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檢驗(yàn)科危急值報(bào)告流程及常見危急值臨床意義危急值的快速處理1、核實(shí)信息:臨床科室接聽人核實(shí)危急值報(bào)告結(jié)果,核對(duì)患者基本信息,予以確認(rèn)。2、記錄信息:接聽人及時(shí)將危急值患者的姓名、住院號(hào)(或門診號(hào))、危急值項(xiàng)目及結(jié)果、接聽人及時(shí)間(至分鐘)等信息記錄在《危急值接獲記錄本》上。3、報(bào)告醫(yī)師:接聽人核對(duì)后,應(yīng)立即報(bào)告病房值班醫(yī)師或經(jīng)治醫(yī)師。4、患者處理:接診醫(yī)師應(yīng)立即診察患者,遵循急危重患者搶救流程,迅速采取相應(yīng)的臨床措施,及時(shí)書寫病程記錄,密切觀察病情變化,做好交接班。5、對(duì)于經(jīng)過經(jīng)治醫(yī)師、值班醫(yī)師診察評(píng)估患者后不需立即處置的危急值,應(yīng)在當(dāng)日記錄該信息,允許當(dāng)日多個(gè)未處置的危急值信息合并記錄。6、若單項(xiàng)危急值與輸入的某種藥物有直接關(guān)系,該藥物目前仍在輸注中,允許護(hù)士立即停止輸注該藥物。7、再次復(fù)查:患者處理后應(yīng)適時(shí)復(fù)查危急值;若是臨床科室發(fā)現(xiàn)危急值與患者病情不相符時(shí),接報(bào)醫(yī)師應(yīng)與醫(yī)技科室檢查、檢驗(yàn)報(bào)告人共同查找原因,必要時(shí)可以重新進(jìn)行檢查、檢驗(yàn)。HIV樣本的采集和處理樣本種類及相應(yīng)的用途全血、血清、血漿、口腔黏膜滲出液、尿液、干血斑以及血液制品原料樣本可用于HIV抗體檢測(cè)。
全血、血清、血漿、病毒培養(yǎng)上清液以及血液制品原料樣本可用于HIV抗原檢測(cè)??鼓捎糜贑D4+和CD8+T淋巴細(xì)胞數(shù)測(cè)定。血漿、干血斑可用于HIV-1病毒載量、基因亞型和基因型耐藥檢測(cè)。全血、淋巴細(xì)胞富集液、外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMC)、血漿以及血液制品原料可用于HIV核酸定性與定量、基因型檢測(cè)和HIV-1分離培養(yǎng)。
操作步驟01采樣前準(zhǔn)備根據(jù)檢測(cè)項(xiàng)目的具體要求,確定采集樣本的種類、處理、保存及運(yùn)輸?shù)臅r(shí)限和方法,按照臨床采血技術(shù)要求操作,遵守生物安全相關(guān)要求。采樣前應(yīng)檢查所需物品是否已備齊,是否在有效期內(nèi),有無破損,是否足量,特別應(yīng)檢查受檢者信息與樣本容器表面的標(biāo)記是否一致,并注明樣本采集時(shí)間及唯一編碼。采集血液樣本宜選擇合適的室內(nèi)(外)空間,受檢者坐(臥)于合適的位置。準(zhǔn)備采血用具、皮膚消毒用品、采血管及試管架、硬質(zhì)廢棄物容器等。口腔黏膜滲出液樣本應(yīng)使用試劑盒提供的專用采樣工具,尿液樣本建議使用可保持尿液穩(wěn)定的專用采尿管。收集血液制品原料樣本時(shí),應(yīng)詳細(xì)記錄制品的來源、生產(chǎn)日期、批號(hào)、使用者等信息。02樣本的編碼和記錄應(yīng)制定樣本編碼的標(biāo)準(zhǔn)操作程序(SOP),規(guī)定樣本編碼的原則和方法,保證每一份樣本具有唯一性編碼(編號(hào))采血前,先對(duì)試管或?yàn)V紙進(jìn)行標(biāo)記,核對(duì)后編碼。要將標(biāo)簽貼在試管的側(cè)面,推薦使用預(yù)先印制好的、專門用于冷凍儲(chǔ)存的耐低溫標(biāo)簽。干血斑濾紙應(yīng)使用具有資質(zhì)的產(chǎn)品。口腔黏膜滲出液樣本應(yīng)采集口腔黏膜滲出液,不是唾液。尿液樣本準(zhǔn)備好帶有唯一編碼的采尿管或者尿杯,并保留唯一編碼。應(yīng)使用專門的樣本記錄本或登記表記錄樣本,同時(shí)錄入電腦保存。03樣本的采集和處理血液抗凝全血:消毒局部皮膚,用加有抗凝劑(EDTA鈉鹽或鉀鹽、枸櫞酸鈉、肝素)的真空采血管抽取適量靜脈血,或用一次性注射器抽取靜脈血,轉(zhuǎn)移至加有抗凝劑的試管中,輕輕顛倒混勻10-15次,備用。末梢全血消毒局部皮膚(成人和1歲以上兒童可選擇耳垂、中指、無名指或食指,1歲以下兒童采用足跟部)。用采血針刺破皮膚,用無菌紗布擦掉第一滴血。收集滴出的血液,備用。血漿根據(jù)檢測(cè)需要,選擇含適宜抗凝劑的采血管,按照采血管說明采集靜脈血,分離血漿;或?qū)⒉杉目鼓?500~3000r/min離心15分鐘,上層即為血漿,吸出置于合適的容器中,備用。血清根據(jù)檢測(cè)需要,按照采血管說明采集靜脈血,分離血清;或用不含抗凝劑的真空采血管抽取適量靜脈血,或用一次性注射器抽取靜脈血,轉(zhuǎn)移至無抗凝劑或含促凝劑的試管中放置1~2小時(shí),待血液凝固、血塊收縮后再用1500~3000r/min離心15分鐘,吸出血清,置于合適的容器中,備用。淋巴細(xì)胞富集液將采集的抗凝全血1500~3000r/min離心15分鐘,吸取血漿層下的淋巴細(xì)胞富集液,置于合適的容器中,備用。外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMC)使用淋巴細(xì)胞分離液,進(jìn)行密度梯度離心,吸出PBMC層,置于合適的容器中,備用??鼓齽┑倪x擇根據(jù)檢測(cè)要求選用適當(dāng)?shù)目鼓齽鏑D4+和CD8+T淋巴細(xì)胞數(shù)測(cè)定可選用
EDTA
鉀鹽或鈉鹽、枸櫞酸鈉、肝素(如果血液不用于核酸檢測(cè));HIV-1分離、核酸定性/定量檢測(cè)可選用EDTA鉀鹽或鈉鹽或枸櫞酸鈉。樣本采集后處理、保存、運(yùn)輸?shù)臅r(shí)限和條件,因不同的檢測(cè)項(xiàng)目而異,應(yīng)參見相應(yīng)檢測(cè)項(xiàng)目要求。
采血完成后的穿刺針頭必須丟棄于尖銳危險(xiǎn)品容器內(nèi),妥善處理,防止發(fā)生職業(yè)暴露。干血斑根據(jù)需要,可將采集的各種血液樣本制備成干血斑,用于檢測(cè)。最常用的是用抗凝全血、末梢全血和血漿制備干血斑。用移液器從樣本管中吸取100μL抗凝全血(或血漿),對(duì)準(zhǔn)濾紙印圈的中心處,將樣本滴在濾紙上;或?qū)⒋┐毯笞云つw傷口流出的末梢全血直接滴加在濾紙印圈的中心處。根據(jù)需要,連續(xù)在數(shù)個(gè)印圈上滴加樣本。于室溫下自然干燥至少4小時(shí)(潮濕氣候下至少干燥24小時(shí)),不要加熱或堆疊血斑,勿與其他界面接觸。血斑充分干燥后,將其放入密封袋中,每張干血斑單獨(dú)保存,避免血斑之間的相互污染,同時(shí)放入干燥劑及濕度指示卡,密封包裝,保存?zhèn)溆谩?/p>
尿液和口腔黏膜滲出液尿液:按照試劑盒說明書要求采集樣本。尿液樣本可采集隨機(jī)尿,女性經(jīng)期應(yīng)取中段尿??谇火つB出液:按照試劑盒說明書要求采集樣本。04樣本的保存用于抗體和抗原檢測(cè)的血清或血漿樣本,短期(1周)內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)的可存放于2~8℃,一周以上應(yīng)存放于-20℃以下。用于核酸檢測(cè)的血漿和血細(xì)胞樣本,4天內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)的可存放于2-8℃;3個(gè)月以內(nèi)應(yīng)存放于-20℃以下;3個(gè)月以上應(yīng)置于-70℃以下保存??谇火つB出液樣本應(yīng)即刻使用,需要保存應(yīng)以產(chǎn)品說明書為準(zhǔn)。尿液快速檢測(cè)樣本保存條件以產(chǎn)品說明書為準(zhǔn)。尿液樣本,使用專用采尿管,室溫下可保存2周;三個(gè)月之內(nèi)存放宜在2~8℃;長(zhǎng)期保存(三個(gè)月以上)的樣本凍存條件、是否添加防腐劑等以產(chǎn)品說明書為準(zhǔn)。用于CD4+T淋巴細(xì)胞檢測(cè)的全血樣本,室溫保存,時(shí)間不超過48小時(shí)。如全國艾滋病檢測(cè)技術(shù)規(guī)范4采用
CD45
設(shè)門,樣本保存不超過72小時(shí)。篩查結(jié)果為陽性的樣本應(yīng)及時(shí)進(jìn)行補(bǔ)充試驗(yàn);篩查結(jié)果為陰性的樣本,可根據(jù)具體需要決定保存時(shí)間,建議至少保存1個(gè)月。艾滋病檢測(cè)確證實(shí)驗(yàn)室收到的篩查陽性樣本,無論補(bǔ)充試驗(yàn)結(jié)果如何,均應(yīng)保存剩余樣本,保存時(shí)間根據(jù)需要確定,建議至少保存3年,特殊用途或?qū)m?xiàng)項(xiàng)目的樣本根據(jù)具體要求確定保存時(shí)間。補(bǔ)充試驗(yàn)結(jié)果為陽性的樣本按照國家生物樣本管理的有關(guān)規(guī)定執(zhí)行。05樣本的運(yùn)送全血、血漿的運(yùn)送應(yīng)符合生物安全要求,參照《可感染人類的高致病性病原微生物菌(毒)種或樣本運(yùn)輸管理規(guī)定》(衛(wèi)健委第45號(hào)令,2006年2月1日?qǐng)?zhí)行)。血液樣本運(yùn)送時(shí)應(yīng)采用三層容器對(duì)樣本進(jìn)行包裝,隨樣本應(yīng)附有與樣本唯一性編碼相對(duì)應(yīng)的送檢單。送檢單應(yīng)標(biāo)明受檢者姓名、樣本種類等信息,并應(yīng)放置在第二層和第三層容器之間。第一層容器:直接裝樣本,應(yīng)防滲漏。樣本應(yīng)置于帶蓋的試管內(nèi),試管上應(yīng)有明顯的標(biāo)記,標(biāo)明樣本的唯一性編碼或受檢者姓名、種類和采集時(shí)間。在試管的周圍應(yīng)墊有緩沖吸水材料,以免碰碎。
第二層容器:容納并保護(hù)第一層容器,可以裝若干個(gè)第一層容器。要求不易破碎、帶蓋、防滲漏、容器的材料要易于消毒處理。第三層容器:容納并保護(hù)第二層容器的運(yùn)輸用外層包裝箱。外面要貼上醒目的標(biāo)簽,注明數(shù)量、收樣和發(fā)件人及聯(lián)系方式,同時(shí)要注明“小心輕放、防止日曬、小心水浸、防止重壓、禁止倒立”等字樣,還應(yīng)易于消毒。用于抗體檢測(cè)的血清和血漿樣本應(yīng)在凍存條件下運(yùn)送。用于CD4+和CD8+T淋巴細(xì)胞測(cè)定的樣本應(yīng)在室溫下(18~25℃)運(yùn)送。用于病毒載量檢測(cè)的樣本應(yīng)在-20℃以下運(yùn)輸。干血斑和尿液樣本應(yīng)在室溫下(18~25℃)運(yùn)送,可通過郵寄方式運(yùn)送。血液制品樣本的運(yùn)送按照血液制品有關(guān)使用說明執(zhí)行。
運(yùn)送樣本必須有記錄。06樣本的接收樣本包裹必須在具有處理感染性材料條件的實(shí)驗(yàn)室內(nèi)、由經(jīng)過培訓(xùn)的工作人員打開,打開包裹時(shí)應(yīng)穿戴防護(hù)衣、戴手套、口罩和防護(hù)眼鏡,在生物安全柜中打開,用后的包裹應(yīng)及時(shí)進(jìn)行消毒。核對(duì)樣本與送檢單,檢查樣本管有無破損和溢漏。
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