化妝品 抗熱老化活性的評(píng)價(jià) 秀麗線蟲(chóng)法-征求意見(jiàn)稿

1化妝品抗熱老化活性的評(píng)價(jià)秀麗線蟲(chóng)法材料與試劑、實(shí)驗(yàn)儀器與設(shè)備、實(shí)驗(yàn)步驟、實(shí)驗(yàn)T/GDCA013—2022化妝品抗氧化活性的評(píng)價(jià)秀麗線T/GDCA033—2023化妝品抗羰基化活性的評(píng)價(jià)秀3.1熱老化Antithermalaging基質(zhì)金屬蛋白酶過(guò)度降解細(xì)胞基質(zhì)，造成膠原蛋白和彈性3.24檢測(cè)原理HSP-16.2蛋白是分子量為16kd的小分子熱休克蛋白（sHS綠色熒光蛋白報(bào)告基因（GFP）偶聯(lián)的hsp16.2啟動(dòng)子，具有與HSP16.2相同的表達(dá)模式），測(cè)定化妝品5.2.1除非另有說(shuō)明，化學(xué)試劑使用符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)的分析純?cè)噭?5.2.2培養(yǎng)基與試劑配制按T/GDCA033—2023的規(guī)定進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。422PO4磷酸氫二鉀（K2HPO4）、磷酸氫二鈉十二水（Na27.2樣品性調(diào)整前處理方法，具體按T/GDCA013—202稱取0.001g蝦青素于2mL離心管中，加入558μL二甲基亞砜。將離心管超聲30min后置于80℃水浴取E.coliOP50菌液和蝦青素母液按98:2比例混合均勻，用移液槍吸取150μL菌液輕緩地打在每個(gè)8.2預(yù)測(cè)試8.3線蟲(chóng)抗熱老化測(cè)定收集繁殖期TJ375線蟲(chóng)用于同期化。將同期化的幼蟲(chóng)轉(zhuǎn)移到含/不含藥物的NGM上作用48h后暴露于片上，每個(gè)處理組挑選至少30條線蟲(chóng)轉(zhuǎn)移至左旋咪唑液滴中以麻醉線蟲(chóng)至無(wú)任何反應(yīng)，拍攝在激發(fā)/發(fā)9結(jié)果評(píng)價(jià)3采用ImageJ軟件對(duì)圖像中線蟲(chóng)熒光強(qiáng)度進(jìn)行相對(duì)定量分析，得到各組熒光強(qiáng)度值。采用GraphPadPrism軟件繪制柱狀圖，t-test在實(shí)驗(yàn)滿足有效性的基礎(chǔ)上，樣品組熒光強(qiáng)度值顯著低于空白組（p＜0.05說(shuō)明該受試物在該濃度下，能下調(diào)熱應(yīng)激線蟲(chóng)的HSP16.2蛋白表達(dá)，保護(hù)線蟲(chóng)免受熱應(yīng)激損傷，可作為抗熱老化活性評(píng)蝦青素得到穩(wěn)定的數(shù)據(jù)，以確保實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ偷某晒θ絷?yáng)性對(duì)照組的線蟲(chóng)熒光強(qiáng)度值未顯著低于空白組，則該次實(shí)驗(yàn)視435℃條件下TJ375線蟲(chóng)熒光圖像見(jiàn)A.1，TJ375線蟲(chóng)熒光強(qiáng)度的相對(duì)定量分析見(jiàn)圖A5[1]JinYoungSeo,JinHoChung.elegans,Food&Fuction,2021,12:9098-9110.smallheat-shockproteinSocietiesforExperimentalBiologycomplexity.JBiolChem.2019,294(6):2121-2132.Caenorhabditiselega