高中生物：實驗知識總結(jié)原理應(yīng)用和注意事項

高中生物：實驗知識總結(jié)，原理應(yīng)用

和注意事項

1.斐林試劑檢測可溶性還原糖

原理：還原糖+斐林試劑一磚紅色沉淀

注意：斐林試劑的甲液和乙液要等量混合均勻后方可使

用，而且是現(xiàn)用現(xiàn)配，條件需要水浴加熱。

應(yīng)用：檢驗和檢測某糖是否為還原糖；不同生物組織中

含糖量高低的測定;在醫(yī)學(xué)上進行疾病的診斷，如糖尿

病、腎炎。

2.蘇丹m、蘇丹w檢測脂肪3

原理：蘇丹m+脂肪一橘黃色；

蘇丹w+脂肪-紅色。

注意：脂肪的鑒定需要用顯微鏡觀察。

應(yīng)用：檢測食品中營養(yǎng)成分是否含有脂肪。

3.雙縮版試劑檢測蛋白質(zhì)3

原理：蛋白質(zhì)+雙縮服試劑一紫色

注意：雙縮脆試劑在使用時，先加A液再加B液，反應(yīng)

條件為常溫（不需要加熱）。

應(yīng)用：鑒定某些消化液中含有蛋白質(zhì);用于劣質(zhì)奶粉的鑒

定。

『0—4.碘液檢測淀粉展

原理：淀粉+碘液-藍色

注意：這里的碘是單質(zhì)碘，而不是離子碘。

應(yīng)用：檢測食品中營養(yǎng)成分是否含有淀粉

5.DNA的染色與鑒定..........

染色原理：DNA+甲基綠一綠色

應(yīng)用：可以顯示DNA在細胞中的分布。

鑒定原理：DNA+二苯胺一藍色

應(yīng)用：用于DNA粗提取實驗的鑒定試劑。

6.D比羅紅使RNA呈現(xiàn)紅色(J

原理：RNA+毗羅紅一紅色

應(yīng)用：可以顯示RNA在細胞中的分布。

注意：在觀察DNA和RNA在細胞中的分布時用的是甲基

綠和毗羅紅混合染色劑，而不是單獨染色。

7.臺盼藍使死細胞染成藍色

(H

原理：正常的活細胞，細胞膜結(jié)構(gòu)完整具有選擇透過性

能夠排斥臺盼藍，使之不能夠進入胞內(nèi);死細胞或細胞膜

不完整的細胞，胞膜的通透性增加，可被臺盼藍染成藍

色。

應(yīng)用：區(qū)分活細胞和死細胞;檢測細胞膜的完整性。

8.線粒體的染色

原理：健那綠染液是專一性染線粒體的活細胞染料，可

以使活細胞中的線粒體呈現(xiàn)藍綠色，而細胞質(zhì)接近無

色。

應(yīng)用：可以用高倍鏡觀察細胞中線粒體的存在。

5§.酒精的檢測0T

原理：橙色的重餡酸鉀溶液在酸性條件下與酒精發(fā)生

化學(xué)反應(yīng)，變成灰綠色。

應(yīng)用：探究醵母菌細胞呼吸的方式;制作果酒時檢驗是否

產(chǎn)生了酒精;檢查司機是否酒后駕駛。

uQ1℃。2的檢測點

原理：C02可以使澄清的石灰水變混濁，也可使溟麝香

草酚藍水溶液由藍變綠在變黃。

應(yīng)用：根據(jù)石灰水混濁程度或漠麝香草酚藍水溶液變黃

的時間長短，可以檢測酵母菌培養(yǎng)液中CO2的產(chǎn)生情

況。

11.染色體（或染色質(zhì)）的染色

(H

原理：染色體容易被堿性染料（如左膽紫溶液或醋酸洋紅

溶液）染成深色。

應(yīng)用：用高倍鏡觀察細胞的有絲分裂。

12.亞硝酸鹽的檢測出現(xiàn)玫瑰紅3

原理：在鹽酸酸化條件下，亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發(fā)

生重氮化反應(yīng)后，與N-1.奈基乙胺鹽酸鹽結(jié)合形成玫瑰

紅色染料。

應(yīng)用：將顯色反應(yīng)后的樣品與已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)液進行目

測比狡，可以大致估算出泡菜中亞硝酸鹽的含量。

13眼酶的檢測讓」

原理：細菌合成的眠酶可以將尿素分解成氨，氨會使培

養(yǎng)基的堿性增強，使PH升高，從而使酚紅指示劑變紅。

應(yīng)用：在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基加入酚紅指示劑，

培養(yǎng)某種細菌后，看指示劑變紅與否可以鑒定這種細菌

能否分解尿素。

14.伊紅美藍檢測大腸桿菌3

原理：在伊紅美藍培養(yǎng)基上，大腸桿菌的代謝產(chǎn)物(有機

酸)與伊紅美藍結(jié)合使菌落呈現(xiàn)黑色。

應(yīng)用：用濾膜法測定水中大腸桿菌的含量。

15.剛果紅檢測纖維素分解菌

(W

原理：剛果紅是一種染料，它可以與像纖維素這樣的多

糖物質(zhì)形成紅色復(fù)合物，但并不和水解后的纖維二糖和

葡萄糖發(fā)生這種反應(yīng)。當(dāng)在含有纖維素的培養(yǎng)基中加入

剛果紅時，剛果紅能與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合

物。當(dāng)纖維素被纖維素分解菌分解后，剛果紅?纖維素的

復(fù)合物就無法形成，培養(yǎng)基中會出現(xiàn)以纖維素分解菌為

中心的透明圈。

高中考綱規(guī)定教材的19個實驗可分為：

(1)顯微鏡觀察類實驗：一、三、四、六、十、十二；

(2)探究性實驗：七、九、十三、十五、十七、十九；

(3)驗證性實驗：二、八;

(4)模擬實驗：五、十一、十六;

(5)調(diào)查類實驗：十四、十八。

實驗一觀察DNA、RNA在細胞中的分布(必修一P26)

1、原理、步驟、結(jié)論

甲基爆+DNA呈瑰綠色

哦羅紅+RNA呈現(xiàn)紅色

DNNA

R在N

NA削用蒸隔水沖洗10s

中

胞

分

的

布

綠色主要集中在軍胞中央

綠色周圍的紅色范圍較廣

2、實驗注意事項

(1)選材：口腔上皮細胞或洋蔥內(nèi)表皮細胞(無色)【不能用紫色洋蔥表皮細胞

或葉肉細胞，防止顏色的干擾】

（2）緩水流沖洗目的：防止玻片上的細胞被沖走。

⑶幾種試劑在實驗中的作用

①0.9%NaCI溶液（生理鹽水）:保持口腔上皮細胞正常形態(tài)。

②8%鹽酸：a.改變細胞膜的通透性，加速染色劑進入細胞；b.使染色體中DNA

與蛋白質(zhì)分開，有利于染色。

③甲基綠叱羅紅染液：混合使用且需現(xiàn)配現(xiàn)用。

實驗二檢測生物組織中還原糖、脂肪和蛋白質(zhì)（必修一P18）

L實驗原理及步驟

…9盾l某些化學(xué)試劑能夠使組織中的有

歲竺學(xué)3關(guān)m有機物發(fā)生特定的顏色反應(yīng)

還原糖|步驟:選材—制備組織樣液f加斐林試劑

生物組的瓦運|一水浴加熱煮沸一顯色（磚紅色沉淀）

織中還

原糖、脂脂肪的|步驟:選材一制?加蘇丹m（或蘇丹W）

肪、蛋白鑒定染液染色一漂淤一鏡檢（橘黃色或紅色）

質(zhì)的鑒定

蛋白質(zhì)|步驟:選材一制備組織樣液一加雙縮

的鑒定脈試劑Af搖勻一加雙縮脈試劑B

------f觀察顏色（紫色）

2、實驗注意事項

（1）還原糖鑒定實驗材料要求：需為白色或淺色，且還原糖含量高。

【不能用綠色葉片、西瓜、血液等材料，防止顏色的干擾；不能用馬鈴薯（含淀

粉）、甘蔗、甜菜（含蔗糖）。】

（2）唯一需要加熱：還原糖鑒定，且必需水浴加熱，不能用酒精燈直接加熱。若

不加熱則無磚紅色沉淀出現(xiàn)。

（3）非還原糖（如蔗糖）+斐林試劑（水浴加熱），現(xiàn)象不是無色而是淺藍色

[Cu（0H）2的顏色]。

（4）唯一需要顯微鏡——脂肪鑒定,實驗用50%酒精的作用——洗掉浮色。

（5）斐林試劑：需混合加入,且現(xiàn)配現(xiàn)用；雙縮版試劑：需分別加入（先加A液,

后加B液）。

實驗三用顯微鏡觀察多種多樣的細胞（必修一P7）

L顯微鏡的使用

顯

微

鏡

的

使

用

方

法

事項

注意

用的

鏡使

顯微

2、

。

倍鏡

后高

倍鏡

：先低

后高

先低

。

倍數(shù)

放大

度"的

是"長

：指的

倍數(shù)

放大

數(shù)越

大倍

近，放

片越

離玻

鏡距

，物

越長

，物鏡

越短

：目鏡

關(guān)系

數(shù)的

大倍

與放

鏡頭

大。

較

的比

倍鏡

與低

倍鏡

3、高

圍

視野范

距離

片的

與玻

物置

度

視野高

胞數(shù)目

看到細

小

物像大

近

少

小

暗

大

高倍造

低倍鏡

大

遠

高

多

小

7）

一P4

（必修

綠體

和葉

粒體

察線

四觀

實驗

理

驗原

1、實

①葉綠體呈綠色，不需染色，制片后直接觀察。

②線粒體需用健那綠（專一性線粒體的活細胞染料）染成藍綠色后制片觀察。

2、實驗材料

①觀察葉綠體用辭類或菠菜葉片；

②觀察線粒體用人的口腔上皮細胞。

3、注意問題

①實驗過程中的臨時裝片要始終保持有水狀態(tài)。

②選鮮類、黑藻類葉：因為葉子薄而小，葉綠體清楚，可取小葉直接制片；

N

S海液

半透膜告斗Sz溶液

實驗五通過模擬實驗探究膜的透性(必修一P60)

1.滲透系統(tǒng)的組成(如圖)及條件

(1)半透膜：可以是具選擇透過性膜的生物膜，也可以是物理性的過濾膜。

(2)膜兩側(cè)的溶液具濃度差：是指物質(zhì)的量濃度，而非質(zhì)量濃度。

2、注意事項

①水分子的移動方向：可雙向移動，但整體上水分子是從低濃度-高濃度。

②達到滲透平衡后，只要存在液面差A(yù)h,則S1溶液的濃度仍大于S2溶液的濃

度。

③若S1為10%蔗糖溶液,S2為10%葡萄糖溶液（若都不能透過半透膜）,則水

分子由漏斗進燒杯使漏斗液面下降。

實驗六觀察植物細胞的質(zhì)壁分離和復(fù)原（必修一P61）

1、原理：成熟的植物細胞構(gòu)成滲透系統(tǒng)

2、流程

制作洋蔥鱗片葉表皮臨時裝片

(①有一個紫色的中央大液泡

用低倍顯微鏡觀[②原生質(zhì)層緊貼細胞壁

0.3

①中央液泡逐漸變小,顏色變深

用低倍顯微鏡觀察場)原生質(zhì)層與細胞壁逐漸分離

蓋玻片

吸水紙吸引*hr清水

/①中央液泡逐漸脹大，顏色變淺

低倍顯觀察

I②原生質(zhì)層逐漸貼近細胞壁

3、質(zhì)壁分離發(fā)生的條件

活的植物細胞、大液泡、濃度差

4、質(zhì)壁分離的原因分析

外因：外界溶液濃度＞細胞液濃度；

內(nèi)因：原生質(zhì)層相當(dāng)于一層半透膜，且細胞壁的伸縮性小于原生質(zhì)層；

表現(xiàn)：液泡由大變小，細胞液的顏色由淺變深，原生質(zhì)層與細胞壁逐漸分離。

5、特別提醒

(1)必須選擇有大液泡并有顏色的植物細胞，便于在顯微鏡下觀察。

(2)若用50%蔗糖溶液做實驗，能發(fā)生質(zhì)壁分離但不能復(fù)原，因為細胞過度失

水而死亡。

(3)若用尿素、KN03等溶液會出現(xiàn)自動復(fù)原現(xiàn)象。

實驗七探究影響酶活性的因素(必修一P78)

L酶的高效性——比較過氧化氫在不同條件下的分解

(1)實驗過程分析

(2)實驗注意事項

實驗時必須用新鮮的肝臟作實驗材料,若不新鮮細胞內(nèi)的過氧化氫酶等有機物可

能在細菌的作用失活。

2、酶的專一性

該實驗探究中的自變量可以是反應(yīng)物不同，也可是酶種類不同；因變量是反應(yīng)物

是否被分解。

（1）方案一：用同一種酶催化兩種不同物質(zhì)

;淀粉（非還原糖）淀粉酶。麥芽糖（還原糖）

:蔗糖（非還原糖）淀粉酶，蔗糖

②用淀粉酶分別作用于淀粉和蔗糖后，再用斐林試劑鑒

定，根據(jù)是否有磚紅色沉淀生成來判斷淀粉酶是否對二

者都有催化作用，從而探究酶的專一性。

方案二：用兩種不同酶催化同一種物質(zhì)

①J淀粉（非還原糖）麥芽糖（還原糖）

:淀粉（非還原糖）2^^淀粉

②再用斐林試劑鑒定，從而探究酹的專一性。

3、探究溫度對酶活性的影響

度

變

溫

淀粉和淀粉酶的量、溶

液的pH值和反應(yīng)時間等

因變淀粉分解量的多少（用碘液檢測

量

是否出現(xiàn)藍色及藍色深淺表示）

(1)實驗過程分析

(2)實驗注意事項

①由于過氧化氫酶受熱會分解，所以不能用過氧化氫為底物。

②由于斐林試劑在使用時需加熱，所以應(yīng)用碘液檢測因變量。

4、探究pH對酶活性的影響

思考：為什么不能用淀粉酶為底物探究pH的實驗？

答：因為淀粉在酸性條件下會分解，這對于判斷淀粉酶

能否使得淀粉水解出現(xiàn)干擾。故不能使用。

實驗八葉綠體色素的提取和分離(必修一P97)

L提取色素原理

色素能溶解在無水乙醇等有機溶劑中。

2、分離色素原理

各色素隨層析液在濾紙上擴散速度不同，從而分離色素。

【溶解度大，擴散速度快；溶解度小，擴散速度慢。】

3、各物質(zhì)作用

無水乙醇：溶解并提取色素；

層析液：分離色素；

二氧化硅：使研磨得充分；

碳酸鈣：中和液泡破損時釋放的有機酸，防止色素分子被破壞。

4、分離結(jié)果

濾紙條從上到下依次是"胡黃ab"?！旧貛У膶捳c色素含量相關(guān)】

實驗九探究酵母菌的呼吸方式(必修一P91)

L原理

有氧條件：C6H12O6+602+6H2O6-C02+12H2O+能量

無氧條件：C6H12O6-2C2H5OH+2CO2+少量能量

2、檢測

(1)檢測C02的產(chǎn)生：使澄清石灰水變渾濁，或使溪麝香草酚藍水溶液由藍

變綠再變黃。

(2)檢測酒精的產(chǎn)生：橙色的重鋁酸鉀溶液，在酸性條件下與酒精發(fā)生反應(yīng),

變成灰綠色。

實驗十觀察細胞的有絲分裂(必修一P115)

L材料

洋蔥根尖(或蔥，蒜)

2、步驟

(1)洋蔥根尖的培養(yǎng)

(2)裝片的制作流程：解離(解離液)一漂洗(清水洗3min)—染色(龍膽

紫或醋酸洋紅)-＞制片

3、觀察

(1)先在低倍鏡下找到根尖分生區(qū)細胞：細胞呈正方形，排列緊密，有的細胞

正在分裂。

(2)換高倍鏡下觀察：處于分裂間期的細胞數(shù)目最多。

4、注意問題

(1)為何每條根只能用根尖？取根尖的最佳時間是何時？為何？答：因為根尖

分生區(qū)的細胞能進行有絲分裂；上午10時到下午2時；因為此時細胞分裂活躍。

(2)解離和壓片的目的分別是什么？壓片時為何要再加一塊載玻片?

答：解離和壓片的目的都是為了使細胞相互分離開來；再加一塊載玻片是防止蓋

玻片被壓破。

(3)解離過程中鹽酸的作用是什么？

答：分解和溶解細胞間質(zhì)。

(4)為何要漂洗？

答：洗去鹽酸便于染色。

(5)為何要找分生區(qū)？分生區(qū)的特點是什么？

答：因為在根尖只有分生區(qū)的細胞能夠進行細胞分裂；

分生區(qū)的特點是：細胞呈正方形，排列緊密。

(5)所觀察的細胞能從中期變化到后期嗎？

答：不能，因為觀察時細胞已死亡，只停留在某一時期。

(6)觀察洋蔥表皮細胞能否看到染色體？為什么？

答：不能，因為洋蔥表皮細胞不能再分裂。

(8)若觀察時不能看到染色體，可能的原因是什么？

答：沒有找到分生區(qū)細胞；沒有找到處于分裂期的細胞；染液過稀；染色時間過

短等。

實驗十一細胞大小與物質(zhì)運輸?shù)年P(guān)系（必修一P110）

［模擬探究細胞表面積與體積的關(guān)系］

1、實驗原理

用瓊脂塊模擬細胞，瓊脂塊中含有酚猷,與NaOH相遇,呈紫紅色,可顯示物

質(zhì)（NaOH）在瓊脂塊中的擴散速度。

2、結(jié)論

瓊脂塊的表面積與體積之比隨著瓊脂塊的增大而減小；

NaOH擴散的體積與整個瓊脂塊的體積之比隨著瓊脂塊的增大而減小。

實驗十二觀察細胞的減數(shù)分裂（必修二P21）

L方法步驟

低倍鏡觀察T高倍鏡觀察T繪圖

2、討論

（1）如何判斷視野中的一個細胞是處于減數(shù)第一次分裂還是減數(shù)第二次分裂?

答：減數(shù)第一次分裂會出現(xiàn)同源染色體聯(lián)會、四分體形成、同源染色體在赤道板

位置成對排列、同源染色體分離、移向細胞兩極的染色體分別由兩條染色單體組

成等現(xiàn)象；減數(shù)第二次分裂的中期，非同源染色體成單排列在細胞赤道板位置,

移向細胞兩極的染色體不含染色單體。

(2)減數(shù)第一次分裂與減數(shù)第二次分裂相比，中期細胞中的染色體的不同點是

什么？末期呢？

答：減數(shù)第一次分裂的中期，兩條同源染色體分別排列在細胞赤道板的兩側(cè)，末

期在細胞兩極的染色體由該細胞一整套非同源染色體組成，其數(shù)目是體