血液學檢驗紅細胞膜缺陷癥

關(guān)于血液學檢驗紅細胞膜缺陷癥第一節(jié)概述紅細胞有許多重要的生理功能，除攜帶氧氣和運輸二氧化碳外，對維持體內(nèi)衡態(tài)起重要作用。近年來由于分子生物學的發(fā)展，研究生物大分子的新技術(shù)不斷改進，紅細胞膜結(jié)構(gòu)與功能的研究有了很大的進展。第2頁,共55頁，星期六，2024年，5月由于紅細胞循環(huán)周身，其它臟器的疾病也會影響紅細胞膜，如糖尿病、嚴重肝病及動脈粥樣硬化等都會累及紅細胞膜。因此對紅細胞膜的研究不僅對血液病、對其它疾病的認識也有重要作用。第3頁,共55頁，星期六，2024年，5月一、紅細胞膜的組成與結(jié)構(gòu)1、紅細胞膜的組成人的紅細胞由蛋白質(zhì)、脂質(zhì)、糖類及無機離子等組成。紅細胞膜的特點是脂質(zhì)含量高，蛋白質(zhì)與脂質(zhì)的比約為1：1。比值變化常與功能密切相關(guān)。第4頁,共55頁，星期六，2024年，5月紅細胞膜組成脂質(zhì)：40%糖類：8%蛋白質(zhì)：50%磷脂60%雙性物質(zhì)膽固醇+中性脂肪33%糖脂7%糖+脂質(zhì)中性糖：葡萄糖半乳糖甘露糖氨基糖類：GalNH2GIcNH2GIcNAcGaINAc骨架蛋白12457跨膜蛋白帶3蛋白血型糖蛋白C/P:0.8-1.0第5頁,共55頁，星期六，2024年，5月紅細胞膜上的蛋白質(zhì)大多數(shù)是與脂質(zhì)或糖結(jié)合在一起的脂蛋白、糖脂蛋白。這些蛋白質(zhì)既有維持紅細胞結(jié)構(gòu)的作用，又有一定功能，僅起結(jié)構(gòu)作用的蛋白很少。紅細胞膜在有十二烷基磺酸鈉（SDS）存在下作SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳（SDS），按分子量大小可分為7-8條帶。第6頁,共55頁，星期六，2024年，5月第7頁,共55頁，星期六，2024年，5月2、紅細胞膜的結(jié)構(gòu)紅細胞膜的結(jié)構(gòu)與其他細胞膜結(jié)構(gòu)相似，根據(jù)流動鑲嵌學說的基本論點，紅細胞膜以脂質(zhì)雙層構(gòu)成膜的骨架，內(nèi)外兩層脂類分子分布是不對稱的，蛋白質(zhì)鑲嵌在脂質(zhì)雙層。膜結(jié)構(gòu)有兩個最基本的特征：紅細胞膜的流動性和膜的不對稱性。第8頁,共55頁，星期六，2024年，5月（1）紅細胞膜的不對稱性（asymmetry）

是指紅細胞膜脂雙層中的內(nèi)外兩層脂類分布的不均一及其物理性質(zhì)的不同，以及膜蛋白在膜內(nèi)外兩層分布也是不對稱性。

第9頁,共55頁，星期六，2024年，5月膜脂質(zhì)分布的不對稱性外層：膽堿磷脂（PC）和鞘磷脂（SM）為主內(nèi)層：絲氨酸磷脂（PS）和乙醇氨磷脂（PE）

生物物理法測定：紅細胞膜的流動性密度，外層脂類分子密度大于內(nèi)層，流動性也大于內(nèi)層。

膜脂質(zhì)不對稱性是維持紅細胞正常形態(tài)的基礎(chǔ)

第10頁,共55頁，星期六，2024年，5月膜蛋白分布的不對稱性膜蛋白在脂質(zhì)雙層兩側(cè)的分布不對稱性是絕對的，有的膜蛋白位于脂質(zhì)雙層的內(nèi)側(cè)，有的位于外側(cè)，有的蛋白是跨膜的，如糖蛋白、糖鏈都位于膜的外側(cè)。膜蛋白結(jié)構(gòu)上兩側(cè)的不對稱性保證了膜的方向性功能。第11頁,共55頁，星期六，2024年，5月（2）紅細胞膜的流動性膜的流動性是指膜內(nèi)部分子運動性，主要是指脂質(zhì)和蛋白質(zhì)的運動。構(gòu)成膜的脂類，在一定的溫度下，流動的液晶態(tài)與晶態(tài)可以相互轉(zhuǎn)變。生理條件下生物膜一般處于液晶態(tài)，膜脂總是處于流動狀態(tài)。第12頁,共55頁，星期六，2024年，5月膜脂質(zhì)流動性與紅細胞形態(tài)和功能密切相關(guān)。如去除膽固醇或降低C/P比值，膜流動性升高，此時紅細胞形態(tài)轉(zhuǎn)為口形；膜脂流動性還能影響紅細胞一些酶和受體活性，當流動性降低時，膜乙酰膽堿酯酶（AchE）活性下降，β腎上腺素能受體對cAMP反應(yīng)下降。第13頁,共55頁，星期六，2024年，5月膜蛋白由于脂質(zhì)雙層的流動性也處于運動之中，在脂質(zhì)雙層中作側(cè)向運動和旋轉(zhuǎn)運動。膜骨架蛋白是影響膜脂質(zhì)流動性的重要原因，膜骨架在維持紅細胞正常形態(tài)和磷脂不對稱性分布方面起重要作用。第14頁,共55頁，星期六，2024年，5月（二）紅細胞膜的功能細胞形態(tài)與功能總是相適應(yīng)的比如：復習紅細胞有哪些形態(tài)結(jié)構(gòu)特點?①兩面中部凹陷的圓餅狀；②充滿血紅蛋白；③無細胞核④無線粒體第15頁,共55頁，星期六，2024年，5月①其相對表面積與球形比有變化嗎?有什么好處?（相對表面積增大，可以更迅速地完成氣體交換）②紅細胞內(nèi)無線粒體，只進行無氧呼吸，有什么好處?(運輸氧氣的過程中不消耗氧氣，提高了運輸氧氣的效率)③無細胞核，有什么好處?(無核細胞新陳代謝很弱，適應(yīng)了只能進行無氧呼吸這一特點)第16頁,共55頁，星期六，2024年，5月物質(zhì)運輸紅細胞膜抗原性離子運輸：帶3蛋白HCO3-/Cl-

Na+-K+-ATP酶

Ca2+-Mg2+-ATP酶水的運輸：水通道AQP-CHIP葡萄糖轉(zhuǎn)運:葡萄糖轉(zhuǎn)運體GLUT血型抗原:糖蛋白或糖脂老化抗原:SCA第17頁,共55頁，星期六，2024年，5月紅細胞的變形性

紅細胞變形性與紅細胞功能及壽命密切相關(guān)紅細胞的變形性有助于機體對異常紅細胞的清除膜變形性也有利于防止未成熟紅細胞進入血循環(huán)紅細胞的變形性影響因素:

①膜骨架蛋白組分和功能狀態(tài)②膜脂質(zhì)流動性大有利于變形③細胞表面積與細胞體積比值④血紅蛋白的質(zhì)和量

第18頁,共55頁，星期六，2024年，5月紅細胞的免疫功能①清除免疫復合物的作用

ICCR1和補體

②對淋巴細胞調(diào)控作用：BTNK

③紅細胞對吞噬細胞的作用CR1CR3

吞噬細胞FCRCR1CR3CR4④對補體活性調(diào)節(jié)

DAFMIRLC8

第19頁,共55頁，星期六，2024年，5月遺傳性球形紅細胞增多癥HereditaryspherocytosisHE第20頁,共55頁，星期六，2024年，5月遺傳性球形紅細胞增多癥

是一種紅細胞膜先天缺陷的溶血性貧血，其特點為慢性溶血過程常伴有急性發(fā)作，循環(huán)血液中球形紅細胞增多，紅細胞滲透脆性增高，并有不同程度的脾腫大和黃疸。世界各地均有發(fā)生，我國也有報道。遺傳規(guī)律常染色體顯性遺傳，兩性患病率相等。少數(shù)可為常染色體隱性遺傳。第21頁,共55頁，星期六，2024年，5月臨床分型根據(jù)病情，臨床可分為三型。輕型：約占1/4，多見于兒童。中間型：約占2/3，多見于成年人。重型：少數(shù)病人貧血嚴重，常依賴輸血。第22頁,共55頁，星期六，2024年，5月體征：主要為脾腫大，肝臟一般可以觸及，并有程度不一的黃疸和貧血。并發(fā)癥：常因感染、妊娠及其他因素而誘發(fā)溶血危象，但一般不太嚴重；誘發(fā)再障危象，一般較兇險，重者甚至可以致死；此外，膽結(jié)石常多見的并發(fā)癥，可出現(xiàn)阻塞性黃疸和感染的癥狀。第23頁,共55頁，星期六，2024年，5月實驗室檢查血象：血紅蛋白和紅細胞比積降低外周血涂片球形紅細胞明顯增多網(wǎng)織紅細胞計數(shù)增高，5％～10％紅細胞參數(shù)MCV大多正?；蜉p度減低，

MCHC大多增高致35％～38％第24頁,共55頁，星期六，2024年，5月球形紅細胞第25頁,共55頁，星期六，2024年，5月紅細胞滲透脆性試驗：增高，但有10％～20％的患者正常。紅細胞孵育脆性試驗：輕型患者也增加。自身溶血試驗：48小時紅細胞溶血率達10％～30％，甚至50％，加入葡萄糖或ATP，溶血程度顯著減輕。酸化甘油溶血試驗：陽性第26頁,共55頁，星期六，2024年，5月骨髓檢查紅系細胞增生明顯，晚幼和中幼紅細胞增生可占骨髓有核細胞的25％～60％，核分裂多見。再障危象時，骨髓中紅細胞顯著減少，粒巨細胞也減少，骨髓和外周血中網(wǎng)織紅細胞顯著減少。第27頁,共55頁，星期六，2024年，5月

(1)增生明顯活躍。

(3)紅細胞系顯著增生，幼紅細胞百分比常＞O．50，以中幼紅細胞為主，其他階段的幼紅細胞亦相應(yīng)增多，易見核分裂象。成熟紅細胞中易見大紅細胞、嗜多色性紅細胞及Howell-Jolly小體。

(4)粒細胞系相對減少,各階段比例及細胞形態(tài)大致正常。

第28頁,共55頁，星期六，2024年，5月其他檢查血清間接膽紅素增多糞膽原排泄明顯增高尿膽原增高血清鐵正?；蛟龈呒t細胞生存時間明顯縮短。SDS–PAGE電泳膜骨架蛋白減少第29頁,共55頁，星期六，2024年，5月鑒別診斷輕型或無貧血的病例易被忽視或誤診，網(wǎng)織紅細胞計數(shù)和骨髓檢查可發(fā)現(xiàn)溶血跡象。黃疸型病毒性肝炎免疫性溶血性貧血先天性非球形紅細胞貧血第30頁,共55頁，星期六，2024年，5月治療脾切除輸血再障危象治療第31頁,共55頁，星期六，2024年，5月遺傳性橢圓形紅細胞增多癥Hereditaryelliptocytosis第32頁,共55頁，星期六，2024年，5月遺傳性橢圓形紅細胞增多癥是一組高度異質(zhì)性疾病。各亞型之間的臨床表現(xiàn)，紅細胞形態(tài)分子病理學等都有區(qū)別，但共同特點是外周血中出現(xiàn)大量橢圓形、卵圓形或棒狀紅細胞，其中以橢圓形紅細胞為主，一般可高達50％～90％，國內(nèi)學者提出超過25％就有診斷意義。HE有家族遺傳史，大多數(shù)患者為常染色體顯性遺傳，少數(shù)為隱性遺傳。男女均可發(fā)病，多為雜合子，少數(shù)嚴重溶血者為純合子。第33頁,共55頁，星期六，2024年，5月臨床表現(xiàn)和分型HE臨床表現(xiàn)差異很大，分型亦頗復雜，一般按臨床分型可分為：隱匿性：無癥狀，無明顯溶血證據(jù)，為雜合子溶血代償型：有慢性溶血，但紅細胞生成良好，無貧血，脾可輕度腫大溶血性貧血型：有輕～中度貧血，間歇性黃疸和輕至中度脾腫大，且在慢性溶血過程中可發(fā)生膽石癥和再生障礙或溶血危象。國外報道隱匿型占85％，余兩型則在15％以內(nèi)。第34頁,共55頁，星期六，2024年，5月HE又可分為以下幾個亞型輕度溶血型可溶血及輕度貧血偶發(fā)溶血型只有在感染、妊娠時溶血加重，出現(xiàn)貧血嚴重溶血型為良性HE的純合子，出生后即出現(xiàn)溶血，紅細胞形態(tài)顯著異常，可見多數(shù)紅細胞碎片嬰兒期溶血型嬰兒期有中重度貧血，1歲后改善或消失熱敏感性異形紅細胞對熱敏感，遇熱后易形成碎片。雜紅細胞增多癥合子溶血輕，純合子有嚴重溶血，是常染（HPP）

色體隱性遺傳，多見于黑人。第35頁,共55頁，星期六，2024年，5月實驗室檢查1.輕重不等的溶血性貧血的外周血和骨髓象改變，隱匿型可完全正常。2.典型表現(xiàn)為外周血涂片可見多數(shù)橢圓形紅細胞，呈橢圓、棒狀或卵圓形多種形態(tài)，占紅細胞的25％以上。可伴有少數(shù)異形紅細胞或球形紅細胞。3.少數(shù)兼有球形特征的橢圓形紅細胞增多癥，滲透脆性試驗和自身溶血試驗增高。4.膜電泳檢查有助于確定膜分子病變。第36頁,共55頁，星期六，2024年，5月橢圓形紅細胞第37頁,共55頁，星期六，2024年，5月鑒別診斷1.不少貧血也可見到橢圓形紅細胞，但數(shù)量不多，但同時有顯著的各類異形紅細胞增多。2.HE有溶血危象時，紅細胞形態(tài)不一，大小不等，橢圓形紅細胞相對減少，則須與非球形細胞性溶血性貧血相鑒別，做家族紅細胞形態(tài)觀察有助于鑒別。第38頁,共55頁，星期六，2024年，5月遺傳性口形紅細胞增多癥HereditarystomatocytosisHSt第39頁,共55頁，星期六，2024年，5月HST是一組較為罕見的常染色體顯性遺傳的慢性溶血性疾病特征周圍血液中口形紅細胞增多，有輕重不等的溶血和陽性家族史?；静±砀淖兡﹃栯x子通透性增高。臨床表現(xiàn)溶血輕重不一，輕者只有紅細胞口形變而無臨床表現(xiàn)，因此不易發(fā)現(xiàn)；重者除貧血外，可有黃疸、肝脾腫大等慢性溶貧的癥狀和體征。第40頁,共55頁，星期六，2024年，5月實驗室檢查血象貧血一般輕微，血紅蛋白一般很少低于80～100g/L，網(wǎng)織紅細胞中度增高（10％～20％），MCV增高，MCHC降低，外周血片口形紅細胞可達10％～50%。溶血試驗紅細胞脆性增高，自身溶血試驗陽性，葡萄糖或ATP可糾正。第41頁,共55頁，星期六，2024年，5月口形紅細胞第42頁,共55頁，星期六，2024年，5月診斷和鑒別診斷依據(jù)家族史和外周血紅細胞增多即可診斷?？谛渭t細胞還可見于輕型地貧、肝病、肌強直癥、氯丙嗪或長春新堿治療后，急性酒精中毒、傳單、SLE等。第43頁,共55頁，星期六，2024年，5月陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿癥paroxysmalnocturnalhemoglobinuriaPNH第44頁,共55頁，星期六，2024年，5月PNH是一種后天獲得性造血干細胞基因突變引起的紅細胞膜異常的溶血性貧血。本病異常的紅細胞起源于有缺陷的造血干細胞，是一種克隆性疾病。由于紅細胞膜缺乏控制補體溶血的蛋白，使紅細胞對補體介導的溶血敏感而發(fā)生溶血性貧血，粒細胞和血小板也因膜異常易被補體或抗體溶解破壞。睡眠中組織器官酸度增高可能為本病紅細胞破壞的適當環(huán)境。第45頁,共55頁，星期六，2024年，5月1.發(fā)病隱襲，病程遷延，病情輕重不一2.陣發(fā)性或加重發(fā)作性血紅蛋白尿是典型癥狀3.合并感染較為常見診斷要點第46頁,共55頁，星期六，2024年，5月4.實驗室檢查

血象全血細胞減少，正色素性或低色素性貧血，多嗜紅細胞增高，網(wǎng)織紅細胞增高。血小板數(shù)常減少，也可正常。骨髓象增生多為活躍或明顯活躍，少數(shù)減低或重度減低。粒紅巨三系均增殖，或僅紅系增生好，粒或巨核系增生低下。第47頁,共55頁，星期六，2024年，5月血液生化檢查急性溶血時，可見非結(jié)合膽紅素升高，血漿游離血紅蛋白、高鐵血紅蛋白、乳酸脫氫酶均升高，而血漿結(jié)合珠蛋白和血鐵蛋白減少。尿血紅蛋白尿發(fā)作期，