中藥檢驗技術(shù)課件

中藥檢驗技術(shù)中藥檢驗技術(shù)中藥檢驗技術(shù)我國新世紀中藥發(fā)展戰(zhàn)略

我國是中藥的發(fā)源地，但近年來發(fā)展滯后，在國際中藥市場上已落后于日本、韓國。我國新世紀中藥發(fā)展戰(zhàn)略旨在推進中藥產(chǎn)業(yè)化、現(xiàn)代化進程，力爭在這個世界各國競相發(fā)展的朝陽產(chǎn)業(yè)領(lǐng)域搶占先機。中藥檢驗技術(shù)我國新世紀中藥發(fā)展戰(zhàn)略新世紀中藥發(fā)展戰(zhàn)略的要點：以創(chuàng)新為核心，加速中藥現(xiàn)代化進程以標準為重點，提高中藥產(chǎn)品質(zhì)量面向市場，積極推進中藥產(chǎn)業(yè)發(fā)展加強中藥資源保護優(yōu)勢集成，共同推進中藥現(xiàn)代化發(fā)展中藥檢驗技術(shù)我國新世紀中藥發(fā)展戰(zhàn)略以創(chuàng)新為核心，加速中藥現(xiàn)代化進程。古老的中藥產(chǎn)業(yè)當務(wù)之急是實現(xiàn)現(xiàn)代化，不能再一味依靠“祖?zhèn)鳌?，大膽?chuàng)新才有出路。我國將繼承和發(fā)揮中醫(yī)藥特色和優(yōu)勢，以創(chuàng)新為核心，吸納多種現(xiàn)代先進科學技術(shù)，包括信息技術(shù)、生物技術(shù)及植物藥研發(fā)技術(shù)等先進技術(shù)手段，加強理論創(chuàng)新、技術(shù)創(chuàng)新及產(chǎn)品創(chuàng)新，加快創(chuàng)新平臺建設(shè)，在創(chuàng)新中發(fā)展，在發(fā)展中創(chuàng)新。中藥檢驗技術(shù)我國新世紀中藥發(fā)展戰(zhàn)略

以標準為重點，提高中藥產(chǎn)品質(zhì)量。標準化程度不高，是中藥走向國際市場的主要障礙。中藥標準對于保證中藥產(chǎn)品的安全有效、質(zhì)量可控具有重要意義。目前，國際上還沒有公認的中藥標準。我國必須加快建立符合中藥特點的、科學的、能為國際公認的現(xiàn)代中藥標準。中藥檢驗技術(shù)我國新世紀中藥發(fā)展戰(zhàn)略面向市場，積極推進中藥產(chǎn)業(yè)發(fā)展。中醫(yī)藥科技發(fā)展必須瞄準國內(nèi)外需求，在保證中藥療效的前提下，改進中藥傳統(tǒng)劑型，提高質(zhì)量控制水平，加快療效確切、使用安全、質(zhì)量可控的中藥新產(chǎn)品的開發(fā)，實現(xiàn)傳統(tǒng)中藥產(chǎn)業(yè)向現(xiàn)代中藥產(chǎn)業(yè)的跨越。中藥檢驗技術(shù)我國新世紀中藥發(fā)展戰(zhàn)略

加強中藥資源保護。近年來，生態(tài)惡化和資源破壞是威脅中藥發(fā)展的重點因素。中藥必須可持續(xù)發(fā)展戰(zhàn)略。開發(fā)中醫(yī)藥的同時，必須注意資源及生態(tài)環(huán)境的保護，保障中藥材資源的可持續(xù)利用，保障中藥產(chǎn)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展。而保障中醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展，其根本出路在于科技進步。中藥檢驗技術(shù)我國新世紀中藥發(fā)展戰(zhàn)略

優(yōu)勢集成，共同推進中藥現(xiàn)代化發(fā)展。政府通過制定國家戰(zhàn)略目標、創(chuàng)造良好發(fā)展環(huán)境，宏觀引導中藥現(xiàn)代化發(fā)展的方向，集成高等院校、科研機構(gòu)、制藥企業(yè)等多方面力量，發(fā)揮區(qū)域優(yōu)勢，通過整體布局、資源重組、機制創(chuàng)新，構(gòu)筑研發(fā)體系。棗中醫(yī)中藥相互促進，協(xié)同發(fā)展。中醫(yī)、中藥密不可分。中藥是在中醫(yī)理論的指導下發(fā)揮其治療、保健、康復(fù)等重要作用的。加強中醫(yī)臨床診療規(guī)律的研究，促進中醫(yī)、中藥協(xié)同發(fā)展。中藥檢驗技術(shù)目前中藥材及中成藥的檢驗方法有性狀鑒別、顯微鑒別、理化鑒別、色譜分析、光譜分析及其他儀器分析等技術(shù)。在繼承傳統(tǒng)經(jīng)驗鑒別的同時,積極開發(fā)應(yīng)用新技術(shù)、新方法。實踐證明,儀器分析枝術(shù)在中藥檢驗工作中有廣闊前途,逐步實現(xiàn)中藥檢驗的規(guī)范化、現(xiàn)代化和科學化是完全可能的。中藥檢驗技術(shù)中藥是中醫(yī)防病治病的物質(zhì)基礎(chǔ),是保征中醫(yī)療效的重要標志之定,中藥的質(zhì)量好壞,直接關(guān)系著億萬人民的身體健。但由于種種原因和歷史條件所限制,再加上一些不法分子人為的偽造及摻假,致使中藥較為復(fù)雜、混亂,收假、收錯、誤用錯種屢有發(fā)生。為保征人民用藥安全有效,必須提高我們的中藥檢測水平,開展新技術(shù)的研究應(yīng)用,適應(yīng)新形勢的發(fā)展的需要,根據(jù)不同情況,采用不同的檢驗方法和技術(shù),作出正確的結(jié)論,供衛(wèi)生行政部門處理。中藥檢驗技術(shù)中成藥是祖國醫(yī)藥學寶貴遺產(chǎn)的重要組成部分,在國內(nèi)外享有很高的信譽。實現(xiàn)中藥評價的科學化和標準化有利于中醫(yī)藥走向世界[1]]。在新藥的研制過程中,《新藥審批辦法》[2]中明確要求要制定臨床研究用質(zhì)量標準及生產(chǎn)用質(zhì)量標準;目的是確保臨床研究用藥品的穩(wěn)定一致及上市藥品的質(zhì)量,從而保證藥品的安全有效.質(zhì)量標準伴隨產(chǎn)品從始至終.[3]加強中藥新制劑的質(zhì)量標準研究,使中成藥制劑納入規(guī)范化,勢在必行,使祖國醫(yī)藥走出國門,走向世界。中藥檢驗技術(shù)一、藥品應(yīng)具有安全性,有效性,穩(wěn)定性及質(zhì)量可控性。藥品質(zhì)量標準應(yīng)反映上述性質(zhì)。同時還必須具有權(quán)威性，科學性及當代研究水平[4];藥品標準是國家宏觀管理藥品質(zhì)量的手段之一。藥品標準是保證人民用藥安全與有效所必須，是必需遵循的法定依據(jù)。中藥檢驗技術(shù)一、藥品應(yīng)具有安全性,有效性,穩(wěn)定性及質(zhì)量可控性。精密儀器的不斷發(fā)展給中藥新制劑質(zhì)量標準提供了先進的方法手段，如用氣相色譜法、高效液相色譜法、色譜－光譜－計算機聯(lián)用技術(shù)、薄層掃描法、核磁共振波譜法、超臨界流體色譜法等先進技術(shù)和設(shè)備來研究分析中藥質(zhì)量在常規(guī)分析技術(shù)方面采用導數(shù)光譜分析多種成分，也用比色法、薄層層析－紫外分光光度法；分析方法是新、老技術(shù)，現(xiàn)代與傳統(tǒng)方法并上。中藥檢驗技術(shù)一、藥品應(yīng)具有安全性,有效性,穩(wěn)定性及質(zhì)量可控性。我國對中藥（包括藥材和成藥）的深入研究報道有每年遞增的趨勢，這表明中藥質(zhì)量的控制和制訂質(zhì)量標準是勢在必行的，并為之提供了有利的條件。目前許多質(zhì)量標準尚停留在經(jīng)驗鑒別及簡單的理化鑒別階段,尤其是地方標準及保健品的質(zhì)量標準,末能很好地控制藥品的質(zhì)量.質(zhì)量標準測試都是在化學成分上,中成藥質(zhì)量標準仍然面臨著如何制訂高水平而又實際可行的質(zhì)量標準內(nèi)容問題。中藥檢驗技術(shù)一、藥品應(yīng)具有安全性,有效性,穩(wěn)定性及質(zhì)量可控性。而現(xiàn)行質(zhì)量標準的嚴肅性又受到兩方面的挑戰(zhàn)，即由于部分標準本身欠完善，因此損害了它的權(quán)威形象；另外少數(shù)人質(zhì)量意識很差，視標準無物[５]。中藥檢驗技術(shù)一、藥品應(yīng)具有安全性,有效性,穩(wěn)定性及質(zhì)量可控性。但中藥成分十分復(fù)雜,中藥制劑大多由中藥藥材粉末或浸膏制成，質(zhì)量難控制，對有效成分定性或定量的干擾較大[８]。且中藥新制劑是在中醫(yī)藥理論指導下用藥,通過各味產(chǎn)生的綜合效能而達到治療的目的,單用一兩個化學成分是不能完全作為臨床的評定指標的,建立在現(xiàn)代理化分析基礎(chǔ)上的質(zhì)量標準是一個控制標準，或者說是一個不完全的評定指標，這與化學藥品不同,但通過這一質(zhì)量標準起到了保證藥品質(zhì)量的控制作用。中藥檢驗技術(shù)一、藥品應(yīng)具有安全性,有效性,穩(wěn)定性及質(zhì)量可控性。同時，中藥新制劑的質(zhì)量標準的研究也能夠完全保證在整個藥效研究和臨床研究過程中所提供樣品的質(zhì)量穩(wěn)定性。中成藥質(zhì)量標準,其目的在于起著控制產(chǎn)品質(zhì)量的穩(wěn)定性,要達到可控,就必須要求各項制定的內(nèi)容切實，能充分反映出該制劑所含藥品的真實性，劑型的穩(wěn)定性及純度和品質(zhì)的優(yōu)良度。但目前中成藥還沒一個切實可行的評價標準。中藥檢驗技術(shù)二、《新藥審批辦法》對中藥新制劑質(zhì)量標準的要求：中藥新制劑的質(zhì)量標準及其目的控制產(chǎn)品的終端。它必須在處方固定和原料質(zhì)量、制備工藝穩(wěn)定的前提下進行。其內(nèi)容包括：名稱（中文名）、漢語拼音名稱、處方、制法、性狀、鑒別、檢查、含量測定、功能和主治、用法和用量、禁忌、注意、規(guī)格、貯藏、使用期限等項目，以及起草說明。中藥檢驗技術(shù)二、《新藥審批辦法》對中藥新制劑質(zhì)量標準的要求：《新藥審批辦法》中有關(guān)命名有明確的要求,中成藥名稱應(yīng)是對該中成藥藥物組成、藥理作用和主治病癥的概括,因此一個藥品的名稱是否恰當,有時會影響到人們對該藥品的認識和接受程度。中藥檢驗技術(shù)二、《新藥審批辦法》對中藥新制劑質(zhì)量標準的要求：科學的命名則是中成藥質(zhì)量標準的重要組成部分[６]。一個新藥命名恰到好處時，能起到“命名效應(yīng)”，事半功倍的收獲[7]。使名稱頂向于作用與用途是主要的發(fā)展方向，但由于藥品相同功能和療效較多，應(yīng)避免混同中藥檢驗技術(shù)二、《新藥審批辦法》對中藥新制劑質(zhì)量標準的要求：處方中各藥味排列應(yīng)根據(jù)中醫(yī)藥理論，按君、臣、佐、使的順序排列。各組份（含輔料）應(yīng)符合法定標準。如原料藥材是多種來源時，應(yīng)按實際使用的品種收入標準，品種存在有混亂情況，必須以具體品種收入標準。無法定標準的組分，要另制定相應(yīng)的標準[9]。處方中藥材用量一般控制成1000粒（或片、ｍl等）。實際應(yīng)用時，按折算投料。中藥檢驗技術(shù)二、《新藥審批辦法》對中藥新制劑質(zhì)量標準的要求：制法項應(yīng)在保證質(zhì)量的前提下，敘述處方各味藥處理的簡單工藝，使用藥味，輔料的名稱及用量，制成的劑型，制成品數(shù)量等。保密品種制法可略。但應(yīng)提供可作為衛(wèi)生檢查結(jié)果判斷依據(jù)的說明（如是否含生藥粉及動物藥味、防腐劑等）。目前許多保密品種提供，以致造成衛(wèi)生學檢查難于按規(guī)定下結(jié)論。中藥檢驗技術(shù)二、《新藥審批辦法》對中藥新制劑質(zhì)量標準的要求：性狀包括成品的顏色、外形、氣味。通常是除去包裝及包衣或囊殼后的實際情況擬定。外用藥不描述味。性狀項的描述應(yīng)是多批樣品綜合描述，且是在初步穩(wěn)定性試驗和穩(wěn)定性實驗過程中的實際觀察情況擬定，因此，規(guī)定應(yīng)有一定的范圍[9]。如“安宮牛黃丸”規(guī)定為黃橙色至紅褐色。中藥檢驗技術(shù)二、《新藥審批辦法》對中藥新制劑質(zhì)量標準的要求：中藥制劑多為復(fù)方，鑒別的目的是為了確定該組份中藥材的存在、真?zhèn)魏图兌?，或某一成分是否含有，?fù)方制劑并非全部藥味都要求鑒別，但方中君藥，貴重藥劇毒藥應(yīng)首選。所選擇的鑒別藥味應(yīng)盡可能全，一般要求應(yīng)占總藥味的３0％以上[9]。中藥檢驗技術(shù)二、《新藥審批辦法》對中藥新制劑質(zhì)量標準的要求：有成熟藥味的鑒別方法應(yīng)選上，鑒別方法按經(jīng)驗鑒別、顯微鑒別，理化鑒別、色譜鑒別的順序排列，所選用的方法要求既有專屬性又應(yīng)有先進性。中藥檢驗技術(shù)二、《新藥審批辦法》對中藥新制劑質(zhì)量標準的要求：（1）經(jīng)驗鑒別，其方法包括形狀、表面、顏色、氣、味、水試、火試、水火共試等。如有許多中藥材可用水試進行鑒別[10]。但經(jīng)驗鑒別多已納入性狀項。在選擇經(jīng)驗鑒別方法時，應(yīng)注意使用任何人都能夠簡單地進行試驗檢查的方法。中藥檢驗技術(shù)二、《新藥審批辦法》對中藥新制劑質(zhì)量標準的要求：（2）顯微鑒別，適用于含生藥或部分生藥粉末的制劑，中藥新制的顯微鑒別也是專屬、快速、簡便、準確的科學方法，有著可靠的實際應(yīng)用價值。通過用顯微鏡來觀察，擇其具專屬性組織特征，作為鑒別依據(jù)，從而判斷組份有無、真?zhèn)?，純度，品質(zhì)。例如有人總結(jié)出草酸鈣結(jié)晶體在被子植物中的分布規(guī)律作為其鑒別依據(jù)[１１]。同時應(yīng)用顯微化學方法或微量升華顯微法確定某些化學成分[12]。中藥檢驗技術(shù)二、《新藥審批辦法》對中藥新制劑質(zhì)量標準的要求：其步驟可分為：1、直接取樣法；2、刮取法；3、研磨取樣法；4、離心取樣法；前兩法應(yīng)注意取樣的代表性。對含量少或含有糖分較多和粘稠的樣品，可采取加水離心清洗的辦法，取沉淀物制片。顯微待特征的觀察應(yīng)在三個以上批次的樣品。每批次應(yīng)不低于5張片。中藥檢驗技術(shù)二、《新藥審批辦法》對中藥新制劑質(zhì)量標準的要求：在起草說明中應(yīng)繪制墨線詳圖，繪圖應(yīng)有粗細、比例或放大倍數(shù)。采用簡圖必須按規(guī)范的組織顯微特征簡圖表示法[13]。另外隨著科學儀器的普及，將電子顯微鏡或掃描電子顯微鏡應(yīng)用于中藥新制劑的鑒定是可行的，尤其是在含有種子類中藥的鑒別，掃描電鏡可觀察到某些細微特征予以鑒別中藥檢驗技術(shù)二、《新藥審批辦法》對中藥新制劑質(zhì)量標準的要求：（3）理化鑒別是反映中藥新制劑所含的有效成分或有效部位及其特征成分的理化性質(zhì)，來鑒別真?zhèn)巍⒓兌然虼嬖?。由于理化反?yīng)凡有相同功能團的成分，均可能呈正反應(yīng)，因此專屬性不強。主要在制定質(zhì)量標準初期階段作為成分預(yù)試篩選試驗，不宜作為標準中的最終鑒別項目。中藥檢驗技術(shù)二、《新藥審批辦法》對中藥新制劑質(zhì)量標準的要求：理化鑒別應(yīng)進行空白對照，經(jīng)確實沒有干擾，并有一定的專屬性方可采用。處方中藥味數(shù)較少時或含礦物藥或提取物時，可盡可能多作理化鑒別。處方中有升華物時采用微量升華，在顯微鏡下觀察結(jié)晶，再利用顯色反應(yīng)進行鑒別。對含多味藥的新藥制劑，不宜采用理化反應(yīng)來進行鑒別。中藥檢驗技術(shù)二、《新藥審批辦法》對中藥新制劑質(zhì)量標準的要求：因為各藥味成分復(fù)雜，含有相同功能基團的成份較多，容易造成干擾。對于熒光鑒別時，如供試液點于濾紙上，置紫外光燈（365ｎｍ）或（254ｎｍ）下觀察，所顯的顏色判斷，必須注意操作的細節(jié)，在斑點末干及干后的斑點熒光顏色，往往有所不同；另外在噴以三氯化鋁等試劑時，有時需要加熱100℃烘后斑點顏色方可明顯，因此，標準中應(yīng)明確注明，否則將產(chǎn)生錯誤的判斷結(jié)果。中藥檢驗技術(shù)二、《新藥審批辦法》對中藥新制劑質(zhì)量標準的要求：（4）色譜鑒別，色譜法的原理可概述為：當將樣品混合物注于固定相上（或流路中），并由另一個流動相流過此固定相時，由于樣品混合物中各組分在不同的兩相中溶解、解析、吸附、脫附，或其它親和作用性能的差異，當兩相作相對運動時，使各組分在兩相中反復(fù)多次受到上述各作用力的不同而以不同的速度在固定相上移動，從而得到互相分離中藥檢驗技術(shù)二、《新藥審批辦法》對中藥新制劑質(zhì)量標準的要求：色譜法可分為多種，但在中藥制劑色譜鑒別試驗中，應(yīng)用量多的是薄層色譜法（ＴＬＣ）。在中藥制劑中，用薄層圖譜與對照品（或?qū)φ账幉模┑膱D譜相比較，即可鑒別出有效成分或特征成分，尤其是有效成分尚不明確時，顯微鑒別法不能使用時，更顯示薄層色譜法的實用性及優(yōu)越性。但薄層鑒別試驗設(shè)計，必須注意目的性、針對性、重現(xiàn)性和準確性；因此要求比較嚴格，有所規(guī)定。中藥檢驗技術(shù)二、《新藥審批辦法》對中藥新制劑質(zhì)量標準的要求：由于樣品多為復(fù)方，成分復(fù)雜，干擾成分較多，薄層鑒別要設(shè)陰性對照實驗，試驗條件要經(jīng)過優(yōu)選，薄層色譜圖應(yīng)有多批樣品均有重現(xiàn)性。影響薄層色譜的條件較多，樣品在與對照品(提取物對照或?qū)φ账幉?的薄層色譜圖和陰性對照下，在同一板上得到證實時，才能作為判斷標準。通過拍攝彩照可將薄層板所提供的全部信息（斑點）完整地以照片形式記錄下來，從而得到永久性的指紋照片（薄層色譜圖），以反映其真實性中藥檢驗技術(shù)二、《新藥審批辦法》對中藥新制劑質(zhì)量標準的要求：實驗條件的展開劑選擇應(yīng)有三種以上均能證明供試品中的欲鑒別成分與對照品的層析行為一致，再從中選取較好的一個條件列入質(zhì)量標準正文中，其余展開方法寫入說明中。在選用對照品(單體)進行薄層色譜鑒別時,確切地說其鑒別結(jié)果只能證明是否含某一成分,而不一定能確證是否含某藥材[17]。中藥檢驗技術(shù)二、《新藥審批辦法》對中藥新制劑質(zhì)量標準的要求：當所檢成分為制劑中數(shù)種藥味所共有時,應(yīng)選用藥材對照品,因為其色譜圖提供的“指紋譜”鑒別特征更多，專屬性更強；如“牛黃上清丸”中黃連的TLC鑒別,用鹽酸小檗堿對照品及黃連對照藥材同時進行[１8]。但應(yīng)選用地道藥材作為對照品，對多種來源的藥材，應(yīng)對各種進行考察，找出共同的特征斑點作為鑒別依據(jù)。中藥檢驗技術(shù)二、《新藥審批辦法》對中藥新制劑質(zhì)量標準的要求：在選用對照藥材時，從樣品得到的色譜不一定與其它色譜完全一致，但主要斑點一致，以能夠作出準確的判斷；但正文中應(yīng)寫成樣品的色譜圖與對照藥材的色譜圖的主斑點一致；但中藥成分復(fù)雜；明顯主斑點有的較多，與對照藥材的明顯斑點不完全一致，往往給判斷結(jié)果帶來困難；造成這一原因主要對照藥材溶液的提取方法、純化方法與樣品供試液工藝、供試液制備方法不完全一致。中藥檢驗技術(shù)二、《新藥審批辦法》對中藥新制劑質(zhì)量標準的要求：因此，在設(shè)計薄層鑒別時應(yīng)注意不同工藝和不同劑型的特點，應(yīng)注意工藝是水煮提取還是醇提；對照藥材溶液制備時應(yīng)注意一致，否則，所得的供試品色譜與對照藥材溶液品色譜圖不一致或不完全一致的情況。中藥檢驗技術(shù)二、《新藥審批辦法》對中藥新制劑質(zhì)量標準的要求：有人提出對照藥材溶液應(yīng)“精提”，但中藥成分復(fù)雜，對照品過于“精提”，有時會出現(xiàn)“假陽性”情況,即“指紋斑點”少，專屬性差。因此，必須作陰性對照試驗；陰性試驗可以采用未加鑒別的藥味來進行；也可采用將所有藥味均各按圖中方法制成供試品溶液后點于同一薄層板上一齊展開；看其它藥味有無干擾。但前法應(yīng)用較多，可以避免各藥味混合后產(chǎn)生反應(yīng)所帶來的“假陽性”結(jié)果。后法一般不采用；但作為質(zhì)量標準制定時，為選擇有鑒別特征藥味的薄層色譜時，采用此方法將大為方便。中藥檢驗技術(shù)二、《新藥審批辦法》對中藥新制劑質(zhì)量標準的要求：影響薄層色譜分析的因素較多[19],[20];重現(xiàn)性容易受影響；操作條件規(guī)范化尚待統(tǒng)一；環(huán)境因素如溫度影響較大，因此薄層板、點樣、展開、顯色等都要符合規(guī)范化要求。中藥檢驗技術(shù)二、《新藥審批辦法》對中藥新制劑質(zhì)量標準的要求：規(guī)范化的要求包括：（I）儀器與材料；（II）操作技術(shù)及實驗環(huán)境。此外,用于中(成)藥鑒別的方法還有:(1)薄層掃描法;(2)氣相色譜法;(3)高效液相色譜法;(4)電泳法;(5)熒光法;(6)紫外分光光度法;(7)紅外分光光度法等，但應(yīng)用較少。中藥檢驗技術(shù)二、《新藥審批辦法》對中藥新制劑質(zhì)量標準的要求：檢查中成藥制劑的通則檢查,依照《中國藥典》2000年附錄有關(guān)規(guī)定，如果末能控制在通則項下的要求，則應(yīng)在正文中另設(shè)檢查限度，起草說明中列出具體數(shù)據(jù)及說明規(guī)定的理由，且致少應(yīng)有10個批次20個數(shù)據(jù)指標的要求。中藥檢驗技術(shù)二、《新藥審批辦法》對中藥新制劑質(zhì)量標準的要求：含量測定含量測定是質(zhì)量標準的核心部分，含量測定是用現(xiàn)代理化分手段上測試藥物所得到的結(jié)果。正確合理的控制標準，是提高質(zhì)量標準可靠的關(guān)鍵所在。中藥檢驗技術(shù)二、《新藥審批辦法》對中藥新制劑質(zhì)量標準的要求：含量測定的方案設(shè)計按《新藥審批辦法》的要求制訂，選擇處方中君藥及臣藥的有效成分做為含量測定指標。對君、臣藥應(yīng)予以高度重視，力求找到合理檢測方法，否則就得不到質(zhì)量保證；其次要對貴重藥、毒劇藥進行檢測，以確保藥效和用藥安全中藥檢驗技術(shù)二、《新藥審批辦法》對中藥新制劑質(zhì)量標準的要求：新藥審批還規(guī)定，如成品測定干擾較大難以測定時，應(yīng)對其原料（藥材）作含量控制，以間接控制成品質(zhì)量。主要有效成分或特征成分不清楚時，以總有效成分的限量測定（如總皂甙、總黃酮、總生物堿等）。在含量測定確實無法建立時，可將浸出物測定作為質(zhì)量控制項目，但必須具有針對性和控制質(zhì)量的意義。中藥檢驗技術(shù)二、《新藥審批辦法》對中藥新制劑質(zhì)量標準的要求：在選擇某個有效成分進行含量測定時。應(yīng)充分了解該成分的性質(zhì)，因為中藥新制劑多為復(fù)方，各藥味混合后各成分之間會發(fā)生轉(zhuǎn)化或變化；如含苦參堿類成分的藥味在煎煮或與還原性化合物的藥味存在時，均會發(fā)生轉(zhuǎn)化，氧化苦參堿的含量減少，而苦參堿的含量曾加[21],[22]；我們在進行“白山片”質(zhì)量標誰研究時，曾發(fā)生上述情況，本品為含有山豆根的復(fù)方制劑，因此用氧化苦參堿的含量來反映山豆根的質(zhì)量[23];在測定時應(yīng)特別注意其不穩(wěn)定性及提取條件的選定中藥檢驗技術(shù)二、《新藥審批辦法》對中藥新制劑質(zhì)量標準的要求：隨著科學技術(shù)的不斷發(fā)展，新的檢測手斷不斷完善，測定中成藥有效成分含量的方法手段越來越先進，但每種含量測定方法，則必須進行方法學考察試驗。含量測定方法不同，要求含量測定方法學的考察試驗內(nèi)容也有所不同。中藥檢驗技術(shù)二、《新藥審批辦法》對中藥新制劑質(zhì)量標準的要求：如薄層掃描方法學考察試驗包括：（1）待測斑點與對照品的一致性和分離度；（2）工作曲線；（3）精密度考察；（4）回收率試驗；（5）穩(wěn)定性考察；（6）檢出限度考察；（7）測定結(jié)果的計算與數(shù)據(jù)的統(tǒng)計檢驗。中藥檢驗技術(shù)二、《新藥審批辦法》對中藥新制劑質(zhì)量標準的要求：高效液相色譜法的考察試驗內(nèi)容包括：（１）色譜條件；（２）樣品前處理；（3）含量測定方法；（4）陰性對照試驗；（5）回收率試驗；（6）重現(xiàn)性試驗；（7）含量限度指標的確定。中藥檢驗技術(shù)二、《新藥審批辦法》對中藥新制劑質(zhì)量標準的要求：測定中成藥含量的方法很多，應(yīng)根據(jù)具體情況加以選擇；如用薄層層析比色法（或紫外分光光度法）測定含量的中成藥有：六味地黃丸,小兒奇應(yīng)丸,藿香正氣水等;用薄層掃描法測定含量的有:六味地黃丸,小兒奇應(yīng)丸,三黃片等;用氣相色譜法測定含量的有:桑菊感冒片,六神丸,冰硼散等;用高效液相色譜法測定含量的有:烏雞白鳳丸,楓蓼腸胃康沖劑,銀杏葉片等;用原子吸收光譜法測定含量的有:護肝片,陳香露白露片等。中藥檢驗技術(shù)三、現(xiàn)階段的質(zhì)量標準研究

多限于檢測其主要藥效成分;控制指標而且停留于改進和建立方法方面。而日本對中成藥質(zhì)量管理,要求含量測定最少應(yīng)有兩種以上的成分即“指標物質(zhì)”作含量；如含厚樸中成藥中厚樸酚及和厚樸酚的同時定量[36]；含知母中成藥中的知母皂甙B-II，知母皂甙A-III及芒果素的HPLC測定[37]。中藥檢驗技術(shù)三、現(xiàn)階段的質(zhì)量標準研究隨著中醫(yī)藥藥效學和化學研究的新進展，如何進一步運用多種檢測手段，建立檢測中成藥中能反映中醫(yī)療效的藥效成分的質(zhì)量控制指標,尤其是加強在與藥效有密切相關(guān)的微量元素[38]及與毒性相關(guān)的農(nóng)藥殘留物的檢測控制方面的研究。是深入研究傳統(tǒng)中成藥質(zhì)量的重要方面,也是祖國醫(yī)藥學走向世界的重要保證。中藥檢驗技術(shù)目前我們常用的中藥檢驗技術(shù)

一、基源鑒別

二、性狀鑒別

三、顯微鑒定

四、理化鑒別反應(yīng)

五、色譜分析

六、光譜分析

七、其他

中藥檢驗技術(shù)

一、基源鑒別:

就是應(yīng)用植(動)物的分類學知識,對中藥的來源進行鑒定,確定其正確的學名,以保證應(yīng)用的品種準確無誤[1、2]。對原植物的鑒定步驟如下:首先觀察植物形態(tài)對活的或比較完整的標本要注意標本的完整性,代表性,對植物標本特別注意繁殖器官,如標本不完整,無代表性,除對極個別品種的特征十分突出可以鑒定外,一般都要追究其原植物,包括深入到產(chǎn)地調(diào)查,采集實物標本,否則無法入手鑒定。根據(jù)已觀察到的形態(tài)特征,核對資料,結(jié)合鑒定人的分類經(jīng)驗,能初步確定科屬的,直接可查該科屬的資料;若對科屬都不能確定的,就必須查植物分科檢索表。當知道末知物是什么科屬時,可以到標本室核對已定學名的該科標本,或根據(jù)已知文獻核對已定學名的某種標本。動物藥材的鑒定也基本同上。中藥檢驗技術(shù)二、性狀鑒別

由于各種藥材來源不同,性狀上就有一定的特異點,性狀鑒別就針對這些特異點,對藥材的形、色、氣、味、大小、質(zhì)地、斷面等特征,通過眼看、手摸、鼻聞、口嘗、水試、火試等簡單方法,直接感觀藥材,作出符合實際的判斷。尤其是老藥工的傳統(tǒng)經(jīng)驗,更值得學習。但這是直觀鑒別,有一定的狹隘性和局限性,所以,必須開展新枝術(shù)的研究用。中藥檢驗技術(shù)三、顯微鑒定

顯微鑒定是簡捷可靠的中藥品種鑒定手段之一[3、4、5]。通過對中藥材的細胞組織及其內(nèi)含物的形態(tài)特征和理化檢測,植物器官等各部位的典型和異常的結(jié)構(gòu),各類動物解剖構(gòu)造和組織特點的光學鑒定常數(shù)等顯微特征,以對中藥材的真?zhèn)巫鞒稣_的判斷。尤其是對中國傳統(tǒng)中成藥,如用其中藥材粉末制成的膏、丹、丸、散之類制劑,原有的外表特征都已消失,用肉眼難于鑒別其真?zhèn)?即所謂“膏丹丸散,神仙難辨”的說法。而實際上,在處方工藝相對穩(wěn)定的情況下,可以在顯微鏡下,觀察藥材粉末顯微組織,根據(jù)其細胞的形態(tài)學特征,各種內(nèi)含物或其它微細特征加以鑒別,達到準確鑒別的目的。隨著顯微技術(shù)的發(fā)展,偏光顯微鏡,熒光顯微鏡,紫外光顯微鏡,顯微攝影技術(shù)等在中藥檢驗鑒定方面都得到迅速的應(yīng)用。中藥檢驗技術(shù)三、顯微鑒定

20世紀30年代,出現(xiàn)電子顯微鏡,它并非光學顯微鏡,但基本結(jié)構(gòu)與光學顯微鏡相似,所不同的是用電子流代替照明的光線,用電子源代替了光源,以及用特殊的電極或磁板(靜電透鏡或電磁透鏡)代替了光學顯微鏡的集光器,物鏡和目鏡的作用。它的分辨率比光學顯微鏡提高8萬倍,從此生物學入超微時代。但是,供電子顯微鏡需要用超薄切片機進行切片,標本厚為0.02～0.1微米。1938年出現(xiàn)了掃描電鏡,它放大范圍廣,可以方便地從10倍到20萬倍作連續(xù)掃描,分辨率更高,景深大,樣品不用切成薄片,3～5毫米厚的材料可直接放入觀察,它特別適合孢子、花粉、葉、花、種子、果實及其他薄片或粉末狀材料表面構(gòu)造的分析鑒定。最近有人應(yīng)用電子顯微鏡對海水珍珠和淡水珍珠研究發(fā)現(xiàn)斷層結(jié)構(gòu)有差異,解決了兩者鑒別上的難題。中藥檢驗技術(shù)四、理化鑒別反應(yīng)

每種中藥都含有一定成分,這些成分,尤其是活性成分,常能代表某些中藥的內(nèi)在質(zhì)量。理化檢驗就是利用中藥中存在的某些化學成分的性質(zhì),通過物理方法或化學反應(yīng)(為便于說明問題,儀器分析另分開討論),來鑒定中藥的真?zhèn)蔚馁|(zhì)量。隨著植化研究工作的發(fā)展,60～70年代,中藥質(zhì)量標準采用理化反應(yīng)幾乎成常規(guī)并在不斷提高、完善。但它也存在缺點,就化學鑒別有些只往往是鑒別某一類物質(zhì)(成分、化合物),專屬性較差,因此,后來許多鑒別反應(yīng)就逐步被薄層色譜所代替。中藥檢驗技術(shù)五、色譜分析

自從1906年茨維特成功利用吸附柱分離色素以來,色譜技術(shù)迅速發(fā)展,目前主要應(yīng)用于藥品檢驗上的色譜技術(shù)有:1、薄層色譜法

2、高效層色譜法:簡稱HPTLC3、熱餾薄層色譜法:簡稱TAS4、薄層掃描法:簡稱TLCS5、氣相色譜法:簡稱GC6、高效液相色譜法:簡稱HPLC中藥檢驗技術(shù)1、薄層色譜法

薄層色譜法簡稱TLC,是Kirchner等人在五十年代從經(jīng)典柱層析及紙層析的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種色譜技術(shù)[6],是目前中藥檢驗的最常用的鑒別方法,與薄層掃描儀聯(lián)合應(yīng)用,不可以進行含量測定。TLC具有設(shè)備簡單,操作方便,分離快速,靈敏度高,分辨率高,專屬性好的特點,顯色劑選擇性大,以及制備薄層載量大,而切割色譜方便等優(yōu)點,因此,在分離分析及少量制備工作中基本取代了紙層析及柱層析。由于TLC鑒別是考察藥品真實性的有效而簡單的手段之一,尤以對成分復(fù)雜的中藥有重要意義,比如,以前對熊膽與用其他膽汁偽造的偽熊膽,西洋參與用國產(chǎn)生曬參偽制的偽西洋參,以前用理化方法就很難加以鑒別,后來在廣卅市藥檢所謝培山老師的努力下,終于用TLC法解決了[7、8]?，F(xiàn)在,TLC已成為各級藥品檢驗所,各藥材公司及中藥廠的質(zhì)檢常規(guī)或強制性檢測手段。中藥檢驗技術(shù)1、薄層色譜法

TLC技術(shù)的應(yīng)用近年來發(fā)展迅猛,儀器設(shè)備,技術(shù)水平不斷提高,科學化,現(xiàn)代化,自動化及規(guī)范化正在不斷普及。廣卅市藥品檢驗所謝培山老師主編的《中國藥典中藥薄層色譜彩色圖集》已成為從事中藥檢驗工作的TLC鑒定的重要工具書[9],劉訓紅主編出版的《中藥薄層色譜鑒別》等許多有關(guān)TLC的資料[10、11、12],給我們提供了必不可少的參考資料。中藥檢驗技術(shù)2、高效層色譜法:簡稱HPTLC

HPTLC是在普通薄層基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種更靈敏、更精細的薄層技術(shù)[13]。與TLC不同主要在于HPTLC改進吸附劑更細,更勻(粒度5～7微米),因此提高了分離率(比普通薄層高三倍),增加檢出靈敏度,使斑點小圓,重現(xiàn)性增強,同時,點樣量減少在0.1微升以下,使原點控制在1毫米內(nèi),展開時間縮短,展距縮小,達到微量,快速,高效目的。中藥檢驗技術(shù)3、熱餾薄層色譜法:簡稱TAS

TAS是將微量樣品粉末5～10毫克,裝入耐熱玻璃管中,管底部用墊封閉,管壁用可調(diào)試金屬加熱,藥材受熱后揮發(fā)物質(zhì)隨含水分子篩的水蒸氣經(jīng)玻璃棉過濾后從毛細管逸出,點樣薄層板上,再用普通層析法層開。本法具有微量,自動的優(yōu)點,但目前實際檢驗中還極少應(yīng)用。中藥檢驗技術(shù)4、薄層掃描法:簡稱TLCS

以上所說的三種色譜法,都為定性鑒別用,而要定量常常需要將斑點洗脫,再用化學分析或儀器分析方法作定量測定。手工洗脫不但費時,而且損失較大,定量誤差也較大。1972年,日本島津公司首先推出CS-900型薄層掃描儀(又稱薄層光密度計),

用這種儀器對薄層上被分離的物質(zhì)(斑點)進行直接定量,就叫“薄層掃描法”。它的基本原理是采用一束長寬可以調(diào)節(jié)的一定波長,在一定強度的光,照射到被測薄層板的斑點上,進行斑點掃描(包括有紫外吸收的無色斑點),利用儀器測量通過斑點時光束強度的變化,而達到定性定量的目的。中藥檢驗技術(shù)4、薄層掃描法:簡稱TLCSTLCS儀已進入分離高效化,定量儀囂化,數(shù)據(jù)處理自動化的階段,尤其在中成藥檢測方面的含量測定應(yīng)用較多,如中國藥典收載的六味地黃丸含量測定等均應(yīng)用此法測定含量[14],許多專著及資料都已作大量報導[15、16、17、18]。一些中藥雖所含成分相同,用TLC鑒別有時不直觀,而用TLCS則很直觀,如目前一不法分子用人工引流熊膽充天然熊膽,用TLCS測定出熊去氧膽酸和鵝去氧膽酸的含量,如果熊去氧膽酸比鵝去氧膽酸的含量高,便是天然熊膽,否則是人工引流熊膽[19]。中藥檢驗技術(shù)5、氣相色譜法:簡稱GC

本法是采用氣體作流動相(稱載氣),色譜柱內(nèi)裝有吸附劑,高分子多孔小球或涂有固定液的載體。注入進樣口的供試品被加熱氣化,被載氣帶入色譜柱內(nèi)分離后,各成分先后進入檢測器,用記錄儀記錄色譜圖,從而進行定性和定量。目前本方法主要用于含揮發(fā)性成分的中藥定性和定量,許多含揮發(fā)性藥材及制劑,尤其進口藥油類的檢測多都是采用本法定性定量[20、21、22]。另外,有些很難鑒別的混淆品,如各種砂仁,可以應(yīng)用氣相色譜/質(zhì)譜分析研究,作為鑒定依據(jù)[23]。但本法對不能氣化的樣品,無揮發(fā)性的鹽類及許多無機物,則無能為力。中藥檢驗技術(shù)6、高效液相色譜法:簡稱HPLC

本法是將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖劑等作為流動相,用泵將流動相壓入裝有填充劑的色譜柱,注入供試品,經(jīng)流動相帶入柱內(nèi),用記錄儀記錄色譜圖,從而達到定性及定量的目的。本法應(yīng)用范圍比氣相色譜廣,只要樣品能制成溶液,就可進行分析,尤其是中藥的含量測定,更為適用。中藥檢驗技術(shù)6、高效液相色譜法:簡稱HPLC

由于衛(wèi)生部要求,申報新中藥時質(zhì)量標準必須有一項以上含量測定,否則不以批準。為此,申報單位、科研及藥檢部門投入大量時間、人力、物力及財力加以研究,其中,近年來高效液相用于含量測定最為突出,用高效液相作含量測定,具有分離效率高,快速,儀器化等優(yōu)點,中國藥典1985年版一部就開始收載此法,中藥質(zhì)量標準中用高效液相色譜法測定含量的資料就更多,如用反相高效液色譜法測定五味清濁散中胡椒堿含量[24]、高效液相色譜法測定鼻炎膠囊中葛根素的含量[25]等等。中藥檢驗技術(shù)六、光譜分析

1、紫外分光光度法:簡稱UV

2、紅外分光光度法:簡稱IR

中藥檢驗技術(shù)1、紫外分光光度法

紫外光照射某些物質(zhì)后,引起物質(zhì)內(nèi)部分子、電子或原子核間的運動變化,消耗一部分能量,然后透射出來,再通過梭鏡,可得到一組不連續(xù)光譜,根據(jù)光譜特征,如峰或谷的波長位置、數(shù)目、峰形、峰高等結(jié)合,對中藥進行定性及定量。雖然中藥成分復(fù)雜,但大多數(shù)中藥成分中含有共軛雙健結(jié)構(gòu)的成分,可產(chǎn)生紫外吸收,其光譜有一定的特異性,從而,為中藥鑒定提供了很有價值的光譜信息,借此判斷中藥的真?zhèn)蝺?yōu)劣。中藥檢驗技術(shù)1、紫外分光光度法隨著儀器的普及,紫外分光光度法在中藥檢驗中得到廣泛的應(yīng)用,四川省醫(yī)藥學?？蒲兴瘸袚摹八幉淖贤夤庾V鑒別研究”課題,1991年10月19日在成都通過專家鑒定。該研究采用全息特征的鑒別方法,將峰數(shù)、峰位、谷數(shù)、谷位、肩峰、相鄰峰高比值等可資利用的鑒別參數(shù),都用于進行鑒別,并將這些參數(shù)輸入電子計算機進行數(shù)據(jù)庫的微機處理。據(jù)測定出200組533種藥材及其混淆品在水、乙醇及環(huán)已烷三種不同溶劑中的紫外吸收曲線1599條,結(jié)果表明,絕大多數(shù)藥材可以利用紫外光譜進行鑒別。中藥檢驗技術(shù)1、紫外分光光度法如西紅花的摻偽品有菊科紅花、有用西紅花的非藥用部分加工而成、有各種植物部位加工制成品,雖然外觀很像,但其甲醇提液,照分光光度測定其吸收度,結(jié)果表明在458±1nm和432±1nm波長處有最大吸收,同時吸收度458nm與432nm的比值為0.84～0.90之間,而其他偽品或非藥用部位的吸收曲線與西紅花完全不同,為此可以用本法鑒別西紅花的真?zhèn)蝃26]。真龍心丹中的西紅花也是應(yīng)用紫外法進行鑒別的[27、28]。中藥檢驗技術(shù)2、紅外分光光度法

物質(zhì)分子在紅外線照射下,當紅外線一定波長的光能與分子各種運動能級相同時,就能吸收光能產(chǎn)生共振,于是產(chǎn)生對紅外線的選擇吸收,因此呈現(xiàn)出相應(yīng)的紅外吸收光譜。通常一般的中藥檢驗用紅外分光光度法鑒定真?zhèn)尾欢?主要用于推斷物質(zhì)分子結(jié)構(gòu)。中藥檢驗技術(shù)2、紅外分光光度法廣西藥檢所曾應(yīng)用紅外分光光度法對牛黃真?zhèn)芜M行研究,在1700～1550cm-1范圍內(nèi),天然牛黃有三個較強的特征吸收倒峰,A1663±9cm-1;B1628±4cm-1;C1566±10-1,因牛黃系混合物,其化學組成及各成分含量上不盡相同,故特征吸收峰位波動范圍稍大,但多次實驗表明,仍具有穩(wěn)定的鑒別意義[29]。還有報道對大黃及其偽品、厚撲及其偽品、西洋參及其偽品(人參)、白芍和赤芍的紅外光譜進行研究[2]。中藥檢驗技術(shù)七、其他

除上述中藥最常用的檢驗技術(shù)和方法外,色譜分析還有離子交換法,凝膠薄層色譜法,等電點聚焦薄層色譜法。光譜分析還有熒光分析法。此外還有液滴逆流技術(shù)、同步掃描技術(shù)、離子選擇電極的應(yīng)用、生物檢定技術(shù)(如洋地黃的含量測定[30])、電泳法(如對阿膠和蛤蚧的研究[2])等等。中藥檢驗技術(shù)我國藥典的重大修改

我國將對國家藥品標準的主體－－《中國藥典》從六個方面進行重大修改。修改后的《中國藥典》將突出中藥的標準化和現(xiàn)代化，成為我國藥典發(fā)展的一個里程碑。中藥檢驗技術(shù)我國