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文檔簡介
交叉配血2交叉配血的定義
交叉配血試驗(yàn)也稱配合性試驗(yàn),使病人,獻(xiàn)血者血液之間沒有可測到的不相配合的抗原、抗體成分,試驗(yàn)應(yīng)在37℃下進(jìn)行。在配血的任何步驟中均不產(chǎn)生溶血或凝集的獻(xiàn)血者的血液才能輸注給病人。3
交叉配血的目的交叉配血試驗(yàn)是輸血前必要的步驟,主要是檢查受血者血清中有無能破壞供血者紅細(xì)胞的抗體。主要目的是為了防止輸血后產(chǎn)生溶血性反應(yīng)。盡可能確保任何一個(gè)病人,在輸了供血者的血之后不會(huì)引起有害反應(yīng),并且使紅細(xì)胞在輸注后能保持最長的存活時(shí)間。
交叉配血標(biāo)本要求交叉配血標(biāo)本一般選用EDTA抗凝血標(biāo)本,也可以是血清標(biāo)本,但鑒于交叉配血需要患者紅細(xì)胞,臨床多選用EDTA抗凝血標(biāo)本;標(biāo)本凝塊、溶血、嚴(yán)重脂血、標(biāo)本被細(xì)菌污染等應(yīng)為不合格標(biāo)本應(yīng)拒收。
交叉配血試驗(yàn)的內(nèi)容主側(cè)配血用患者血清與供者紅細(xì)胞進(jìn)行試驗(yàn)次測配血
供血者血清與患者紅細(xì)胞進(jìn)行試驗(yàn)患者供血者主側(cè)次側(cè)56
交叉配血的“交叉”含義
交叉配血的要求主側(cè)配血要求:
不可以有凝集或溶血現(xiàn)象。次測配血要求:
供血者血清加受血者紅細(xì)胞在允許范圍內(nèi),可以有凝集現(xiàn)象,但不可以有溶血。凝集不凝集7★特殊說明:輸血不一定要主次側(cè)都相合,主側(cè)不合在有些病種、病情下也可以輸血,嚴(yán)格按照相應(yīng)的配血原則即可。8常見交叉配血試驗(yàn)方法鹽水介質(zhì)配血聚凝胺配血抗人球蛋白檢測卡配血生理鹽水法生理鹽水法
鹽水介質(zhì)中紅細(xì)胞上的抗原決定簇與相應(yīng)抗體分子上的抗原結(jié)合位點(diǎn)結(jié)合,交叉連接形成肉眼可見的凝集塊。鹽水介質(zhì)凝集試驗(yàn)用于IgM抗體的檢出。
鹽水介質(zhì)配血方法患者獻(xiàn)血者主側(cè)次側(cè)離心看結(jié)果陽性陰性112%-5%紅細(xì)胞懸液聚凝胺試驗(yàn)13聚凝胺試驗(yàn)原理凝聚胺法首先利用低離子介質(zhì)降低溶液的離子強(qiáng)度,減少紅細(xì)胞周圍的陽離子云,促進(jìn)血清(漿)中的抗體與紅細(xì)胞相應(yīng)抗原結(jié)合。再加入帶高價(jià)陽離子多聚物-凝聚胺溶液,中和紅細(xì)胞表面的負(fù)電荷,縮短細(xì)胞間距,形成可逆的非特異性聚集,并使IgG型抗體直接凝集紅細(xì)胞。最后加入懸浮液具有中和凝聚胺陽離子的作用,使正常的紅細(xì)胞非特異性凝集散開,試驗(yàn)結(jié)果為陰性;但如果紅細(xì)胞被相應(yīng)的抗體致敏,則凝集不散開,試驗(yàn)結(jié)果為陽性。操作步驟
1.取試管兩支,標(biāo)明主側(cè)次側(cè),主側(cè)管加受血者血清(血漿)2滴,和供血者3~5%紅細(xì)胞懸液1滴,次側(cè)管反之。2.各加低離子溶液0.65ml,混合均勻后,再各加凝聚胺溶液溶液2滴,并混合均勻。3.用離心機(jī)3400轉(zhuǎn)/min離心10秒,然后把上清液倒掉,不要瀝干,讓管底殘留約0.1ml液體。4.輕輕搖動(dòng)試管,目測紅細(xì)胞有無凝集,如無凝集,則必須重做。聚凝胺試驗(yàn)5.最后加入懸浮液2滴,輕輕轉(zhuǎn)搖動(dòng)試管混勻并同時(shí)觀察結(jié)果。6.結(jié)果判定:如果在60秒內(nèi)凝集散開,代表是由凝聚胺引起的非特異性聚集,配血結(jié)果相合;如凝集不散開,則為紅細(xì)胞抗原抗體結(jié)合的特異性反應(yīng),配血結(jié)果不相合。如反應(yīng)可疑,可進(jìn)一步倒在玻片上用顯微鏡觀察。凝聚胺配血方法患者獻(xiàn)血者主側(cè)次側(cè)混合均勻凝聚胺主次側(cè)均加低離子溶液混勻后再加凝聚胺混勻16凝聚胺配血方法離心凝聚胺引起紅細(xì)胞非特異性凝集陽性陰性懸浮液主次側(cè)均加懸浮液看結(jié)果17抗人球蛋白檢測卡19抗人球蛋白檢測卡(微柱凝膠法)檢驗(yàn)原理
抗人球蛋白檢測卡利用微柱凝膠卡中的微管來代替?zhèn)鹘y(tǒng)意義上血型血清學(xué)試驗(yàn)用的試管,采用凝膠作為微柱凝膠卡的填充物,利用凝膠間縫隙只允許游離紅細(xì)胞通過的特性,將生物化學(xué)的凝膠過濾技術(shù)、離心技術(shù)和血型血清學(xué)的抗原抗體特異性反應(yīng)結(jié)合在一起,專供血型血清學(xué)試驗(yàn)使用。將紅細(xì)胞和抗血清加在凝膠上部反應(yīng),離心后觀察。凝集的紅細(xì)胞,被阻擋在凝膠的上部或中央,判斷凝集反應(yīng)陽性;游離的紅細(xì)胞,可通過凝膠間隙而沉積在凝膠的底部,判斷凝集反應(yīng)陰性。抗人球蛋白檢測卡—交叉配血操作示意圖201%受血者紅細(xì)胞稀釋10ul壓積紅細(xì)胞+1ml低離子介質(zhì)受血者全血供血者全血1%供血者紅細(xì)胞受血者全血供血者全血25ul血漿50ul25ul血漿50ul抗人球蛋白檢測卡——交叉配血操作示意圖21離心判讀孵育陽性:表示受(供)血者血漿或血清中含供(受)血者紅細(xì)胞血型抗原相應(yīng)的抗體(IgG或IgM),供受血者不相容;陰性:表示供受血者相容。孵育器離心機(jī)檢測卡凝集強(qiáng)度示意圖及結(jié)果判斷表224+3+2+1+±dcpPHH-
陽性4+表示RBC絕大部分凝聚于凝膠表層。3+表示RBC多數(shù)凝聚于凝膠表層,少數(shù)RBC凝集顆粒懸浮于近膠表層。2+表示部分RBC沉積于膠底,部分RBC凝集顆粒懸浮于凝膠中。1+表示RBC多數(shù)沉積于膠底,可見少數(shù)RBC凝集顆粒懸浮于凝膠中?!辣硎綬BC絕大多數(shù)沉積于膠底,極少數(shù)RBC凝集顆粒懸浮于近膠底。dcp表示混合凝集外觀,部分紅細(xì)胞凝集顆粒集結(jié)于凝膠表層,部分紅細(xì)胞沉于膠底。PH表示部分溶血,凝膠管中液體呈清澈透明紅色,凝膠中有殘留紅細(xì)胞。H表示完全溶血,凝膠管中液體呈清澈透明紅色,凝膠中無紅細(xì)胞。陰性—表示RBC全部沉積于膠底。
結(jié)果判斷表幾種交叉配血方法的比較方法優(yōu)點(diǎn)缺點(diǎn)鹽水法操作方便,費(fèi)用低廉
只能檢出不相配合完全抗體,不能檢出不相配合的不完全抗體聚凝胺法方便、應(yīng)用最廣,實(shí)用于急診
對(duì)罕見不規(guī)則抗體抗K敏感性低,且肝素對(duì)其有影響,易引起假陰性??谷饲虻鞍讬z測卡(微柱凝膠法)國際安全輸血檢查的推薦方法,靈敏度高、重復(fù)性好、特異性好、檢測結(jié)果可較長時(shí)間保存費(fèi)用高24配血注意事項(xiàng)在抗體篩查或交叉配血試驗(yàn)時(shí)出現(xiàn)弱凝集時(shí),一定要考慮是否有臨床意義,有時(shí)一些簡單的方法可解決問題。如將試管放入37℃水浴數(shù)分鐘,凝集消散,則很可能該抗體為無臨床意義抗體;對(duì)有妊娠史(包括流產(chǎn))、輸血史或有過器官移植的病例輸用血液時(shí),受血者血清抗體篩查、交叉配血等檢查一定要進(jìn)行不完全抗體的檢測;25配血注意事項(xiàng)日常工作中,交叉配血,包括ABO血型正反定型、RHD血型定型、受血者血清中不規(guī)則抗體檢測最好使用兩種方法進(jìn)行平行檢測,結(jié)果均符合才能發(fā)出報(bào)告;尤其,在交叉配血時(shí),鹽水法、聚凝胺法或微柱凝膠法,一起使
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