TGXAS-毛發(fā)中氟胺酮、去甲氟胺酮的測(cè)定 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法

Q/LB.□XXXXX-XXXXII含0.1％甲酸的5mmol/L乙酸銨水溶液（以配制500mL為例）：稱(chēng)取0.1925g乙酸銨，加水溶解后，再加入0.5mL甲酸，用水稀釋至500mL，混勻。100μg/mL氟胺酮、去甲氟胺酮標(biāo)準(zhǔn)液：市售氟胺酮、去甲氟胺酮標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)溶液。密封，置于冰箱中冷凍保存，保存時(shí)間12個(gè)月。氟胺酮、去甲氟胺酮標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)工作溶液：試驗(yàn)中所用其他濃度的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)工作溶液均由上述標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)溶液用甲醇稀釋而得。密封，置于冰箱中冷藏保存，保存時(shí)間3個(gè)月。1.0mg/mL甲氧那明標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液：稱(chēng)取甲氧那明10mg于10mL容量瓶中，加入適量甲醇溶解并定容至刻度，配制成1.0mg/mL甲氧那明標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液。密封，置于冰箱中冷凍保存，保存時(shí)間12個(gè)月。1.0μg/mL甲氧那明標(biāo)準(zhǔn)工作溶液：移取1.0mg/mL甲氧那明標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液10μL置于10mL容量瓶中，加入適量甲醇溶解并定容至刻度，配制成1.0μg/mL甲氧那明標(biāo)準(zhǔn)工作溶液。密封，置于冰箱中冷凍保存，保存時(shí)間3個(gè)月。2.0ng/mL甲氧那明標(biāo)準(zhǔn)工作溶液：移取1.0μg/mL甲氧那明標(biāo)準(zhǔn)工作溶液100μL置于50mL容量瓶中，加入甲醇定容至刻度，配制成2.0ng/mL甲氧那明標(biāo)準(zhǔn)工作溶液。密封，置于冰箱中冷凍保存，保存時(shí)間3個(gè)月。材料具蓋離心管。具蓋研磨管。容量瓶。儀器設(shè)備液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀：配有電噴霧離子源(ESI)。電子天平：感量0.1mg。離心機(jī)。超聲波清洗儀。冷凍研磨儀。恒溫水浴鍋。微量移液器。操作方法樣品前處理案件樣品毛發(fā)樣品依次用適量的水和丙酮振蕩洗滌兩次，晾干后剪成約1mm段，置于冷凍研磨儀中粉碎，呈粉末狀。稱(chēng)取毛發(fā)粉末20mg，加入1.0mL內(nèi)標(biāo)甲氧那明標(biāo)準(zhǔn)工作液，超聲30min，離心，移取上清液，于60℃水浴空氣流下吹干。殘留物用200μL甲醇復(fù)溶，供儀器分析?？瞻讟悠啡】瞻酌l(fā)樣品20mg，按7.1.1的要求，與案件樣品平行提取操作。添加樣品取空白毛發(fā)樣品20mg，添加氟胺酮及去甲氟胺酮對(duì)照品，按7.1.1的要求，與案件樣品平行提取操作。儀器檢測(cè)儀器條件液相色譜條件以下為參考條件，可根據(jù)不同儀器實(shí)際進(jìn)行調(diào)整：色譜柱：ZORBAXEclipsePlusC18(2.1cm×50mm，1.8μm)；流動(dòng)相：A為5mmol/L乙酸銨和0.1％甲酸緩沖液，B為甲醇，流動(dòng)相洗脫梯度見(jiàn)表1；流動(dòng)相梯度洗脫程序時(shí)間(min)流動(dòng)相A(％)流動(dòng)相B(％)0.009550.5070303.5070305.0030706.0030706.505958.005958.1095510.00955流速：0.3mL/min；柱溫：35℃；進(jìn)樣量：1.0μL。質(zhì)譜條件以下條件作為參考，可根據(jù)不同儀器實(shí)際情況進(jìn)行調(diào)整：離子源：電噴霧電離-正離子模式(ESI+)；檢測(cè)方式：多反應(yīng)監(jiān)測(cè)(MRM)；離子源電壓(IS)：4800V；碰撞氣(CAD)、氣簾氣(CUR)、霧化氣(GS1)、輔助氣(GS2)均為高純氮?dú)?，使用前調(diào)節(jié)各氣流流量以使質(zhì)譜靈敏度達(dá)到檢測(cè)要求；噴霧電壓(IS)、去簇電壓(DP)、碰撞能量(CE)等電壓值應(yīng)優(yōu)化至最佳靈敏度。在以上色譜、質(zhì)譜條件下，氟胺酮、去甲氟胺酮和內(nèi)標(biāo)物的定性離子對(duì)和保留時(shí)間見(jiàn)表2。氟胺酮、去甲氟胺酮的MRM色譜圖參見(jiàn)附錄A。氟胺酮、去甲氟胺酮和內(nèi)標(biāo)物的定性離子對(duì)和保留時(shí)間化合物母離子(m/z)子離子(m/z)去簇電壓(V)碰撞能量(V)保留時(shí)間(min)氟胺酮(F-Ketamin)222.30109.1024471.60163.002621去甲氟胺酮(Nor-F-Ketamin)208.20191.1026141.58109.102438甲氧那明(Orthoxine)180.20121.0810242.01148.801016進(jìn)樣分別吸取案件樣品、空白樣品和添加樣品提取液，按7.2.1的條件進(jìn)樣分析。記錄記錄案件樣品、空白樣品和添加樣品中氟胺酮和去甲氟胺酮可疑色譜峰的保留時(shí)間、特征離子和離子對(duì)豐度比。定性判斷依據(jù)以保留時(shí)間、質(zhì)譜特征碎片離子峰和離子對(duì)相對(duì)豐度比作為定性判斷依據(jù)。如果案件樣品中出現(xiàn)氟胺酮和去甲氟胺酮的兩對(duì)定性離子對(duì)的特征色譜峰，保留時(shí)間與添加樣品中相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的色譜峰保留時(shí)間比較，相對(duì)誤差在±2.5％內(nèi)，且定性離子對(duì)豐度比與濃度相近添加樣品的離子對(duì)豐度比的相對(duì)誤差不超過(guò)表3規(guī)定的范圍，則可判斷案件樣品中存在該種目標(biāo)物。相對(duì)離子對(duì)豐度比的最大允許相對(duì)誤差相對(duì)離子對(duì)豐度比/（％）5021～5011～2010允許的相對(duì)誤差/（％）20253050分析結(jié)果評(píng)價(jià)陰性結(jié)果評(píng)價(jià)如果案件樣品中僅檢出內(nèi)標(biāo)甲氧那明，未檢出氟胺酮和去甲氟胺酮，則陰性結(jié)果可靠。如果案件樣品中未檢出內(nèi)標(biāo)，則陰性結(jié)果不可靠，應(yīng)按第7章重新提取檢驗(yàn)。陽(yáng)性結(jié)果評(píng)價(jià)如果案件樣品中檢出氟胺酮、去甲氟胺酮且空白樣品無(wú)干擾，則陽(yáng)性結(jié)果可靠。如果案件樣品中檢出氟胺酮、去甲氟胺酮且空白樣品亦呈陽(yáng)性，則陽(yáng)性結(jié)果不可靠，應(yīng)按第7章重新提取檢驗(yàn)。

（資料性）

氟胺酮、去甲氟胺酮和內(nèi)標(biāo)物的M