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備案號:DB11DB11/T828.3—2011實驗用小型豬第3部分:遺傳質(zhì)量控制ExperimentalminipigPart3:Geneticqualitycontrol北京市質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布 DB11/T828的本部分規(guī)定了實驗用小型豬的遺傳分類、繁殖方法和經(jīng)人工飼育,對其攜帶的病原微生物和寄生蟲實行控制,遺傳背景明確或者來源清楚,122stock)。當(dāng)近交系小型豬生產(chǎn)供應(yīng)數(shù)量不是很大時,一般不設(shè)血緣擴(kuò)大群,僅選擇封閉群實驗用小型豬繁殖方法的原則是保持封閉群小型豬的遺傳異質(zhì)性及基因多態(tài)性,避免封閉群應(yīng)足夠大,以保持封閉群實驗用小型豬的遺傳基因的穩(wěn)定,并盡量避免近親交配。具體繁采用微衛(wèi)星DNA標(biāo)記檢測方法。具體方法執(zhí)行附錄4群體內(nèi)遺傳變異采用平均雜合度指標(biāo)或群體平衡因頻率或基因型頻率發(fā)生變化,該封閉群實驗用小型豬群體判為不合格。具體方法采集近交系實驗用小型豬的血液或耳組織,提取基因組DNA。對特定的微衛(wèi)星標(biāo)記座位進(jìn)行PCR擴(kuò)增,通過遺傳分析儀檢測各座位基因的峰形和大小,確定各近交系的微衛(wèi)星6PCR產(chǎn)物,以2%的瓊脂糖檢測擴(kuò)增效率。凝膠成像系統(tǒng)),含變性后的PCR產(chǎn)物的96孔板放入遺傳分析儀內(nèi)進(jìn)行分析,原始峰圖用基因分型所有樣品檢測位點的等位基因都符合品系的特征(見表A.2),沒有新的等位基因8表A.2五指山小型豬近交系、廣西巴馬小型豬和貴州小型豬近交系培育過程中,遺傳質(zhì)),擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)過瓊脂糖凝膠電泳檢測確保擴(kuò)增出目的片斷后,選擇分別以FAM、HEX、TAMRA標(biāo)記的三斷從小到大順序排列紀(jì)錄為a,b,c,d等。將所有樣本的每個微衛(wèi)星位點的基因型以ab,bb等形式輸入群體遺傳分析軟件的數(shù)根據(jù)判定結(jié)果對被檢測的封閉群實驗用小型豬群體做出表B各微衛(wèi)星座位的引物序列、染色體位置、
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