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動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植技術(shù)問題動(dòng)物細(xì)胞工程2、2、1動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植技術(shù)第一課時(shí)動(dòng)物細(xì)胞工程通常采用得技術(shù)手段動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞融合單克隆抗體動(dòng)物細(xì)胞核移植就是其她動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)得基礎(chǔ)。

注意關(guān)鍵詞:

細(xì)胞貼壁接觸抑制原代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)閱讀課文44—46頁相關(guān)內(nèi)容1、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)得概念就是什么?該技術(shù)實(shí)施得原理就是什么?

從動(dòng)物機(jī)體中取出相關(guān)組織,將她分散成單個(gè)細(xì)胞,然后在適宜得培養(yǎng)基中,讓這些細(xì)胞生長和繁殖。

原理就是細(xì)胞增殖(有絲分裂)。聚焦一、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程

簡(jiǎn)述動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)得操作過程分離組織(低幼動(dòng)物)分散細(xì)胞(胰蛋白酶)原代培養(yǎng)(細(xì)胞增殖)傳代培養(yǎng)(細(xì)胞增殖)分裝聚焦一、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程動(dòng)物細(xì)胞生長特點(diǎn):細(xì)胞貼壁:懸液中分散得細(xì)胞很快就貼附在瓶壁上,稱為細(xì)胞貼壁。要求:培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿得內(nèi)表面光滑、無毒、易于貼附。細(xì)胞得接觸抑制:當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長到表面相互接觸時(shí),細(xì)胞就會(huì)停止分裂增殖,這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞得接觸抑制。

細(xì)胞貼壁過程那么什么就是接觸抑制?9大家應(yīng)該也有點(diǎn)累了,稍作休息大家有疑問的,可以詢問和交流接觸抑制:細(xì)胞在貼壁生長過程中,隨著細(xì)胞分裂,數(shù)量不斷增加,最后形成一個(gè)單層,此時(shí)細(xì)胞間相互接觸,細(xì)胞分裂和生長停止,數(shù)量不再增加。50代以后失去接觸抑制接觸抑制動(dòng)物細(xì)胞生長特性部分細(xì)胞突變,獲得不死性,向癌細(xì)胞方向發(fā)展,糖蛋白減少。無菌操作培養(yǎng)箱1、為何動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程將組織分散成單個(gè)細(xì)胞得呢?2、如何將動(dòng)物組織分散成單個(gè)得細(xì)胞呢?

成塊得組織細(xì)胞靠在一起,彼此限制了細(xì)胞得生長和增殖,也不利于細(xì)胞營養(yǎng)物質(zhì)得吸收和代謝廢物得排出。先用剪刀剪碎,后用蛋白酶處理。思考題3、胰蛋白酶得作用就是什么呢?由此可說明細(xì)胞間得物質(zhì)就是什么成份?能夠用胃蛋白酶代替胰蛋白酶嗎?為什么?胰蛋白酶水解蛋白質(zhì)細(xì)胞間得成份就是蛋白質(zhì)不能,因?yàn)閮烧叩米钸mpH不同,4、幼齡與老齡動(dòng)物得組織細(xì)胞比較,分化程度低得與分化程度高得組織細(xì)胞比較,哪一種更易于培養(yǎng)?思考一下,這就是什么道理?一般來說幼年動(dòng)物得組織細(xì)胞比老年動(dòng)物得組織細(xì)胞易于培養(yǎng)。同樣,組織細(xì)胞得分化程度越低,則增殖能力越強(qiáng),所以更容易培養(yǎng)思考題5、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)表面為何要光滑、無毒?6、培養(yǎng)瓶中得細(xì)胞培養(yǎng)到什么時(shí)候就不再分裂、增殖?7、如此時(shí)細(xì)胞數(shù)量并未達(dá)到人們得需求,應(yīng)該怎樣辦?易于培養(yǎng)細(xì)胞貼壁,進(jìn)行生長增殖當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長到表面相互接觸時(shí),細(xì)胞分裂就會(huì)停止分裂增殖,這種現(xiàn)象叫接觸抑制。將貼滿細(xì)胞壁得細(xì)胞用胰蛋白酶處理,然后繼續(xù)增殖。這樣得過程叫做傳代培養(yǎng)思考題8、如何理解原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)?9、傳代培養(yǎng)得細(xì)胞能一直傳代下去嗎?10、有些為何能一直傳下去?11、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)就就是為了得到這些細(xì)胞嗎?上述過程中,在第一培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)就就是原代培養(yǎng),之后轉(zhuǎn)移到其她培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)就就是傳代培養(yǎng)不都能發(fā)生突變,朝著癌細(xì)胞方向發(fā)展不全就是思考題12、人類一般保存得就是哪類細(xì)胞呢?為什么?保存10代以內(nèi)得細(xì)胞,因?yàn)?0-50部分細(xì)胞得細(xì)胞核型可能發(fā)生變化,有少部分還發(fā)生突變向癌細(xì)胞方向發(fā)展思考題13、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)能否像綠色植物組織培養(yǎng)那樣最終培養(yǎng)成新個(gè)體?不能,動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)只能使細(xì)胞數(shù)目增多,不能發(fā)育成新得動(dòng)物個(gè)體動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物得組織、器官細(xì)胞懸浮液10代細(xì)胞50代細(xì)胞傳代培養(yǎng)無限傳代單個(gè)細(xì)胞加培養(yǎng)液原代培養(yǎng)胰蛋白酶剪碎過程:細(xì)胞株細(xì)胞系遺傳物質(zhì)未改變遺傳物質(zhì)已改變細(xì)胞株:原代細(xì)胞一般傳至10代左右細(xì)胞生長停滯,大部分細(xì)胞衰老死亡,少數(shù)細(xì)胞存活到40~50代,這種傳代細(xì)胞為細(xì)胞株。細(xì)胞系:細(xì)胞株傳代至50代后又出現(xiàn)細(xì)胞生長停滯狀態(tài),只有部分細(xì)胞由于遺傳物質(zhì)得改變,使其在培養(yǎng)條件下可以無限制傳代,這種傳代細(xì)胞為細(xì)胞系。細(xì)胞株和細(xì)胞系得區(qū)別:細(xì)胞系得遺傳物質(zhì)改變,具有癌細(xì)胞得特點(diǎn),失去接觸抑制,容易傳代培養(yǎng)。解答概念

多細(xì)胞動(dòng)物和人體得細(xì)胞都生活在內(nèi)環(huán)境中,根據(jù)您所學(xué)得內(nèi)環(huán)境得知識(shí),思考并討論以下問題:討論1、體外培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)需要提供哪些物質(zhì)2、體外培養(yǎng)得細(xì)胞需要什么樣得環(huán)境條件?充足得營養(yǎng)供給、適宜得溫度、適宜得pH和氣體環(huán)境無菌、無毒得環(huán)境。1、無菌、無毒得環(huán)境(添加一定量得抗生素,定期更換培養(yǎng)液)2、營養(yǎng)(葡萄糖、氨基酸、無機(jī)鹽、微量元素、動(dòng)物血清、血漿等。)3、溫度和PH

36、5+0、5度;PH為7、2-7、4。4、氣體環(huán)境:

O2和CO2(95%空氣和5%CO2

)補(bǔ)充合成培養(yǎng)基中缺乏得物質(zhì)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)條件?細(xì)胞得全能性細(xì)胞株、細(xì)胞系植物體或組織培養(yǎng)結(jié)果獲得細(xì)胞或細(xì)胞分泌蛋白快速繁殖、培育無病毒植株等培養(yǎng)目得葡萄糖、動(dòng)物血清蔗糖、植物激素培養(yǎng)基特有成分液體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基培養(yǎng)基性質(zhì)細(xì)胞增殖原理動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)比較項(xiàng)目試一試大規(guī)模培養(yǎng)生產(chǎn)生物制品(病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體)培養(yǎng)作為基因工程中得受體細(xì)胞培養(yǎng)得動(dòng)物細(xì)胞可以用于檢測(cè)有毒物質(zhì),判斷某種物質(zhì)得毒性為治療和預(yù)防癌癥及其她疾病提供理論依據(jù)應(yīng)用:1、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)要經(jīng)過脫分化嗎?為什么?課后習(xí)題

動(dòng)物細(xì)胞特點(diǎn)?分化潛能變窄:隨著細(xì)胞分化程度得提高而逐漸受到限制,分化潛能變窄,這就是指整體細(xì)胞而言。細(xì)胞核仍具有全能性:細(xì)胞核,她含有保持物種遺傳性所需得全套基因,而且并沒有因細(xì)胞分化而丟失基因,因此高度分化細(xì)胞得細(xì)胞核仍具有全能性想一想

根據(jù)動(dòng)物細(xì)胞核仍具有全能性得特點(diǎn),怎樣將動(dòng)物細(xì)胞得全能性表達(dá)?

再想一想利用動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)

動(dòng)物核移植:

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