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DB34DB34/T3101—2018獼猴桃潰瘍病菌檢疫鑒定方法DetectionandidentificationofPseudomonassyringaepv.actinidae安徽省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布I13.1病原菌:丁香假單胞菌獼猴桃致病變種(Pseudomonassyringaepv.actinidae)5.5恒溫培養(yǎng)箱:20℃~30℃5.7恒溫水浴鍋:4℃~100℃5.10可調(diào)移液器:1-10μL,10μL-100μL,1026.1PCR試劑:2×PCRTa將疑似獼猴桃潰瘍病的發(fā)病組織用70%乙醇表面消毒后,挑取少許病健交界處的新鮮病組織放到無菌的培養(yǎng)皿中,加入0.5mL的無菌水,用玻璃棒碾碎后靜置30min,在細菌培養(yǎng)基上劃線培養(yǎng)。擴增產(chǎn)物用1.5%瓊脂糖凝膠在1×TAE緩沖液中電泳,用凝膠成像系34(資料性附錄)獼猴桃潰瘍病菌為好氣菌,菌體短桿狀,革蘭氏染色陰性,無莢A.2為害癥狀獼猴桃潰瘍病主要危害獼猴桃的新梢、枝蔓、葉片和花蕾,以危害1~2年生枝梢為主,害根和果實。感病植株樹干或大枝上可出現(xiàn)縱向裂縫。植株受害后,于2月中下旬開始發(fā)病,最初從爛。病部皮層組織逐漸變軟呈水浸狀下陷,在枝蔓上發(fā)生1~3cm長的縱裂縫,并流出深綠色水漬狀時在新生葉片上呈現(xiàn)褪綠小點,水浸狀,后發(fā)展為1~3mm的不規(guī)則形或多角形褐色病斑,邊緣有明5A.3分布6注:加入水溶解,最后定容至1000mL,
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