嵌合抗原受體修飾T細胞(CAR-T細胞)制劑制備質(zhì)量管理規(guī)范(征求意見稿)

嵌合抗原受體修飾T細胞（CAR-T細胞）制劑制備質(zhì)量管理規(guī)范（征求意見稿）中國醫(yī)藥生物技術協(xié)會發(fā)布目次前言II引言III1范圍12術語和定義13基本要求23.1基本原則23.2人員的要求23.3場所和設施23.4物料24載體制備34.1質(zhì)粒制備34.2非病毒載體制備的基本要求34.3病毒載體制備的基本要求35細胞制備過程中的要求35.1樣本的要求35.2T細胞的采集和分離45.3操作的要求45.4細胞轉(zhuǎn)導及擴增的要求45.5安全性及有效性檢測55.6CAR-T細胞制劑的質(zhì)量要求55.7CAR-T細胞凍存、運輸與復蘇的要求56CAR-T制劑的質(zhì)量控制與放行57追溯58保密原則69附則6參考文獻7前言本標準按照GB/T1.1—2009《標準化工作導則第1部分：標準的結構和編寫》給出的規(guī)則起草。請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機構不承擔識別這些專利的責任。本標準由中國醫(yī)藥生物技術協(xié)會制定，由中國醫(yī)藥生物技術協(xié)會實施。本標準起草單位：中國醫(yī)藥生物技術協(xié)會醫(yī)藥生物技術臨床應用專業(yè)委員會。本標準主要起草人：。本標準為首次發(fā)布。引言近年來，免疫治療經(jīng)歷了一系列突飛猛進的發(fā)展，以特異性過繼免疫細胞療法及免疫檢查點抗體療法為代表的新型免疫治療技術因其在臨床研究中取得的顯著療效而成為學術界和產(chǎn)業(yè)界共同關注的焦點。其中，嵌合抗原受體T細胞免疫療法（ChimericAntigenReceptorT-CellImmunotherapy，CAR-T療法）因其在白血病、淋巴瘤、多發(fā)性骨髓瘤的治療中展現(xiàn)出顯著的治療效果而成為國內(nèi)外研究的熱點。隨著我國對CAR-T技術的研究不斷深入，國內(nèi)企業(yè)的積極布局和產(chǎn)業(yè)鏈的延伸，我國的CAR-T細胞治療技術也在緊隨國際趨勢的發(fā)展。然而，目前國內(nèi)關于CAR-T細胞的制備和質(zhì)量控制缺乏統(tǒng)一的標準和管理規(guī)范，各制備機構或應用機構之間無法進行正常的評估和交流，一定程度上不利于細胞治療產(chǎn)業(yè)的專業(yè)化發(fā)展。只有確立了安全、規(guī)范、穩(wěn)定、可追溯的行業(yè)規(guī)范，才能從源頭保證整個CAR-T細胞治療產(chǎn)業(yè)的規(guī)范性和安全性。為了適應我國CAR-T細胞治療產(chǎn)業(yè)的需要，加強CAR-T細胞治療的管理，規(guī)范細胞制備過程，保證CAR-T細胞制品在臨床應用的安全性，促進國際間同行的交流，有必要制定中國醫(yī)藥生物技術行業(yè)的CAR-T細胞制劑制備質(zhì)量管理規(guī)范。嵌合抗原受體修飾T細胞（CAR-T細胞）制劑制備質(zhì)量管理規(guī)范1范圍1.1為協(xié)助CAR-T細胞制劑制備機構（以下簡稱機構）在制備過程中避免污染、交叉污染、混淆及差錯，且保證CAR-T細胞制劑的安全性、生物學效應，參照《免疫細胞制劑制備質(zhì)量管理自律規(guī)范》等相關規(guī)定和指導原則，制定本規(guī)范。1.2本規(guī)范所稱的CAR-T指用于治療的、經(jīng)體外基因?qū)牒蟊磉_嵌合型抗原受體的人源T細胞，T細胞來源于患者自體或異體外周血淋巴細胞。1.3本規(guī)范適用于CAR-T細胞制劑制備的所有階段。2術語和定義下列術語和定義適用于本文件。2.1嵌合抗原受體T細胞（CAR-T細胞）ChimericAntigenReceptorTCell，CAR-Tcell經(jīng)過基因工程修飾的，可表達被導入的含有抗原識別片段、T細胞受體活化分子、共刺激信號等信號分子的CAR基因的T細胞。2.2外周血單個核細胞PeripheralBloodMononuclearCell，PBMC血液中具有單個核的細胞，主要包括淋巴細胞，單核細胞，巨噬細胞，樹突狀細胞和少量其他細胞類型。2.3質(zhì)粒Plasmid是一類存在于細菌和真菌細胞中獨立于染色體DNA而自主復制的共價、閉合、環(huán)狀DNA分子，是基因工程最常見的運載體。2.4目的基因TargetGene人工構建的具有明確功能的基因或基因片段。2.5載體Vector在基因工程重組DNA技術中將DNA片段（目的基因）轉(zhuǎn)移至受體細胞中進行復制和表達其他添加成分殘余量進行檢測，如細胞因子等。5.6.4使用磁珠抗體刺激T細胞的，應檢測細胞中的殘余磁珠量。5.6.5應對細胞存活率和回輸數(shù)量進行檢測。5.6.6應對終產(chǎn)品中CAR-T細胞轉(zhuǎn)導率、免疫表型進行檢測。5.6.7應檢測CAR-T細胞制劑對特異性腫瘤細胞的殺傷作用。如果制備的是異體CAR-T細胞，還應檢測CAR-T細胞對正常細胞的殺傷。5.6.8用病毒轉(zhuǎn)導細胞并對病毒RCR完成檢測之后，應留取部分CAR-T細胞以備將來需要時對RCR的檢測。應進行RCR的長期隨訪檢測。5.7CAR-T細胞凍存、運輸與復蘇的要求5.7.1CAR-T產(chǎn)品應用之前可先凍存，待質(zhì)控試驗結束證實結果無問題后再復蘇并進行回輸。5.7.2凍存、運輸與復蘇的方法、凍存液以及凍存容器等應經(jīng)過驗證，保證細胞質(zhì)量和安全性。6CAR-T制劑的質(zhì)量控制與放行6.1機構應具有CAR-T細胞制劑的檢測能力，并配備相關專業(yè)技術人員和設備，建立制劑質(zhì)量控制檢測標準和操作規(guī)程，確立制劑質(zhì)量檢驗和放行的操作規(guī)程，所有的檢測方法應經(jīng)過驗證。對整個制備過程中各個環(huán)節(jié)的質(zhì)量控制均符合標準方可進行臨床應用。6.2每批次的CAR-T細胞制劑質(zhì)量標準的檢測項目應至少包括：無菌檢測、支原體檢測、內(nèi)毒素檢測、外源血清殘留、細胞存活率、細胞數(shù)量、細胞表型、效應細胞比率、CAR轉(zhuǎn)導效率、復制型病毒等，檢測方法參見現(xiàn)行版《中國藥典》生物制品相關規(guī)程。7追溯應建立完整的細胞制備過程記錄系統(tǒng)以及標識標簽系統(tǒng)和免疫細胞制劑編碼系統(tǒng)，以確保CAR-T細胞制劑的辨識并防止制劑混雜，確保其唯一性和可追溯性。記錄和標識應當遵循相關法律和規(guī)范的要求。細胞制備記錄包括每天的細胞狀況，細胞數(shù)量，轉(zhuǎn)導條件，細胞因子濃度等具體信息。標識系統(tǒng)應記錄患者姓名、病歷號、病種、細胞制劑名稱、批號、收獲日期及時間、規(guī)格（細胞數(shù)量/體積）、儲存條件、效期（精確時間）等。每個患者的信息應當雙人復核。每份CAR-T細胞制劑必須編制唯一的編碼，通過它能追溯到患者信息以及該細胞制劑操作和最終處理的所有記錄，并建立相關程序能夠關聯(lián)新舊編碼。8保密原則應采取措施，保證病人的隱私信息不被泄露。9附則其他關于免疫細胞制備的要求以及人員、設備、樣品儲存與運輸、標識與追溯系統(tǒng)等細則，參見中國醫(yī)藥生物技術協(xié)會制定的《免疫細胞制劑制備質(zhì)量管理自律規(guī)范》。參