原子吸收校準(zhǔn)工作規(guī)程

原子吸收光譜儀校準(zhǔn)工作規(guī)程文件編號：SOP-QC-004.01名稱：原子吸收光譜儀的校準(zhǔn)生效日期：頁碼：起草人：審核人：批準(zhǔn)人：日期：日期：日期：目的建立原子吸收光譜儀的校準(zhǔn)規(guī)程，確保其得以正確校準(zhǔn)。適用范圍適用于本QC實驗室原子吸收光譜儀的校準(zhǔn)。職責(zé)指導(dǎo)教師負(fù)責(zé)和監(jiān)督本規(guī)程的有效實施；操作人員嚴(yán)格按照該規(guī)程進(jìn)行操作。程序校準(zhǔn)準(zhǔn)備4.1.1外觀校準(zhǔn)前，原子吸收光譜儀儀器上應(yīng)有：儀器名稱、型號、出廠編號、制造廠名、制造日期、額定工作電源電壓及頻率，國產(chǎn)儀器應(yīng)有制造計量器具許可證標(biāo)志及編號。所有緊固件均應(yīng)安裝牢固，連接件應(yīng)連接良好，各調(diào)節(jié)旋鈕、按鍵和開關(guān)均能正常工作，無松動現(xiàn)象，電纜線的接插件應(yīng)接觸良好氣路連接正確，不得有漏氣現(xiàn)象，氣源壓力應(yīng)符合出廠說明規(guī)定的指標(biāo)。外觀不應(yīng)有影響儀器正常工作的損傷。儀表的所有刻線應(yīng)清晰、粗細(xì)均勻。指針的寬度不應(yīng)大于刻線的寬度，并應(yīng)于刻線平行。數(shù)顯部位顯示清晰、完整。4.1.2校準(zhǔn)環(huán)境溫度環(huán)境：10~30℃濕度范圍：≤85%RH儀器應(yīng)平穩(wěn)地放在工作臺上，操作時不得有搖動，周圍無強磁場、電場或振動源干擾，無強氣流影響。4.1.3校準(zhǔn)設(shè)備及標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)空心陰極燈標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)秒表最小分度值不大于0.1s波長示值誤差與重復(fù)性光譜帶寬偏差基線穩(wěn)定性測量重復(fù)性特征濃度檢出限4.2.1泵流量設(shè)定值誤差Ss和流量穩(wěn)定性SR泵流量設(shè)定值（mL/min）0.2~0.50.6~1.0大于1.0測定次數(shù)333流動相收集時間/min20~1010~55注：最大流量的設(shè)定值可根據(jù)用戶使用情況而定；對特殊的、流量小的儀器，流量的設(shè)定可根據(jù)用戶使用情況選大、中、小三個流量；流動相的收集時間則根據(jù)情況適當(dāng)縮減或延長。按上表的要求設(shè)定流量，啟動儀器，壓力穩(wěn)定后，在流動相出口處用事先稱重過的潔凈容量瓶收集流動相，同時用秒表計時，收集表5-2規(guī)定時間流出的流動相，在分析天平上稱重，按公式(3)計算流量實測值Fm按公式(1)、公式(2)計算Ss和SR。每一設(shè)定流量，重復(fù)測量3次。Ss=Fm式中：Fm—同一設(shè)定流量3次測量值的算數(shù)平均值，mL/minFs—流量設(shè)定值，mL/minSR=F式中：Fmax—同一設(shè)定流量3次測量值的最大值，mL/minFmin—同一設(shè)定流量3次測量值的最小值，mL/minF式中：Fm—流量實測值，mL/minW2—容量瓶+流動相的質(zhì)量，gW1—容量瓶的質(zhì)量，gρt—實驗溫度下流動相的密度，g/cm3，(不同溫度下流動相的密度參見JJG705-2014附錄C)t—收集流動相的時間，min。4.2.2梯度誤差色譜條件：色譜柱阻尼管（4m*0.1mmD）或等效柱溫40℃流動相A泵：純水B泵：0.1%（V/V）丙酮水溶液梯度程序時間（min）A泵%B泵%Initial10005.0010005.01802010.00802010.01604015.00604015.01406020.00406020.01208025.00208025.01010030.00010030.01100035.00100035.00Stop流速2.0mL/min檢測波長254nm測量次數(shù)2按照上述色譜方法運行，完成譜圖采集后，畫出B溶劑經(jīng)由5段階梯從0%變到100%的梯度變化曲線，如圖5-1所示。求出由B溶劑變化所產(chǎn)生的每一段階梯對應(yīng)的響應(yīng)信號值的變化值Li。重復(fù)測量2次，按公式(4)計算每一段階梯對應(yīng)的響應(yīng)信號值的變化平均值Li；按公式(5)計算五段階梯響應(yīng)信號值的總平均值Li；按公式(6)計算每一段的梯度誤差Gi，取GiL式中：Li—第iL1i—第i段階梯第1L1i-1—第（i-1）段階梯第L2i—第i段階梯第2L2i-1—第（i-1）段階梯第Li=i=1式中：Li—5n—梯度的階梯數(shù)，n=5。式中：Gi—第i注：當(dāng)i為1（i-1=0）時，第（i-1）階梯響應(yīng)信號值為B溶劑為0%時的響應(yīng)信號值。圖5-1梯度誤差檢定示意圖溫箱溫度設(shè)定值誤差ΔTs和柱箱溫度穩(wěn)定性Tc 將數(shù)字溫度計探頭固定在柱溫箱內(nèi)與色譜杜相同的部位，選擇35℃和45℃(也可根據(jù)用戶使用溫度設(shè)定)進(jìn)行檢定。按議器明書操作，通電升溫，待溫度穩(wěn)定后，記下溫度計讀數(shù)并開始計時，以后每隔10min記錄1次，共計7次，求出平均值。平均值與設(shè)定值之差為柱溫箱溫度設(shè)定值誤差ΔTs，7次讀數(shù)中最大值與最小值之差為柱溫箱溫度穩(wěn)定性Tc。紫外-可見光檢測器和二極管陣列檢測器的性能4.4.1波長示值誤差和重復(fù)性將檢測器和數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)連接好，通電預(yù)熱穩(wěn)定后，用注射器將純水注入檢測池內(nèi)進(jìn)行沖洗后，充滿檢測池。待檢測器示值穩(wěn)定后，在(235±5)nm、(257±5)nm、(313±5)nm和(350±5)nm的波長下將示值回零，然后再用注射器將紫外分光光度計溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(參考波長為235nm，257nm，313nm和350nm)從檢測器人口注入樣品池中沖洗，并將樣品池充滿至示值穩(wěn)定。將檢測器波長調(diào)到低于參考波長5nm處(例如檢定257nm時，檢測器波長先調(diào)到252nm)，改變檢測器波長，每(5~10)s改變1nm，記錄每個波長下的吸收值(吸收值變化的示意圖見圖5-2)，最大或最小吸收值對應(yīng)的波長與參考波長之差為波長示值誤差。每個波長重復(fù)測量3次，其中最大值與最小值之差為波長重復(fù)性。圖5-2波長示值誤差檢定中吸收值變化示意圖 有吸光值顯示的檢測器，改變波長時可直接讀出吸光值，其最大(或最小)吸光值對應(yīng)的波長與參考波長之差為波長示值誤差。有波長掃描功能的儀器可畫出標(biāo)準(zhǔn)溶液的光譜曲線，其波峰(或波谷)對應(yīng)的波長與參考波長之差為波長示值誤差。對于有內(nèi)置標(biāo)準(zhǔn)濾光片可進(jìn)行自檢的儀器可直接采用其測量數(shù)據(jù)。 對改變波長有自動回零功能的紫外-可見光檢測器，可采用連續(xù)進(jìn)樣的方法檢定波長示值誤差，具體做法是：用一節(jié)空管代替色譜柱將液路連通，以水做流動相，流量為(0.5~1.0)mL/min，采用步進(jìn)進(jìn)樣方法，例如檢定257nm時，從252nm開始到262nm，每2min改變1nm，用注射器注人相同體積的紫外分光光度計溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，得到一組不同波長的色譜峰，最高(或最低)色譜峰對應(yīng)的波長與參考波長之差，即為波長示值誤差。4.4.2基線噪聲和基線漂移選用C18色譜柱，以100%甲醇為流動相，流量為1.0mL/min，紫外檢測器的波長設(shè)定為254nm，檢測靈敏度調(diào)到最靈敏擋。開機預(yù)熱，待儀器穩(wěn)定后記錄基線30min，選取基線中噪聲最大峰-峰高對應(yīng)的信號值，按公式(7)計算基線噪聲，用檢測器自身的物理量（AU）作單位表示?；€漂移用30min內(nèi)基線偏離起始點最大信號值（AU/30min）表示。Nd=KB式中：Nd—K—衰減倍數(shù)；B—測得基線峰-峰高對應(yīng)的信號值，AU4.4.3最小檢測濃度在4.4.2的色譜條件下，由進(jìn)樣系統(tǒng)注入（10~20）L的1.00×10-7g/mL萘-甲醇溶液，記錄色譜圖，由色譜峰高和基線噪聲峰高，按公式（8）計算最小檢測濃度CL(按20L進(jìn)樣量計算)C式中：CL—最小檢測濃度，g/mLNd—C—標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度，g/mL；V—進(jìn)樣體積，μL；H—標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的峰高。注：Nd和H的單位應(yīng)保證一致；式中分母的“20”表示標(biāo)準(zhǔn)的進(jìn)樣體積，其單位為微升（μL4.4.4線性范圍色譜條件：色譜柱阻尼管（4m*0.1mmD）或等效柱溫40℃流動相不同濃度的丙酮—2%（V/V）異丙醇水溶液（先用0.1%濃度的丙酮—2%（V/V）異丙醇水溶液作為流動相，等待基線穩(wěn)定后開始測試度數(shù)，每更換一個濃度流動相需要等儀器示值穩(wěn)定之后，再記錄信號響應(yīng)值）不同濃度分別指的是0.1%濃度，0.2%濃度，0.3%濃度，0.4%濃度，0.5%濃度，0.6%濃度，0.7%濃度，0.8%濃度，0.9%濃度，1.0%濃度的丙酮—2%（V/V）異丙醇水溶液以5個丙酮溶液濃度（0.1%，0.2%，0.3%，0.4%，0.5%和對應(yīng)的響應(yīng)值作標(biāo)準(zhǔn)曲線，在曲線上找出丙酮溶液濃度大于0.5%各點的讀數(shù)，與相應(yīng)各濃度點的測量值做比較，量值相差5%的濃度作為檢測上線CH,按照4.4.3得到的最小檢測濃度為檢測下限CL值，CH/CL比值為線性范圍）整機性能（定性、定量重復(fù)性）將儀器各部分聯(lián)接好，選用C18色譜柱，用100%甲醇為流動相，流量為1.0mL/min，根據(jù)儀器配置的檢測器，選擇測量參數(shù):紫外可見光檢測器和二極管陣列檢測器波長設(shè)定為254nm，靈敏度選擇適中，基線穩(wěn)定后由進(jìn)樣系統(tǒng)注入一定體積的1.0×10-4g/mL萘-甲醇溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)；熒光檢測器激發(fā)波長和發(fā)射波長分別設(shè)定為290nm和330nm，靈敏度選在中間擋，基線穩(wěn)定后注人一定體積的1x10-5g/mL萘-甲醇標(biāo)準(zhǔn)溶液；示差折光率檢測器和蒸發(fā)光散射檢測器靈敏度選在中間擋，注人一定體積的200ug/mL(2.0×10-4g/mL)的甲醇中膽固醇溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。連續(xù)測量6次，記錄色譜峰的保留時間和峰面積，按公式(9)計算相對標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD6。RSD式中：RSD6定性（定量）Xi—第iX—6次測量結(jié)果的算數(shù)平均值；i—測量序號；n—測量次數(shù)；可接受校準(zhǔn)泵流量設(shè)定值誤差Ss和流量穩(wěn)定性SR泵流量設(shè)定值（mL/min）0.2~0.50.6~1.0大于1.0測定次數(shù)333流動相收集時間/min20~1010~55泵流量設(shè)定值最大允許誤差Ss±5%±3%±2%泵流量穩(wěn)定性SR3%2%2%柱溫箱溫度設(shè)定值最大允許誤差：±2℃柱溫箱溫度穩(wěn)定性：不大于1℃/h。紫外可見光檢測器二極管陣列檢測器基線噪聲≤5×10-4AU基線漂移≤5×10-3AU/30min最小檢測濃度≤5×10-8g/mL萘-甲醇溶液波長示值最大允許誤差±2nm波長重復(fù)性≤2nm線性范圍優(yōu)于103定性定量重復(fù)性：紫外可見光檢測器二極管陣列檢測器定性重復(fù)性：≤1.0%定量重復(fù)性：≤3.0%？插入原子吸收光譜儀介紹視頻文檔作為二維碼學(xué)習(xí)鏈接

原子吸收光譜儀校準(zhǔn)記錄實訓(xùn)的方法條件色譜柱型號流動相流速柱箱溫度檢測器類型其他：實訓(xùn)數(shù)據(jù)記錄-流量設(shè)定誤差，流量穩(wěn)定性Fs泵流量設(shè)定值（mL/min）：t收集時間（min）：ρ水密度g/mL*Fm第1次第2次第3次FmFmax（mL/min）Fmin（mL/min）SSSRSS標(biāo)準(zhǔn)要求SR標(biāo)準(zhǔn)要求結(jié)論滿足不滿足結(jié)論滿足不滿足具體計算過程：*參見具體計算過程：梯度誤差Gc參考本規(guī)程4.2.2色譜參數(shù)要求設(shè)置方法，由梯度控制儀器設(shè)置階梯式的梯度洗脫程序（具體參數(shù)填寫至下表中），A溶劑為純水，B溶劑為含0.1%丙酮的水溶液。將輸液泵和檢測器連接，開機后以A溶劑沖洗系統(tǒng)，基線平穩(wěn)后開始執(zhí)行梯度程序。方法參數(shù)：色譜柱______________________________________________________柱溫_________℃流動相A泵：________________________________________________B泵：________________________________________________梯度程序時間（min）A泵%B泵%Initial流速______mL/min檢測波長_____nm測量次數(shù)2響應(yīng)值數(shù)據(jù)記錄項目階段（B%）0%20%40%60%80%100%LiL1i-L1(i-1)L2iL2i-L2(i-1)LLLGi實訓(xùn)數(shù)據(jù)記錄-柱箱溫度設(shè)定值誤差ΔTs，柱箱溫度穩(wěn)定性Tc第1次第2次第3次第4次第5次第6次第7次溫度（℃）平均值ΔTs溫度設(shè)定值誤差Tc溫度穩(wěn)定性ΔTs標(biāo)準(zhǔn)要求Tc標(biāo)準(zhǔn)要求結(jié)論結(jié)論實訓(xùn)數(shù)據(jù)記錄-基線噪聲按照檢定條件進(jìn)行設(shè)置，記錄基線30min，選取基線中噪聲最大峰-峰高對應(yīng)的信號值為儀器的基線噪聲；實訓(xùn)數(shù)據(jù)記錄-基線漂移按照檢定條件進(jìn)行設(shè)置，記錄基線30min，選取基線偏離起始點最大的相應(yīng)信號值為儀器的基線漂移。實訓(xùn)數(shù)據(jù)記錄-最小檢測濃度（_____檢測器）按照_________測器的檢定條件進(jìn)行設(shè)置，待基線穩(wěn)定后，用20μL進(jìn)樣針注入20μL濃度為______________的_________________。CL=2NdCV===線性范圍試劑信息丙酮：_____________________________________________________異丙醇：_____________________________________