薄層層析紫外分光光度法測(cè)定香丹注射液中原兒茶醛的含量

1、薄層層析-紫外分光光度法測(cè)定香丹注射液中原兒茶醛的含量【摘要】目的建立薄層層析-紫外分光光度法測(cè)定香丹注射液中原兒茶醛的含量。方法以原兒茶醛為對(duì)照品，展開劑為二氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸850.8別離得到原兒茶醛，采用紫外分光光度法，檢測(cè)波長(zhǎng)281n，測(cè)定原兒茶醛的含量。結(jié)果原兒茶醛在0.554.95g/l范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，r=0.9998。平均含量為0.174g/l，加樣回收率為97.3%102.3%，RSD為1.6%。結(jié)論實(shí)驗(yàn)結(jié)果說(shuō)明，薄層層析-紫外分光光度法測(cè)定香丹注射液中原兒茶醛的含量，方法操作簡(jiǎn)便，準(zhǔn)確度高，精細(xì)度好，可作為樣品的檢測(cè)方法。【關(guān)鍵詞】香丹注射液；原兒茶醛；薄層層析-紫外

2、分光光度法；含量測(cè)定【Abstrat】bjetiveATL-UVethdasdevelpedtseparateanddeterineprtatehuialdehydeininjetinsaliaeiltirrhizaepsita.ethdsntrastingithprtatehuialdehyde，theauntfprtatehuialdehydeininjetinsaliaeiltirrhizaepsitahavebeendeterinedbyTL-UVithethylenehlride-aetiaidaetiester-friaid850.8asthedevelpingslventandt

3、hedetetinavelengthat281n.ResultsThealibratinarveraslinearintherangef0.554.95g/l(r=0.9998)frprtatehuialdehyde.Theaverageauntis0.174g/l.Thereveriesfprtatehuialdehydearebeteen97.3%and102.3%，andRSD%asntrethan2.0%.nlusinTheethdissiple，rapidandreprduiblefrdeterinatinfprtatehuialdehydeininjetinsaliaeiltirr

4、hizaepsita.【Keyrds】injetinfsaliaeiltirrhizaepsita；prtatehuialdehyde；TL-UV；ntentdeterinatin香丹注射液為棕色澄明液體，是由降香和丹參提取物配制而成，臨床用于治療心絞痛、心肌梗死等。處方中降香是豆科植物降香檀樹干和根的枯燥心材，性辛，溫，能活血止血，行氣止痛。丹參為唇形科植物丹參的枯燥根及根莖，性微寒味苦，具有活血化瘀，涼血消腫，清心除煩之成效。丹參的化學(xué)成分1為兩類，一類為脂溶性的二萜醌類，主要為丹參酮和丹參酮，具有抗菌、抗炎及擴(kuò)張血管作用；另一類為水溶性的酚酸類，主要為原兒茶醛，是抗心絞痛有效成分。中華人

5、民共和國(guó)藥品衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)S3-B-3289-98采用高效液相色譜法測(cè)定香丹注射液中原兒茶醛的含量2。本文參考有關(guān)文獻(xiàn)3，4建立了薄層層析-紫外分光光度法別離測(cè)定香丹注射液中原兒茶醛的含量，方法簡(jiǎn)便，準(zhǔn)確度高，精細(xì)度好，本錢低廉。1材料與儀器1.1材料二氯甲烷、乙酸乙酯、甲酸，均為分析純。對(duì)照品：原兒茶醛中國(guó)藥品生物制品檢定所。薄層層析硅膠G青島海洋化工化學(xué)純。水為蒸餾水。香丹注射液10l/支。1.2儀器752紫外可見分光光度計(jì)上海菁華科技儀器。微量點(diǎn)樣器5l。分析天平。2實(shí)驗(yàn)方法2.1薄層層析條件的考察2.1.1對(duì)照品溶液的制備精細(xì)稱取原兒茶醛對(duì)照品1.1g，置10l容量瓶中，加水溶解稀釋至

6、刻度，搖勻即得濃度為0.11g/l。2.1.2陰性對(duì)照品溶液的制備取降香10g加水100l浸潤(rùn)，進(jìn)展水蒸汽蒸餾，搜集蒸餾液約5l，冷藏靜置24h，分去油層，搜集水溶液得到陰性對(duì)照品溶液。2.1.3展開條件的選擇薄層板為0.3%-Na的硅膠G板，105活化0.5h，置枯燥器中備用。精細(xì)汲取香丹注射液10l點(diǎn)于硅膠G-Na薄層板上，另取原兒茶醛對(duì)照品溶液和陰性對(duì)照品溶液分別點(diǎn)于香丹注射液斑點(diǎn)兩側(cè)。以二氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸850.8為展開劑，展開約12。取出，晾干，濃氨水顯色，結(jié)果見圖1。2.2含量測(cè)定方法的建立2.2.1對(duì)照品溶液的制備精細(xì)稱取原兒茶醛對(duì)照品1.1g，置10l容量瓶中，加水溶解稀

7、釋至刻度，搖勻即得濃度為0.11g/l。2.2.2供試品溶液的制備精細(xì)汲取香丹注射液20l，點(diǎn)于硅膠G-Na(0.3%)薄層板上，另取對(duì)照品溶液10l點(diǎn)于供試品斑點(diǎn)一側(cè)作為對(duì)照。以二氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸850.8為展開劑，展開約12，取出，晾干。在紫外燈(365n)下觀察，定位。刮取與對(duì)照品斑點(diǎn)相應(yīng)位置上的供試品斑點(diǎn)，精細(xì)參加5l水溶解，過(guò)濾，即得原兒茶醛供試品溶液。2.2.3檢測(cè)條件的選擇文獻(xiàn)記錄原兒茶醛在281n處吸光度最大。精細(xì)量取對(duì)照品溶液1l置10l的容量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻。以蒸餾水為空白對(duì)照在281n左右測(cè)定吸光度，結(jié)果281n處吸光度為最大。1為對(duì)照品溶液；2為香丹注射

8、液；3為陰性對(duì)照品溶液圖1香丹注射液薄層層析圖2.2.4標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備精細(xì)量取對(duì)照品溶液5l置10l的容量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻。分別精細(xì)量取0.1l，0.3l，0.5l，0.7l，0.9l對(duì)照品溶液置10l的容量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻。使?jié)舛确謩e為0.55g/l，1.65g/l，2.75g/l，3.85g/l，4.95g/l。以蒸餾水為空白對(duì)照在281n波長(zhǎng)處測(cè)吸光度，以吸光度A為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，進(jìn)展回歸分析，回歸方程為：A=2.610-3+0.1015，r=0.9998n=5。結(jié)果說(shuō)明，原兒茶醛在濃度0.554.95g/l范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。測(cè)定結(jié)果見表1。表1標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備

9、2.2.5穩(wěn)定性試驗(yàn)精細(xì)汲取香丹注射液20l，點(diǎn)于硅膠G-Na(0.3%)薄層板上，另取對(duì)照品溶液10l點(diǎn)于供試品斑點(diǎn)一側(cè)作為對(duì)照。以二氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸850.8為展開劑，展開約12，取出，晾干。在紫外燈(365n)下觀察，定位。刮取與對(duì)照品斑點(diǎn)相應(yīng)位置上的供試品斑點(diǎn)，精細(xì)參加5l水溶解，過(guò)濾，即得原兒茶醛供試品溶液。刮取同一薄層板上與供試品斑點(diǎn)等面積的空白硅膠G-Na(0.3%)，精細(xì)參加5l水溶解，過(guò)濾，取濾液作為空白對(duì)照。取供試品溶液和對(duì)照品溶液分別在281n波長(zhǎng)處測(cè)吸光度，隔30in測(cè)定一次，連續(xù)測(cè)定3h，結(jié)果在3h內(nèi)吸收度穩(wěn)定。測(cè)定結(jié)果見表2。2.2.6精細(xì)度試驗(yàn)取同一供試液連

10、續(xù)測(cè)定6次，結(jié)果說(shuō)明精細(xì)度良好。測(cè)定結(jié)果見表3。表2穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果表3精細(xì)度試驗(yàn)結(jié)果2.2.7含量測(cè)定分別精細(xì)汲取香丹注射液20l兩份，點(diǎn)于硅膠G-Na(0.3%)薄層板上，另取對(duì)照品溶液10l點(diǎn)于供試品斑點(diǎn)一側(cè)作為對(duì)照。以二氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸850.8為展開劑，展開約12，取出，晾干。在紫外燈(365n)下觀察，定位。刮取與對(duì)照品斑點(diǎn)相應(yīng)位置上的供試品斑點(diǎn)，精細(xì)參加5l水溶解，過(guò)濾，即得原兒茶醛供試品溶液和。刮取同一薄層板上與供試品斑點(diǎn)等面積的空白硅膠G-Na(0.3%)，精細(xì)參加5l水溶解，過(guò)濾，取濾液作為空白對(duì)照。取樣品在281n波長(zhǎng)處測(cè)吸光度，由標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算供試品中原兒茶醛的含量。

11、測(cè)定結(jié)果見表4。表4含量測(cè)定結(jié)果注：吸光度為供試品溶液和的平均值2.2.8加樣回收率試驗(yàn)精細(xì)汲取香丹注射液5l，置于10l量瓶中，分別參加對(duì)照品1.0g、1.5g、2.1g，加水至刻度，搖勻，按“含量測(cè)定項(xiàng)下操作，測(cè)定，計(jì)算回收率，結(jié)果見表5。表5加樣回收率試驗(yàn)結(jié)果3實(shí)驗(yàn)結(jié)果原兒茶醛在0.554.95g/l范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，r=0.9998。平均含量為0.174g/l，加樣回收率為97.3%102.3%，RSD為1.61%。4討論(1)點(diǎn)樣斑點(diǎn)直徑應(yīng)控制在23，有較好的別離效果。(2)原兒茶醛為丹參水溶性酚酸類成分，在展開劑中參加少量甲酸，抑制酸的解離。文獻(xiàn)中使用的展開劑為苯-乙酸乙酯-甲酸8：5：0.8，但是苯有毒性，本實(shí)驗(yàn)用與苯有相似極性二氯甲烷代替亦得到了較好的別離效果。(3)本實(shí)驗(yàn)過(guò)程中還使用過(guò)甲醇-水-冰醋酸22：78：0.5，氯仿-甲醇-水8：1：1。但別離效果都不好，采用二氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸8：5：0.8作為展開劑有較好別離效果。(4)降香揮發(fā)油水飽和溶液在本實(shí)驗(yàn)條件下不干擾原兒茶醛的含量測(cè)定。5結(jié)論實(shí)驗(yàn)結(jié)果說(shuō)明，薄層層析-紫外分光光度法測(cè)定香丹注射液中原兒茶醛的含量，方法操作簡(jiǎn)便，準(zhǔn)確度高，精細(xì)度好，可作為樣品的檢測(cè)方法?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】1劉燕，謝培德，王寶