)成的雙質(zhì)粒

系統(tǒng)。

21、重疊基因：在某些生物中，不同基因可共用同一段DNA的核昔酸序列，它們的核甘酸序

列是彼此重疊的，這樣的基因稱為重疊基因。

22、同源區(qū)：兩段雙鏈DNA中序列基本相同的區(qū)域。

23、轉(zhuǎn)基因動(dòng)物技術(shù)：以動(dòng)物個(gè)體作為基因受體的基因表達(dá)技術(shù)。

24、SD序列：mRNA中用于結(jié)合原核生物核糖體的序列。

25、轉(zhuǎn)座基因：可以從染色體基因組上的一個(gè)位置轉(zhuǎn)移到另一個(gè)位置，甚至在不同的染色體

之間跳躍的基礎(chǔ)成分

26、一元載體系統(tǒng)：是中間表達(dá)載體與改造后的受體Ti質(zhì)粒之間，通過同源重組所產(chǎn)生的

一種復(fù)合型載體，通常一成為共整合載體。

27、同尾酶：切割不同的DNA片段但產(chǎn)生相同的粘性末端的一類限制性內(nèi)切酶

28、基因工程：對(duì)不同的遺傳物質(zhì)在體外進(jìn)行剪組合和拼接，使遺傳物質(zhì)重新組合，然后通

過載體注入微生物、植物和動(dòng)物細(xì)胞內(nèi)，進(jìn)行無(wú)性繁殖，并使所需的基因在細(xì)胞中表達(dá)，

產(chǎn)生人類所需的產(chǎn)物或新生物類型

29、分泌信號(hào)序列:也稱信號(hào)序列，編碼前體蛋白上N端一段17s30個(gè)氨基酸殘基的分泌信

號(hào)肽。

30、鋅指結(jié)構(gòu)：指的是在很多蛋白中存在的一類具有指狀結(jié)構(gòu)的模體

31、終止子：為基因3'端非翻譯去與轉(zhuǎn)錄終點(diǎn)下游緊鄰的一段非轉(zhuǎn)錄的核甘酸短序列

32、反應(yīng)元件：是一類能介導(dǎo)基因?qū)?xì)胞外的某種信號(hào)產(chǎn)生反應(yīng)的DNA序列

33、修飾：是指細(xì)菌的修飾酶對(duì)于自身DNA堿基分子的甲基化等化學(xué)修飾作用

34、反轉(zhuǎn)錄病毒：是一類含單鏈RNA的動(dòng)物病毒

35、cDNA文庫(kù)：以mRNA為模板，在體外經(jīng)反轉(zhuǎn)錄酶催化反轉(zhuǎn)錄生成cDNA,與適當(dāng)載體連接

后轉(zhuǎn)化宿主菌并繁殖擴(kuò)增，這樣包含著組織細(xì)胞全部mRNA信息的cDNA克隆集合稱為該

組織細(xì)胞的cDNA文庫(kù)

36、受體細(xì)胞：能夠攝取外源DNA并能夠使其穩(wěn)定存在的細(xì)胞，又稱宿主細(xì)胞或寄主細(xì)胞

37、轉(zhuǎn)化：細(xì)菌獲得外源質(zhì)粒DNA,產(chǎn)生新遺傳性狀的過程

38、轉(zhuǎn)導(dǎo)：以噬菌體為媒介，將外源DNA導(dǎo)入細(xì)菌的過程

39、轉(zhuǎn)染：指感受態(tài)的受體細(xì)胞捕獲和表達(dá)以噬菌體為載體的重組DNA分子的進(jìn)程

40、感受態(tài)：細(xì)菌能從周圍環(huán)境中吸收DNA的生理狀態(tài)為感受態(tài)

41、接合轉(zhuǎn)化：通過供體細(xì)胞同受體細(xì)胞間的直接接觸而傳遞外源DNA的方法

42、融合蛋白：將外源蛋白基因與受體菌自身蛋白基因重組在一起，但不改變兩個(gè)基因的閱

讀框，這樣形成的蛋白質(zhì)為融合蛋白

43、非融合蛋白：不與細(xì)菌的任何蛋白或多肽融合在一起的表達(dá)蛋白稱為非融合蛋白

44、同義密碼子：編碼相同氨基酸的一組密碼子為同義密碼子

45、基因工程細(xì)胞：含有表達(dá)型重組DNA的生物細(xì)胞，能夠通過工程方法在體外進(jìn)行規(guī)?；?/p>

培養(yǎng)，獲得大量的外源基因的表達(dá)產(chǎn)物，這樣的細(xì)胞稱為基因工程細(xì)胞

46、補(bǔ)料分批培養(yǎng)：發(fā)酵反應(yīng)器中接種培養(yǎng)一段時(shí)間后，間歇或連續(xù)的補(bǔ)加新鮮培養(yǎng)基，發(fā)

酵結(jié)束前一段時(shí)間停止補(bǔ)料，發(fā)酵結(jié)束后一次性放料的培養(yǎng)方法

47、離心沉淀法：利用固體顆粒在外力作用下與液體物質(zhì)做相對(duì)運(yùn)動(dòng)最終實(shí)現(xiàn)固液分離的細(xì)

胞分離技術(shù)

48、超聲波破碎法：利用一定功率的超聲波，機(jī)械振動(dòng)處理細(xì)胞懸液，使細(xì)胞在急劇震蕩中

破裂

49、酶解法：利用能降解細(xì)胞壁的酶將菌體細(xì)胞壁破壞，使細(xì)胞暴露在低滲溶液或者含變性

劑的溶液中從而破裂

50、載體：攜帶外源基因或DNA片段進(jìn)入宿主細(xì)胞進(jìn)行復(fù)制和表達(dá)的運(yùn)載工具

51、基因重排：某些基因片段改變?cè)械男蛄?，通過調(diào)整有關(guān)基因片段銜接序列，重新組成

一個(gè)完整的轉(zhuǎn)錄單位

52、轉(zhuǎn)化子：是指得到外源DNA分子并穩(wěn)定存在的受體細(xì)胞

53、重組子：得到重組DNA分子的轉(zhuǎn)化子

54、基因表達(dá)：結(jié)構(gòu)基因所包含的遺傳信息，遵照中心法則通過轉(zhuǎn)錄生成RNA,以及轉(zhuǎn)錄后

再經(jīng)過翻譯生成蛋白質(zhì)的過程

55、光穿孔法：利用激光產(chǎn)生的熱量，使細(xì)胞壁產(chǎn)生空洞，將外源物質(zhì)導(dǎo)入細(xì)胞

56、沖擊波法：利用細(xì)胞受沖擊后細(xì)胞膜通透性瞬時(shí)增加，將外源基因?qū)爰?xì)胞

57、電穿孔法：是指在高壓脈沖的作用下使細(xì)胞膜上出現(xiàn)微小的孔洞，從而導(dǎo)致不同細(xì)胞之

間的原生質(zhì)膜發(fā)生融合作用的細(xì)胞生物學(xué)過程

58、抗體轉(zhuǎn)染法：利用抗體作為載體，介導(dǎo)基因注入表達(dá)特定表面抗原細(xì)胞的方法

59、核移植：將外源性細(xì)胞核作為供體轉(zhuǎn)入到去核卵母細(xì)胞中，細(xì)胞核發(fā)生基因程序重排而

獲得多能性，開始新的胚胎發(fā)育

60、反向重復(fù)序列：是指兩個(gè)順序相同的拷貝在DNA鏈上呈反向排列

61、看家基因：在機(jī)體生長(zhǎng)發(fā)育過程中，有些基因在幾乎所有細(xì)胞中持續(xù)表達(dá)，這類屬于基

礎(chǔ)或組成型表達(dá)的基因?yàn)榭醇一?/p>

62、基因超家族：是指一組有多基因家族及單基因組成的更大的基因家族

63、顯微注射轉(zhuǎn)化法：利用顯微注射儀將外源DNA直接注入受體的細(xì)胞質(zhì)或細(xì)胞核中

二、選擇題

1、下列關(guān)于PCR介導(dǎo)定點(diǎn)誘變的優(yōu)點(diǎn)不包括（B）

A、突變體回收率高B、PCR產(chǎn)物錯(cuò)誤率低

C、快去簡(jiǎn)便D、高溫度的利用降低模板DNA形成二級(jí)結(jié)構(gòu)的能力

2、關(guān)于感受態(tài)細(xì)胞性質(zhì)的描述，下面哪一種說法不正確（C）

A、具有可誘導(dǎo)性B、具有可轉(zhuǎn)移性

C、細(xì)菌生長(zhǎng)的任何時(shí)期都可以出現(xiàn)D、不同細(xì)菌出現(xiàn)感受態(tài)的比例是不同的

3、固相亞磷酸三酯法是目前最通用的一種合成寡核甘酸的方法，其合成的一個(gè)循環(huán)周期可

分為四個(gè)步驟，正確的序號(hào)應(yīng)是：（B）

a.偶聯(lián)反應(yīng)b.氧化作用c.去保護(hù)d.封端反應(yīng)

A.abedB.cadbC.cbadD.bacd

4、在小量快速提取DNA樣品時(shí)為了降低污染物對(duì)限制性內(nèi)切酶活性的抑制作用，以下不正

確的方法是（A）

A、增加限制性內(nèi)切酶的用量

B、增加酶切反應(yīng)的總體積，降低抑制物的濃度

C、延長(zhǎng)酶切反應(yīng)時(shí)間

D、加入高濃度的鹽離子，升高DNA樣品的溫度

5、關(guān)于酵母載體Leu2營(yíng)養(yǎng)缺陷體，下列說法正確的是：（A）

A、只有在添加亮氨酸的條件下才能正常生長(zhǎng)

B、添加亮氨酸的條件下不能正常生長(zhǎng)

C、菌體本身自帶Leu2合成基因，能在基本培養(yǎng)基上生長(zhǎng)

D、能自身合成Leu

6、下列中關(guān)于Ti質(zhì)粒改造表達(dá)錯(cuò)誤的是（D）

A、保留T-DNA的轉(zhuǎn)移功能

B、取消TDNA的致瘤性

C、通過簡(jiǎn)便的手段可使外源DNA插入T-DNA,并隨著『DNA整合到植物染色體上

D、易進(jìn)行DNA重組操作

7、關(guān)于感受態(tài)細(xì)胞性質(zhì)的描述，下面哪一種說法是不正確的？（C）

A具有可誘導(dǎo)性B具有可轉(zhuǎn)移性

C細(xì)菌生長(zhǎng)的任何時(shí)期都可以出現(xiàn)

D不同細(xì)菌出現(xiàn)感受態(tài)的比例是不同的

8、用CsCl-EB密度梯度平衡離心的方法分離純化質(zhì)粒DNA時(shí)，（A）與Cs離子結(jié)合，密

度最大，沉積管底。

A、RNAB、染色體DNAC、質(zhì)粒D、蛋白質(zhì)

9、PBerg構(gòu)建SV40二聚體時(shí)用了幾種不同的酶，其中（B）的作用是制造隱蔽的5'端

A、末端轉(zhuǎn)移酶B、外切核酸酶

C、外切酶mD、DNA連接酶

10、YAC載體的選擇標(biāo)記主要采用（A）

A、營(yíng)養(yǎng)缺陷型基因B、噬菌體

C、免疫缺陷型基因D、病毒

11、下列是細(xì)胞RNA提取過程最關(guān)鍵的是（C）

A、樣品或組織的有效破碎B、有效地是使酸蛋白復(fù)合體變性解離

C、抑制RNA酶的活性D、有效地將RNA從DNA和蛋白質(zhì)混合物中分離

12、在長(zhǎng)模板鏈的指導(dǎo)下引物延伸合成長(zhǎng)的DNA互補(bǔ)鏈時(shí)應(yīng)選用（D）

A、T4DNA聚合酶B、Klenow酶

C、大腸桿菌DNA聚合酶D、T7DNA聚合酶

13、瓊脂糖凝膠電泳時(shí)電壓不應(yīng)超過（C）V/cm。

A、7B、8C、5D、6

14、下列那些不是質(zhì)粒載體（C）

A、PSC101B、PBR322C、C0L123D、PUC

15、柯斯質(zhì)粒載體的特點(diǎn)（D）

A、噬菌體的特點(diǎn)B、質(zhì)粒載體的特點(diǎn)C、高容量的克隆能力D、整合其他基因

16、動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)中常用的表達(dá)載體有（C）

A農(nóng)桿菌B酵母

C腺病毒D芽抱桿菌

17、基因工程中所用的質(zhì)粒載體大多是改造過的，真正的天然質(zhì)粒載體很少，在下列載體中

只有哪一種質(zhì)粒被視為用作基因工程載體的天然質(zhì)粒載體（B）

ApBR322BpSClOl

CpUBllODpUC18

18、采用基因工程技術(shù)將人凝血因子基因倒入山羊受精卵培育出了轉(zhuǎn)基因羊。但是人凝血因

子之存在于該轉(zhuǎn)基因羊的乳汁中，下列有關(guān)敘述，正確的是（B）

A、人體細(xì)胞中凝血因子基因的堿基對(duì)數(shù)目，小于凝血因子氨基數(shù)目的3倍

B.可用顯微鏡注射技術(shù)將含有人凝血因子基因的重組DNA分子導(dǎo)入羊的受精卵

C.在該轉(zhuǎn)基因羊中，人凝血因子只存在與乳腺細(xì)胞，而不存在與其他體細(xì)胞中

D.人凝血因子基因開始轉(zhuǎn)錄后，DNA連接酶以DNA分子的一條鏈為模板合成DNA

19、以下哪樣不是基因芯片的制備方法D

A點(diǎn)樣法B壓電印刷法

C光蝕刻合成法D點(diǎn)擊轉(zhuǎn)化法

20、下列有關(guān)基因工程的應(yīng)用中，對(duì)人類不利的是（c）

A.制造“工程菌”用于藥品生產(chǎn)。

B.制造“超級(jí)菌”分解石油、農(nóng)藥

C.重組DNA誘發(fā)受體細(xì)胞基因突變

D.導(dǎo)入外源基因替換缺陷基因

21、下列不是高等植物基因的誘導(dǎo)表達(dá)系統(tǒng)的是（c）

A.外源基因的四環(huán)素誘導(dǎo)系統(tǒng)

B.外源基因的乙醇誘導(dǎo)系統(tǒng)

C.外源基因的甲醇誘導(dǎo)系統(tǒng)

D.外源基因的類固醇誘導(dǎo)系統(tǒng)

22、（A）是革蘭氏陰性菌，是目前遺傳背景最清楚的原核生物之一。

A大腸桿菌B芽抱桿菌C鏈霉菌D藍(lán)藻

23、下列細(xì)胞中不能用作轉(zhuǎn)基因動(dòng)物技術(shù)宿主細(xì)胞的是（D）

A、BHK-21細(xì)胞B、CH0-K1細(xì)胞

C、鼠骨髓瘤細(xì)胞D、CV1細(xì)胞

24、下列不是哺乳動(dòng)物的轉(zhuǎn)基因操作的是（C）

A、顯微注射法B、胚胎干細(xì)胞法

C、轉(zhuǎn)錄病毒載體法D、精子介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)移

25、原核生物和真核生物基因表達(dá)調(diào)控的共同點(diǎn)不包含以下哪項(xiàng)？

A結(jié)構(gòu)基因均有調(diào)控序列。

B表達(dá)過程都具有復(fù)雜性，表現(xiàn)為多環(huán)節(jié)。

C表達(dá)的時(shí)空性，表現(xiàn)為不同發(fā)育階段和不同組織器官上的表達(dá)的復(fù)雜性。

D轉(zhuǎn)錄與翻譯的間斷性。

26、原核表達(dá)系統(tǒng)中，常用的受體菌包括以下哪些？

①大腸桿菌；②芽抱桿菌；③鏈霉菌；④藍(lán)藻；⑤酵母細(xì)胞；

A①②③⑤

B②③④⑤

C①②④⑤

D①②③④

27、下列那種克隆載體對(duì)外源DNA的裝載量最大（B）

A.黏粒B.酵母人工染色體（YAC）C.質(zhì)粒D.入噬菌體

28、關(guān)于穿梭質(zhì)粒載體，下面那種說法正確（B）

A.在不同的宿主中具有不同的復(fù)制機(jī)制

B.在不同的宿主細(xì)胞中使用不同的復(fù)制起點(diǎn)

C.在不同的宿主細(xì)胞中使用不同的復(fù)制酶

D.在不同的宿主細(xì)胞中具有不同的復(fù)制效率

29、關(guān)于探針的說法錯(cuò)誤的是？（C）

A、核酸根據(jù)來(lái)源可分為基因組DNA探針、cDNA探針、RNA探針及人工合成的寡核甘酸探針

等幾類。

B、根據(jù)目的要求不同，可以采用不同類型的核酸探針。

C、從一般意義上來(lái)說，任意一段核酸片段都可以作為探針。

D、探針應(yīng)具有高度特異性、來(lái)源要盡量方便、探針的序列結(jié)構(gòu)應(yīng)不受標(biāo)記物的影響等原則。

30、關(guān)于固相支持物的說法錯(cuò)誤的是？（C）

A、固相支持物具有較強(qiáng)的結(jié)合核酸的能力。

B、非特異性吸附少，在洗膜條件下能將非特異性吸附在其表面的探針分子洗脫掉。

C、通常來(lái)說固相支持物的機(jī)械性能較差。

D、目前最常用的幾種固相支持物有；硝酸纖維素濾膜、尼龍膜、濾紙等。

31、轉(zhuǎn)化受體系統(tǒng)的類型不包括：（B）

A.原生質(zhì)體受體系統(tǒng)B.經(jīng)過愈傷組織的芽受體系統(tǒng)

C.生殖細(xì)胞受體系統(tǒng)D.葉綠體轉(zhuǎn)化系統(tǒng)

32、農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法不包括以下那種方法：（D）

A.葉盤轉(zhuǎn)化法B.原生質(zhì)體共培養(yǎng)轉(zhuǎn)化法

C.整株感染法D.PLO誘導(dǎo)法

33、根據(jù)基因工程的定義，下列各名詞中不能替代基因工程的是（A）

A.基因誘變B.分子克隆C.DNA重組D.基因無(wú)性繁殖

34、第一個(gè)被分離的H類酶是：（C）

A.EcoKB.HindlllC.HindIID.EcoB

35、用免疫化學(xué)法篩選重組體的原理是（A）

A.根據(jù)外源基因的表達(dá)B.根據(jù)載體基因的表達(dá)

C.根據(jù)mRNA同DNA的雜交D.根據(jù)DNA同DNA的雜交

36、Southern印記是用DNA探針檢測(cè)DNA片段，而Nouthern印跡則是：（C）

A.用RNA探針檢測(cè)DNA片段B.用RNA探針檢測(cè)RNA片段

C.用DNA探針檢測(cè)RNA片段D.用RNA探針檢測(cè)蛋白質(zhì)片段

37、用于核酸分子雜交的探針可以是放射性標(biāo)記的（A）

A.DNAB.RNAC.抗體D.抗原

38、關(guān)于感受態(tài)細(xì)胞性質(zhì)的描述，下面哪一種說法不正確？（C）

A.具有可誘導(dǎo)性B.具有可轉(zhuǎn)移性

C.細(xì)菌生長(zhǎng)的任何時(shí)期都可以出現(xiàn)

D.不同細(xì)菌出現(xiàn)感受態(tài)的比例是不同的

39、黏性末端鏈接法，不僅操作方便，而且（B）

A.產(chǎn)生新切點(diǎn)B.易于回收外源片段

C.載體不易環(huán)化D.影響外源基因的表達(dá)

40、在下面試劑中，哪一種可以螯合Ca”離子？（D）

A.EDTAB.檸檬酸鈉C.SDSD.EGTA

41、限制性核酸內(nèi)切酶可以特異性識(shí)別：（B）

A.雙鏈DNA的特定堿基對(duì)B.雙鏈DNA的特定堿基序列

C.特定的三聯(lián)密碼D.以上都正確

42、限制性核酸內(nèi)切酶的星號(hào)活星是指：（A）

A.在非常規(guī)條件下，識(shí)別和切割序列發(fā)生變化的活性

B.活性大大提高

C.切割速度大大加快

D.識(shí)別序列與原來(lái)的完全不同

43、下面那一種不是產(chǎn)生星號(hào)活性的主要原因：（D）

A.甘油含量過高

B.反應(yīng)體系中含有有機(jī)溶劑

C.含有非Mg"的二價(jià)陽(yáng)離子

D.酶切反應(yīng)時(shí)酶濃度過低

44、在基因工程中，可用堿性磷酸酶（A）

A.防止DNA的自身環(huán)化

B.同多核甘酸激酶一起進(jìn)行DNA的3'末端標(biāo)記

C.制備突出的3'末端

D.上述說法都正確

45、下列酶中，除（A）外都具有磷酸酶的活性

A.X核酸外切酶B.外切酶III

C.單核甘酸激酶D.堿性磷酸酶

46、關(guān)于穿梭質(zhì)粒載體，下面那一種說法最正確：（B）

A.在不同的宿主中具有不同的復(fù)制機(jī)制

B.在不同的宿主細(xì)胞中使用不同的復(fù)制起點(diǎn)

C.在不同的宿主細(xì)胞中使用不同的復(fù)制酶

D.在不同的宿主細(xì)胞中具用不同的復(fù)制速率

47、黏粒是一種人工制造的載體，（D）

A.具有COS位點(diǎn)，因而可進(jìn)行體外包裝

B.它具有質(zhì)粒DNA的復(fù)制特性

C.進(jìn)入受體細(xì)胞后，可引起裂解反應(yīng)

D.以上都是

48、關(guān)于cDNA的最正確的說法是什么：（C）

A.同mRNA互補(bǔ)的單鏈DNA

B.同mRNA互補(bǔ)的雙鏈DNA

C.以mRNA為模板合成的雙鏈DNA

D.以上都正確

49、用堿法分離質(zhì)粒DNA時(shí)，染色體DNA之所以可以被除去，是因?yàn)椋海–）

A.染色體DNA斷成了碎片

B.染色體DNA分子量大，而不能釋放

C.染色體變性后來(lái)不及復(fù)性

D.染色體未同蛋白質(zhì)分開

50、下列文庫(kù)中，（C）屬于cDNA文庫(kù)

A.YAC文庫(kù)B.MAC文庫(kù)

C.扣減文庫(kù)D.BAC文庫(kù)

51、在cDNA技術(shù)中，所形成的發(fā)夾環(huán)可用（C）

A.限制性內(nèi)切核酸酶切除

B.用3'外切核酸酶切除

C.用S1核酸酶切除

D.用5'外切核酸酶切除

52、關(guān)于DNA接頭在基因文庫(kù)中的作用，下列說法中哪一項(xiàng)不正確？（D）

A.給外源DNA添加適當(dāng)?shù)那悬c(diǎn)

B.人工構(gòu)建載體

C.調(diào)整外源基因的可讀框

D.增加調(diào)控元件

53、cDNA文庫(kù)庫(kù)包括該種生物的（A）

A.某些蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因

B.所有蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因

C.所有結(jié)構(gòu)基因

D.內(nèi)含子和調(diào)控區(qū)

54、下列關(guān)于建立cDNA文庫(kù)的敘述中，哪一項(xiàng)是錯(cuò)誤的？（A）

A.從特定組織或細(xì)胞中提取DNA或RNA

B.用反轉(zhuǎn)錄酶合成mRNA的對(duì)應(yīng)單鏈DNA

C.以新合成的單鏈DNA為模板合成雙鏈DNA

D.新合成的雙鏈DNA甲基化

55、下列對(duì)黏性末端連接法的評(píng)價(jià)中，哪一項(xiàng)是不正確的？（C）

A.操作方便

B.易于回收片段

C.易于定向重組

D.載體易于自身環(huán)化，降低重組率

56、Southern印跡的DNA探針（C）雜交

A.只與完全相同的片段

B.可與任何含有相同序列的DNA片段

C.可與任何含有互補(bǔ)序列的DNA片段

D.可與用某些限制性內(nèi)切核酸酶切成的DNA片段

57、用下列方法進(jìn)行重組體的篩選，只有（C）說明了外源基因進(jìn)行了表達(dá)

A.Southern印跡雜交

B.Northern印跡雜交

C.Western印跡

D.原位菌落雜交

58、報(bào)告基因（D）

A.以其易于分析的編碼序列代替感興趣基因的編碼序列

B.以其易于分析的啟動(dòng)子區(qū)代替感興趣基因的啟動(dòng)子區(qū)

C.能用于確定啟動(dòng)子何時(shí)何處有活性

D.以上都是

59、切口移位是指在（）作用下，使（B）帶上放射性標(biāo)記

A.DNA聚合酶I,RNA

B.DNA聚合酶I,DNA

C.DNA聚合酶m,RNA

D.DNA聚合酶III,DNA

60、用于核酸分子雜交的探針可以是放射性標(biāo)記的（D）

A.DNA

B.RNA

C.抗體

D.A+B

61、關(guān)于T4DNALigase,下列說法哪一項(xiàng)不正確？（C）

A.是最常用的DNA連接酶

B.不但能連接黏性末端，還能連接平末端

C.不能連接黏性末端

D.最適溫度37攝氏度

62、基因工程的創(chuàng)始人是（D）

A.A.Kornberg

B.W.Gilbert

C.P.Berg

D.Cohen

63、關(guān)于宿主控制的限制修飾現(xiàn)象的本質(zhì)，下列描述中只有（B）不太恰當(dāng)

A.由作用于同一DNA序列的兩種酶構(gòu)成

B.這一系統(tǒng)中的核酸酶都是II類限制性內(nèi)切核酸酶

C.這一系統(tǒng)中的修飾酶主要是通過甲基化作用對(duì)DNA進(jìn)行修飾

D.不同的宿主系統(tǒng)具有不同的限制-修飾系統(tǒng)

64、在DNA的3'-5'鏈上，基因的起始密碼子是（A）

A.ATG（或GTG）

B.AGT

C.TAG

D.TGA

65、II限制性內(nèi)切核酸酶可以特異性識(shí)別（B）

A.雙鏈DNA的特定堿基對(duì)

B.雙鏈DNA的特定堿基序列

C.特定的三聯(lián)密碼

D.以上都正確

66、末端轉(zhuǎn)移酶是合成酶類，具有（B）活性

A.3'-5'DNA聚合酶

B.5'-3'DNA聚合酶

C.5'-3'DNA內(nèi)切酶

D.5'-3'DNA外切酶

67、不是基因工程方法生產(chǎn)的藥物是（C）

A.干擾素

B.白細(xì)胞介素

C.青霉素

D.乙肝疫苗

68、下列哪項(xiàng)敘述不是運(yùn)載體必須具備的條件（B

A.具有某些標(biāo)記基因

B.決定宿主細(xì)胞的生存

C.能夠在宿主細(xì)胞中復(fù)制

D.有一個(gè)或多個(gè)限制酶切點(diǎn)

69、在基因工程中用來(lái)修飾改造基因的工具是（A）

A.限制酶和連接酶

B.限制酶和水解酶

C.限制酶和運(yùn)載酶

D.連接酶和運(yùn)載酶

70、下列與關(guān)基因工程的敘述中，不正確的是（A）

A.DNA連接酶將黏性末端的堿基對(duì)連接起來(lái)

B.基因探針是指用放射性同位素或熒光分子等標(biāo)記的DNA分子

C.基因治療主要是對(duì)有基因缺陷的細(xì)胞進(jìn)行替換

D.蛋白質(zhì)中氨基酸序列可為合成目的基因提供資料

71、蛋白質(zhì)工程中，直接需要進(jìn)行操作的對(duì)象是（D）

A.氨基酸結(jié)構(gòu)

B.蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)

C.肽鏈結(jié)構(gòu)

D.基因結(jié)構(gòu)

72、有關(guān)基因與酶關(guān)系的敘述正確的是（C）

A.每個(gè)基因都控制合成一種酶

B.酶的遺傳信息編碼在內(nèi)含子的堿基序列中

C.基因的轉(zhuǎn)錄、翻譯都需要酶

D.同一生物體不同細(xì)胞的基因和酶是相同的

73、下列關(guān)于質(zhì)粒的敘述正確的是（B）

A.質(zhì)粒是廣泛存在于細(xì)菌細(xì)胞中的一種顆粒狀細(xì)胞器

B.質(zhì)粒是細(xì)菌細(xì)胞質(zhì)中能自主復(fù)制的小型環(huán)狀雙鏈DNA分子

C.質(zhì)粒只有在侵入宿主細(xì)胞后在宿主細(xì)胞內(nèi)復(fù)制

D.細(xì)菌治理的復(fù)制過程一定是在宿主外獨(dú)立進(jìn)行的

74、關(guān)于基因工程的敘述，正確的是（B）

A.基因工程經(jīng)常以抗菌素抗性基因?yàn)槟康幕?/p>

B.細(xì)菌質(zhì)粒是基因工程常用的運(yùn)載體

C.通常用一種限制性核酸內(nèi)切酶處理含目的基因的DNA,用另一種限制沒處理運(yùn)載體DNA

D.為育成抗除草劑的農(nóng)作物新品種導(dǎo)入的抗除草劑的基因只能以受精卵為受體

三、填空題

1、隨機(jī)突變包括化學(xué)或物理誘變法以及PCR隨機(jī)誘變法

2、在CaCk法制備大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞并轉(zhuǎn)化的實(shí)驗(yàn)中，為了提高轉(zhuǎn)化效率，實(shí)驗(yàn)中要考

慮的重要因素有：細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)和密度、質(zhì)粒的質(zhì)量和濃度、試劑的質(zhì)量、防止雜菌和

雜DNA的污染。

3、PCR作為一種體外快速擴(kuò)增目的DNA片段的技術(shù)，主要由變性、退火、延伸三個(gè)基本步

驟組成。

4、在限制修飾系統(tǒng)中，限制是指細(xì)菌的限制性核酸酶對(duì)入侵DNA的降解作用。

5、酵母載體主要有三種類型，分別是整合型載體Yip、復(fù)制型載體YRp、附加體型載體

YEp

6、雙元載體系統(tǒng)由兩個(gè)含有T-DNA和vir區(qū)的相容性突變Ti質(zhì)粒微型Ti質(zhì)粒和輔助

Ti質(zhì)粒構(gòu)成。

7、提取純化核酸總的來(lái)說分為樣品準(zhǔn)備、細(xì)胞破碎、分離純化核酸和核酸的沉淀濃

超四大步驟。

8、堿裂解法質(zhì)粒分離主要步驟為細(xì)菌的培養(yǎng)、細(xì)菌的收集和裂解、質(zhì)粒DNA的分離和

純化。

9、基因克隆中三個(gè)基本要點(diǎn):克隆基因的類型、受體的選擇、載體的選擇。

1O、P1人工染色體載體是在P1噬菌體載基礎(chǔ)上構(gòu)建的，它結(jié)合了P1載體和BAC載體的

最佳特性，是一種與黏位載體相似的高通量載體。

11、核酸純化的關(guān)鍵去除蛋白質(zhì)

12、上游技術(shù)是基因克隆的核心與基礎(chǔ),包括基因重組、克隆載體的設(shè)計(jì)與構(gòu)建，在設(shè)計(jì)中

注重體現(xiàn)“簡(jiǎn)化下游工藝和設(shè)備”的重要原則；下游技術(shù)是上有基因克隆藍(lán)圖的體現(xiàn)和

保證，是目的基因產(chǎn)品產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)的關(guān)鍵。

13、用于化學(xué)方法及酶法細(xì)胞破碎的試劑有十二烷基硫酸鈉（SDS）、溶菌酶、蛋白酶K。

14、噬菌體是一類細(xì)菌病毒的總稱。

15、常用的質(zhì)粒載體PBR322,PUC。

16、哺乳動(dòng)物轉(zhuǎn)基因操作的五種方法：顯微注射法,利用體細(xì)胞核移植制備轉(zhuǎn)基因動(dòng)物,胚

胎干細(xì)胞法,反轉(zhuǎn)錄病毒載體法,精子介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)移。

17、動(dòng)物基因工程，包括動(dòng)物細(xì)胞基因表達(dá)技術(shù)，和動(dòng)物轉(zhuǎn)基因技術(shù)兩個(gè)方面。

18、RNA病毒的種類為單鏈RNA、亞基因組RNA、衛(wèi)星RNA

19、southernE|J跡雜交包括酶解、電泳、轉(zhuǎn)膜、探針標(biāo)記、雜交、雜交檢出

20、植物基因工程載體根據(jù)其功能和構(gòu)建過程可分為：目的基因克隆載體、中間克隆載體、

中間表達(dá)載體、卸甲載體、植物基因轉(zhuǎn)化載體。

21、放射性標(biāo)記法分為體內(nèi)標(biāo)記法和體外標(biāo)記法兩種。

22、原核表達(dá)系統(tǒng)有大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)芽抱桿菌表達(dá)系統(tǒng)鏈霉菌表達(dá)系統(tǒng)藍(lán)藻表達(dá)系統(tǒng)

23、目前常用的表達(dá)載體分為病毒載體和質(zhì)粒載體。

24、動(dòng)物基因工程包括動(dòng)物細(xì)胞基因表達(dá)技術(shù)和動(dòng)物轉(zhuǎn)基因技術(shù)兩方面。

25、分批培養(yǎng)的細(xì)菌可分為四個(gè)時(shí)期，分別是延遲期、對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期、穩(wěn)定期、衰亡期。

26、原核生物的啟動(dòng)子一般由四部分構(gòu)成：轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)、Pribnowbox、Sextama框、間

隔區(qū)

27、核酸探針的種類有基因組DNA探針cDNA探針RNA探針寡核甘酸探針。

28、核酸探針的標(biāo)記方法有切口平移法隨機(jī)引物法末端標(biāo)記法生物素探針的化學(xué)標(biāo)

記方法。

29、Ti質(zhì)粒可以被分為四種類型：章魚堿型、胭脂堿型、農(nóng)桿堿型和農(nóng)桿菌素堿型

30、用于開發(fā)載體的轉(zhuǎn)化病毒有:花椰菜花葉病毒、雙聯(lián)體病毒、RNA病毒

31、酵母轉(zhuǎn)化子篩選的標(biāo)記基因主要有營(yíng)養(yǎng)缺陷互補(bǔ)基因、顯性基因兩大類。

32、廣泛用于目的基因表達(dá)的酵母菌有：釀酒酵母、產(chǎn)骯假絲酵母、畢赤酵母、解脂耶氏酵

母等。

33、在Laci標(biāo)記基因插入外源基因，經(jīng)IPTG誘導(dǎo)，在X-gal培養(yǎng)基中顯白色,

為陽(yáng)性克隆,未插入基因的克隆顯藍(lán)色，為陰性克隆。

34、基因表達(dá)的四大表達(dá)系統(tǒng)分別為大腸桿菌、酵母菌、哺乳動(dòng)物細(xì)胞、昆蟲細(xì)胞。

35、在基因工程中應(yīng)用的酶類統(tǒng)稱為工具酶。

35、Klenow酶在有dNTP情況下,呈現(xiàn)DNA聚合酶活性，在沒有dNTP情況下呈現(xiàn)

外切酶活性。

36、基因工程所需的基本條件1、用于核酸操作的工具酶；2、用于基因克隆的載體；3、用

于基因轉(zhuǎn)移的受體菌或細(xì)胞。

37、基因工程的基本程序包括：DNA制備、體外DNA重組、遺傳轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)化細(xì)胞的篩選

38、RNA分子經(jīng)凝膠電泳后按大小不同分開，然后被轉(zhuǎn)移到一張硝酸纖維素膜（尼龍膜）

上，同一放射DNA探針雜交的技術(shù)稱Northern印跡

39、在分離DNA時(shí)要戴手套操作原因是手上常有核酸酶

40、能夠與特定DNA序列結(jié)合的放射性DNA片段稱為：W

41、核酸雜交探針可分為兩大類答：DNA探針和RNA探針。

42、限制性內(nèi)切酶通常保存在50%濃度的甘油溶液中。

43、基因工程的基本程序包括DNA制備、體外DNA重組、遺傳轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)化細(xì)胞的篩選

44、載體與CDNA連接重組可用的方法有同聚尾連接酶,加人工接頭連接法。

45、回收DNA片段時(shí)，常用正丁醇處理以除去EB

46、E.coli感受態(tài)出現(xiàn)的生理時(shí)期是對(duì)數(shù)期。

47、在分離質(zhì)粒DNA的菌體培養(yǎng)過程中，加入氯霉素有兩個(gè)好處：可以擴(kuò)增質(zhì)粒DNA；

抑制了菌體的數(shù)量，有利于裂解。

48、形成平末端的方法：用產(chǎn)生平末端的限制酶切、用S1核酸酶切除黏性末端、用DNA

聚合酶填平粘性末端

49、DNA片段重組連接的方法有：平端連接、黏端連接、同聚尾連接、加接頭連接

50、在用單一限制酶切載體和目的基因并進(jìn)行連接時(shí)，為防止載體自身環(huán)化，常用堿性磷

酸酶處理載體

51、用乙醇沉淀DNA時(shí)，通常要在DNA溶液中加入單價(jià)的陽(yáng)離子，目的是：中和DNA分子

的負(fù)電荷，增加DNA分子間的凝聚力

52、在DNA分離過程中，通常要進(jìn)行透析，目的是為了除去小分子的無(wú)機(jī)離子

53、在DNA分離過程中造成DNA分子斷裂的因素很多，主要有：核酸酶降解、化學(xué)降解、

物理剪切

54、SSCP電泳方式為非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳

55、酚法和堿法分離質(zhì)粒DNA都要用溶菌酶破壁，但堿法用的溶菌酶濃度較高

56、載體根據(jù)主要用途可以分為：克隆載體、表達(dá)載體

57、克隆載體的關(guān)鍵元件有：多克隆位點(diǎn)、篩選標(biāo)記基因、復(fù)制起始位點(diǎn)

58、載體按照傳代特性可分為：自主復(fù)制型載體、整合型載體

59、細(xì)菌的移動(dòng)基因存在著三種類型的轉(zhuǎn)位因子包括：插入序列、轉(zhuǎn)位子、噬菌體Mu和

D108

60、位于基因5'端非翻譯區(qū)與轉(zhuǎn)錄起點(diǎn)上游緊鄰的一段非轉(zhuǎn)錄序列稱為啟動(dòng)子

61、向發(fā)酵罐內(nèi)一次性投入培養(yǎng)基并接種培養(yǎng)，一次性放料的間歇性培養(yǎng)方法為：分批培

養(yǎng)

62、酵母菌轉(zhuǎn)化方法：原生質(zhì)體轉(zhuǎn)化法、堿金屬離子轉(zhuǎn)化法、電激轉(zhuǎn)化法

四、簡(jiǎn)答題

1、PCR介導(dǎo)定點(diǎn)誘變的不足之處。

答：①PCR產(chǎn)物有相對(duì)高的錯(cuò)誤率，需要通過限制擴(kuò)增的循環(huán)數(shù)，應(yīng)用更好的熱穩(wěn)定DNA聚

合酶來(lái)改善；

②在擴(kuò)增DNA的3'-末端引入非預(yù)設(shè)的核甘酸，這可通過用pfuDNA聚合酶代替Taq酶來(lái)解

決；

③一些以PCR為基礎(chǔ)的方法，每個(gè)誘變實(shí)驗(yàn)需大量的引物和擴(kuò)增反應(yīng)；

④進(jìn)行PCR反應(yīng)的每套引物和模板的條件都需要優(yōu)化；

⑤以親本野生型DNA為模板的PCR反應(yīng)中，污染可導(dǎo)致高比例的非突變的克?。?/p>

⑥標(biāo)準(zhǔn)PCR反應(yīng)不能有效擴(kuò)增大于2~3kb大小的片段。

2、DNA重組選擇受體細(xì)胞的基本原則有哪些？

答：①細(xì)胞要比較安全，無(wú)致病性，不會(huì)對(duì)外界環(huán)境造成生物污染；

②重組DNA分子導(dǎo)入受體細(xì)胞要方便；

③重組DNA分子要能夠在該受體細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)定存在；

④重組DNA分子的篩選要方便；

⑤遺傳穩(wěn)定性要高，利于擴(kuò)大培養(yǎng)或長(zhǎng)期培養(yǎng)；

⑥選擇蛋白水解酶基因缺失或蛋白酶含量低的細(xì)胞，以利于穩(wěn)定大量收集目的蛋白產(chǎn)物。

3、什么是PCR技術(shù)？PCR的基本原理是什么？

答：PCR即聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，是一種在體外快速擴(kuò)增特定目的基因或DNA序列的技術(shù)，故

又稱基因的體外擴(kuò)增技術(shù)。它可以在試管中建立反應(yīng)，經(jīng)過數(shù)小時(shí)之后，就能將極微量

的目的基因或DNA片斷擴(kuò)增數(shù)十萬(wàn)乃至千百萬(wàn)倍，無(wú)需經(jīng)過繁瑣費(fèi)時(shí)的基因克隆程序,

便可獲得足夠數(shù)到兩精確的DNA拷貝。

PCR的基本工作原理：以擬擴(kuò)增的DNA分子為模板，以一對(duì)分別與模板5'末端和3'末端

相互補(bǔ)的寡核甘酸片段為引物，DNA聚合酶的作用下，在按照半保留復(fù)制的機(jī)制沿著

模板鏈延伸直至完成新的DNA合成，重復(fù)這一過程，即可使目的DNA片段得到擴(kuò)增。

4、通常所說的限制性內(nèi)切酶是哪個(gè)？它有什么特征？

答：通常所說的限制性核酸內(nèi)切酶是II型酶，它的限制和修飾活性分開，蛋白結(jié)構(gòu)為單一成

分，限制作用的輔助因子為鎂離子，切割位點(diǎn)在特異性位點(diǎn)或附近，可以識(shí)別未甲基化

的位點(diǎn)進(jìn)行核酸內(nèi)切酶切割，能對(duì)序列特異性切割，廣泛應(yīng)用于基因工程中。

5、三種酵母質(zhì)粒載體的共同特點(diǎn)是什么？

答：①能在大腸桿菌中克隆，并具有較高拷貝數(shù)；

②含有在酵母中便于選擇的遺傳標(biāo)記；

③有合適的限制酶切位點(diǎn)，以便外源基因插入。

6、Ti質(zhì)粒分為哪幾個(gè)區(qū)？

答：①T-DNA區(qū)②毒性區(qū)③接合轉(zhuǎn)移區(qū)④復(fù)制起始區(qū)

7、作為基因工程理想的質(zhì)粒載體必須具備什么條件？

答：(1)具有復(fù)制起點(diǎn)，在宿主細(xì)胞能自主復(fù)制；

(2)帶有盡可能多的單一限制性酶切位點(diǎn)，以供外源DNA片段定點(diǎn)插入；

(3)具有合適的選擇標(biāo)記基因，為宿主細(xì)胞提供易于檢測(cè)的遺傳表型特征；

(4)具有較小的分子量和較高的拷貝數(shù)；

(5)基因工程所應(yīng)用的質(zhì)粒通常為非傳遞性的松弛型質(zhì)粒，安全可控，不至于對(duì)操作者和

環(huán)境帶來(lái)不必要的危害。

8、質(zhì)粒DNA的分離純化有哪幾種方法？列舉三種。

答：①堿裂解法②煮沸法③CsCl-EB密度梯度平衡離心

9、簡(jiǎn)述SangerDNA測(cè)序法原理

答：Sangerdna測(cè)序法是建立在兩個(gè)基本原理之上：(1)核酸是依賴于模板在聚合酶的作用

下由5'端向3'端聚合(DNA聚合酶參與了細(xì)菌修復(fù)DNA合成過程)；(2)可延伸的引物必

須能提供游離的3,羥基末端，雙脫氧核甘酸由于缺少游離的3,羥基末端，因此會(huì)終止聚

合反應(yīng)的進(jìn)行。如果分別用4種雙脫氧核甘酸終止反應(yīng)，則會(huì)獲得4組長(zhǎng)度不同的DNA

片段。通過比較所有DNA片段的長(zhǎng)度可以得知核甘酸的序列。

10、人工染色體載體有哪三種？

答：酵母人工染色體載體、細(xì)菌人工染色體載體、P1人工染色體載體。

11、提取核酸RNA時(shí)加入氯仿和異戊醇的目的是什么？

答：①氯仿與酚混合能在變性蛋白質(zhì)的同時(shí)有效抑制RNA酶的活性；

②氯仿還能加速有機(jī)相與液相分層；

③最后抽提時(shí)用氯仿可以去除核酸溶液中的痕量酚；

④加入少許異戊醇則是為了減少蛋白質(zhì)變性操作過程中產(chǎn)生的氣泡。

12、請(qǐng)簡(jiǎn)述轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)染、轉(zhuǎn)導(dǎo)的異同

答：轉(zhuǎn)化：細(xì)菌接納外援DNA而引進(jìn)新的基因標(biāo)記。

轉(zhuǎn)染：接受加入的DNA從而獲得新的基因標(biāo)記。

轉(zhuǎn)導(dǎo)：指噬菌體將細(xì)菌基因從一種細(xì)菌中轉(zhuǎn)移到另一種細(xì)菌中。一個(gè)攜帶自身以及宿主基因

的噬菌體稱為轉(zhuǎn)導(dǎo)噬菌體。也可指逆轉(zhuǎn)錄病毒獲得和轉(zhuǎn)移真核基因。

13、RNA的提取方法有哪些？

答：①提取總核酸，再用氯化鋰將RNA沉淀出來(lái)，這種方法會(huì)導(dǎo)致小分子RNA的丟失；

②直接在酸性條件下抽提。

14、基因工程載體的特性有哪些？

答：①在宿主細(xì)胞能自主復(fù)制

②容易在宿主細(xì)胞中分離純化

③載體DNA中有一段不影響擴(kuò)增的非必需區(qū)域,插在其中的外源基因可以正常進(jìn)行復(fù)制和擴(kuò)

增

④有限制酶切的克隆位點(diǎn)

⑤能賦予細(xì)胞特殊的遺傳標(biāo)記

⑥具有啟動(dòng)子，增強(qiáng)子，SD序列等表達(dá)原件

15、柯斯載體的特點(diǎn)

答：①具有噬菌體的特性

②具有質(zhì)粒載體的特性

③具有高容量的克隆能力

16、基因芯片技術(shù)在哪些方面有所應(yīng)用？并簡(jiǎn)要說明。

答：

①應(yīng)用于基因表達(dá)及調(diào)控的研究：

生物體在不同的時(shí)間條件下有不同的功能基因表達(dá),通過從該樣品中提出mRNA與含有代

表該生物體中所有功能基因的芯片進(jìn)行雜交，就可以獲得該樣品中功能基因的表達(dá)情況。

②基因芯片技術(shù)在臨床上的應(yīng)用：

利用基因芯片可以對(duì)某一細(xì)胞的基因表達(dá)情況進(jìn)行一個(gè)全面的了解，所以還可進(jìn)一步應(yīng)

用于癌癥的精確診斷及治療。同時(shí)基因芯片還可以觀察藥物對(duì)腫瘤細(xì)胞基因表達(dá)譜的影

響，評(píng)估藥物對(duì)腫瘤治療的可行性。

17、動(dòng)物基因工程中，外源基因表達(dá)包括哪些內(nèi)容？

①導(dǎo)入大片段；

②添加基因附著區(qū)；

③利用具有組織和發(fā)育特異性調(diào)控作用的啟動(dòng)子和增強(qiáng)子；

④添加內(nèi)含子；

⑤利用基因打靶系統(tǒng)實(shí)現(xiàn)染色體定位整合；

⑥加入基因座控制區(qū)。

18、簡(jiǎn)述獲得目的基因常用的幾種方法。

(1)直接從染色體DNA中分離

(2)人工合成

(3)從mRNA合成cDNA

(4)利用PCR合成

(5)從基因文庫(kù)中篩選

19、外源基因?qū)胫参锏姆椒ㄖ饕心男?/p>

物理方法：電擊法、基因槍法(biolistic)、顯微注射法、微激光束法

化學(xué)方法：PEG介導(dǎo)法