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γ-谷氨酰轉移酶測定文件編號:版本號:頁碼:1檢測原理γ-谷氨酰轉移酶能催化谷氨酰部分從γ-谷氨酰-3-羧基-4-苯基重氮酸(GCNA)轉化成雙甘氨肽,由此釋放出在405nm波長吸光的5-氨基-2-硝基苯甲酸鹽。此變化與γ-谷氨酰轉移酶的活性成正比。γ-谷氨酰-3-羧基-4-苯基重氮酸+雙甘氨肽L-γ-谷氨酰-雙甘氨肽+5-氨基-2-硝基苯甲酸鹽2標本采集與處理2.1采血方法空腹采不抗凝靜脈血2~3ml。2.2標本保存室溫或4℃可穩(wěn)定72.3注意事項標本應避免脂血、溶血、黃疸。采血管中有草酸鉀和氟化鈉的混合物會使γ?谷氨酰轉移酶活性降低15%。3試劑和設備3.1試劑采用西門子醫(yī)學診斷產(chǎn)品(上海)有限公司提供的試劑盒。3.1.1試劑組成試劑船1~6孔為γ-谷氨酰-3-羧基-4-苯基重氮酸0.69mg,片劑;7~8孔為雙甘氨肽90mM/L,3.1.2試劑準備直接使用。3.1.3試劑保存試劑2~8℃3.2質(zhì)控品美國BIORAD液體多項質(zhì)控品。3.3校準品西門子校準品。3.4儀器SIEMENSDIMENSIONXpandPlus/RxLMax全自動生化分析系統(tǒng)。4操作程序4.1檢測過程流程簽收樣品→離心→上機檢測→審核報告→簽發(fā)報告→標本保存。γ-谷氨酰轉移酶測定文件編號:版本號:頁碼:4.2樣品簽收嚴格按照標本接收程序簽收標本。4.3標本處理以2500~3000r/min,離心6~10min,分離血清上機測定。如不能及時檢測,分離血清于2-8℃4.4標本檢測4.4.1手工編排測試項目:樣品按編號裝入樣品架,主屏幕按F1:ENTERDATA,在Position處輸入樣品所在樣品架字母及所在位置號,按enter,在PatientName處選擇性輸入病人名字,按enter,在SampleNo處輸入樣品號,按enter,在Tests處使用檢驗鍵或檢驗組合鍵選擇相應項目,根據(jù)需要選擇相應的按鍵改變Mode(按F7:MEXTMODE選擇樣品管類型)、Priority(按F4:NEXTPRIORITY選擇樣品的處理模式)、Fluid(按F8:NEXTFLUID選擇標本類型)。4.4.2雙向條形碼標本分離血清后直接運行儀器。4.4.3運行:輸入完畢后按F3:LOADLIST,確認樣品已經(jīng)裝載在樣本盤上,按Run鍵,儀器開始進行樣品檢測。4.4.4檢驗后標本保存標本檢驗完成后用采血管原蓋蓋緊,保存于標本冷藏庫內(nèi),按日期放好,保存期為7天。5校準程序5.1校準品準備和儲存直接使用,2~8℃5.2校準條件在室內(nèi)質(zhì)控失控、更換試劑批號、更換儀器主要配件或進行大保養(yǎng)后均需校準。無特殊情況校準周期為3個月。5.3校準程序主屏幕按F5:PROCESSCTRL→F1:CALIBRATION,按enter→F2:SET-UP&RUN,按項目鍵選擇所需要校準的項目名稱METHOD,選中相應試劑批號LOT,輸入操作者姓名Operator、校準液貨號CalibratorProduct和批號Lot,以及最低值校準液在樣品架上的位置StartatPosition,最后把校準液各個水平的值按照由低到高的順序輸?shù)綄恢?,按F4:ASSIGNCUPS指定樣品杯,校準液按順序排列在樣品架上,按F7:LOAD/RUN→F4:RUN或“RUN”運行鍵運行校準程序。6質(zhì)量控制程序6.1質(zhì)控品準備和儲存質(zhì)控品為液體,可以直接使用。原包裝質(zhì)控品-10~-70℃可保存到瓶身有效期,未開啟2~8℃可保存90d,開啟后2~8℃6.2質(zhì)控水平和分析批長度γ-谷氨酰轉移酶測定文件編號:版本號:頁碼:每24小至少進行一批,每批2個濃度水平。6.3質(zhì)控操作程序與4.4標本檢測步驟相同,只需要按F4:NEXTPRIORITY將ROUTINE修改成QC狀態(tài)。7性能參數(shù)本法線性范圍為0~800U/L,對于超過測定線性范圍的結果,用酶稀釋液對標本進行稀釋,輸入稀釋因子后再重新檢測。8生物參考區(qū)間女性:5~55U/L男性:15~85U/L。9臨床意義γ谷氨酰轉移酶廣泛地分布在腎、胰、前列腺、肝等人體組織內(nèi),促使γ谷氨酰酞水解,轉移γ谷?;?。γ谷氨酰轉移酶(γ-GT)廣泛地分布在腎、胰、前列腺、肝等人體組織內(nèi),促使γ谷氨酰酞水解,轉移γ谷酰基。GGT主要用于診斷肝膽疾病。原發(fā)性肝癌、胰腺癌和乏特壺腹癌時,血清GGT活力顯著升高,特別在診斷惡性腫瘤患者有無肝轉移和肝癌術后有無復發(fā)時,陽性率可達90%。嗜酒或長期接受某些藥物治療如苯巴比妥、苯妥因鈉、安替比林者,血清GGT活性常常升高。口服避孕藥會使GGT值增高20%。但是,GGT作為肝癌標志物的特異性較差,急性肝炎、慢性肝炎活動期、阻塞性黃疸、膽道感染、膽石癥、急性胰腺炎時都可以升高。腎臟中GGT含量最高,但腎臟疾病時,血液中該酶活性增高卻不明顯,有人認為,腎單位病變時,GGT經(jīng)尿排出,測定尿中酶活力可以有助于診斷腎臟疾患。10參考文獻[1]西門子醫(yī)學診斷產(chǎn)品(上海)有限公司γ-谷氨酰轉移酶(GGT)測定試劑說
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